不同产地拟黑多刺蚁质量评价研究

目的 通过比较浸出物、蚁酸和金属元素含量,系统研究7个产地21批拟黑多刺蚁药材的质量差异,建立一个多元的拟黑多刺蚁药材质量控制体系。方法 按照《中国药典》2020年版测定拟黑多刺蚁浸出物含量;乙醇衍生-顶空气相色谱(GC)法测定拟黑多刺蚁中蚁酸的含量;微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定拟黑多刺蚁中Mg、Ca、Na、K、Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Co、V、Se 12种元素的含量;采用SPSS结合聚类分析和主成分分析法进行多元统计学分析,评价不同产地拟黑多刺蚁的质量差异。结果 GC测定法显示蚁酸在0.2 mg·mL^(-1)~10 mg·mL^(-1)范围内线性关系良好(R^(2)=1.000),加样回收率为99%~103%;ICP-MS测定法显示12种元素精密度良好(RSD=2.07%~5.09%),重复性良好(RSD=2.58%~7.49%),在各自浓度范围内线性关系良好(R^(2)=0.996~0.999);聚类分析结果显示21批样品可分为3大类:S4~S15、S19和S21聚为一类,S1~S3和S16~S18聚为一类,S20单独为一类;经主成分分析,主成分1、主成分2、主成分3是影响药材品质质量评价的主要因子,3个主成分的累积方差贡献率为91.339%,以S20的主成分综合得分最高,S21的主成分综合得分最低。结论 基于浸出物、蚁酸和金属元素含量,结合聚类分析和主成分分析法进行的多元统计学分析能够评价不同产地拟黑多刺蚁质量,为优质拟黑多刺蚁的产地筛选提供参考。

拟黑多刺蚁活性成分对LPS诱导小鼠炎性骨丢失的作用

目的:研究拟黑多刺蚁活性成分(AFPR)对脂多糖(LPS)诱导小鼠炎性骨丢失的作用。方法:取24只雄性C57BL/6J小鼠,每组6只,随机分为假手术组、模型组(AFPR 0 g/kg)、AFPR给药组(4 g/kg、8 g/kg);第1天和第4天分别给予腹腔注射LPS溶液(5 mg/kg),饲养7 d后建立小鼠炎性骨丢失模型;利用Micro-CT扫描及苏木精—伊红(HE)染色分析法分析胫骨骨组织形态学及相关参数变化情况,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAcP)染色分析小鼠胫骨骨组织破骨细胞数量的变化情况,活化T细胞核因子(NFATc1)与组织蛋白酶K(CTSK)染色分析破骨细胞活性的变化情况,并进一步采用HE染色观察小鼠体内肝肾组织的变化情况;此外,体外实验通过TRAcP染色实验探究AFPR对破骨细胞分化的作用,利用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(ARD)染色探究AFPR对成骨细胞活性的影响。结果:与sham组相比,AFPR 0 g/kg组胫骨骨小梁明显受到破坏,破骨细胞数目明显增多(P<0.001),且破骨特异性因子NFATc1与CTSK的表达上调。与AFPR 0 g/kg组相比,不同剂量AFPR可有效增加小鼠骨组织中骨小梁厚度与数量,并且还能够抑制破骨细胞活性及其特异性因子的表达水平(P<0.001),并呈剂量依赖性;在体外实验中,与AFPR 0μg/mL组相比,AFPR能够有效抑制破骨细胞分化;但AFPR对成骨细胞的活性没有影响。结论:AFPR对LPS诱导小鼠全身炎性骨丢失具有一定的保护作用,并且可能与抑制破骨细胞活性有关。

双指标融合Box-Behnken设计优化广西特产拟黑多刺蚁提取工艺

本研究以广西特产拟黑多刺蚁为原料,提取浸膏及水溶性蛋白含量。在单因素考察的基础上,采用Box-Behnken设计响应面法优化提取工艺。采用浸膏得率、浸膏中水溶性蛋白含量为优化指标,考察以液料比、提取温度、提取时间对提取工艺的影响。最佳提取工艺为:液料比19.924,提取温度48.04℃,提取时间60 min,在此最优提取条件下浸膏得率为53.112%、浸膏中水溶性蛋白含量为77.164%。优化拟黑多刺蚁水溶性蛋白提取的工艺条件,对拟黑多刺蚁的研究开发综合利用具有重要意义。

