何首乌肝毒性研究进展

何首乌是九大仙草之一,临床应用极其普遍。随着何首乌肝毒性报道越来越多,其安全性日益受到重视。本文主要从案例报道、临床特点、实验研究、毒性机制及风险防范等方面对何首乌的肝毒性进行综述,为何首乌临床安全用药及肝毒性机制研究提供参考。

麦冬与何首乌上调氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的比较研究

目的探讨最常用的抗衰老中药麦冬和何首乌延缓衰老的作用机理,观察和分析麦冬注射液和何首乌注射液对氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的影响。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、模型组、实验1组、实验2组。除对照组外,模型组、实验组先用氟哌啶醇建立痴呆症(Alzheimer Disease,AD)动物模型,实验组还分别腹腔注射麦冬注射液、首乌注射液。测定各组大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量。结果与对照组和模型组比较,麦冬注射液、何首乌注射液均能使模型大鼠多种组织SOD,GSH-PX显著升高,差异有极显著性意义(P<0.01)。结论麦冬和何首乌都能显著提升组织抗氧化酶含量,但对多数组织SOD,GSH-PX表达值的影响,何首乌要强于麦冬。

广东省何首乌炮制工艺及GMP执行情况分析

何首乌是历代医家广为推崇的补益中药,何首乌炮制历史比较久远,炮制工艺繁杂,辅料多样,生、制何首乌功效不一致,炮制前后何首乌化学成分及药效均发生一定变化,在不同地区有不同的炮制规范。本文对何首乌炮制历史沿革、炮制工艺与成分、药理毒理及我国何首乌炮制规范进行归纳,并分析目前制何首乌生产企业GMP执行情况,提出建议。

何首乌中二苯乙烯苷的提取

从何首乌中提取2,3,4,5-四羟基二苯乙烯2-O-β-D-葡萄糖苷。采用正交实验法以乙醇浓度(A)、溶剂量(B)、提取时间(C)和提取次数(D)4个因素,选出优化提取工艺。最佳提取条件为料液比(g∶mL)为1∶8,以及60%乙醇,8倍量提取3次,每次1.5h。二苯乙烯苷适宜洗脱的乙醇浓度为50%。纯化后的产物经高效液相色谱分析,二苯乙烯苷含量达到70.34%,得率为64.13%。

何首乌中二苯乙烯苷类物质的分离纯化及抗氧化活性研究

目的:研究何首乌中二苯乙烯苷类物质的分离纯化及抗氧化活性。方法:采用超声波辅助提取技术,从何首乌中提取得到二苯乙烯苷类物质,并通过NKA-9型大孔树脂对何首乌中二苯乙烯苷类物质进行分离纯化。将纯化后的二苯乙烯苷进行DPPH·和·OH的清除能力及Fe^(3+)的还原力测定。结果:NKA-9型大孔树脂对何首乌二苯乙烯苷的静态吸附率和解析率分别达到80.75%和92.36%,粗提物二苯乙烯苷纯度为34.62%,纯化后的二苯乙烯苷纯度为72.68%。纯化二苯乙烯苷对·OH和DPPH·的清除率分别达到72.72%和78.73%,还原力约为同浓度Vc的40%。结论:何首乌中二苯乙烯苷类物质表现出较好的抗氧化活性。

水煎提取赤首乌白首乌的中试探讨

目的探讨赤、白首乌有效部位的创新水提取、分离、纯化工艺。方法主要应用生物酶工程技术与絮凝技术对水提取液作前处理,采取组合大孔树脂技术进行分离精制。结果及结论白首乌的平均提取率高,赤首乌中二苯乙烯苷含量高。

何首乌结合型蒽醌中大黄素成分提取工艺的研究

目的比较不同提取工艺对何首乌中大黄素含量的影响。方法采用HPLC法对提取物中大黄素进行定量分析,比较提取溶液浓度、温度和加酸处理对两种提取方法的影响,确定提取何首乌中结合型蒽醌中大黄素的最佳工艺条件。结果以75%乙醇为提取溶媒采用回流提取方法,提取90 min,在干燥后的提取物中加20%盐酸酸化提取,在此提取工艺下,提取物中大黄素的含量可达0.0730%。结论不同提取工艺提取何首乌中大黄素含量差异较大,此结果为进一步开发利用何首乌资源提供科学的理论依据。

