酶解糖化滇黄精多糖的结构表征及其免疫活性

该论文研究了酶解糖化下的滇黄精多糖结构和免疫活性,以探究酶解糖化下的黄精多糖结构特征及免疫活性的影响。结果表明,酶解糖化黄精多糖(SPKP)的多糖和还原糖含量分别为94.05%、4.1%。多糖结构分析表明,SPKP的红外光谱在1016~1147和931 cm-1处有吡喃糖特征吸收峰;单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖:半乳糖:葡萄糖:甘露糖:果糖=0.032:0.117:0.419:0.048:0.383,重均分子量(Mw)为3820 u。甲基化结果表明SPKP主要的糖苷键连接方式为(→4-Glcp-1→),占比47.1%,分支度为34.1%结合碘碘化钾和刚果红实验结果可以推测SPKP是一种含有复杂分支的三股螺旋多糖。RAW264.7细胞实验结果表明,酶解糖化黄精多糖在比较广的浓度范围内无毒性,均能促进细胞增殖,且有较高的细胞吞噬能力和NO水平,因此可以推测SPKP具有较好的免疫活性,且与其多糖结构有一定的关系。该研究可以为多糖与免疫活性的构效关系以及黄精新炮制方法的开发提供一定参考。

林下种植滇黄精对土壤理化性状及微生物群落的影响

目的:探究林下不同生长年限滇黄精根区土壤微生物群落结构和土壤环境因子的变化,为实现滇黄精林下可持续种植提供参考。方法:对云南省禄劝彝族苗族自治县栽培1、2、3年滇黄精的林下土壤及未开发林下土壤进行土壤理化性质、酶活性检测和高通量测序。结果:滇黄精根区土壤pH、全磷和速效钾的含量随种植年限的增加而降低,有机质、全氮、速效磷的含量随种植年限的增加而增加。与原生林地比较,种植1、2、3年的滇黄精根区土壤脲酶活性显著降低,过氧化氢酶活性显著增加。此外,种植滇黄精后,土壤细菌、真菌的多样性和丰度增加,且原生林地土壤与滇黄精根区土壤细菌、真菌群落结构存在差异,不同种植年限滇黄精土壤细菌、真菌群落结构相似。pH、速效氮、脲酶、酸性磷酸酶、过氧化氢酶是引起土壤细菌、真菌群落变化的主要土壤因子。结论:种植滇黄精对林地土壤的理化性质、酶活性和微生物群落结构造成一定影响,不同土壤因子及土壤微生物的响应不同。研究结果为建立滇黄精林下可持续种植模式、提高滇黄精品质提供了参考。

自然发酵滇黄精酵素的工艺优化及功能活性分析

为探究滇黄精自然发酵工艺优化及发酵前后活性成分变化,以新鲜滇黄精为原料,经预处理后将其置于自然条件下利用其内生菌进行发酵,以酶活性和功能成分为评价指标设计单因素和正交试验,根据隶属度综合评分法得出最佳发酵工艺条件,并对发酵前后的样品进行有效成分活性评价。结果表明,与新鲜未发酵滇黄精相比,经过自然发酵的滇黄精酵素中有效成分多糖、皂苷、多酚含量增多,发酵液超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及脂肪酶活性分别增加了181.59U/g、0.77U/mL,且具有一定的抗氧化活性。滇黄精自然发酵最优工艺条件为发酵时间18d、初始糖浓度15%(质量分数),料水比1∶4.5(g/mL)。综上,自然发酵法利于滇黄精活性物质的溶出,同时可提升滇黄精酵素SOD、脂肪酶活性和抗氧化活性。

滇黄精炮制品中甾体类化学成分研究

[目的]研究滇黄精炮制品中的甾体类化学成分。[方法]采用柱层析、薄层层析和制备型高效液相色谱等方法对滇黄精炮制品乙醇提取物进行分离和纯化,通过核磁波谱数据分析并鉴定化合物。[结果]从滇黄精炮制品中分离鉴定到6种甾体类化合物,分别为:balanoinvolin(1)、3β-hydroxystigmasta-5,22-dien-7-one(2)、3β-hydroxystigmast-5-en-7-one(3)、6′-O-棕榈酰-β-胡萝卜苷(4)、胡萝卜苷(5)、β-谷甾醇(6)。[结论]化合物1~4均为首次从滇黄精炮制品中分离得到。