基于NF-κB/TNF-α/IL-6通路探讨拟黑多刺蚁活性组分对脂多糖诱导抑郁小鼠神经炎症的影响

目的:探讨拟黑多刺蚁活性组分对脂多糖(LPS)所诱导抑郁小鼠神经炎症的影响及其可能的作用机制。方法:将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀(20 mg/kg)阳性对照组及拟黑多刺蚁活性组分高(8 g/kg)、中(4 g/kg)、低(2 g/kg)剂量组,连续给药10 d,第11、12天采用LPS(1 mg/kg)腹腔注射诱导小鼠抑郁模型。对小鼠进行行为学实验(强迫游泳实验、悬尾实验),ELISA法检测小鼠血清神经递质和炎症因子,HE、Tunel染色观察小鼠脑组织病理损伤和凋亡情况,Real-time PCR检测小鼠脑组织中IL-6 mRNA表达,Western Blot检测小鼠脑组织中NF-κB/TNF-α/IL-6通路相关蛋白表达。将RAW264.7细胞分为空白对照组、模型组及拟黑多刺蚁活性组分高(2 mg/mL)、中(1 mg/mL)、低(0.5 mg/mL)浓度组,加入脂多糖(1μg/mL)造模,Western Blot检测各组细胞中NF-κB/TNF-α/IL-6通路相关蛋白表达。结果:动物实验中,与正常对照组比较,模型组小鼠的游泳不动时间、悬尾不动时间、血清TNF-α水平及脑组织IL-6 mRNA和p-NF-κB、IL-6、TNF-α蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),脑组织病理变化明显,脑组织神经元凋亡增加。与模型组比较,除拟黑多刺蚁活性组分低剂量组小鼠血清TNF-α水平及中剂量组小鼠血清TNF-α、DA、BDNF水平差异无统计学意义(P>0.05)外,拟黑多刺蚁活性组分各组小鼠游泳不动时间、悬尾不动时间、血清TNF-α水平、脑组织IL-6 mRNA表达及脑组织IL-6、TNF-α、p-NF-κB蛋白表达显著降低,血清5-HT、DA、BDNF水平显著升高(P<0.05或P<0.01),脑组织病理学明显改善,脑组织神经元凋亡明显减少。体外实验中,与空白对照组比较,模型组RAW264.7细胞IL-6、TNF-α、p-NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),与模型组比较,拟黑多刺蚁活性组分各组RAW264.7细胞TNF-α、p-NF-κB蛋白表达显著降低,高浓度组IL-6蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:拟黑多刺蚁活性组分可通过抑制NF-κB/TNF-α/IL-6通路的激活,改善小鼠抑郁症神经炎症。

拟黑多刺蚁超细粉蜜丸的制备及质量评价

目的:本文以凤阳本地的拟黑多刺蚁为原料,探索拟黑多刺蚁超细粉蜜丸的制备方法。方法:首先,通过正交实验法,研究拟黑多刺蚁蜜丸的最佳的配方,以获得色泽、口感、香味俱佳的蜜丸。在此基础上,加入冰糖、柠檬酸等矫味剂,再通过一定的配比,由感官评分去确定拟黑多刺蚁超细粉蜜丸的最佳制备工艺,从而制得较佳的拟黑多刺蚁超细粉蜜丸。结果:合药温度70℃、蜜药比1:1.5、炼蜜为嫩蜜时,获得的拟黑多刺蚁蜜丸在色泽、香味、滋味各方面都是最佳的。冰糖4%、柠檬酸0.02%时,口感最佳。结论:在此条件下制备出的拟黑多刺蚁超细粉蜜丸最佳。