大黄素型单蒽酮基因突变风险评价

目的为评价大黄素型单蒽酮潜在遗传毒性致基因突变,分别开展miniAmes试验和体外Pig-a基因突变试验进行研究。方法 miniAmes试验:分别设置对照组(DMSO),单蒽酮(0.6、1.1、2.3、4.5、9μg/皿),阳性剂组,使用鼠伤寒沙门氏菌TA 97、TA 98、TA 100、TA 102、TA 1535、TA 1537和大肠杆菌WP2 uvrA分别在-S9和S9两种代谢状态下开展基于6孔板培养的细菌回复突变试验,48 h后计数突变菌落数。体外Pig-a基因突变试验:以L5178Y细胞为体系,非S9代谢条件:分别设对照组(1%DMSO),阳性剂(EMS 500μg/mL),单蒽酮(0.2μg/mL,0.39μg/mL,0.78μg/mL,1.56μg/mL),受试物处理4 h后计数,去除受试物更换培养,24 h后计数,表达8 d,表达期维持细胞密度在1×106~2×106个/mL,表达结束后进行抗体孵育流式检测。S9代谢条件:分别设对照组(1%DMSO),阳性剂(B(a)P 5μg/mL),单蒽酮(0.2μg/mL,0.39μg/mL,0.78μg/mL,1.56μg/mL),受试物处理4 h后,去除受试物更换培养,24 h后计数,表达8 d,表达期维持细胞密度在1×106~2×106个/mL,表达结束后进行抗体孵育流式检测。结果 Ames试验结果:非S9代谢活化条件下,单蒽酮可诱导TA97、TA1537回复突变菌落数与阴性对照组相比有所增加;S9代谢活化条件下,可诱导TA1537回复突变菌落数与阴性对照组相比有所增加。增加倍数超过阴性对照组的2~3倍,且上述结果均存在一定剂量相关变化趋势。体外Pig-a基因突变结果:非S9代谢活化条件下,单蒽酮浓度大于0.78μg/mL,Pig-a基因突变频率与溶媒对照组相比存在显著性差异(P <0.01),且存在剂量相关性。结论本研究条件下,大黄素型单蒽酮存在基因突变风险。

何首乌栽培技术研究进展

近年来,随着何首乌需求量的日益增长与何首乌野生资源的日益匮乏,何首乌人工繁殖和栽培显得尤为重要。结合近年来对何首乌的研究情况,总结了何首乌生物学特性、成分与药理以及人工繁殖和栽培技术方面的研究现状,并对今后的研究工作进行了探讨。

3D肝细胞模型研究大黄素型单蒽酮肝细胞毒性

目的:首次研究何首乌中大黄素型单蒽酮的潜在肝细胞毒性及其作用机制。方法:本研究利用悬滴技术构建以人肝细胞HepaRG和人星型细胞HSC为基础的3D多细胞聚球体模型,用该模型评价何首乌中大黄素型单蒽酮成分的重复给药毒性,并与2D模型下单次给药毒性进行比较。进一步研究大黄素型单蒽酮对主要肝药酶和外排转运体表达的影响。结果:肝脏3D多细胞聚球体模型体外培养15 d仍然可以维持较好的肝脏功能。大黄素型单蒽酮2D培养给药48 h,IC50为1. 091μg·mL-1。肝脏3D悬滴模型下连续给药6 d,同浓度大黄素型单蒽酮对肝细胞毒性显著性小于2D培养评价结果。RT-PCR结果显示大黄素型单蒽酮体外多次给药上调主要肝药酶CYP3A4,CYP2B6及外排转运体P-糖蛋白和多药耐药转运蛋白2(MRP2)。结论:何首乌中的新化合物大黄素型单蒽酮具有明显的肝细胞毒性,体外3D模型多次给药引起主要肝药酶和外排转运体表达上调,为肝细胞降低大黄素型单蒽酮毒性提供了潜在机制,同时也提示服用含有大黄素型单蒽酮化合物的中药可能会产生药物相互作用。