滇黄精化学成分的研究

目的:研究滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.根茎的化学成分。方法:运用正反相硅胶、AB-8大孔吸附树脂及制备高效液相等多种色谱方法对滇黄精根茎的醇提物进行分离纯化,结合HRMS、NMR等波谱数据及相关文献数据鉴定化合物的结构。结果:从滇黄精中分离得到8个化合物,分别鉴定为:N-对香豆酰真蛸胺(1)、N-反式-对香豆酰基酪胺(2)、disporopsin(3)、反式-阿魏酸对羟基苯乙酯(4)、(-)-syringaresinol-O-β-D-glucopyroside(5)、militarin(6)、tetrahydro-5-oxo-2-furancaboxylic acid ethylester(7)、n-butyl pyroglutamate(8)。结论:其中,化合物4~7为首次从黄精属植物中分离得到,化合物8为首次从滇黄精中分离得到。

酶解糖化滇黄精多糖的结构表征及其免疫活性

该论文研究了酶解糖化下的滇黄精多糖结构和免疫活性,以探究酶解糖化下的黄精多糖结构特征及免疫活性的影响。结果表明,酶解糖化黄精多糖(SPKP)的多糖和还原糖含量分别为94.05%、4.1%。多糖结构分析表明,SPKP的红外光谱在1016~1147和931 cm-1处有吡喃糖特征吸收峰;单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖:半乳糖:葡萄糖:甘露糖:果糖=0.032:0.117:0.419:0.048:0.383,重均分子量(Mw)为3820 u。甲基化结果表明SPKP主要的糖苷键连接方式为(→4-Glcp-1→),占比47.1%,分支度为34.1%结合碘碘化钾和刚果红实验结果可以推测SPKP是一种含有复杂分支的三股螺旋多糖。RAW264.7细胞实验结果表明,酶解糖化黄精多糖在比较广的浓度范围内无毒性,均能促进细胞增殖,且有较高的细胞吞噬能力和NO水平,因此可以推测SPKP具有较好的免疫活性,且与其多糖结构有一定的关系。该研究可以为多糖与免疫活性的构效关系以及黄精新炮制方法的开发提供一定参考。

病毒病害对滇黄精生理生化特性、产量及品质的影响

【目的】明确病毒侵染对滇黄精生长发育、根茎产量及品质的影响,为深入研究病毒的致病机理提供依据。【方法】以云南省滇黄精主产区曲靖和玉溪种植的4年生滇黄精田间抗病和感病植株为研究对象,比较病毒侵染后滇黄精叶绿体超微结构、叶片光合气体交换参数、叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物氧化酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)以及块茎生物学性状和药用有效化学成分含量的变化。【结果】(1)滇黄精遭受病毒侵染后,叶片细胞质中散布线状病毒粒子及其聚集形成的大量内含体,细胞内叶绿体结构严重受损,部分已发生解体;(2)感病滇黄精叶绿素发生降解,叶绿素a和b的含量分别极显著降低了22.97%和35.38%,其叶片净光合速率、气孔导度、胞间CO_(2)浓度分别降低了49.75%、11.25%和5.79%,光合作用效率明显减弱;(3)感病滇黄精叶片细胞膜发生强烈的脂膜过氧化反应,MDA含量升高了117.17%,SOD、POD、PPO、PAL活性极显著升高,其中PPO活性平均升高了61.81%;(4)感病滇黄精地下根茎的膨大和嫩芽的生长受阻,单株鲜质量降低了49.47%,根茎中多糖的相对含量减少了6.97%,皂苷、黄酮、总酚含量分别减少了23.31%、15.32%、11.07%。【结论】滇黄精遭受病毒侵染后,抗氧化酶防御反应虽然被激活,但细胞膜仍严重受损,光合作用明显减弱,最终导致根茎产量和药用品质显著降低。

