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USE OF THE POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) TO DETECT MONOCLONALITY OF B CELL LYMPHO-PROLIFERATIVE DISORDERS
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作者 万景华 K.Trainor +1 位作者 M.J.Brisco A.A.Morley 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1991年第2期53-56,共4页
A technique has been developed using PCR to detect monoclonality of B-lymphoproliferative disorders. DNA was extracted from the blood, tissue and paraffin embedded sections by biochemical means or boiling. Forty cases... A technique has been developed using PCR to detect monoclonality of B-lymphoproliferative disorders. DNA was extracted from the blood, tissue and paraffin embedded sections by biochemical means or boiling. Forty cases of B-non Hodgkin's lymphoma (NHL), 15 cases of T-NHL, 8 cases of chronic lymphocytic leukemia, 17 cases of reactive lymphadenopathy and 12 cases of various non-lym-phocytic tumor were examined. Monoclonality of B-lymphocytes was detected in 86-92% of cases with B-lymphoproliferative diseases, but none in T-NHL, reactive disorders and non-lymphatic tumors. This technique provides a new molecular biologic method to diagnose malignant B-lymphoproliferative dicor-ders. It may be useful in Ig gene rearrangement study, differential diagnosis and retrospective investigation of lymphoproliferative disorders. 展开更多
关键词 PCR TO DETECT MONOCLONALITY OF B CELL LYMPHO-PROLIFERATIVE DISORDERS use OF THE polymerase chain reaction NHL DNA
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Detection of Myobacterium Tuberculosis in the Samples of 122 TB Patients Using Polymerase Chain Reaction Technique
2
《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1994年第9期80-80,共1页
By means of polymerase chain reaction(PCR) technique,direct smear fluorescence microscopy and bacterial culture,the sputa and purulent secretion of 122 TB patients were examined to detect mycobacterium tuberculosis.
关键词 TB Detection of Myobacterium Tuberculosis in the Samples of 122 TB Patients Using polymerase chain reaction Technique
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嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立 被引量:6
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作者 吕沁风 郑伟 +3 位作者 罗鹏 吴忠华 李禾 沈建根 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期305-310,共6页
目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5... 目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度。结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光。与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml。结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌。 展开更多
关键词 军团病杆菌 嗜肺 军团杆菌病/诊断 基因扩增 聚合酶链反应/方法 增强子元件(遗传学)
