广西红树蚬的分布特征及影响因素分析

【目的】研究红树蚬(Polymesoda erosa)分布密度与潮高、底质和红树根际等环境因子的关系。【方法】在广西廉州湾和珍珠湾红树林设置5条断面25个取样站进行采样调查,运用单因素方差分析(one-way ANOVA)和主成分分析的统计方法对数据进行分析。【结果】红树蚬多见于高潮带而鲜见于低潮带,红树蚬分布密度从高潮位向低潮位递减。红树根际与林内空地红树蚬分布密度差异不明显(P>0.05),不同红树植物树种根际红树蚬的分布密度差异不明显(P>0.05)。【结论】沉积物紧实度和盐度是红树蚬分布的影响因素。

红树蚬的生态观察

１９９１年４月─１９９３年８月，对广东、广西、海南的红树蚬Ｐｏｌｙｍｅｓｏｄａｅｒｏｓａ（Ｓｏｌａｎｄｅｒ）的生态环境、生活习性与分布等进行了观察。红树蚬分布于热带－亚热带海区，生活在咸淡水交汇的河口和潮间带，生长最适的水温２０—２８℃，盐度５—２０，海水ｐＨ７．２─８．２，底质为软泥、泥砂或砂泥，栖息深度约１０ｃｍ，以底栖硅藻和有机碎屑为食，繁殖期为５—９月。其肉供食用、药用，可发展人工养殖。

六溴环十二烷胁迫下红树蚬鳃及肝胰腺线粒体基因表达定量研究

红树蚬(Polymesoda erosa)作为一种主要栖息于潮间带的沼泽地或红树林的双壳贝类,近年来很多研究都证明其具有做为海洋污染监测指示物种的潜力。红树蚬受六溴环十二烷(HBCD)不同浓度(0、0. 086、0. 860、8. 600μg/dm^3)及不同天数(1、3、11、15、22 d)胁迫后,从转录组上调文库中挑取6个线粒体编码基因:细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ、Ⅲ(COXⅠ、COX Ⅲ),NADH脱氢酶亚基Ⅰ、Ⅲ(ND Ⅰ、ND Ⅲ),细胞色素b(Cyt b),无机焦磷酸酶(PPase),并用实时荧光定量PCR研究各基因在红树蚬各组织内的表达情况,因为基因不稳定性,利用β-actin作为内参对各目的基因所得数据进行均一化处理。结果发现:6个基因在HBCD胁迫后都有转录且差异表达。经生物统计学分析,胁迫后鳃及肝胰腺组织中各基因的表达量较对照组中有显著变化,总体上随着胁迫天数及浓度的增加呈增加趋势,但当胁迫浓度过高时,因线粒体产生的应激能力有限,表达量反而降低。最后从酶复合物在呼吸链、ROS生成、ATP合成中的作用等各方面分析了HBCD胁迫导致线粒体基因表达变化的原因,为进一步开展分子毒理研究和开发分子生物标志物在海洋监测中的应用奠定了基础。

红树蚬与歪红树蚬形态差异分析

【目的】从形态上区分红树蚬（Polymesoda erosa）和歪红树蚬（Polymesoda expansa）。【方法】运用多变量形态度量学分析方法，采用14项生物学形态性状指标比较广西廉州湾草头村红树林的红树蚬与歪红树蚬的差异。【结果】方差分析结果显示，1个比例性状达到差异显著水平（P〈O．05），12个比例性状达到差异极显著水平（P〈O．01）。主成分分析构建了4个主成分，第1主成分贡献率为3O．7O％，第2主成分贡献率为17．76％，第3主成分贡献率为1O．11％，第4主成分贡献率为7．80％，累计贡献率为66．37％。逐步判别分析建立判别函数，其判别准确率p，为81．7％～89．0％，夕：为81．7％～87．5％，综合判别率为86．0％。【结论】壳高、壳宽、韧带长、韧带宽等性状决定红树蚬和歪红树蚬两个种问的形态差异，判别方程可以有效将上述种群区分开来。

