大孔树脂吸附纯化何首乌中二苯乙烯苷的研究

目的：研究大孔吸附树脂纯化生首乌二苯乙烯苷的工艺及参数.方法：以树脂的比吸附量为指标,比较了4种大孔树脂对二苯乙烯苷的吸附性能,对大孔树脂吸附纯化生首乌中二苯乙烯苷的工艺参数进行筛选,并在此基础上考察了洗脱条件.结果：S-8树脂对二苯乙烯苷的吸附性能最好,树脂的处理量为1.6 g生药·g^-1湿树脂,上样液含量为0.2 g生药·mL^-1,流速1.5 mL·min^-1,pH 7～8,10BV（即15 mL·g^-1树脂）50%乙醇为洗脱溶剂.通过本工艺生首乌的二苯乙烯苷比吸附量达36.89·g^-1.结论：工艺简单,树脂再生容易,该纯化方法可取.

广东道地药材何首乌HPLC指纹图谱研究

目的建立广东道地药材何首乌的指纹图谱,并对其主要成分进行指认。方法采用高效液相色谱(HPLC)法建立何首乌药材的HPLC-DAD指纹图谱,并采用SPSS软件对指纹图谱结果进行聚类分析。结果确定11个色谱峰为共有峰,13批何首乌药材指纹图谱的相似度良好,对7个主要成分进行了化学指认,SPSS软件将样品聚为Ⅱ类。结论该指纹图谱的建立可对规范何首乌药用资源及质量评价提供科学依据。

炮制工艺对何首乌主要化学成分的影响研究

考察九蒸九晒以及黑豆汁炖炮制工艺对何首乌中主要化学成分二苯乙烯苷、游离/总大黄素和游离/总大黄素甲醚含量的影响.试验结果表明,九蒸九晒炮制后,反式-二苯乙烯苷含量明显下降,游离大黄素、游离大黄素甲醚和总大黄素甲醚含量明显升高,总大黄素含量下降;黑豆汁炖制后,反式-二苯乙烯苷含量明显下降,游离/总大黄素和游离/总大黄素甲醚含量升高.顺式-二苯乙烯苷含量探索性研究发现,九蒸九晒和黑豆汁炖制后反式/顺式-二苯乙烯苷比下降.不同炮制工艺对何首乌主要化学成分影响差异显著,建议将顺式-二苯乙烯苷作为何首乌质量控制重要内容.

基于植物代谢组学技术研究何首乌和制何首乌的差异性成分

目的 利用植物代谢组学技术对比分析何首乌(PMR)和制何首乌(PMRP)化学成分的差异,以阐明何首乌炮制前后化学成分的变化规律及炮制减毒的物质基础。方法 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOFMS/MS)技术对何首乌和制何首乌中成分进行检测;采用主成分分析(PCA)法观察样本的整体分布趋势;采用统计学等分析技术对火山图中差异性化合物进行筛选;并将所得差异性成分与Agilent PCDL自建数据库进行比对,对其化学成分进行初步鉴定。结果 何首乌和制何首乌中的化学成分差异较大,从何首乌炮制后含量大幅减低的化合物中,初步鉴别45个化合物。结论 何首乌炮制前后化学成分存在较大的差异,尤其蒽醌(单核和双核蒽醌)和二苯乙烯苷类成分存在明显的差异,这些差异性化合物可能是何首乌炮制减毒的主要物质基础。

援药药对“制何首乌-虎杖”治疗脑小血管病的理论探析

血浊是脑小血管病发生的重要病理因素,从浊血伤髓论治脑小血管病,可以为脑小血管病临床诊疗提供新的思路。援药药对“制何首乌-虎杖”为化浊行血汤的重要组成,具有化浊益髓的作用。文章主要从脑小血管病的病因病机、治疗原则、援药药对配伍意义、援药药对的相关药理研究4个方面对援药药对“制何首乌-虎杖”治疗脑小血管病进行理论探讨。

何首乌研究进展

通过参阅国内近几年发表的相关文献,论述何首乌炮制前后化学成分、药理作用和肝毒性的研究进展。该文论述何首乌主要化学成分有二苯乙烯苷类、醌类、磷脂类、总糖及还原糖等,具有补血、抗衰老、神经保护、肾保护等药理作用,易造成肝中毒,具有多种机制,为开发利用何首乌这一重要药用植物资源提供依据。

基于内毒素特异质模型的何首乌毒性与炮制工艺研究

目的基于内毒素特异质肝损伤模型,考察不同炮制程度的何首乌对大鼠肝脏的损伤作用,以优选何首乌最为安全的炮制工艺。方法采用无毒剂量的脂多糖(LPS,尾静脉注射2.8 mg/kg)制备内毒素特异质模型大鼠,模型大鼠和正常大鼠均灌胃给予12.96 g/kg不同炮制程度(0、8、16、24、32 h)的何首乌50%乙醇提取物,各给药1次,检测大鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及HE染色观察肝脏病理学改变。结果在灌胃给予不同炮制程度的何首乌50%乙醇提取物后,正常SD大鼠上,未见明显肝损伤作用,炮制24 h,32 h组ALT,AST值低于正常组;在内毒素特异质模型上,生首乌的ALT,AST值显著升高,炮制8 h,炮制16 h的ALT,AST值均高于正常组。结论何首乌以常压炮制32 h最为安全。