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聚合酶链反应在流感嗜血杆菌肺炎诊断中的应用研究 被引量:3
4
作者 陈志敏 汪天林 +1 位作者 尚世强 李建平 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第1期47-50,共4页
目的 :探讨聚合酶链反应 (PCR)在流感嗜血杆菌 (Hi)肺炎诊断中的应用价值。方法 :应用 Hi种特异性PCR和 b型 Hi(Hib)特异性 PCR及选择性 Hi培养基 ,对 83例婴幼儿肺炎急性期鼻咽深部分泌物 (NPA)和 5 1份血标本 ,及 37份健康婴幼儿咽拭... 目的 :探讨聚合酶链反应 (PCR)在流感嗜血杆菌 (Hi)肺炎诊断中的应用价值。方法 :应用 Hi种特异性PCR和 b型 Hi(Hib)特异性 PCR及选择性 Hi培养基 ,对 83例婴幼儿肺炎急性期鼻咽深部分泌物 (NPA)和 5 1份血标本 ,及 37份健康婴幼儿咽拭子标本进行检测。结果 :83份 NPA标本培养阳性 2 0份 (2 4 .1% ) ,Hi- PCR阳性 36份 (43.4 % ) ,其中 Hib- PCR阳性 19份 (2 2 .9% ) ,Hi- PCR阳性而 Hib- PCR阴性 17份 (2 0 .5 % ) ;5 1份血标本培养均阴性 ,Hi- PCR和 Hib- PCR均阳性 6份 ;37份对照咽拭子培养阳性 3份 (8.1% ) ,Hi- PCR阳性 6份 (16 .2 % ) ,Hib-PCR均阴性。结论 :健康婴幼儿咽部不定型 Hi携带率较高 ,肺炎 NPA标本以 Hib- PCR检测为宜。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 细菌性肺炎 诊断 流感嗜血菌 分离 提纯
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应用PCR技术进行常染色体显性遗传多囊肾病家系的基因诊断 被引量:5
5
作者 朱世乐 张宏 +3 位作者 白千帆 李少英 刘玉春 王海燕 《北京医科大学学报》 CSCD 1996年第6期419-421,共3页
目的:用PCR方法对中国的常染色体显性遗传多囊肾病(ADPKD)家系进行基因诊断。方法:提取基因组DNA,用PCR方法扩增与PKD1位点连锁的高度多态性的微小卫星体DNA(SM7,AC2.5,SM6,KG8)为遗传标... 目的:用PCR方法对中国的常染色体显性遗传多囊肾病(ADPKD)家系进行基因诊断。方法:提取基因组DNA,用PCR方法扩增与PKD1位点连锁的高度多态性的微小卫星体DNA(SM7,AC2.5,SM6,KG8)为遗传标记,进行家系分析。对22个ADPKD家系的156个成员(包括68个患者)找出染色体上与疾病连锁的单体型,进行了连锁分析。结果:21个被测家系提供了基因诊断信息;另一个家系显示重组或不连锁。结论:能够采用PCR方法对中国的ADPKD家系进行基因诊断。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 多囊肾 常染色体显性 基因诊断
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肺炎患儿肺炎支原体感染的实验室检测 被引量:4
6
作者 俞锡林 余钟声 汪天林 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2000年第2期67-69,共3页
目的 :探讨肺炎患儿肺炎支原体 (MP)感染的实验室检测方法。方法 :使用聚合酶链反应(PCR)技术检测 676例肺炎患儿MP的感染 ,其中 1 3 9例同时采用支原体培养进行检测 ,1 1 2例做间接血凝试验 (IHA)。结果 :PCR法对MP感染的检出率明显高... 目的 :探讨肺炎患儿肺炎支原体 (MP)感染的实验室检测方法。方法 :使用聚合酶链反应(PCR)技术检测 676例肺炎患儿MP的感染 ,其中 1 3 9例同时采用支原体培养进行检测 ,1 1 2例做间接血凝试验 (IHA)。结果 :PCR法对MP感染的检出率明显高于培养法 (P <0 .0 1 ) ,双份血清IHA的检出率和PCR法比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,单份血清IHA的检出率明显低于PCR法(P <0 .0 1 )。结论 :PCR法是检测MP感染的简便有效的方法。PCR和IHA方法结合使用 ,可提高MP感染的检出率。 展开更多
关键词 肺炎支原体 肺炎 聚合酶链反应 儿童
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16 SrRNA基因聚合酶链反应检测细菌感染的研究 被引量:1
7
作者 滕懿群 孙眉月 +3 位作者 尚世强 洪文澜 朱方远 于钟声 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1999年第5期193-195,共3页
目的:探索快速可靠的检测细菌感染的新方法。方法:通过自行设计合成的细菌16SrRNA基因高度保守区引物,对20 种标准菌株、12 种27 株临床分离的细菌株、人基因组DNA及巨细胞病毒进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结... 目的:探索快速可靠的检测细菌感染的新方法。方法:通过自行设计合成的细菌16SrRNA基因高度保守区引物,对20 种标准菌株、12 种27 株临床分离的细菌株、人基因组DNA及巨细胞病毒进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果:对所测细菌株均获得371 bp 扩增产物,而与人基因组DNA、巨细胞病毒无交叉阳性反应,PCR最低能检测lpg 大肠杆菌DNA。结论:建立了用共同引物PCR扩增以判断是否存在细菌感染的方法,该方法检测快速,敏感性和特异性高。 展开更多
关键词 16SRRNA基因 细菌 基因 聚合酶链反应 细菌感染/诊断
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聚合酶链反应检测临床标本中的肺炎支原体 被引量:7
