泰山白首乌中微量金属元素的测定

用原子吸收光谱法测定了泰山白首乌和何首乌的干品、药液和药渣中 8种微量元素的含量 ,计算了它们的溶出率和残留率 ,探讨了中草药中微量元素的溶出规律。结果表明 :泰山白首乌和何首乌的干样三次浸出液中 8种微量元素的总溶出率分别为 38%～ 6 2 %和 4 2 %～ 6 3%。

中药对衰老大鼠肝细胞超微结构的影响

目的研究制首乌、北沙参、紫丹参三味中药的保肝抗衰老作用。方法用D-半乳糖皮下注射,将2月龄大鼠制成衰老模型,用药组在造模的同时给予制首乌、北沙参、紫丹参3味药灌胃,40d后用电子显微镜观察各组大鼠肝细胞的形态学变化。结果衰老模型组肝细胞体积缩小,细胞核和细胞器损伤严重;中药治疗组肝细胞体积正常,细胞核和细胞器保持良好,接近正常对照组肝细胞的形态。结论制首乌、北沙参、紫丹参3味药联合应用能够改善肝细胞超微结构,抑制肝细胞的凋亡,具有保护肝细胞、抗衰老的功效。

何首乌提取液益生菌发酵前后化学成分变化研究

目的:采用反相HPLC建立何首乌提取液益生菌发酵前后指纹图谱,观察何首乌提取液发酵前后化学成分变化与活性的相关性。方法:以Agilent ZORBAX SB-AQ(4.6 mm×150 mm,5.0μm)为色谱柱,以A(乙腈)和B(0.1%磷酸)为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,柱温20℃,检测波长254 nm。结果:建立了有13个共有峰的HPLC色谱图,并比较了色谱峰相对峰面积的变化。结论:何首乌提取液经益生菌发酵后化学成分的变化较大,中药经过发酵可通过多途径影响化学成分,进而改变药物的药理药效。

何首乌扩增长度多态性反应及银染体系的建立

目的通过对各主要影响因素的研究,建立适于何首乌扩增长度多态性(AFLP)反应体系及银染体系。方法采用改进的CTAB提取方法从何首乌的嫩叶中提取获得总DNA;从酶切DNA的量、时间等考察酶切体系,并设计正交实验进行预扩体系和选扩体系的优化。结果酶切体系DNA的适用量为400ng,37℃酶切5h;用较优的预扩增体系和选择性扩增得到的选择性扩增产物在6%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳,得到清晰的指纹图谱。结论所建立的反应体系可有效地应用于何首乌的分类鉴定和道地性鉴定。

心安宁片质量标准研究

目的：建立心安宁片质量标准.方法：采用薄层鉴别方法进行定性鉴别,运用高效液相色谱法测定葛根素的含量.结果：确立了制剂中葛根、制何首乌的鉴别方法.通过方法学系统考察,建立了葛根素的含量测定方法,其葛根素的线性范围为0.212～3.392μg,回归方程：Y=4 528 774X-79 624（r=0.999 9）,平均加样回收率为98.9％,RSD =2.64％ （n =6）.结论：建立的鉴别和含量测定方法简便、准确、重复性好,适用于心安宁片的质量控制.

何首乌水提物大鼠连续灌胃给药28d肝毒性研究——胆汁淤积相关性分析

目的:观察何首乌水提物(AEPM)28 d连续给药对SD大鼠的肝损伤程度及胆汁淤积机制的相关性。方法:SD大鼠分别灌胃AEPM 60,30 g·kg-1,每天1次,连续28 d。28 d后观察一般状况、体重变化,检测血生化中肝功能相关指标,收集胆汁,计算胆汁流量、流速、密度及检测胆汁中主要成分变化情况。检测肝体比重变化情况及肝组织病理检查。结果:AEPM对SD大鼠一般状况和体重无明显影响。肝损伤和胆汁淤积相关生化指标检测结果显示,AEPM对大鼠血清ALT和AST水平无明显影响,高剂量可致雄性大鼠血清中ALP,GGT,TBA明显升高(P<0.05,P<0.01),而TBIL明显降低(P<0.05),低剂量雄鼠给药组GGT也明显升高(P<0.05)。AEPM对大鼠胆汁流量无影响,但高剂量可引起雄性大鼠胆汁成分(TG↑,TBIL↑,TBA↓)明显改变。AEPM高剂量组肝脏质量和肝脏系数有增加的趋势,但无统计学意义。病理结果显示AEPM给药大鼠肝脏仅见部分肝细胞小灶性坏死,未出现严重病变。结论:AEPM可明显损伤大鼠胆管上皮细胞和干扰肝细胞功能,明显改变大鼠胆汁成分,在不诱发严重肝脏损伤前提下即可引起大鼠胆汁淤积相关指标改变。