红树蚬体内氧化逆境标志物对SCCPs暴露的响应

实验室条件下,观测不同剂量-时间短链氯化石蜡(SCCPs)暴露下红树蚬(Polymesoda erosa)血液及鳃组织的4种氧化逆境标志物(SOD、CAT、GST酶活性及MDA含量)的响应特征.结果表明:在低浓度(0.5,1mg/L)和中浓度(5mg/L)胁迫组,血液和鳃组织SOD、GST酶基本表现为随胁迫时间延长,酶活性逐渐上升的趋势;高浓度(10,20mg/L)胁迫组SOD、GST酶在胁迫初期表现出很高的活性,之后逐渐下降.CAT酶在胁迫初期(1d)就表现出最高的酶活性,之后酶活性逐渐降低并最终受到抑制.低浓度胁迫组MDA含量呈现上升-下降-上升的趋势;中等浓度及以上胁迫组,MDA含量持续升高.抗氧化系统在低于5mg/L的SCCPs胁迫组能够有效发挥作用,而高于此浓度的胁迫组,抗氧化系统经过初期的应急反应后,随胁迫时间延长逐渐被破坏.本文还探讨了利用红树蚬作为指示生物的可行性.

红树蚬壳体尺性状对活体重的影响研究

[目的]了解红树蚬壳体尺性状与活体重的关系。[方法]随机选取广西北部湾红树蚬632个,测量壳长(X1)、壳宽(X2)、壳高(X3)和活体重(Y)。采用相关分析、通径分析和逐步回归分析等方法分析了壳体尺性状对红树蚬活体重的影响。[结果]红树蚬壳长、壳宽、壳高与活体重的相关系数均达到极显著水平(P<0.01),对活体重的决定系数总和d=0.922 3,说明它们是影响活体重的主要性状。红树蚬壳长对活体重的直接影响最大,是影响活体重的主要因素;壳高对活体重的直接影响较小。红树蚬壳长、壳宽、壳高对活体重的多元回归方程Y=-77.414+1.414X1+1.235X2+0.307X3。[结论]该研究为深入研究红树蚬的种质资源保护和人工育苗提供了理论依据。

露空对红树蚬生物标志物的影响

[目的]研究样品露空运输过程对红树蚬（Polymesoda erosa ）生物标志物的影响。[方法]野外采集的红树蚬经8℃、26℃和35℃露空处理8h，随后在26℃海水中暂养恢复3h、6h、12h 和24h，测定红树蚬血液超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、乙酰胆碱酯酶（AChE）、谷胱甘肽转硫酶（GST）活性，以及铁还原力（FRAP）和丙二醛（MDA）含量。[结果]8℃和35℃露空处理，SOD、CAT、AChE、GST、FRAP 和 MDA 均显著升高。26℃露空处理，SOD、AChE 和 MDA 显著升高，GST 显著降低，CAT 和 FRAP 有所降低但不显著。经过暂养，红树蚬各项指标均能恢复到初始水平，但24h 内波动较大。[结论]露空对红树蚬的生物标志物有显著影响。26℃露空8h 后，经3～6h 暂养，红树蚬生物标志物与初始水平最接近。

红树蚬与歪红树蚬对短链氯化石蜡胁迫应答的差别

【目的】研究红树蚬Polymesoda erosa与歪红树蚬Polymesoda expansa对短链氯化石蜡(Short-chain Chlorinated Paraffins,SCCPs)胁迫应答的差别。【方法】观察两种蚬血细胞的溶酶体中性红保持时间(Neutral Red Retention Time,NRRT)、总抗氧化活力(Total Antioxidant Capacity,T-AOC)、丙二醛(MDA)含量对不同剂量-时间SCCPs的响应。【结果】在低浓度SCCPs胁迫早期,两种蚬NRRT均表现出"毒物兴奋效应",其中红树蚬表现更为明显;T-AOC值、MDA含量表明歪红树蚬对于逆境的抵抗力更强。中、高浓度SCCPs胁迫下两种蚬对SCCPs响应结果相似。【结论】红树蚬与歪红树蚬对SCCPs胁迫应答随剂量-时间变化总体趋势相似。歪红树蚬对逆境的抵抗力略强。

