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Bacterial Translocation and Change in Intestinal Permeability in Patients after Abdominal Surgery 被引量:2
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作者 乔治 黎沾良 +3 位作者 李基业 陆连荣 吕艺 黎君友 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2009年第4期486-491,共6页
The purpose of this study was to investigate bacterial translocation and change in intestinal permeability in patients after abdominal surgery. Sixty-three patients undergoing elective abdominal surgery were enrolled ... The purpose of this study was to investigate bacterial translocation and change in intestinal permeability in patients after abdominal surgery. Sixty-three patients undergoing elective abdominal surgery were enrolled in the study. Blood samples were collected prior to operation and 2, 24, 48 h after surgery for bacterial culture, microbial DNA extraction, plasma D-lactate and endotoxin measurement. PCR analysis was performed after DNA extraction, with β-lactosidase gene of E. coli and 16S rRNA gene as target genes. All patients were observed for a period of 30 days for infectious complications. Our results showed that no bacterial DNA was detected before surgery, but after operation it was found in 12 patients (19.0%). Bacterial DNA was detected in 41.7% (10/24) of SIRS patients and 5.1% (2/39) of non-SIRS patients (P〈0.01). About 83.3% of PCR-positive patients developed systemic inflammatory response syndrome (SIRS), but only 27.5% of PCR-negative patients did so (P〈0.01). Two thirds of PCR-positive patients developed infectious complications, while none of PCR-negative patients did (P〈0.01). The blood culture was positive only in 3 patients (4.8%), who were all PCR-positive. E. coli DNA was found in 66.7% of the PCR-positive patients. The plasma levels of D-lactate and endotoxin were elevated significantly 2, 24 and 48 h after operation in PCR-positive patients, with a significant positive correlation found between them (r=0.91, P〈0.01). It is concluded that increased intestinal permeability was closely related with bacterial translocation. Intestinal bacterial translocation (most commonly E. coli) might occur at early stage (2 h) after abdominal surgery. Postoperative SIRS and infection might bear a close relationship with bacterial translocation. 展开更多
关键词 bacterial translocation intestinal permeability abdominal surgery polymerase chain reaction pcr
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用三对引物检测血液中细菌DNA的方法学 被引量:9
