PEA3和GDNF在小鼠海马内的表达

目的观察多瘤促活化因子(Polymoma virus enhancer-3,PEA3,)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)在出生后小鼠海马CA1、CA2、CA3区中的表达,探讨PEA3和GDNF在海马神经元发育过程中表达变化及相关性。方法正常鼠龄分别为D1、D5、D10、D20、D30、D40昆明小鼠各5只,断头处死,迅速取出大脑,冠状面切取海马所在部位1cm厚的组织块。常规固定、脱水、石蜡包埋,连续切片,免疫组织化学SABC方法研究PEA3、GDNF的表达。结果本实验观察到PEA3免疫反应阳性光密度平均值在出生后D1、D5、D10、D20保持在一定水平,4组间的表达变化无统计学意义(P>0.05);在D30、D40下降并保持在一定水平,两组间的表达变化无统计学意义(P>0.05),但是,与D1、D5、D10、D20比较差异有统计学意义(P>0.05),GDNF蛋白免疫反应阳性光密度平均值在出生后D1、D5、D10、D20与PEA3保持在相似水平,4组间的表达变化无统计学意义(P>0.05),在D30、D40下降,两组间的表达变化无统计学意义(P>0.05),其中,D1、D5、D10、D20和D30、D40组之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论出生后,PEA3和GDNF在海马神经元发育过程中发挥作用,并且GDNF可能以PEA3作为其下游作用靶。这种作用方式在D20以前可能对海马神经发育起重要作用。

PEA3在小鼠大脑皮质的表达

目的观察多瘤促活化因子(PEA3)在出生后小鼠大脑皮质的表达变化,进而从形态学角度探讨PEA3与出生后大脑皮质发育的关系。方法分别取正常鼠龄分别为1、5、10、20、30、40d昆明小鼠各5只,断头处死,迅速取出大脑,冠状面分别切取额叶、颞叶、顶叶所在部位1cm厚的组织块。常规固定、脱水、石蜡包埋,连续切片,免疫组织化学SABC方法研究PEA3的表达。结果本实验观察到PEA3免疫反应阳性光密度平均值在出生后1、5、10、20d额叶、颞叶及顶叶皮质中分别保持在一定水平(P>0.05),在30d时下降,40d略升高但仍低于1、5、10、20d组水平。结论 PEA3在出生后大脑皮质发育过程中起作用,其中在20d以前作用可能较为重要;PEA3在大脑皮质不同部位表达变化情况具有差异性。

PEA3和GDNF在小鼠纹状体的表达

目的:观察多瘤促活化因子(PEA3)和胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)蛋白在出生后小鼠纹状体神经纤维中的表达变化及相关性,为进一步探讨多巴胺能神经元疾病的治疗方法提供实验依据。方法:分别取正常鼠龄为1,5,10,20,30,40 d昆明小鼠各5只,断头处死,迅速取出大脑,冠状面切取纹状体所在部位1 cm厚的组织块。常规固定、脱水、石蜡包埋,连续切片,免疫组织化学SABC方法,DAB染色。结果:本实验观察到PEA3免疫阳性反应纤维数目在出生后1,5,10,20 d持续上升,在30,40 d下降并保持在一定水平,GDNF蛋白免疫反应阳性纤维数目在出生后1,5,10,20 d保持在一定水平,在30,40 d下降,各组间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:出生后,GDNF在纹状体多巴胺能神经纤维发育过程中发挥作用,并且可能以PEA3作为其下游作用靶。这种作用方式在第20天以前可能是GDNF作用于纹状体神经纤维发育过程的主要途径。