基于“辨状论质”综合评价指数的拳参药材规格等级标准研究

针对市场拳参只有统货规格,基于辩证论质法,建立拳参商品规格等级标准。首先,对24批拳参外观性状和数量指标进行测定。同时,检测浸出物、总酚酸、没食子酸三个内在成分,并对拳参抗氧化药理活性进行评价。随后,为了探究可能作为拳参药材规格等级的参数,分析单个外观指标与内在质量指标相关性;并采用信息熵赋权法对内在质量指标整体进行综合评分,进一步地分析内在质量指标综合评分与外观性状的相关性。最后,运用描述统计分析、主成分分析、方差分析确定性状指标的重要度。内在指标综合评分、总酚酸含量与长度值1、最粗直径、单个质量、L*、b*呈极显著正相关;浸出物与长度值1、L*呈极显著正相关。抗氧化能力与长度值1、最粗直径、单个质量、L*、b*呈极显著正相关。筛选得到最粗直径、单个质量、百克个数三个重要性状指标,制定拳参商品规格等级分为统货、选货,统货断面颜色偏暗,呈棕褐色,直径在0.83.0 cm;选货断面颜色鲜亮,偏黄,分为2等,一等品拳参最粗直径在1.8 cm以上,单个质量6.9 g以上,百克个数16个以内,综合评分≥64.63;二等品拳参最粗直径1.5 cm以上,单个质量3.8 g以上,百克个数33个以内,综合评分≥35.74。研究证实了本草记载的科学性,即个大、断面浅棕色为佳,制定了拳参商品规格等级标准,利于其市场环境和质量控制,确保临床用药的稳定性和有效性。

拳参高效液相色谱指纹图谱与抗氧化活性的谱效关系研究

目的采用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱与抗氧化活性建立谱-效关系分析筛选拳参抗氧化活性的有效成分。方法采用HPLC法建立拳参指纹图谱,评价指纹图谱相似度,结合HPLC-Q-Orbitrap HRMS/MS定性分析,对其中29个主要特征峰进行指认。使用2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)和2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)自由基清除法,以及铁离子还原能力(FRAP)测定法,分别评价拳参样品的抗氧化能力,并利用抗氧化活性综合指数(APC)进行综合评价,结合灰色关联度分析和偏最小二乘回归分析研究谱效关系。结果建立了11批拳参样品的HPLC指纹图谱,相似度评价结果均≥0.970。标定29个主要特征峰,并鉴定其中26种成分。灰色关联度分析和偏最小二乘回归分析结果显示,峰2+3(6-O-没食子酰葡萄糖)、峰8(二没食子酰葡萄糖)、峰11(绿原酸)、峰14(儿茶素)、峰15(二没食子酰葡萄糖)、峰18(二没食子酰葡萄糖)和峰23(表儿茶素)是反映拳参抗氧化药效的重要特征峰。结论拳参发挥的抗氧化作用是酚酸类和黄酮类等多种成分联合效应的结果,本文研究结果可为拳参药材的质量评价提供更全面的参考。

拳参正丁醇提取物的化学成分

目的分离拳参(Polygonum bistortaL.)根茎正丁醇提取物的化学成分并进行结构鉴定。方法利用硅胶、聚酰胺和Sephadex LH 20柱色谱进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果得到4个化合物,分别鉴定为丁香苷(syringin,Ⅰ)、儿茶素(catechin,Ⅱ)、芦丁(rutin,Ⅲ)、mururin A(Ⅳ)。结论Ⅰ和Ⅳ为首次从该属植物中分离得到。

拳参的化学成分

目的分离蓼科蓼属植物拳参 (PolygonumbistortaL )根茎 95 % (φ)乙醇提取物的化学成分并进行鉴定。方法利用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱进行分离纯化 ,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果得到 5个化合物 ,分别鉴定为没食子酸 (Ⅰ )、丁二酸 (Ⅱ )、槲皮素 (Ⅲ )、槲皮素 5 O β D 葡萄糖苷 (Ⅳ )、原儿茶酸 (Ⅴ )。 结论化合物Ⅱ。

高效液相色谱法同时测定拳参药材中没食子酸和绿原酸的含量

目的:建立同时测定拳参药材中没食子酸和绿原酸含量的反相高效液相色谱法。方法:采用 Diamonsil C_(18)色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.4%醋酸水溶液(25:75)为流动相,流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为室温,检测波长为290nm。结果:样品中没食子酸和绿原酸回收率分别为95.7%-104%和96.0%-100%;没食子酸和绿原酸的线性范围分别为5.3-53μg·mL^(-1)(r=0.9996)和25-150μg·mL^(-1)(r=0.9998)。结论:该方法可用于拳参药材的质量控制,方法简便、准确,重现性好。