2
作者 文利平 唐伟松 +3 位作者 蒋朱明 王树惠 梁存河 张云 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期592-594,共3页
目的建立稳定、敏感的检测血液中肠源性细菌 DNA的方法。方法取 23例腹部手术后体温 >38.5℃患者的肘静脉血进行血培养,并以酚抽提法提取全血 DNA进行 PCR,靶基因分别为大肠杆菌特异性的β-半糖苷酶基因、脆弱类杆菌特异性的谷氨... 目的建立稳定、敏感的检测血液中肠源性细菌 DNA的方法。方法取 23例腹部手术后体温 >38.5℃患者的肘静脉血进行血培养,并以酚抽提法提取全血 DNA进行 PCR,靶基因分别为大肠杆菌特异性的β-半糖苷酶基因、脆弱类杆菌特异性的谷氨酰胺合成酶基因,以及大多数细菌所共有的 16SrRNA基因。以标准菌株提取的 DNA为阳性对照,空白对照为阴性对照, 20例健康志愿者全血 DNA为正常对照。对 20例标本重复检测 2次以确定其复现性。结果 PCR复现率为 95%。血培养阳性率为 13.0%( 3/23), PCR检测阳性率为 43.5%( 10/23),较血培养阳性率高( P=0.016)。结论按照规范进行的 PCR检测血液中肠源性细菌方法稳定,比血培养敏感。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 肠道细菌移位 细菌dna 血液引物
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DNA检测技术及其在微生物采油中的应用 被引量:6
3
作者 段景杰 赵亚杰 吕振山 《油田化学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期192-196,共5页
专题论文。第一节简述了聚合酶链式反应(PCR)技术的特点、原理及在微生物采油中的作用。第二节介绍了菌种16SrRNA基因碱基序列分析的操作程序,包括基因扩增及精制、16SrRNA基因克隆、荧光标识基因序列PCR扩增、基因碱基序列及微生物属... 专题论文。第一节简述了聚合酶链式反应(PCR)技术的特点、原理及在微生物采油中的作用。第二节介绍了菌种16SrRNA基因碱基序列分析的操作程序,包括基因扩增及精制、16SrRNA基因克隆、荧光标识基因序列PCR扩增、基因碱基序列及微生物属种确定,给出了2个MEOR菌的基因碱基序列及属种。第三节介绍了多酶切和混合酶切两种PCR RFLP基因检测技术(RFLP:限制性片段长度多态性),后一种方法使操作减少1/4。第四节介绍了直接DNA扩增基因检测技术,包括平板菌落法(检测时间2d)和最大可能数法(当天得检测结果),DNA模板制备及其反应体系,电泳法检测及菌种检出。第五节介绍了DNA基因检测技术在吉林油田多项微生物采油矿场试验中的应用,包括常在菌对微生物采油影响分析,微生物单井吞吐、微生物清防蜡、微生物调驱效果分析,多功能采油菌构建的实验探索。图2参9。 展开更多
关键词 dna检测技术 微生物采油 矿场试验 吉林油田
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多聚酶链反应检测细菌DNA对大鼠空、回肠吻合口瘘的早期诊断价值
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作者 雷姗姗 李铁钢 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2008年第4期367-371,共5页
目的探讨PCR检测大鼠外周血及腹水中细菌DNA对空肠-空肠、回肠-回肠吻合口瘘的早期诊断价值。方法健康Wistar雌性大鼠50只,随机分成5组,每组10只:A组为假手术组;B组为空肠-空肠吻合组;C组为空肠吻合口瘘组;D组为回肠-回肠吻合组;E组为... 目的探讨PCR检测大鼠外周血及腹水中细菌DNA对空肠-空肠、回肠-回肠吻合口瘘的早期诊断价值。方法健康Wistar雌性大鼠50只,随机分成5组,每组10只:A组为假手术组;B组为空肠-空肠吻合组;C组为空肠吻合口瘘组;D组为回肠-回肠吻合组;E组为回肠吻合口瘘组。采集手术前后外周血及术后腹水,抽提DNA,比较lacZ基因和16SrRNA基因的PCR阳性率,并观察各组的病理学情况。结果(1)C,E组术后外周血lacZ基因PCR阳性率与B,D组无显著性差异(P>0.05);C,E组术后外周血16SrRNA基因PCR阳性率显著高于B,D组(P<0.05)。(2)C,E组腹水lacZ基因和16SrRNA基因PCR阳性率均显著高于B,D组(P<0.05)。(3)C,E组腹水lacZ基因阳性率显著高于外周血(P<0.05);C,E组腹水16SrRNA基因阳性率与外周血无显著性差异(P>0.05)。结论(1)PCR检测术后外周血16SrRNA基因对空、回肠吻合口瘘的早期诊断有一定意义;(2)检测术后腹水lacZ基因和16SrRNA基因对空肠-空肠、回肠-回肠吻合口瘘的早期诊断也有一定意义。 展开更多
关键词 吻合口 肠瘘/并发症 多聚酶链反应 dna 细菌/分析
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外科病人手术前后血中细菌DNA检出率的研究 被引量:3
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作者 文利平 蒋朱明 +4 位作者 唐伟松 梁存河 王树惠 张云 王宝贵 《中国临床营养杂志》 1999年第4期171-173,共3页