拟黑多刺蚁对仓鼠胆固醇代谢的影响

为研究拟黑多刺蚁对高胆固醇饮食仓鼠血脂和肠道菌群的影响,选用叙利亚金黄地鼠为模型,设置无胆固醇添加组(Non-Cholesterol Diet,NCD)、高胆固醇饮食组(High Cholesterol Dite,HCD)和添加拟黑多刺蚁粉末的高胆固醇饮食组(Polyrhachis vicina Roger High Chelosterol Diet,PRD),饮食干预六周后,PRD组仓鼠血清中总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High-Density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(Non-High-Density Lipoprotein Cholesterol,Non-HDL-C)质量浓度相比HCD组分别上升16.20%、95.48%、9.52%、22.88%,HDL-C/TC比值下降4.00%。与HCD组相比,PRD组仓鼠肝脏中HMG-CoA-R基因相对表达量显著升高48.92%,肝脏胆固醇质量浓度升高52.38%,肝脏脂质质量浓度升高19.19%。综上所述,饮食中添加拟黑多刺蚁会加剧仓鼠血脂异常,使肝脏中HMG-CoA-R基因表达水平升高、肝脏胆固醇和肝脏脂质浓度上升。本研究为指导拟黑多刺蚁的食用及相关食品开发提供了安全性参考。

拟黑刺多蚁(Polyrhachis vicina Roger)干粉对黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的寿命有延长的作用

有一些民族有食用蚂蚁的习惯 ,本草纲目也有将蚂蚁作为药用的记载。在 1994年 ,以蚂蚁作为食疗之风流行 ,或将其加入酒中 ,或与一些其它中草药配伍成为复方保健药 ,甚至认为能治疗种种疾病。虽然对蚂蚁粉的宣传很多 ,但是对于蚂蚁的作用尚未见有分析式的研究和确证。黑腹果蝇是国内外常用作药物对寿命影响的模型。我们将蚁粉添加在果蝇的配养基中以实验其对果蝇寿命的影响。我们的统计数据表明蚂蚁粉对果蝇的寿命确有显著的延长作用 ,对雄果蝇的作用略强于对雌果蝇的作用 ,蚂蚁粉可使雄果蝇的半数死亡期延长 2 1.30 % (P <0 .0 0 5 )。将蚂蚁粉与另一味动物药—雄蚕蛾的作用做了比较 ,并把它们的作用与转基因和长寿基因的作用进行了对比。

拟黑多刺蚁乙醇提取物中降低小鼠血清尿酸水平活性部位的筛选与化学成分分析

目的研究拟黑多刺蚁乙醇提取物(EEPR)中降低高尿酸血症模型小鼠血清尿酸水平的活性部位及其主要化学成分。方法昆明小鼠分别ig给予别嘌醇0.04 g.kg-1(阳性对照),EEPR 0.128,0.256和0.512 g.kg-1,EEPR的石油醚部位0.079和0.158 g.kg-1,乙酸乙酯部位0.051和0.102 g.kg-1,正丁醇部位0.052和0.104 g.kg-1和水部位0.042和0.084 g.kg-1,每天1次,连续12 d。正常对照组和模型对照组ig给予等体积含0.3%吐温-80的水溶液。末次给药1 h后除正常对照组外,其余各组小鼠均ip给予次黄嘌呤0.6 g.kg-1。1 h后眼眶静脉丛取血,用磷钨酸比色法测定血清尿酸水平,酶比色法测定黄嘌呤氧化酶活性。对降低血清尿酸水平的活性部位进行GC-MS分析,鉴定其主要化学成分。结果高尿酸血症模型小鼠血清尿酸水平与正常对照组比较明显升高(P<0.01),别嘌醇0.04 g.kg-1,EEPR 0.256和0.512 g.kg-1可明显降低该模型小鼠血清尿酸水平(P<0.05),分别由模型组的(464±143)μmol.L-1下降到273±80,346±85和(302±72)μmo.l L-1(P<0.05)。EEPR中石油醚部位0.079和0.158 g.kg-1可显著降低该模型小鼠血清尿酸水平,分别由模型组的(446±139)μmo.lL-1下降到328±100和(314±112)μmol.L-1(P<0.05),其他部位各剂量组对血清尿酸水平均无明显影响。石油醚部位0.158 g.kg-1可明显抑制黄嘌呤氧化酶活性,由模型对照组的(18±8)U.L-1下降到(11±5)U.L-1(P<0.05)。GC-MS分析结果表明,石油醚部位的脂肪酸中,反式十八碳烯酸甲酯占60.77%,十六烷酸甲酯占18.99%,十六碳烯酸甲酯占9.31%。结论 EEPR中石油醚部位可降低高尿酸血症模型小鼠血清尿酸水平,不饱和脂肪酸为石油醚部位脂肪酸的主要成分。