拳参的DNA裂解活性成分研究

目的 研究蓼科植物拳参的水溶性成分 ,并测试其 DNA裂解活性。方法 利用反相层析的方法进行分离纯化 ,根据化合物的化学性质与光谱数据鉴定其结构。结果 自拳参根茎的 6 0 %丙酮提取物中分得 10个化合物 ,确定其结构分别为没食子酸 ( ) ,色氨酸 ( ) ,2 ,6 -二羟基苯甲酸 ( ) ,( +) -儿茶素 ( ) ,绿原酸 ( ) ,( - ) -表儿茶素 - 5 - O-β- D-吡喃葡萄糖苷 ( ) ,( +) -儿茶素 - 7- O-β- D -吡喃葡萄糖苷 ( ) ,1- ( 3- O-β- D-吡喃葡萄糖基 - 4,5 -二羟基 -苯基 ) -乙酮 ( ) ,( +) -儿茶素 - 5 - O-β- D -吡喃葡萄糖苷 ( )和 ( - ) -表儿茶素 ( )。结论 化合物 , , ～ 为首次从该植物中分得 ,化合物 , , , , , 具有很强的 DNA裂解活性。

不同产地拳参中没食子酸和绿原酸的含量比较

目的 采用RP-HPLC测定不同产地拳参药材中没食子酸和绿原酸的含量。方法 采用色谱柱：Cosmosil C18（4.6mm×250mm,5μm）,以乙腈-0.1%磷酸水溶液（10∶90）作流动相,流速：1.0 ml/min;检测波长：274nm;柱温：25℃。结果不同产地拳参中没食子酸的含量在0.0117%~1.0908%;绿原酸的含量在0.0270%~1.5229%。结论 该方法简便、快速、准确可靠,不同产地拳参中没食子酸和绿原酸含量有较大差异,其中以江西（130711）的含量最高。

拳参黄酮与VC、芦丁协同抗氧化作用研究

用Isobologram分析和清除·DPPH法相结合的方法研究拳参黄酮与VC、芦丁的协同抗氧化作用。结果表明:VC、芦丁和拳参黄酮清除·DPPH能力大小为:VC>拳参黄酮>芦丁;由Isobologram分析得到复配后的效应点均在95%置信区和相加线的左侧,理论IC50add与实验IC50mix有显著差异,相互作用指数γ均小于1;拳参黄酮与VC或芦丁复配均可以增强抗氧化作用效果,比任一单独作用效果更好。

拳参正丁醇提取物对视网膜缺血再灌注损伤时一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的研究拳参正丁醇提取物(PBNA)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤时NO及NOS活性的影响。方法 SD大鼠随机分成4组:假手术组、视网膜缺血再灌注模型组、低剂量及高剂量PBNA治疗组。假手术组分离颈总动脉后舌下静脉给予1ml.kg-1的NS,其余各组分别在夹闭颈总动脉前分别舌下静脉注射生理盐水、低剂量(0.3mg·kg-1)及高剂量(1mg·kg-1)的PBNA。颈总动脉夹闭1h再灌注1h后,视网膜电流图(ERG)检查,取血,分离血清,测定血清NO含量、T-NOS、iNOS及eNOS的活性。结果与假手术组相比,模型组ERG幅度明显降低(P<0.01)、血清NO含量降低(P<0.001)、iNOS活性升高(P<0.05)、eNOS活性降低(P<0.05);与模型组比较,PBNA低剂量组NO含量升高(P<0.05)、iNOS活性降低(P<0.05),低剂量组及高剂量组ERG幅度升高(P<0.001)、T-NOS(P<0.01)及eNOS(P<0.05,P<0.01)活性均升高。结论 PBNA可通过提高T-NOS和具有保护作用的eNOS活性,降低具有损伤作用的iNOS的活性,升高NO含量,提高抗氧化能力和扩血管功能,对视网膜功能起保护作用。