六溴环十二烷胁迫下红树蚬荧光定量PCR内参基因稳定性分析

【目的】筛选出不同浓度六溴环十二烷(HBCD)胁迫下红树蚬(Polymesoda erosa)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的最适内参基因,用以准确校准目的基因的表达,为进一步开展分子毒理研究和开发分子生物标志物奠定基础。【方法】通过荧光定量PCR技术监测候选内参18S核糖体RNA(18S rRNA)、β-肌动蛋白(β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、α-微管蛋白(α-tubulin)等管家基因,在红树蚬各组织受不同浓度(0μg/L、0.86μg/L、8.6μg/L)六溴环十二烷(HBCD)胁迫后的表达量,利用qRT-PCR及geNorm、NormFinder、BestKeeper等分析软件对不同条件下的表达数据进行处理,从而筛选出适合荧光定量PCR的最佳内参基因。【结果】受不同浓度HBCD胁迫后,鳃及肝胰中各管家基因的表达稳定性排序整体为β-actin=α-tubulin>GAPDH>18S rRNA。【结论】可单独或共同使用两个内参基因(β-actin、α-tubulin)校准荧光定量结果。

多氯联苯胁迫下红树蚬荧光定量PCR内参基因的筛选

【目的】筛选出多氯联苯(PCBs)胁迫下红树蚬(Polymesoda erosa)的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)最适内参基因,为进一步开展分子毒理学研究奠定基础。【方法】以β?actin、18S rRNA、GAPDH和#?tubulin为候选内参基因,qRT-PCR测定PCBs胁迫下4个候选内参基因在红树蚬外套膜、鳃、闭壳肌和肝胰腺组织中的表达水平,应用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件分析其表达稳定性。【结果】geNorm软件分析表明β?actin表达最稳定;NormFinder软件分析发现,外套膜、鳃和肝胰腺组织中β?actin的稳定性最好,闭壳肌组织中β?actin(0.454)表达稳定性略微低于#?tubulin(0.425),排第2位;BestKeeper软件分析表明,外套膜和鳃组织中β?actin最稳定,肝胰腺和闭壳肌组织中GAPDH最稳定,β?actin排位第2位。【结论】筛选β?actin为红树蚬在PCBs胁迫下的qRT-PCR最适内参基因。

红树蚬表型性状对秋季软体部重量的影响效果分析

在广西北部湾随机抽取红树蚬(Polymesoda erosa)171个,测量壳长(X1)、壳宽(X2)、壳高(X3)、活体重量(X4)和软体部重量(Y)5个性状,采用相关分析、通径分析和回归分析等方法研究各表型性状对软体部重量的影响。结果表明,各测量性状间的相关系数均达到了极显著水平(P<0.01);活体重量对软体部重量的直接影响最大,其次为壳长,壳宽和壳高对软体部重量的直接影响不显著(P>0.05)。采用逐步回归分析方法建立估计软体部重量的多元回归方程为:Y=-5.286+0.133 X1+0.012 X3+0.096 X4(R2=0.758,P<0.01)。

廉州湾红树蚬的繁殖生物学研究

2011年8月至2012年7月,采集广西北海廉州湾红树蚬(Polymesoda erosa)的周年样品进行了性腺发育、生殖周期和胚胎发育研究。结果表明,红树蚬雌雄异体,性别可通过成熟生殖腺颜色区分;1年1个生殖周期,性腺发育可分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5个阶段,性腺发育两性同步;繁殖期从6月延续到11月,其中7月和10月为繁殖高峰期;肥满度指数最高为5.19%(5月份),最低为1.98%(2月份);繁殖方式为非孵育型,沉性卵,外被一层厚的胶质卵膜,水温26℃时,D形幼虫孵出时间约为27h。

红树蚬软体部营养成分分析与评价

【目的】分析红树蚬软体部营养成分并评价其营养价值,为红树蚬的开发与利用提供参考依据。【方法】测定150只采集于广西北海市廉州湾的野生红树蚬软体部的粗蛋白、粗脂肪、灰分、氨基酸及脂肪酸等营养成分,并与10种贝类的营养成分进行比较分析,评价红树蚬的营养价值。【结果】红树蚬软体部(干样)中的粗蛋白、粗脂肪和灰分含量分别为58.98%、4.37%和9.59%;检测出16种氨基酸,其中有8种必需氨基酸和6种呈味氨基酸,分别占氨基酸总量的35.20%和53.40%,蛋氨酸为第一限制氨基酸;检测出19种脂肪酸,包括7种饱和脂肪酸、4种单不饱和脂肪酸和8种多不饱和脂肪酸,多不饱和脂肪酸及其中的二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸分别占脂肪酸总量的18.95%、2.37%和5.37%。【结论】红树蚬软体部蛋白质含量高、脂肪含量低、营养均衡、营养价值较高,可食用并可作为天然调味品资源予以研究。