拟黑多刺蚁醇提物抗抑郁作用研究

目的观察拟黑多刺蚁醇提物抗抑郁作用,并对其作用机制进行初步分析。方法拟黑多刺蚁醇提物通过乙醇提取得到。采用悬尾试验、强迫游泳试验等行为绝望模型和利血平诱导的抑郁模型观察拟黑多刺蚁醇提物抗抑郁作用。结果拟黑多刺蚁醇提物8、4 g·kg-1剂量组均能明显缩短小鼠在TST和FST的悬尾不动时间和游泳不动时间(P<0.05);拟黑多刺蚁醇提物8 g·kg-1剂量组可提高抑郁症大鼠体温和糖水摄取量(P<0.05);拟黑多刺蚁醇提物8、2 g·kg-1剂量组可拮抗利血平大鼠眼睑下垂,减少运动不能时间(P<0.05,P<0.01);拟黑多刺蚁醇提物8 g·kg-1可明显提高抑郁症大鼠血清、海马组织、大脑皮层的5-羟色胺、去甲肾上腺素水平及超氧化物歧化酶的活性(P<0.05);拟黑多刺蚁醇提物对所述正常组各指标无影响。结论拟黑多刺蚁醇提物具有明显的抗抑郁作用,可能通过对神经递质代谢及对神经细胞抗氧化作用的调节来实现。

拟黑多刺蚁醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响

目的 :研究拟黑多刺蚁 (PVR)醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响 ,从免疫学角度探讨其抑瘤机理。方法 :随机将小鼠分为对照组 ,PVR醇提液高、中、低实验组。各组小鼠腋下接种 S1 80 小鼠腹水肉瘤细胞 ,建立肿瘤动物模型。对照组用蒸馏水灌胃 ,实验组分别以 0 .5、 1.0和 1.5 g· kg- 1 PVR醇提液灌胃 ,连续 10 d,以肿瘤重量、抑瘤率 ,脾脏指数 ,白细胞介素 2 (IL- 2 ) ,NK和 L AK细胞活性及 T、B淋巴细胞增殖为评价指标。结果 :PVR明显抑制荷瘤鼠肿瘤细胞的生长 ,促进脾细胞增殖反应和 IL- 2分泌 ,增强 L AK和 NK细胞的活性。结论 :PVR体内抑瘤作用与其增强机体抗肿瘤免疫功能有关。

拟黑多刺蚁对实验动物血糖和血脂的影响

拟黑多刺蚁能降低高脂血症大鼠TC和TG的含量及AI水平，并升高血清LCAT活性，且对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有明显降血糖作用，但对正常小鼠血糖无明显影响。

拟黑多刺蚂蚁的营养成分分析和蚁皇浆的研制

本研究测定了拟黑多刺蚂蚁的蛋白质、氨基酸、某些维生素和微量元素的含量。用该种蚂蚁的提取物配以食药两用的红景天等中草药，制成了保健饮品＂蚁皇浆＂，观察了＂蚁皇浆＂的抗衰老、增强免疫等功能作用。