滇黄精黄酮提取工艺及活性的初步研究

研究了滇黄精中的黄酮类物质的提取工艺和抗氧化性能。用乙醇作为溶剂,采用正交实验对滇黄精黄酮提取条件乙醇浓度、液料比、超声波时间、提取次数进行正交优化,最佳条件为:乙醇浓度为80%、液料比为25∶1、提取时间为60min、提取次数3次,此条件下滇黄精黄酮最大提取率为0.40%;以芦丁为对照,对滇黄精黄酮进行DPPH自由基清除率、还原力测定实验,结果显示其活力高于同浓度的芦丁。实验结果显示滇黄精是一值得深入研究和开发利用的药材资源。

3个地理种源滇黄精光合日变化及其影响因子分析

为了解不同种源滇黄精(Polygonatum kingianum)光合生理特性与环境因子的关系,采用LI-6400XT光合作用测定系统,在自然环境条件下测定3个不同地理种源滇黄精植株的光合日变化,为良种选育以及科学栽培提供理论依据。结果表明:3个种源滇黄精的净光合速率(Pn)日变化存在明显差异,其中云南永德种源滇黄精Pn日变化呈单峰曲线,四川会理、云南金平种源滇黄精Pn日变化均呈双峰曲线,金平种源具有典型的"午休"现象。3个种源滇黄精的气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)日变化均呈双峰曲线;胞间CO2浓度(Ci)和水分利用率(WUE)日变化均不规则。3个种源之间光合特性存在差异,Pn日均值依次为:云南永德种源>四川会理种源>云南金平种源;除云南永德种源的Tr未出现下降外,其余各光合参数在午后均有较大幅度下降。相关分析表明,云南永德种源的Pn与Gs呈显著正相关;云南金平种源的Pn与Gs、Tr均呈显著正相关;四川会理种源的Pn与Gs、Tr和空气相对湿度(RH)均呈显著正相关,与大气温度(Ta)呈显著负相关。此外,3个种源滇黄精的Gs与RH均呈显著正相关,且各种源的Pn与Gs均呈显著正相关,因此RH对3个种源滇黄精的Pn影响也较大。3个种源滇黄精的光合日进程存在明显差异,说明不同种源对同一环境的适应能力存在较大差别,这种差别在引种栽培时应加以考虑。

滇黄精多糖I的分离纯化及结构研究

以滇黄精为材料,经热水提取,乙醇沉淀和二乙氨基乙基(DEAE)纤维素柱、Sepha-dex柱层析分离得到3个多糖组分(PKPI,PKPⅡ及PKPⅢ),其中滇黄精多糖I(PKPI)主要由葡萄糖组成,相对分子质量M约为8100。经酸水解、乙酰化、甲基化反应、红外吸收光谱(IR)、核磁共振氢谱(1HNMR)、气相色谱(GC)及气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析证明其化学结构为以α-(1→4)葡萄糖为主链,并在6-O上有少量短支链。