8
作者 汪天林 张在珍 《浙江医科大学学报》 CSCD 1995年第5期206-207,228,共3页
作者应用聚合酶链反应(PCR)检测3~13岁肺炎患儿150例咽拭标本中的肺炎支原体(MP),以分离培养及间接血凝试验(IHA)为对照。PCR检出率显著高于培养,若以IHA为标准,PCR阴性一致率为96%、阳性一致率为... 作者应用聚合酶链反应(PCR)检测3~13岁肺炎患儿150例咽拭标本中的肺炎支原体(MP),以分离培养及间接血凝试验(IHA)为对照。PCR检出率显著高于培养,若以IHA为标准,PCR阴性一致率为96%、阳性一致率为73%。不同病程MP-DNA检出率无显著差异,提示即使病程较长仍可应用PCR作出诊断。鉴于PCR检测简便快速,可作呼吸道MP感染的常规诊断应用。但MP感染经敏感药物治疗可使PCR结果阴性,因此,血清学检测尚不宜放弃。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 诊断 肺炎支原体 肺炎
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通用引物检测儿童血和脑脊液的6种疱疹类病毒 被引量:1
9
作者 董关萍 尚世强 +2 位作者 余钟声 梁黎 俞锡林 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第1期60-64,共5页
目的 :通过 PCR- RFLP、DNA克隆和测序分析来检测和区分 6种疱疹类病毒 ,探讨其在临床上的应用价值。方法 :在疱疹类病毒高度同源序列 DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,一对扩增单纯疱疹病毒 1型和 2型、爱泼斯坦 -马尔病毒、人巨细... 目的 :通过 PCR- RFLP、DNA克隆和测序分析来检测和区分 6种疱疹类病毒 ,探讨其在临床上的应用价值。方法 :在疱疹类病毒高度同源序列 DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,一对扩增单纯疱疹病毒 1型和 2型、爱泼斯坦 -马尔病毒、人巨细胞病毒 4种病毒 ,另一对扩增水痘 -带状疱疹病毒和人类疱疹病毒 6型 2种病毒 ,经DNA PCR扩增 ,并对扩增产物进行分子克隆、序列分析后 ,选择 Bam H 或 Bst U 酶切扩增产物进行鉴别。最后 ,对临床 38份脑脊液 (CSF,临床诊断为病毒性脑炎的病例 )和 4 9份血标本 (其中 2 7份为确诊病例 ,2 2份为临床诊断病例 )进行疱疹病毒的检测。结果 :38份 CSF标本中 13份阳性 (34.2 % ) ,2 7份确诊病例标本均阳性 (10 0 % ) ,2 2份临床诊断病例标本 16份阳性 (72 .7% )。这些阳性标本通过 Bam H 或 Bst U 两种酶切后能明确系何种疱疹类病毒。 6 8例正常健康儿童的血和 9份非病毒感染的脑脊液标本 6种疱疹类病毒 DNA均为阴性。结论 :聚合酶链反应加限制性内切酶片段长度多态性分析为疱疹类病毒感染的临床诊断提供了一种有效的手段。 展开更多
关键词 疱疹病毒感染/诊断 碱基序列 分子 克隆 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性
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痰简易处理法结合巢式PCR在检测结核杆菌中的应用 被引量:1
10
作者 陈志敏 汪天林 +1 位作者 张在珍 陈谱发 《浙江医科大学学报》 CSCD 1997年第1期30-32,共3页
作者对106例结核性痰标本采用简易处理法(TET煮沸法)后,再用聚合酶链反应(PCR)检测,阳性率(44.3%)与酚/氯仿抽提法(46.2%)相近(X2=0.076,P>0.05),巢式PCR(nested-PCR)阳性率(72.6%)则显著高于PCR(X2=17... 作者对106例结核性痰标本采用简易处理法(TET煮沸法)后,再用聚合酶链反应(PCR)检测,阳性率(44.3%)与酚/氯仿抽提法(46.2%)相近(X2=0.076,P>0.05),巢式PCR(nested-PCR)阳性率(72.6%)则显著高于PCR(X2=17.485,P<0.01),这种差异在涂片和培养均阴性的标本中尤为明显。巢式PCR扩增人结核菌DNA,其敏感性(50fg)为PCR的100倍,但不影响其特异性。21例非结核性痰标本经PCR和巢式PCR检测均为阴性。因而我们认为,TET煮沸法作为痰PCR前处理简易有效,对含菌量较小的标本有必要结合巢式PCR,以提高结核杆菌阳性诊断率。 展开更多
关键词 结核杆菌 聚合酶链反应
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肠道病毒RNA RT-PCR检测在病毒性心肌炎诊断中的应用
11
作者 王永祥 金世香 +1 位作者 金玉怀 刘贵霞 《河北医科大学学报》 CAS 1999年第2期79-80,共2页
目的探讨RT-PCR方法在肠道病毒感染诊断中的应用。方法根据肠道病毒5’非编码区和VP2基因区共同序列设计一对引物,建立了检测各型肠道病毒的RT-PCR方法。用该方法扩增已知病毒,并用于临床标本检测。结果所检测的11... 目的探讨RT-PCR方法在肠道病毒感染诊断中的应用。方法根据肠道病毒5’非编码区和VP2基因区共同序列设计一对引物,建立了检测各型肠道病毒的RT-PCR方法。用该方法扩增已知病毒,并用于临床标本检测。结果所检测的11种已知病毒中,只对肠道病毒的9个型别扩增。186例心肌炎患者血清标本中,52例(27.95%)阳性。15例脑炎患者脑脊液标本中,4例(26.67%)阳性。结论该RT-PCR方法具有肠道病毒特异性,在肠道病毒感染的诊断中有一定应用价值。 展开更多
关键词 心肌炎 诊断 病因学 肠道病毒感染 病毒性 PCR
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庚型肝炎病毒RT-PCR检测
12
作者 赵彩彦 裴 +3 位作者 甄真 胡云龙 张进贵 胡建峰 《河北医科大学学报》 CAS 1998年第5期273-274,共2页