基于UPLC-MS/MS检测技术探讨清蒸时间对何首乌26种化学成分的影响

目的探究《中华人民共和国药典》(2020年版)(简称“《中国药典》”)收载的清蒸炮制法,在不同炮制时间(0~48 h)下对何首乌中主要化学成分含量的影响。方法制备《中国药典》清蒸样品;建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)测定何首乌中26种成分的分析方法并进行检测。结果建立了准确可靠的UPLC-MS/MS测定何首乌中蒽醌、二苯乙烯苷、黄酮、酚类化合物含量的方法;随着蒸制时间的延长,26种成分的含量发生了明显变化:游离蒽醌类成分(大黄素、大黄素甲醚)先降低后升高,结合蒽醌类成分(大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄素-6-O-葡萄糖苷)、大黄酸、大黄素-1-甲醚、cis-THSG、虎杖苷、表儿茶素和芦丁先升高后降低,大黄素二蒽酮、大黄素-8-O-(6’-甲基丙二酰)吡喃葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-(6’-甲基丙二酰)吡喃葡萄糖苷、trans-THSG、白藜芦醇、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-(2”-O-阿魏酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素和决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷降低,酚类成分升高。结论本方法操作简单、准确度高、重复性好,可以用于何首乌中26种化学成分的定量检测分析。制首乌中26种成分的含量与蒸制时间密切相关,蒽醌类、二苯乙烯苷类、黄酮类、酚类发生规律性变化,对何首乌质量产生重要影响。

基于NMR技术的同源何首乌和首乌藤指纹图谱研究

目的基于1H-NMR建立广东道地药材何首乌、首乌藤的指纹图谱,并对其进行相似度分析,结合多元统计分析技术分析同源何首乌、首乌藤中化学成分的差异。方法何首乌(PMR)、首乌藤(PMC)分别用50%甲醇超声提取,提取物进行1H-NMR测定,所得图谱用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行数据处理。结果同源何首乌、首乌藤的NMR指纹图谱相似度良好,共指认出化学成分17个,多元统计分析结果显示同源何首乌、首乌藤样品间二苯乙烯苷、大黄素及夜交藤乙酰苯酐等化学成分差异较大,且呈现出不同的变化规律,可以明显区分何首乌和首乌藤。结论该指纹图谱的建立可对规范何首乌、首乌藤药用资源及质量评价提供科学依据,也可为何首乌、首乌藤中次生代谢产物合成积累的差异性提供基础资料。

HPLC测定不同生长年限及采收期何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的含量

目的:建立HPLC同时测定何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量的方法,比较不同生长年限及采收期何首乌的成分动态变化。方法:采用HPLC同时测定一至四年生及7—12月采收的何首乌中的二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量。色谱柱为C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,检测波长320,254 nm,流速1.0 mL.min-1。结果:在一定范围内二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚进样量与峰面积积分值线性关系良好,具有良好的精密度、重复性、稳定性和良好的加样回收率。结论:样品测定结果表明该方法灵敏,准确,重复性好。何首乌中的二苯乙烯苷和蒽醌类成分在一至二年生长期间迅速积累,至三年生时达到峰值;同年生何首乌中成分含量在11月时相对高于其他月份。

基于网络药理学的不同方法炮制的何首乌肝毒性机制探讨及实验验证

目的基于网络药理学及实验验证探讨制首乌肝毒性的机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药整合药理学研究平台(TCMIP v2.0)收集制首乌的活性成分和作用靶点。通过GeneCards和OMIM数据库获取肝损伤相关的靶点。用Venny图筛选获得两者的共同靶标后,利用STRING数据库进行蛋白质相互作用(PPI)网络分析,用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点网络,并且利用R语言进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集。利用体内实验进一步验证何首乌不同炮制品的肝毒性。结果分别获取制首乌活性成分30个,肝毒性相关靶点527个,制首乌活性成分与肝损伤的共同靶点48个,包括JUN、MAPK1、CYP3A4等。KEGG通路分析筛选了135条相关信号通路,显示非酒精性脂肪肝通路和TNF信号通路等可能在制首乌肝毒性中起关键作用。体内实验表明,炮制后的何首乌肝毒性有效减轻,以九蒸九晒法效果最好。结论制首乌肝毒性具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点,九蒸九晒法制首乌引起肝毒性的程度最轻。

何首乌配伍茯苓解毒机理的研究

目的:本课题通过灌服大鼠何首乌、制何首乌以及分别配伍不同剂量茯苓浸膏,旨在探求茯苓配伍何首乌是否对何首乌致肝损伤有解毒作用。方法:SD大鼠分为7组,给药组每日灌胃主药30g/kg,分别在60d、90d和恢复期时颈总动脉处死检测血清生化指标及其它相关指标。结果:血清生化指标提示何首乌等各药对部分血清生化酶具有显著性影响;给药组BUN、CREA在不同时期与对照组比较均下降显著。结论:大剂量长期饲喂SD大鼠何首乌对大鼠肝脏有一定意义的影响;茯苓配伍首乌其解毒作用统计学意义不显著。