滇黄精种子萌发及成苗特性初探

目的:旨在解除滇黄精Polygonatum kingianum种子休眠及根茎芽休眠,并对其萌发后的发育过程进行研究。方法:采用常规石蜡切片技术对滇黄精种子萌发后的发育过程进行解剖学研究,探索不同种类及浓度的植物生长调节剂对滇黄精种子的休眠解除效果及低温处理滇黄精根茎对其根茎芽的休眠解除效果。结果:(1)滇黄精种子萌发后的发育解剖学研究初步阐明了滇黄精种子繁殖成苗的生物学机制;(2)从最终萌发率来看,植物生长调节剂对滇黄精种子休眠解除效果为:乙烯利(95.37%)>SNAP(87.04%)>赤霉素(78.70%)>对照(73.15%),差异显著,并且促进效果随乙烯利和SNAP的浓度升高而提高;在滇黄精种子萌发期间,乙烯利和SNAP处理提高了种子的内源乙烯和NO含量;在各处理条件下,萌发的种子比未萌发的种子乙烯释放量要高;(3)4℃低温处理能够有效解除滇黄精根茎芽的休眠,对其初生根茎低温贮藏120 d后转置常温下42 d时的出苗率为96%,与未经低温处理的根茎出苗率(3%)比较差异显著,且出苗速度随低温贮藏时间延长而加快。结论:本研究建立了一种加快滇黄精种子繁殖成苗的方法,并为滇黄精种子休眠及根茎芽休眠解除机理的研究奠定了基础。

不同基原与产地的黄精对比研究

目的对不同产地黄精药材进行多糖和浸出物含量测定,为黄精药材的优选提供参考。方法在全国范围收集黄精样品,用紫外分光光度法测定黄精中多糖含量,用稀乙醇作为溶剂测定黄精浸出物。结果野生滇黄精多糖含量在11.01%~17.22%,浸出物含量46.59%~58.16%,根茎繁殖和种植的滇黄精优于野生滇黄精;野生多花黄精多糖含量在10.39%~22.75%,浸出物含量48.67%~63.90%;野生黄精多糖含量在6.34%~16.79%,浸出物含量48.66%~63.09%。结论野生品种黄精多糖含量大小顺序为多花黄精>滇黄精>黄精,浸出物含量未见明显规律。品种种植中,贵州产滇黄精多糖含量与浸出物含量均较高,其次为多花黄精。

滇黄精与管花鹿药的药材鉴别研究

目的:为滇黄精与管花鹿药的鉴别提供依据。方法:应用药材外观性状鉴别、显微鉴别法对滇黄精与管花鹿药进行生药学鉴别。结果:滇黄精和管花鹿药的外观性状、显微特征均有区别。结论:滇黄精和管花鹿药在外观性状、显微特征方面的区别可作为两种植物的生药学鉴别依据。

滇黄精不同外植体无菌体系的建立

目的:建立滇黄精外植体组织培养再生体系,为完善无菌快繁技术体系提供技术基础。方法:以根状茎、叶、花药为外植体,就不同的灭菌方案、不同浓度的激素对外植体进行诱导试验。结果:根状茎芽点最好的灭菌方案为75%酒精30s+0.2%HgCl2 15min的处理组合,诱导芽点生长的适宜培养基为6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.5mg/L;嫩叶片最佳的灭菌处理为0.1%HgCl2 13min,可控制污染率为18.7%,较好的诱导培养基为6-BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L+2,4-D3.0mg/L。75%酒精20s+0.1%HgCl210min灭菌处理是花药较理想的灭菌方案,以KT1.0mg/L+2,4-D3.0mg/L为最适宜的诱导愈伤组织培养基。结论:试验中不同外植体均可完成再生体系。

几种药用植物林下的生长发育和叶绿素荧光特性研究

对西南地区广泛分布的滇黄精、淫羊藿、草珊瑚3种药用植物,在麻竹林下的生长发育和叶绿素荧光特性调查研究认为:3种药用植物在林下荫蔽环境下都没有明显的光抑制现象,都可以在林下进行开发利用。但3种药用植物在渝西浅丘麻竹林下的生长发育差异很大,无论是发芽率、发芽数等生长指标,还是净生长率等产量指标,滇黄精均显著高于草珊瑚和淫羊藿。种植2年的滇黄精净生长率可达到120%以上,滇黄精是非常适合该地区林下发展的中药材品种,是值得推广的一种林药经营模式。