拳参乙酸乙酯萃取部位的化学成分鉴定

目的:研究拳参乙酸乙酯萃取部位的化学成分,为其药效物质基础研究提供科学依据。方法:取拳参95%乙醇提取物浸膏的乙酸乙酯萃取部位,采用正相和反相柱色谱反复分离纯化,根据理化性质或波谱数据鉴定纯化后各化合物结构。结果:分离得到的11个单体化合物分别鉴定为β-谷甾醇(1)、二氢杨梅素(2)、槲皮素(3)、山柰酚(4)、表儿茶素(5)、绿原酸(6)、芦丁(7)、没食子酸(8)、1,2,3,4-四氢-8-羟基-4-异丙基-1-甲基萘-6-羧酸(9)、原儿茶酸(10)、鞣花酸(11)。结论:经文献查阅证实化合物2为首次从拳参植物中分离得到,化合物9为首次从蓼属植物中分离得到;本试验相关研究成果为进一步阐明拳参的药效物质基础提供了试验依据。

拳参总黄酮的纯化研究

目的考察拳参总黄酮纯化提取条件。方法结合静态和动态吸附实验,分别比较6种不同型号大孔树脂(D101、HPD100、HPD400、HPD500、HPD600、AB-8型)对拳参总黄酮的吸附和解吸性能,以饱和吸附量、洗脱量、总黄酮浸膏量为考察指标,对大孔树脂纯化拳参总黄酮的条件进行筛选。并以芦丁为标准品,10%三氯化铝(A lC l3)为显色剂,采用紫外分光光度法测定拳参总黄酮的含量。结果 HPD400型树脂具有最佳的吸附及洗脱参数,其最佳纯化条件浓度为9.28 mg.mL-1,pH为3.0的上样液,2.9倍柱体积纯化水,4.3倍柱体积55%乙醇洗脱。纯化后总黄酮量约为纯化前总黄酮量的45%。结论 HPD400型树脂适合拳参总黄酮的纯化。该方法简单、易行,效果好,具有良好的应用前景。

拳参抗氧化活性研究

用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基、2,2'-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)自由基和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法对拳参体外总抗氧化活性进行评价,并与6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸(Trolox)及阳性对照二丁基羟基甲苯(BHT)比较。发现拳参有较好的体外抗氧化活性。甲醇提取物清除DPPH自由基(IC50=3.81μg/mL)的能力远远强于BHT的清除能力(IC50=18.71μg/mL);清除ABTS自由基能力(IC50=7.65μg/mL)强于BHT(IC50=7.72μg/mL)的清除能力;还原Fe3+的能力(FRAP=2009.51±16.44μmolTE/g)最强,强于BHT(FRAP=1581.68±97.41μmolTE/g)。在3种提取物中,甲醇提取物具有最高的抗氧化能力,乙酸乙酯提取物次之。3种方法中,ABTS方法和FRAP方法相关性(R=0.984)最高。

拳参饮片炮制工艺研究

目的:对拳参饮片的炮制工艺进行研究,为规范拳参饮片炮制工艺提供参考。方法:以HPLC同时测定拳参炮制品中没食子酸和绿原酸的含量为指标,考察浸泡时间、干燥方法对饮片质量的影响。结果:以略泡10min后闷润、切薄片、阴干的炮制方法测得的饮片中有效成分的含量较高,确定为最佳工艺。结论:采用HPLC测定拳参不同炮制品中的没食子酸和绿原酸含量的方法简便、快速、准确、可靠,确定的拳参的炮制工艺可用于规范饮片市场。

拳参正丁醇提取物对视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究拳参正丁醇提取物(polygonum bistorla L.n-butylal cohol extract,PBNA)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤时抗氧化能力及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量的影响。方法24只SD大鼠随机分成4组,即对照组、视网膜缺血再灌注模型组(简称模型组)、低剂量(0.3mg.kg-1)及高剂量(1.0mg.kg-1)PBNA组,每组各6只大鼠。颈总动脉夹闭法制作视网膜缺血再灌注模型。颈总动脉夹闭60min再灌注60min后,行视网膜电图(electroretinogram,ERG)检查;比色法测定血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)浓度及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,放射免疫法检测血清TNF-α含量。结果(1)与对照组ERG幅度(2.02±0.49)mV相比,模型组ERG幅度(0.55±0.28)mV显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,低剂量PBNA组ERG幅度(3.07±0.18)mV及高剂量PBNA组ERG幅度(3.71±0.48)mV均显著升高,差异均有显著统计学意义(均为P<0.001);(2)模型组血清MDA浓度(7.98±1.21)μmol.L-1较对照组(5.58±1.50)μmol.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,低剂量PBNA组MDA浓度(5.77±1.11)μmol.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)模型组血清NO浓度(26.31±5.34)mmol.L-1较对照组NO浓度(63.39±7.49)mmol.L-1降低,差异有显著统计学意义(P<0.001),与模型组比较,低剂量PBNA组NO含量(43.86±9.27)mmol.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);(4)模型组血清GSH-Px活性(288.20±41.90)×103U.L-1较对照组(418.80±49.27)×103U.L-1降低,差异有显著统计学意义(P<0.01),与模型组比较,GSH-Px活性低剂量PBNA组(434.00±86.76)×103U.L-1及高剂量PBNA组(379.20±55.71)×103U.L-1均升高,前者差异有显著统计学意义(P<0.01),后者差异有统计学意义(P<0.05);(5)模型组血清SOD活性(64.19±7.65)×103U.L-1较对照组(77.56±7.76)×103U.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,低剂量PBNA组SOD活性(83.17±6.47)×103U.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);(6)模型组血清TNF-α含量(3.13±0.87)ng.L-1较对照组(1.84±0.17)ng.L-1升高,差异有显著统计学意义(P<0.01),与模型组比较,高剂量PBNA组TNF-α含量(2.21±0.41)ng.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PBNA可通过提高SOD、GSH-PX的活性及NO的释放,从而提高视网膜缺血再灌注损伤时的抗氧化能力,还可通过降低TNF-α的释放,降低组织细胞损伤,对眼功能起保护作用。

