响应面法优化辣蓼黄酮的提取工艺

试验旨在优化辣蓼黄酮的提取工艺。以辣蓼为试验材料,通过单因素试验考察液料比、乙醇含量、超声时间、超声温度对总黄酮含量的影响;确定影响总黄酮含量的主要因素和最佳范围后,以液料比、乙醇含量和超声时间为考察因素,以辣蓼黄酮含量为评价指标,通过响应面法优化辣蓼黄酮的提取工艺。结果显示,液料比、乙醇含量和超声时间是影响辣蓼黄酮含量的主要因素,当液料比20 mL/g、乙醇含量60%、超声时间40 min时,黄酮含量最高,分别是18.93%、18.07%和18.06%。液料比、乙醇含量和超声时间对辣蓼黄酮含量的影响大小依次是液料比>乙醇含量>超声时间,其中液料比和乙醇含量对辣蓼黄酮含量的影响达到极显著水平,超声时间不显著;液料比和超声时间之间交互作用对辣蓼黄酮含量影响最明显。验证试验结果显示,辣蓼黄酮最优提取工艺为液料比21 mL/g、乙醇含量62%、超声时间39 min,在此条件下黄酮的平均含量为19.108%。

拳参正丁醇提取物对视网膜缺血再灌注损伤时一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的研究拳参正丁醇提取物(PBNA)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤时NO及NOS活性的影响。方法 SD大鼠随机分成4组:假手术组、视网膜缺血再灌注模型组、低剂量及高剂量PBNA治疗组。假手术组分离颈总动脉后舌下静脉给予1ml.kg-1的NS,其余各组分别在夹闭颈总动脉前分别舌下静脉注射生理盐水、低剂量(0.3mg·kg-1)及高剂量(1mg·kg-1)的PBNA。颈总动脉夹闭1h再灌注1h后,视网膜电流图(ERG)检查,取血,分离血清,测定血清NO含量、T-NOS、iNOS及eNOS的活性。结果与假手术组相比,模型组ERG幅度明显降低(P<0.01)、血清NO含量降低(P<0.001)、iNOS活性升高(P<0.05)、eNOS活性降低(P<0.05);与模型组比较,PBNA低剂量组NO含量升高(P<0.05)、iNOS活性降低(P<0.05),低剂量组及高剂量组ERG幅度升高(P<0.001)、T-NOS(P<0.01)及eNOS(P<0.05,P<0.01)活性均升高。结论 PBNA可通过提高T-NOS和具有保护作用的eNOS活性,降低具有损伤作用的iNOS的活性,升高NO含量,提高抗氧化能力和扩血管功能,对视网膜功能起保护作用。

拳参正丁醇提取物对视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究拳参正丁醇提取物(polygonum bistorla L.n-butylal cohol extract,PBNA)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤时抗氧化能力及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量的影响。方法24只SD大鼠随机分成4组,即对照组、视网膜缺血再灌注模型组(简称模型组)、低剂量(0.3mg.kg-1)及高剂量(1.0mg.kg-1)PBNA组,每组各6只大鼠。颈总动脉夹闭法制作视网膜缺血再灌注模型。颈总动脉夹闭60min再灌注60min后,行视网膜电图(electroretinogram,ERG)检查;比色法测定血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)浓度及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,放射免疫法检测血清TNF-α含量。结果(1)与对照组ERG幅度(2.02±0.49)mV相比,模型组ERG幅度(0.55±0.28)mV显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,低剂量PBNA组ERG幅度(3.07±0.18)mV及高剂量PBNA组ERG幅度(3.71±0.48)mV均显著升高,差异均有显著统计学意义(均为P<0.001);(2)模型组血清MDA浓度(7.98±1.21)μmol.L-1较对照组(5.58±1.50)μmol.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,低剂量PBNA组MDA浓度(5.77±1.11)μmol.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)模型组血清NO浓度(26.31±5.34)mmol.L-1较对照组NO浓度(63.39±7.49)mmol.L-1降低,差异有显著统计学意义(P<0.001),与模型组比较,低剂量PBNA组NO含量(43.86±9.27)mmol.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);(4)模型组血清GSH-Px活性(288.20±41.90)×103U.L-1较对照组(418.80±49.27)×103U.L-1降低,差异有显著统计学意义(P<0.01),与模型组比较,GSH-Px活性低剂量PBNA组(434.00±86.76)×103U.L-1及高剂量PBNA组(379.20±55.71)×103U.L-1均升高,前者差异有显著统计学意义(P<0.01),后者差异有统计学意义(P<0.05);(5)模型组血清SOD活性(64.19±7.65)×103U.L-1较对照组(77.56±7.76)×103U.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,低剂量PBNA组SOD活性(83.17±6.47)×103U.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);(6)模型组血清TNF-α含量(3.13±0.87)ng.L-1较对照组(1.84±0.17)ng.L-1升高,差异有显著统计学意义(P<0.01),与模型组比较,高剂量PBNA组TNF-α含量(2.21±0.41)ng.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PBNA可通过提高SOD、GSH-PX的活性及NO的释放,从而提高视网膜缺血再灌注损伤时的抗氧化能力,还可通过降低TNF-α的释放,降低组织细胞损伤,对眼功能起保护作用。