基于多元统计分析的3种法定基源黄精化学成分比较研究

目的比较研究《中华人民共和国药典》规定的3种基源黄精的化学成分差异。方法利用超声法提取收集到的17批黄精药材,提取液经PS/AL固相萃取小柱净化后,采用超高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Orbitrap MS)技术分别对其化学成分进行表征,并用多元统计分析处理数据,包括主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)、正交校正的偏最小二乘分析(OPLS-DA)及聚类分析(HCA)。结果从正、负离子模式下的PCA、PLS-DA、OPLS-DA散点图及HCA树状图可见,3种法定基源黄精明显聚为3类。结论 3种基源黄精的化学成分存在明显差异,所建立的分析方法可用于区分3种法定基源黄精。本研究结果可为黄精药材的深入研究及质量标准的制定提供依据。

黄精的本草考证

目的:研究本草中记录的中药黄精的基源植物,对黄精进行全方位的本草考证,为中药黄精提供文献依据。方法:查阅古籍,从源流、名称、产地、功效考证黄精。结果:通过翻阅历代文献以及《中国植物志》考证出现代药用黄精的品种来源有三种:多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua,黄精,Polygonatum sibiricum Red.滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl。结论:中药黄精的疗效好,用量广,作为药食两用的植物,具有良好的发展及研究前景。

天麻滇黄精和玛咖3种云南药材及种植土壤重金属安全评价

目的:评估天麻、滇黄精、玛咖3种中药材及其种植土壤重金属安全性,保障用药安全。方法:以云南省32个天麻种植地、15个滇黄精种植地和18个玛咖种植地共计184份药材和土壤为材料,测定其铜(Cu)、铅(Pb)、镉(Cd)和砷(As)含量,采用单因子及内梅罗综合指数评价法、潜在生态风险评估法对其种植土壤重金属污染指数进行计算与安全评价,并对重金属超标药材进行健康风险评估。结果:天麻、玛咖种植土壤样本的潜在环境风险指数(RI)均处于轻微和中等水平,而滇黄精种植土壤样本的RI均处于轻微水平。云南省天麻、滇黄精种植土壤存在轻微Cd污染,玛咖种植土壤存在中度Cd污染。这3种药材种植地均不存在Cu、Pb、As污染。天麻仅Cd质量分数超标(0.05~0.37 mg·kg),超标率为3.1%;滇黄精无重金属超标;玛咖存在Cd质量分数超标的情况(0.03~0.65 mg·kg),超标率高达19.1%,但其单个重金属危害指数(HI)和综合危害指数(THQ)均小于1。结论:云南省天麻和滇黄精种植土壤存在轻度和中度的重金属污染风险;玛咖种植土壤存在中度和重度的重金属污染风险,选择其种植地时要特别注意Cd污染风险。按照《中华人民共和国药典》 2020年版要求使用3种药材不存在重金属健康风险。

遮荫和有机肥对滇黄精光合特性及生长的影响

目的:为滇黄精在实际生产中选择合适的遮荫度以及有机肥提供理论依据。方法:设置3种不同的遮荫度(0%不遮荫,56%中度遮荫,77%高度遮荫)以及3种有机肥(商用有机肥,鸡粪堆肥,猪粪堆肥)处理,以不施加有机肥为对照,采用“3×4完全试验”设计,观测滇黄精的光合特性、生长等指标,并分析其受遮荫和有机肥处理的影响。结果:遮荫和有机肥的施用可以增加滇黄精的光合能力,在高度遮荫条件下施用猪粪堆肥时光合能力最强;光合作用的增强使滇黄精植株株高、基径、比叶面积得到相应的增加;遮荫会显著影响生物量的分配,高度遮荫时植物地上部分生长旺盛,但会抑制干物质向地下器官的运输,而中度遮荫时,地下部分累积生物量多,新生根茎干重大。结论:遮荫度保持56%左右(中度遮荫)并施用猪粪堆肥较适合滇黄精的生长。