红树蚬精巢发育的组织学研究和精子超微结构的观察

采集了雄性红树蚬精巢组织样本,采用组织切片法对精巢发育进行了组织学观察,并利用透射电镜研究了红树蚬精子的超微结构.结果显示,雄性红树蚬精巢具有滤泡型的典型特点,由大量分枝的生殖管构成生精小管,生精小管末端膨大为滤泡,滤泡由滤泡壁和滤泡腔组成,不同发育阶段的生精细胞在腔内成层排列,精原细胞和精母细胞靠近滤泡壁,腔内为精细胞和成熟精子.雄性红树蚬性腺发育过程经历5个时期,分别为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期.成熟精子由头部、中段和尾部组成.头部长约6μm,宽约1μm,呈锥形,由顶体和精核组成,顶体呈倒"V"字形,内含物的电子密度低于精核,精核内可观测到泡状结构;中段包含4个线粒体及其围绕着的近、远端中心粒,线粒体呈球形,可见双层膜结构;尾部为细长鞭毛,宽约0.4μm,具典型的"9+2"微管结构.

Cr^6+暴露对红树蚬卵巢中氧化应激和生殖基因表达的影响

Cr^6+具有较强的氧化能力,通常能够造成生物体脂质过氧化胁迫。为探究Cr^6+暴露对红树蚬(Polymesoda erosa)卵巢的生殖毒性效应,共设置ρ(Cr^6+)为0、0.25、1、4和8 mg·L^-15个浓度梯度,暴露时间为0、5、10和15 d。结果表明,Cr^6+对红树蚬卵巢造成氧化胁迫,并影响卵巢雌激素受体er基因和卵黄原蛋白vtg基因表达量。与对照相比,高浓度Cr^6+胁迫使红树蚬性腺指数(GSI)显著降低(P<0.05),且随着Cr^6+浓度升高和试验时间增加,GSI下降程度越明显。高浓度Cr^6+处理红树蚬vtg和er基因表达量显著低于低浓度处理和对照(P<0.05)。此外,通过氧化应激试验发现,经低浓度Cr^6+胁迫后,红树蚬卵巢过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽转移酶(GST)活性以及丙二醛(MDA)含量在10 d后与对照相比无显著差异(P>0.05);而与对照相比,高浓度Cr^6+处理CAT和GST活性被显著抑制(P<0.05),MDA含量也明显升高。Cr^6+对红树蚬卵巢具有组织损伤和代谢干扰效应,并且高浓度Cr^6+对红树蚬生殖存在明显毒害作用。

Cr^6+对红树蚬摄食率及其抗氧化酶活性的影响

通过毒性胁迫实验,研究了不同质量浓度六价铬(Cr^6+)对红树蚬摄食率及其鳃组织中两种抗氧化物(SOD、CAT)活力的影响,测定了其在不同Cr^6+质量浓度胁迫下的摄食率及其鳃组织中两种酶活性的变化,并对实验数据进行了差异性分析.实验结果显示,不同质量浓度的Cr^6+对红树蚬摄食率的影响具有很大的差异,但总趋势相同,且随着实验时间的增加,红树蚬的摄食率呈下降趋势,Cr^6+质量浓度越高,红树蚬的摄食率下降越明显.红树蚬鳃组织的SOD和CAT活性变化较为相似,随着实验的进行,SOD和CAT都呈现先增加后降低的趋势,Cr^6+质量浓度越高,SOD与CAT的活性下降越明显,且SOD对重金属的响应速度快于CAT对重金属的响应速度.本实验结果可为铬离子污染的生态风险评价提供理论依据,也可为预防贝类铬中毒及建立相关的分子毒理学指标提供基础的数据资料.