目的用稳定可靠的PCR方法,检测腹部手术前后血中以肠源性细菌为主的DNA并与相关因素进行分析。方法111例择期腹部手术病人在术前,术后第3天、第6天各采血3ml进行检测。患者按手术创伤大小分为三组,又按术后是否存在“全身性炎症反应... 目的用稳定可靠的PCR方法,检测腹部手术前后血中以肠源性细菌为主的DNA并与相关因素进行分析。方法111例择期腹部手术病人在术前,术后第3天、第6天各采血3ml进行检测。患者按手术创伤大小分为三组,又按术后是否存在“全身性炎症反应综合征”(SIR)分为二组,不同组别与PCR阳性率进行对比。结果术前PCR均为阴性。术后第3天PCR阳性率17.1%(19/111),高于术后第6天PCR阳性率6,3%(7/111,P=0.004)。大手术组PCR阳性率为32.4%(11/34),中手术组为13.4%(9/67),小手术组为10%(1/10),三组之间有差异(P=0.02)。术后出现SIRS的病人PCR阳性率为43.9%(18/41),高于无SIRS组4.3%(3/70,P=0.001)。结论术后禁食输液治疗病人血中可检出细菌DNA,阳性率与手术创伤大小、术后有无SIRS可能有关。 展开更多
关键词 外科手术 dna检出率 肠源性细菌 肠道细菌 细菌移位 聚合酶链反应 细菌dna
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实时定量PCR检测外科发热患者静脉血中细菌DNA含量及其与体征、血细胞计数的相关性 被引量:1
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作者 康军仁 马恩陵 陈伟 《中华临床营养杂志》 CAS CSCD 2015年第5期292-295,共4页
目的 采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测外科发热患者静脉血中肠道DNA,研究其与体征及血细胞计数之间的相关性,并比较不同检测方法对血中细菌阳性检出率的差异。方法 对72份血标本进行常规细菌培养及RQ-PCR定量检测,比较两种检测方法对... 目的 采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测外科发热患者静脉血中肠道DNA,研究其与体征及血细胞计数之间的相关性,并比较不同检测方法对血中细菌阳性检出率的差异。方法 对72份血标本进行常规细菌培养及RQ-PCR定量检测,比较两种检测方法对血中细菌阳性检出率的差异,并计算细菌DNA含量与体温、心率、白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间的相关性。结果 RQ-PCR定量检测细菌DNA阳性率(63.89%)显著高于细菌培养阳性率(9.72%)(F=4.383,P=0.036)。血中细菌DNA含量与体温和心率显著相关(P=0.006,r=0.323;P=0.000,r=0.411),与白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比无相关性(P=0.438,r=0.093;P=0.825,r=0.027;P=0.451, r=-0.090);同年龄无相关性(P=0.096,r=0.198)结论 RQ-PCR可用于定量检测外周血中细菌DNA的含量,快速且灵敏度高。血细胞计数不能较好地反映血中细菌的含量,而体温、心率的影响因素较多。 展开更多
关键词 肠屏障损伤 细菌移位 发热 肠道菌 血培养 实时定量pcr
原文传递
四种不同方法提取人粪便细菌基因组脱氧核糖核酸的比较 被引量:2
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作者 王宁 王占黎 +2 位作者 包艳 刘琦琦 高磊 《包头医学院学报》 CAS 2015年第7期148-151,共4页
目的:比较四种方法提取人粪便细菌基因组DNA的效果。方法:收集30例健康受试者的粪便,采用改进的氯仿抽提法、改进的十六烷基三甲基溴化铵(cetyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)法、改进的液氮冻融法及粪便基因组脱氧核糖核酸(deoxyri... 目的:比较四种方法提取人粪便细菌基因组DNA的效果。方法:收集30例健康受试者的粪便,采用改进的氯仿抽提法、改进的十六烷基三甲基溴化铵(cetyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)法、改进的液氮冻融法及粪便基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)试剂盒法提取DNA,通过微量紫外分光光度计对总产量和纯度进行分析。并选择V3区配对的引物,PCR扩增细菌16S r DNA基因序列,比较不同方法提取人粪便基因组DNA效率的差异。结果:采用改进的氯仿抽提法、改进的CTAB法、改进的液氮冻融法提取和粪便基因组DNA试剂盒法提取的DNA浓度分别为(91.05±58.35)ng/μL、(7.06±3.25)ng/μL、(784.00±69.13)ng/μL、(209.98±39.30)ng/μL,四组两两比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:粪便基因组DNA试剂盒法在提取的基因组DNA纯度、PCR产物扩增电泳,耗时等方面均优于其他三种方法。但改进的氯仿抽提法、改进的CTAB法、改进的液氮冻融法的优点是满足后期使用条件的前提下,提取费用相对较低。 展开更多
关键词 粪便 细菌基因组dna 聚合酶链式反应
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