林下种植滇黄精对土壤理化性状及微生物群落的影响

目的:探究林下不同生长年限滇黄精根区土壤微生物群落结构和土壤环境因子的变化,为实现滇黄精林下可持续种植提供参考。方法:对云南省禄劝彝族苗族自治县栽培1、2、3年滇黄精的林下土壤及未开发林下土壤进行土壤理化性质、酶活性检测和高通量测序。结果:滇黄精根区土壤pH、全磷和速效钾的含量随种植年限的增加而降低,有机质、全氮、速效磷的含量随种植年限的增加而增加。与原生林地比较,种植1、2、3年的滇黄精根区土壤脲酶活性显著降低,过氧化氢酶活性显著增加。此外,种植滇黄精后,土壤细菌、真菌的多样性和丰度增加,且原生林地土壤与滇黄精根区土壤细菌、真菌群落结构存在差异,不同种植年限滇黄精土壤细菌、真菌群落结构相似。pH、速效氮、脲酶、酸性磷酸酶、过氧化氢酶是引起土壤细菌、真菌群落变化的主要土壤因子。结论:种植滇黄精对林地土壤的理化性质、酶活性和微生物群落结构造成一定影响,不同土壤因子及土壤微生物的响应不同。研究结果为建立滇黄精林下可持续种植模式、提高滇黄精品质提供了参考。

食药同源滇黄精水提物保护酒精性肝损伤的机制

滇黄精(polygonatum kingianum coll.et Hemsl.,PK)是我国传世经典食药两用食物,营养物质丰富,具有护肝等功效。九蒸九制是炮制滇黄精的经典方法,但其对滇黄精护肝作用及机制的影响尚无报道。基于LO_(2)细胞酒精性损伤模型,探究九蒸九制滇黄精水提物(Nine Steaming Nine Drying processed PK extracts,PPK)对酒精性肝损伤的改善作用,采用代谢组学和生物信息数据库联合分析以及分子对接揭示其物质基础及潜在的调控机制。结果表明:PPK可以显著提升酒精诱导损伤的LO_(2)细胞活性,改善氧化应激和炎症指标,提高乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性;代谢组学分析联合生物数据库检索发现PPK显著富集芦丁、呋喃酮、咖啡酸、没食子儿茶素等23种代谢物,通过PI_(3)K-Akt、AMPK、NF-κB信号通路调控肝脏氧化应激与炎症;分子对接结果证实PPK的核心代谢物与酒精代谢酶之间具有良好的结合能力。研究结果初步揭示PPK能够通过调控氧化应激、减轻肝脏炎症、增强乙醇代谢功能来缓解酒精性肝损伤,为PPK营养功能的定位提供了科学依据。

滇黄精有效成分近红外光谱快速定量分析模型建立

基于近红外光谱(NIRS)技术,建立了一种能快速预测滇黄精多糖、总皂苷和总酚含量的定量分析模型。采用紫外可见分光光度法测定了116批滇黄精样品的上述3种有效成分含量。同时,利用NIRS技术采集样品近红外光谱,剔除异常光谱后,结合多元散射校正(MSC)、一阶导数(1stD)、二阶导数(2ndD)、S-G平滑法(S-G)等筛选最佳光谱预处理方式,并结合偏最小二乘法(PLS)建立了滇黄精中多糖、总皂苷和总酚的定量模型,通过外部验证,筛选出最佳定量模型。多糖、总皂苷和总酚分别选择MSC+2ndD+S-G、MSC+1stD+NS、MSC+1stD+S-G预处理方法,波长选择8000~4000 cm^(-1),主成分个数分别为6、13和13时,所建立的定量模型效果最佳,其校正集相关系数(R_(cal))分别为0.923、0.990和0.938,验证集相关系数(R_(pre))分别为0.924、0.901和0.910,相关性良好,预测均方根误差(RMSEP)分别为5.380%、0.478%和0.028 mg·g^(-1),性能偏差比(RPD)分别为2.11、2.16和1.95,平均相对偏差均小于2.0%。所建立的滇黄精定量模型准确可靠,证明NIRS技术是一种可行、准确、快速的无损检测方法,可用于滇黄精中有效成分含量的快速测定。

自然发酵滇黄精酵素的工艺优化及功能活性分析

为探究滇黄精自然发酵工艺优化及发酵前后活性成分变化,以新鲜滇黄精为原料,经预处理后将其置于自然条件下利用其内生菌进行发酵,以酶活性和功能成分为评价指标设计单因素和正交试验,根据隶属度综合评分法得出最佳发酵工艺条件,并对发酵前后的样品进行有效成分活性评价。结果表明,与新鲜未发酵滇黄精相比,经过自然发酵的滇黄精酵素中有效成分多糖、皂苷、多酚含量增多,发酵液超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及脂肪酶活性分别增加了181.59U/g、0.77U/mL,且具有一定的抗氧化活性。滇黄精自然发酵最优工艺条件为发酵时间18d、初始糖浓度15%(质量分数),料水比1∶4.5(g/mL)。综上,自然发酵法利于滇黄精活性物质的溶出,同时可提升滇黄精酵素SOD、脂肪酶活性和抗氧化活性。