目的:调查石家庄地区庚型肝炎病毒(HGV)的感染状况。方法:用聚合酶链反应(PCR)法对58例病毒性肝炎进行了HGVRNA检测。结果:证实了石家庄地区有HGV感染存在,在非甲型~戊型肝炎中,HGVRNA的阳性率为... 目的:调查石家庄地区庚型肝炎病毒(HGV)的感染状况。方法:用聚合酶链反应(PCR)法对58例病毒性肝炎进行了HGVRNA检测。结果:证实了石家庄地区有HGV感染存在,在非甲型~戊型肝炎中,HGVRNA的阳性率为20%。在乙型、丙型肝炎病毒所致的慢性肝炎、肝炎肝硬化中,分别有16.67%、14.29%的病例重叠有HGV感染。结论:严格掌握输血指征,筛查献血员,杜绝医源性感染,将对控制HGV感染大有益处。 展开更多
关键词 庚型肝炎 诊断 聚合酶链反应
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MF/SS受累淋巴结病变的基因诊断
13
作者 张春雷 宫恩聪 +2 位作者 刘翠玲 沈力 李世荫 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第1期48-50,共3页
目的:探讨基因诊断在确定MF/SS受累淋巴结病变性质中的价值。方法:采用PCR-PAGE技术,研究了20例MF/SS受累淋巴结病变和10例良性皮病性淋巴结病变T淋巴细胞受体基因重排的特点。结果:检测出有TCR-β和/或TCR-γ基因克隆重排的:1... 目的:探讨基因诊断在确定MF/SS受累淋巴结病变性质中的价值。方法:采用PCR-PAGE技术,研究了20例MF/SS受累淋巴结病变和10例良性皮病性淋巴结病变T淋巴细胞受体基因重排的特点。结果:检测出有TCR-β和/或TCR-γ基因克隆重排的:11/12例(91.7%)典型MF/SS淋巴结病变,5/8例(62.5%)临床病理可疑MF/SS或反应性淋巴结病变。10例良性皮病性淋巴结病变未检测出有TCR个或TCR-γ基因克隆重排,在8例临床病理可疑MF/SS或反应性淋巴结病变病人中,有TCR基因克隆重排的比没有重排的有明显短的生存期。结论:PCR-PAGE检测MF/SS受累淋巴结病变中T淋巴细胞受体基因重排,在其早期诊断及精确分期方面是相当有用的。 展开更多
关键词 淋巴结疾病 淋巴瘤 基因诊断
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GBV-C和HCV共同感染的研究
14
作者 严杰 Dennin RH 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 1999年第3期101-106,共6页
目的:了解GBVC和HCV的共同感染率,及不同引物和自制DIG标记探针检测GBVC的效果。方法:定量RTPCR检测肝炎患者血清标本中的HCV,RTnestedPCR检测HCVRNA阳性标本中的GBVC,分析... 目的:了解GBVC和HCV的共同感染率,及不同引物和自制DIG标记探针检测GBVC的效果。方法:定量RTPCR检测肝炎患者血清标本中的HCV,RTnestedPCR检测HCVRNA阳性标本中的GBVC,分析部分标本扩增产物的核苷酸和氨基酸序列,Southern杂交鉴定GBVC扩增产物的特异性。结果:211例丙型肝炎病人血清标本中,GBVC5’NCR和GBVCNS3区检出率分别为31.8%和22.8%,总阳性率为35.1%。部分标本扩增产物的核苷酸序列分析证实,RTnestedPCR获得的检测结果可靠,但序列中存在较高频率的随机突变。自制的GBVC5’NCR和NS3DIG标记探针有较高的特异性,可用于检测相应的扩增产物。结论:GBVC5’NCR引物的检测效果优于GBVCNS3,GBVC与HCV有较高的共同感染率。 展开更多
关键词 GBV-C感染 HCV感染 共同感染率 乙型肝炎 病毒性肝炎
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采用聚合酶链反应检测肺结核病患者中的结核杆菌
15
作者 姚玉霞 丛军 +1 位作者 刘福英 彭郁葱 《河北医科大学学报》 CAS 1998年第3期147-148,共2页
目的:建立一种快速、敏感及特异的早期诊断肺结核病方法。方法:采用聚合酶链反应(PCR)技术,检测了64例肺结核患者的外周血与痰标本结核杆菌DNA。结果:外周血结核杆菌DNA的阳性率为67.2%(43/64);痰标... 目的:建立一种快速、敏感及特异的早期诊断肺结核病方法。方法:采用聚合酶链反应(PCR)技术,检测了64例肺结核患者的外周血与痰标本结核杆菌DNA。结果:外周血结核杆菌DNA的阳性率为67.2%(43/64);痰标本的阳性率为29.6%(19/64)(P<0.05)。结论:用PCR技术诊断肺结核病。 展开更多
关键词 肺结核 结核杆菌 聚合酶链反应
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用nested RT-PCR法检测肝癌患者外周血癌细胞 被引量:3
16
作者 刘宇慧 周柔丽 芮静安 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第3期270-272,共3页
目的:寻求一种高灵敏的检测肝癌患者外周血中癌细胞的方法。方法:采用nestedRT-PCR法检测外周血中的肝癌细胞。结果:能从2ml人外周静脉血中检测到10个左右肝癌细胞表达的人甲胎蛋白mRNA。结论:此方法特异性强,灵敏度高,可作为一... 目的:寻求一种高灵敏的检测肝癌患者外周血中癌细胞的方法。方法:采用nestedRT-PCR法检测外周血中的肝癌细胞。结果:能从2ml人外周静脉血中检测到10个左右肝癌细胞表达的人甲胎蛋白mRNA。结论:此方法特异性强,灵敏度高,可作为一种理想的临床检测手段。 展开更多
关键词 肝肿瘤 外周血 癌细胞 PCR 诊断
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Mechanism of exogenous nucleic acids and their precursors improving the repair of intestinal epithelium after 7-irradiation in mice 被引量:8