何首乌药材HPLC指纹图谱研究

目的建立何首乌药材反相高效液相色谱(RP-HPLC)指纹图谱分析方法,为有效控制何首乌药材的质量奠定基础。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为SunfireTMC18,乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速为1.0 mL/min,分析时间为60 min,分析了10批生首乌药材和10批制首乌药材的HPLC指纹图谱。结果在选定的色谱条件下通过相似度分析确定13个色谱峰构成生首乌药材指纹图谱的特征峰,11个色谱峰构成制首乌药材指纹图谱的特征峰,可用于不同产地何首乌药材的指纹图谱的测定和质量评价。结论采用RP-HPLC方法所建立的指纹图谱具有稳定、重复性好的特点,不但可以用于何首乌药材质量控制,还可以作为探索中药何首乌有效物质基础研究的有效手段。

何首乌不定根的离体诱导及悬浮培养研究

通过离体不定根的高效诱导与悬浮培养,实现何首乌资源的永续利用。在培养基中添加不同浓度的蔗糖和植物生长物质,筛选从幼茎有效诱导不定根的最适培养基;采用正交试验筛选不定根悬浮培养的最适培养基;对悬浮培养的不定根进行继代培养并测定生长曲线,同时对不定根中的主要有效成分进行检测。结果表明,能够从幼茎有效诱导不定根的最适培养基为MS+蔗糖40 g·L-1+α-萘乙酸2.0 mg·L-1+6-卞基腺嘌呤0.2 mg·L-1;不定根悬浮培养的最适培养基为MS+蔗糖30 g·L-1+α-萘乙酸2.0 mg·L-1+生根粉0.2 mg·L-1;经过检测,发现不定根同样含有何首乌药材中的主要有效成分二苯乙烯苷。该实验实现了何首乌不定根的高效诱导与培养,为中药资源的永续利用研究提供了工作基础。

二苯乙烯苷对基因转染PC12细胞α-突触核蛋白过表达和泛素-蛋白酶体系统的影响

目的观察何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)在体外实验中对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)过表达的影响及其作用机制。方法不同浓度的TSG与α-Syn基因转染PC12细胞共孵育24 h,应用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶漏出法确定该药对培养细胞的无毒范围,RT-PCR法检测细胞中α-Syn mRNA含量的变化,蛋白质印迹(Western blotting)法检测α-Syn、泛素化蛋白羧基端水解酶(UCH-L1)和parkin蛋白的表达,观察TSG对它们的影响。结果 TSG对培养细胞的无毒范围为6.25～100μmol.L-1。在此剂量范围内的TSG与α-Syn基因转染PC12细胞孵育24 h,能够明显减少模型细胞α-Syn mRNA含量,抑制α-Syn蛋白表达和聚集,增强UCH-L1和parkin蛋白表达。结论 TSG在体外对基因转染细胞的α-Syn过表达和聚集有明显抑制作用,其作用机制与抑制α-Syn合成和增强α-Syn降解有关。

HPLC同时测定不同何首乌中的两种蒽醌类成分

目的比较生何首乌、制何首乌及其发酵产品中游离型和结合型蒽醌类成分的含量。方法采用HPLC法测定了不同何首乌蒽醌中两者的含量。色谱柱为Diamonsil C18（150mm×4．6mm，5um）柱，流动相为乙腈-0．1％磷酸（70：30），检测波长为254nm，流速为1．0ml·min^-1。结果大黄素、大黄素甲醚的线性范围分别为0．02～0．40ug（r=0．9994）、0．01～0．20ug（r=0．9994），游离大黄素与大黄素甲醚测定的平均回收率分别为99．9％（RSD=1．9％）、97．9％（RSD=1．5％），总大黄素与大黄素甲醚的平均回收率分别为95．8％（RSD=3．7％）、105．9％（RSD=2．2％）。结论何首乌经炮制和发酵后，结合型蒽醌的含量明显低于生何首乌，文中方法准确可靠，可用于何首乌的质量控制。