滇黄精茯苓复合含片制备工艺优化及其活性评价

以物理方法破壁后的滇黄精粉、茯苓粉、薏苡仁粉为原料,采用湿法制粒压片,以复合含片的感官评分和崩解时限为综合评分指标,利用单因素及正交试验确定含片最佳配方。运用Box-Behnken响应面法优化制备工艺条件,同时评价其活性成分含量及体外抗氧化能力。结果表明,原料中薏苡仁粉、茯苓粉、滇黄精粉的质量比3∶3∶1,原料与辅料的质量比1∶4,辅料中乳糖与麦芽糊精的质量比1∶1,润湿剂乙醇体积浓度70%,46℃干燥25 min,过16目筛后加入1.1%硬脂酸镁压片,该条件下制备的含片综合评分最高,其多糖含量104 mg/g,黄酮含量3.17 mg/g,体外抗氧化试验显示10 mg/mL含片水提物对DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基的清除率分别为23.2%、32.0%、45.0%,总还原力为0.191,0.4 mg/mL含片水提物对Fe3+的还原能力较VC偏弱。复合含片成型完好,口感适宜,含服方便,具备一定营养价值。

滇黄精黄酮提取工艺及活性的初步研究

研究了滇黄精中的黄酮类物质的提取工艺和抗氧化性能。用乙醇作为溶剂,采用正交实验对滇黄精黄酮提取条件乙醇浓度、液料比、超声波时间、提取次数进行正交优化,最佳条件为:乙醇浓度为80%、液料比为25∶1、提取时间为60min、提取次数3次,此条件下滇黄精黄酮最大提取率为0.40%;以芦丁为对照,对滇黄精黄酮进行DPPH自由基清除率、还原力测定实验,结果显示其活力高于同浓度的芦丁。实验结果显示滇黄精是一值得深入研究和开发利用的药材资源。

3个地理种源滇黄精光合日变化及其影响因子分析

为了解不同种源滇黄精(Polygonatum kingianum)光合生理特性与环境因子的关系,采用LI-6400XT光合作用测定系统,在自然环境条件下测定3个不同地理种源滇黄精植株的光合日变化,为良种选育以及科学栽培提供理论依据。结果表明:3个种源滇黄精的净光合速率(Pn)日变化存在明显差异,其中云南永德种源滇黄精Pn日变化呈单峰曲线,四川会理、云南金平种源滇黄精Pn日变化均呈双峰曲线,金平种源具有典型的"午休"现象。3个种源滇黄精的气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)日变化均呈双峰曲线;胞间CO2浓度(Ci)和水分利用率(WUE)日变化均不规则。3个种源之间光合特性存在差异,Pn日均值依次为:云南永德种源>四川会理种源>云南金平种源;除云南永德种源的Tr未出现下降外,其余各光合参数在午后均有较大幅度下降。相关分析表明,云南永德种源的Pn与Gs呈显著正相关;云南金平种源的Pn与Gs、Tr均呈显著正相关;四川会理种源的Pn与Gs、Tr和空气相对湿度(RH)均呈显著正相关,与大气温度(Ta)呈显著负相关。此外,3个种源滇黄精的Gs与RH均呈显著正相关,且各种源的Pn与Gs均呈显著正相关,因此RH对3个种源滇黄精的Pn影响也较大。3个种源滇黄精的光合日进程存在明显差异,说明不同种源对同一环境的适应能力存在较大差别,这种差别在引种栽培时应加以考虑。

滇黄精多糖I的分离纯化及结构研究

以滇黄精为材料,经热水提取,乙醇沉淀和二乙氨基乙基(DEAE)纤维素柱、Sepha-dex柱层析分离得到3个多糖组分(PKPI,PKPⅡ及PKPⅢ),其中滇黄精多糖I(PKPI)主要由葡萄糖组成,相对分子质量M约为8100。经酸水解、乙酰化、甲基化反应、红外吸收光谱(IR)、核磁共振氢谱(1HNMR)、气相色谱(GC)及气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析证明其化学结构为以α-(1→4)葡萄糖为主链,并在6-O上有少量短支链。