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作者 Da Xiang Cui~1 Guei Ying Zeng~2 Feng Wang~1 Jun Rong Xu~1 Dong Qing Ren~2 Yan Hai Guo~1 Fu Rong Tian~2 Xiao Jun Yan~1 Yu Hou~1 Cheng Zhi Su~1 1 Institute of Genetic Diagnosis of the Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,China 2 Department of Irradiation Medicine of the Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2000年第5期709-717,共9页
AIM To clone expressed genes associated withrepair of irradiation-damaged mice intestinalgland cells treated by small intestinal RNA,andto explore the molecular mechanism ofexogenous nucleic acids improving repair ofi... AIM To clone expressed genes associated withrepair of irradiation-damaged mice intestinalgland cells treated by small intestinal RNA,andto explore the molecular mechanism ofexogenous nucleic acids improving repair ofintestinal crypt.METHODS The animal mode of test group andcontrol group was established,forty-five micebeing irradiated by γ ray were treated with smallintestinal RNA as test group,forty mice beingirradiated by γ ray were treated withphysiological saline as control group,five micewithout irradiation were used as normal control,their jejunal specimens were collectedrespectively at 6h,12h,24h,4d and 8d afterirradiation.Then by using LD-PCR based onsubtractive hybridization,these gene fragmentsdifferentially expressed between test group andcontrol group were obtained,and then werecloned into T vectors as well as beingsequenced.Obtained sequences were screenedagainst.GeneBank,if being new sequences,they were submitted to GeneBank.RESULTS Ninety clones were associated withrepair of irradiation-damaged intestinal glandcells treated by intestinal RNA.These clonesfrom test group of 6h,12h,24h,4d and 8dwere respectively 18,22,25,13,12.By screening against GeneBank,18 of which werenew sequences,the others were dramaticallysimilar to the known sequences,mainly similarto hsp,Nmi,Dutt1,alkaline phosphatase,homeobox,anti-CEA ScFv antibody,arginine/serine kinase and BMP-4,repA.Eighteen genefragments were new sequences,their acceptnumbers in GeneBank were respectivelyAF240164-AF240181.CONCLUSION Ninety clones were obtained tobe associated with repair of irradiation-damagedmice intestinal gland cells treated by smallintestinal RNA,which may be related toabnormal expression of genes and matchedproteins of hsp,Nmi,Duttl,Na,K-ATPase,alkalineph-osphatase,glkA,single strandedreplicative centromeric gene as well as 18 newsequences. 展开更多
关键词 radiation ionizing INTESTINE small/injuries RNA gene expression nucleic acids/therapeutic use polymerase chain reaction REPAIR intestinal EPITHELIUM MICE
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