药食同源药材黄精 玉竹营养及生物活性成分分析

目的:为深入挖掘药食同源药材黄精、玉竹的营养价值,推动其食品产业化进程,对滇黄精、黄精、多花黄精、玉竹4个基原物种的营养和生物活性成分进行测定。方法:参照《食品安全国家标准》,测定样品中碳水化合物、淀粉、可溶性膳食纤维、蛋白质、氨基酸、维生素和矿物质元素等多个营养指标含量,分别通过苯酚-硫酸法、香草醛比色法、NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH比色法和Folin-Ciocalteu比色法对多糖、甾体皂苷、黄酮和酚酸总含量进行测定;以《中国居民膳食营养素参考摄入量》为分析依据,对黄精、玉竹的营养价值进行分析。结果:黄精、玉竹中碳水化合物营养价值高(淀粉质量分数为8.33%~10.89%、可溶性膳食纤维质量分数为3.41%~9.53%),氨基酸种类丰富(黄精、多花黄精、玉竹含18种,滇黄精含17种),具高谷氨酸、高维生素B_(6)、高铁、高锰和高钼等特点,且含有多糖、甾体皂苷、酚酸、黄酮等生物活性成分。结论:药食同源药材黄精、玉竹符合现代人的健康饮食需求,可作为优质膳食原料推广使用,测定结果将为其食品产业化发展提供参考。

Box-Behnken响应面法优化滇黄精产地加工炮制一体化工艺对黄精多糖的影响

目的:运用Box-Behnken响应面法优化滇黄精产地加工炮制一体化工艺。方法:采用蒽酮-硫酸紫外分光光度法检测,黄精多糖含量为评价指标。单因素试验确定因素最低水平和最高水平,结合Box-Behnken中心组合设计,对滇黄精蒸制时间、切片厚度、干燥温度3个因素进行优化。结果:滇黄精产地加工炮制一体化优化工艺为蒸制时间22 min、切片厚度3.6 mm、干燥温度61℃。优化工艺检测黄精多糖质量分数为12.12%,与预测值相接近,实验所建模型准确可靠。结论:Box-Behnken响应面优化滇黄精产地加工炮制一体化工艺切实可行,为筛选适宜滇黄精产地加工炮制一体化方法研究提供参考。

4个不同花色滇黄精品系花粉形态特征的电镜扫描分析

[目的]为滇黄精花粉形态学研究及进一步的分类和评价提供参考.[方法]选择4个不同花色的滇黄精品系,在植株形态比较的基础上,利用扫描电镜对花粉形状、外壁纹饰、极轴长(P)、赤道轴长等方面进行观察描述和比较.[结果]P1、P2和P3这3个品系之间除了花色的差异,在多数植物学特征性状上没有显著差异,而P4具有植株较矮、叶片窄小、花被短小以及根茎呈圆柱状、其横切面黄色等特点;滇黄精花粉粒大,长球形,极面观为椭圆形或纺锤形,具远极单沟,沟缘整齐,沟膜较清晰,无萌发孔,外壁很薄,两层,外壁表面具细网状雕纹;4个品系的花粉大小及形态结构上差异不大,花粉长68~ 70 μm,极轴59~ 72 μm,赤道轴23~31 μm,极轴(P,μm)×赤道轴(E,μm)分别为65 μm × 25 μm、70μm×28 μm、64μm×26μm、66 μm×26μm,P/E为2.5~2.6.[结论]尽管4个滇黄精品系花色迥异,但在花粉大小及形态结构上差异不大,难以进行定性和定量的比较.

不同炮制方式对黄精有效成分含量的影响

以滇黄精为对象,研究九蒸九制过程中有效成分含量的变化,探究出滇黄精的最佳炮制工艺。试验中选取蒸制处理方法,采用紫外-可见分光光度法研究九蒸九制过程中多糖、总皂苷和蒽醌类化合物的含量变化。结果表明,随着蒸制处理次数的增加,滇黄精多糖的含量呈现出先下降后趋于稳定的变化,蒽醌类化合物含量呈下降趋势,总皂苷含量呈现出先上升后趋于稳定的变化。蒸制处理对滇黄精有效成分含量产生了一定影响,蒸制时长和次数并不是越多越好。研究结果为黄精的炮制工艺和高品质黄精产品开发提供了依据。