滇黄精种子萌发及成苗特性初探

目的:旨在解除滇黄精Polygonatum kingianum种子休眠及根茎芽休眠,并对其萌发后的发育过程进行研究。方法:采用常规石蜡切片技术对滇黄精种子萌发后的发育过程进行解剖学研究,探索不同种类及浓度的植物生长调节剂对滇黄精种子的休眠解除效果及低温处理滇黄精根茎对其根茎芽的休眠解除效果。结果:(1)滇黄精种子萌发后的发育解剖学研究初步阐明了滇黄精种子繁殖成苗的生物学机制;(2)从最终萌发率来看,植物生长调节剂对滇黄精种子休眠解除效果为:乙烯利(95.37%)>SNAP(87.04%)>赤霉素(78.70%)>对照(73.15%),差异显著,并且促进效果随乙烯利和SNAP的浓度升高而提高;在滇黄精种子萌发期间,乙烯利和SNAP处理提高了种子的内源乙烯和NO含量;在各处理条件下,萌发的种子比未萌发的种子乙烯释放量要高;(3)4℃低温处理能够有效解除滇黄精根茎芽的休眠,对其初生根茎低温贮藏120 d后转置常温下42 d时的出苗率为96%,与未经低温处理的根茎出苗率(3%)比较差异显著,且出苗速度随低温贮藏时间延长而加快。结论:本研究建立了一种加快滇黄精种子繁殖成苗的方法,并为滇黄精种子休眠及根茎芽休眠解除机理的研究奠定了基础。

不同基原与产地的黄精对比研究

目的对不同产地黄精药材进行多糖和浸出物含量测定,为黄精药材的优选提供参考。方法在全国范围收集黄精样品,用紫外分光光度法测定黄精中多糖含量,用稀乙醇作为溶剂测定黄精浸出物。结果野生滇黄精多糖含量在11.01%~17.22%,浸出物含量46.59%~58.16%,根茎繁殖和种植的滇黄精优于野生滇黄精;野生多花黄精多糖含量在10.39%~22.75%,浸出物含量48.67%~63.90%;野生黄精多糖含量在6.34%~16.79%,浸出物含量48.66%~63.09%。结论野生品种黄精多糖含量大小顺序为多花黄精>滇黄精>黄精,浸出物含量未见明显规律。品种种植中,贵州产滇黄精多糖含量与浸出物含量均较高,其次为多花黄精。

滇黄精与管花鹿药的药材鉴别研究

目的:为滇黄精与管花鹿药的鉴别提供依据。方法:应用药材外观性状鉴别、显微鉴别法对滇黄精与管花鹿药进行生药学鉴别。结果:滇黄精和管花鹿药的外观性状、显微特征均有区别。结论:滇黄精和管花鹿药在外观性状、显微特征方面的区别可作为两种植物的生药学鉴别依据。

滇黄精不同外植体无菌体系的建立

目的:建立滇黄精外植体组织培养再生体系,为完善无菌快繁技术体系提供技术基础。方法:以根状茎、叶、花药为外植体,就不同的灭菌方案、不同浓度的激素对外植体进行诱导试验。结果:根状茎芽点最好的灭菌方案为75%酒精30s+0.2%HgCl2 15min的处理组合,诱导芽点生长的适宜培养基为6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.5mg/L;嫩叶片最佳的灭菌处理为0.1%HgCl2 13min,可控制污染率为18.7%,较好的诱导培养基为6-BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L+2,4-D3.0mg/L。75%酒精20s+0.1%HgCl210min灭菌处理是花药较理想的灭菌方案,以KT1.0mg/L+2,4-D3.0mg/L为最适宜的诱导愈伤组织培养基。结论:试验中不同外植体均可完成再生体系。

几种药用植物林下的生长发育和叶绿素荧光特性研究

对西南地区广泛分布的滇黄精、淫羊藿、草珊瑚3种药用植物,在麻竹林下的生长发育和叶绿素荧光特性调查研究认为:3种药用植物在林下荫蔽环境下都没有明显的光抑制现象,都可以在林下进行开发利用。但3种药用植物在渝西浅丘麻竹林下的生长发育差异很大,无论是发芽率、发芽数等生长指标,还是净生长率等产量指标,滇黄精均显著高于草珊瑚和淫羊藿。种植2年的滇黄精净生长率可达到120%以上,滇黄精是非常适合该地区林下发展的中药材品种,是值得推广的一种林药经营模式。