拳参正丁醇提取物对心肌缺血的影响

目的观察拳参正丁醇提取物对结扎大鼠左冠状动脉前降支损伤的保护作用。方法取40只雄性W istar大鼠,随机分为假手术组、结扎冠状动脉组、拳参正丁醇提取物高剂量组(120 mg/kg)、拳参正丁醇提取物低剂量组(60 mg/kg)。结扎冠状动脉左前降支使心肌缺血并持续120 m in,复制结扎冠状动脉损伤模型。记录缺血前、缺血15m in、给药30,60,90,120 m inⅡ导联ECG,统计各标测点Ⅱ导联ECG的ST段偏移∑-ST。治疗组于结扎冠状动脉左前降支前20 m in经十二指肠注入拳参正丁醇提取物。结扎冠状动脉组及假手术组经十二指肠注入等体积生理盐水。实验结束后心内取血测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)活性;测定心肌组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。另用24只W ister大鼠同上述分组及动物模型制作方法,取其心肌作TTC染色测心肌梗死面积。结果治疗组与模型组比较,心肌梗死面积明显缩小,血清LDH、CK活性降低,血清MDA含量减小,SOD活性升高,∑-ST值减少,且呈一定剂量依赖性。结论拳参正丁醇提取物治疗组(高、低剂量)对大鼠结扎冠状动脉的损伤均有保护作用。

拳参正丁醇提取液对家兔胸主动脉条收缩的影响

目的:研究拳参正丁醇提取液(PBNA)对家兔离体胸主动脉条的作用。方法:采用家兔离体胸主动脉条,高钾去极化后,以不同浓度CaCl2为刺激剂,观察PBNA对其量-效曲线的影响;以NE为血管收缩刺激剂,观察PBNA对内钙释放与外钙内流的影响。结果:(1)低剂量PBNA(0.1mg/ml)可抑制高钾去极化引起的动脉条收缩,使CaCl2量-效曲线右移,最大反应性降低,高剂量PBNA(0.4mg/ml)可增强高钾去极化引起的动脉条收缩;(2)低剂量的PBNA抑制NE诱导的内钙释放所致的血管收缩反应,而高剂量的PBNA增强NE诱导的内钙释放所致的血管收缩反应;各剂量的PBNA对复钙后NE所致的血管收缩作用具有抑制趋势。结论:不同浓度的PBNA通过抑制或促进平滑肌细胞膜电压依赖Ca2+通道而对家兔主动脉条的收缩起双重效应,PBNA对受体操纵的Ca2+通道也具有一定的抑制作用,对K+通道的开放有一定的促进作用。

拳参正丁醇提取物对豚鼠心肌生理特性的影响

目的研究拳参正丁醇提取物对豚鼠离体右心房自律性及收缩特性的影响,并探讨其作用机制。方法采用豚鼠离体右心房测定拳参正丁醇提取物对其自律性、收缩幅度、收缩速度、舒张速度的影响。结果拳参正丁醇提取物可降低豚鼠离体右心房的自律性,降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度,且具有明显的剂量依赖性。结论拳参正丁醇提取物可抑制豚鼠离体右心房的自律性,降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度,且具有明显的剂量依赖性。其机制可能与抑制钙离子的内流及改变肌浆网上的钙泵活性有关。

拳参正丁醇提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究拳参正丁醇提取物对脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其保护机制。方法大鼠大脑中动脉栓塞,制作脑缺血再灌注损伤模型,缺血后10 min,于舌下静脉给予不同剂量的拳参正丁醇提取物。再灌注24 h后,断头取脑,TTC染色,测定脑梗塞体积;取血,离心后,取血清,比色法测血清NOS、SOD的活性及NO、MDA的含量。结果与模型组相比,拳参正丁醇提取物治疗组脑梗塞体积减小,血清NOS和SOD的活性升高,NO含量升高,MDA含量降低。结论拳参正丁醇提取物对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其保护机制与拳参正丁醇提取物促进NO释放及增强氧自由基的清除有关。

拳参正丁醇提取物的镇痛作用的研究

目的 :研究拳参正丁醇提取物对小鼠的镇痛作用。方法 :采用醋酸扭体法、热板致痛法、电刺激致痛法观察拳参正丁醇提取物对小鼠镇痛的效果。结果 :拳参正丁醇提取物对醋酸诱发小鼠扭体反应 ,热板法和电刺激法诱发的疼痛有显著的镇痛作用。但纳洛酮不能对抗其镇痛作用。结论

PBNA对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:研究拳参正丁醇提取物(PBNA)对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究。方法:采用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,测定大鼠心脏冠脉流量、心率、左心室收缩压、左心室舒张压。结果:PBNA能有效地增加大鼠心脏冠脉流量;同时可使心率减慢、左心室收缩压升高、左心室舒张压降低。结论:PBNA可通过扩张冠脉、减慢心率、增强心肌收缩力对心肌缺血再灌注损伤起保护作用。

响应面法优化提取拳参黄酮的工艺研究

以拳参粉末为原料,用超声波辅助提取法对黄酮成分进行提取.选取料液比、超声功率、提取时间和提取温度作为考察对象,用拳参黄酮的提取率作为目标,进行单因素实验,进行响应面分析.发现拳参黄酮最好的提取方法是为料液比1∶41 g/mL、超声功率397 W、提取时间59 min、提取温度41℃,提取率的预测值为1.162%,实际值为1.198%,数值接近.因此,响应面优化的工艺稳定可靠,为拳参的综合利用和产业化开发提供理论支持.

响应面法优化拳参总蒽醌超声提取工艺的研究

目的:确定拳参总蒽醌的优化超声提取工艺。方法:采用直接紫外分光光度法测定拳参总蒽醌含量并以总蒽醌提取率为指标,考察乙醇浓度、提取时间、料液比三因素对拳参总蒽醌提取率的影响,在单因素试验的基础上选取试验因素与水平,采用响应面分析法优化超声提取工艺条件。结果:拳参总蒽醌的最佳提取工艺为:乙醇浓度73%,提取时间30 min,料水比1∶35(W∶V)。在最佳工艺条件下,拳参总蒽醌的实际提取率可达3.03%。结论:该工艺提取率高、操作简便,可为拳参总蒽醌的生产提供参考。