中药拳参类的鉴定研究

本文对来源于蓼属植物拳参、珠芽蓼、草血竭、圆穗蓼、大叶蓼的5种中药拳参在性状、显微、理化特征方面进行了鉴定研究,为临床用药及开发利用提供了科学依据。

拳参中没食子酸和总鞣质的含量测定

该研究采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别对拳参中的主要成份——没食子酸以及总鞣质进行含量测定。其中,用高效液相色谱法测定没食子酸的含量,HPLC条件为Hypersil GOLD Phenyl柱(250mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为276 nm。用紫外分光光度法测定总鞣质的含量,采用2010版《中国药典》一部附录XB中鞣质含量测定方法,用干酪素沉淀鞣质,通过干酪素沉淀前后鞣质的变化来确定样品中总鞣质的含量。结果表明:没食子酸在0.051~1.02μg范围内呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.1%、100.3%、101.9%,RSD分别为2.1%、0.8%、2.0%;总鞣质在2.09~10.48μg范围内呈现良好线性关系,平均加样回收率分别为102.2%、100.2%、102.1%,RSD分别为1.3%、1.4%、1.0%。利用上述方法,还测定了贵州贵阳和四川成都各3批样品中没食子酸和总鞣质的含量差异,发现成都样品中的没食子酸与总鞣质均大于贵阳拳参中的含量,初步分析导致这一结果的原因可能与拳参的生长海拔有关,而成都的海拔范围更适合拳参的生长。上述两种方法快速、简单、重现性好,可以作为拳参中没食子酸和总鞣质的含量测定方法,而该方法也是首次被用来同时测定拳参中没食子酸和总鞣质的含量,为今后的地方药典标准甚至《中国药典》标准的补充和完善提供了重要依据。

拳参及其类似品的生药鉴别与鞣质含量

研究拳参及其类似品──支柱蓼、草血竭与珠芽蓼的生药性状、组织与粉末的显微特征并列出检索表。用高锰酸钾法及皮粉法定量测定了它们所含的鞣质。实验结果为蓼科拳参类生药的鉴别与质量评价提供了科学依据。

拳参正丁醇提取物中枢抑制作用的研究

目的 :研究拳参正丁醇提取物的中枢抑制作用。方法 :观察拳参正丁醇提取物对小鼠自发活动的影响和戊巴比妥钠阈上和阈下催眠剂量对小鼠睡眠时间的影响。结果 :拳参正丁醇提取物对小鼠自发活动有明显抑制作用 ,能加速戊巴比妥钠的入睡时间和延长其睡眠时间 ,并与戊巴比妥钠有协同作用。结论

拳参正丁醇提取物的镇痛作用的研究

目的 :研究拳参正丁醇提取物对小鼠的镇痛作用。方法 :采用醋酸扭体法、热板致痛法、电刺激致痛法观察拳参正丁醇提取物对小鼠镇痛的效果。结果 :拳参正丁醇提取物对醋酸诱发小鼠扭体反应 ,热板法和电刺激法诱发的疼痛有显著的镇痛作用。但纳洛酮不能对抗其镇痛作用。结论

中药拳参化学成分及药理活性研究进展

综述了中药拳参的化学成分和药理学活性研究,并对其今后研究开发的方向作了初步探讨.