基于多元统计分析的3种法定基源黄精化学成分比较研究

目的比较研究《中华人民共和国药典》规定的3种基源黄精的化学成分差异。方法利用超声法提取收集到的17批黄精药材,提取液经PS/AL固相萃取小柱净化后,采用超高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Orbitrap MS)技术分别对其化学成分进行表征,并用多元统计分析处理数据,包括主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)、正交校正的偏最小二乘分析(OPLS-DA)及聚类分析(HCA)。结果从正、负离子模式下的PCA、PLS-DA、OPLS-DA散点图及HCA树状图可见,3种法定基源黄精明显聚为3类。结论 3种基源黄精的化学成分存在明显差异,所建立的分析方法可用于区分3种法定基源黄精。本研究结果可为黄精药材的深入研究及质量标准的制定提供依据。

黄精的本草考证

目的:研究本草中记录的中药黄精的基源植物,对黄精进行全方位的本草考证,为中药黄精提供文献依据。方法:查阅古籍,从源流、名称、产地、功效考证黄精。结果:通过翻阅历代文献以及《中国植物志》考证出现代药用黄精的品种来源有三种:多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua,黄精,Polygonatum sibiricum Red.滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl。结论:中药黄精的疗效好,用量广,作为药食两用的植物,具有良好的发展及研究前景。

天麻滇黄精和玛咖3种云南药材及种植土壤重金属安全评价

目的:评估天麻、滇黄精、玛咖3种中药材及其种植土壤重金属安全性,保障用药安全。方法:以云南省32个天麻种植地、15个滇黄精种植地和18个玛咖种植地共计184份药材和土壤为材料,测定其铜(Cu)、铅(Pb)、镉(Cd)和砷(As)含量,采用单因子及内梅罗综合指数评价法、潜在生态风险评估法对其种植土壤重金属污染指数进行计算与安全评价,并对重金属超标药材进行健康风险评估。结果:天麻、玛咖种植土壤样本的潜在环境风险指数(RI)均处于轻微和中等水平,而滇黄精种植土壤样本的RI均处于轻微水平。云南省天麻、滇黄精种植土壤存在轻微Cd污染,玛咖种植土壤存在中度Cd污染。这3种药材种植地均不存在Cu、Pb、As污染。天麻仅Cd质量分数超标(0.05~0.37 mg·kg),超标率为3.1%;滇黄精无重金属超标;玛咖存在Cd质量分数超标的情况(0.03~0.65 mg·kg),超标率高达19.1%,但其单个重金属危害指数(HI)和综合危害指数(THQ)均小于1。结论:云南省天麻和滇黄精种植土壤存在轻度和中度的重金属污染风险;玛咖种植土壤存在中度和重度的重金属污染风险,选择其种植地时要特别注意Cd污染风险。按照《中华人民共和国药典》 2020年版要求使用3种药材不存在重金属健康风险。

药食同源药材黄精 玉竹营养及生物活性成分分析

目的:为深入挖掘药食同源药材黄精、玉竹的营养价值,推动其食品产业化进程,对滇黄精、黄精、多花黄精、玉竹4个基原物种的营养和生物活性成分进行测定。方法:参照《食品安全国家标准》,测定样品中碳水化合物、淀粉、可溶性膳食纤维、蛋白质、氨基酸、维生素和矿物质元素等多个营养指标含量,分别通过苯酚-硫酸法、香草醛比色法、NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH比色法和Folin-Ciocalteu比色法对多糖、甾体皂苷、黄酮和酚酸总含量进行测定;以《中国居民膳食营养素参考摄入量》为分析依据,对黄精、玉竹的营养价值进行分析。结果:黄精、玉竹中碳水化合物营养价值高(淀粉质量分数为8.33%~10.89%、可溶性膳食纤维质量分数为3.41%~9.53%),氨基酸种类丰富(黄精、多花黄精、玉竹含18种,滇黄精含17种),具高谷氨酸、高维生素B_(6)、高铁、高锰和高钼等特点,且含有多糖、甾体皂苷、酚酸、黄酮等生物活性成分。结论:药食同源药材黄精、玉竹符合现代人的健康饮食需求,可作为优质膳食原料推广使用,测定结果将为其食品产业化发展提供参考。