拟黑多刺蚁体内抑瘤作用研究

目的 通过拟黑多刺蚁对S180腹水肉瘤鼠存活时间及Swiss和BaL/C小鼠荷瘤生长的影响，研究其体内抑瘤作用。方法 随机将小鼠分为对照组和500，1000，1500mg/kg蚂蚁剂量实验组，用S180腹水肉瘤建立动物肿瘤模型，对照组以蒸馏水灌胃，实验组以蚂蚁液灌胃，连续25d。结果 实验组小鼠平均存活时间均高于对照组，而腹水量、瘤细胞数及荷瘤重均低于对照组，差异显著（P<0.05)，以1000mg/kg剂量实验组抑瘤效果最明显。结论 拟黑多刺蚁具有抑制肿瘤细胞生长和延长荷瘤小鼠平均存活时间的作用。

拟黑多刺蚁脑部结构的观察

运用Mallory染色方法,对拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina)脑部形态结构进行了显微观察.结果表明,拟黑多刺蚁脑由前、中、后脑三部分组成:前脑中具有较大的蕈形体,说明它可能具有比较发达的学习和记忆的能力;中脑中具有较大的嗅觉神经纤维球,表明拟黑多刺蚁具有发育良好的嗅觉系统.和其它膜翅目昆虫相比,拟黑多刺蚁前脑中的视叶较小.因此推测,视叶在其觅食、学习、记忆及其他行为中的作用不及中脑嗅叶.后脑在整个脑部占据的面积很小,它在蚂蚁脑部的作用目前还不清楚.

不同品级拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina)脑部雌激素相关受体基因的表达

采用原位杂交方法对不同品级拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina)脑部雌激素相关受体pvERRmRNA的表达进行了检测.结果表明,pvERRmRNA在不同品级的蕈形体、附叶、视叶、中脑、食道下神经节和球状细胞中都有表达.蚁后蕈形体和球状细胞中pvERRmRNA的阳性表达最为明显;工蚁中脑pvERR mRNA的阳性反应强度明显高于蚁后和雄蚁;pvERR mRNA在雄蚁视叶中有较强的表达.pvERR mRNA在不同品级的拟黑多刺蚁脑部的表达差异可能与它们各自在蚁群中的功能和行为有关.

拟黑多刺蚁氨基酸和营养元素的分析

目的:探讨拟黑多刺蚁氨基酸和营养元素的医用价值。方法:采用氨基酸自动分析仪和原子吸收分光光度仪,测定拟黑多刺蚁中氨基酸与营养元素的含量。结果:拟黑多刺蚁氨基酸总量为44.33%,人体必需氨基酸占氨基酸总量的34.72%。营养元素钾、钠、钙、镁、铁、锌、锰、铜含量分别为7.748、3.658、0.353、1.820、0.795、1.370、0.910、0.016 mg/g。结论:本研究为开发拟黑多刺蚁的食用价值及医用价值提供了科学依据。

拟黑多刺蚁制品祛黄褐斑作用的人体试食观察研究

为了解拟黑多刺蚁制品祛黄褐斑的保健作用 ,对 30例黄褐斑志愿者进行了初步人体试食观察。每日服用以拟黑多刺蚁为主要原料的××口服液 ,日服 3次 ,每次 2支 ,每支 10mL ,连续 30d ,结果表明受试者黄褐斑面积平均下降 30 0 8± 2 7 4 1mm2 ,颜色明显变浅 ,色卡平均降低 0 53±0 51度 (P <0 0 0 1) ,总有效率达 83 33%。且受试者血清SOD的活性较试食前有显著提高。试食前后血常规、尿常规及血生化指标无异常。可以认为 ,××口服液具有明显的祛黄褐斑作用 ,且对试食者身体健康无明显影响。

拟黑多刺蚁的理化分析

主要测定了拟黑多刺蚁的理化性质。拟黑多刺蚁蛋白质含量为54.51%,氨基酸总量为43.91%,必需氨基酸占氨基酸总量的32.49%,必需氨基酸指数为0.97,故该蚁是一种优质蛋白源;电感耦合等离子体质谱测定结果显示拟黑多刺蚁富含多种微量元素,特别是K、Fe、Ca、Mg、Na等;采用考马斯亮兰法测定不同pH值下可溶性蛋白质的变化,发现拟黑多刺蚁在偏酸和偏碱的条件下可溶性蛋白质逐步升高,且碱性条件下较酸性条件下高;采用顶空/气相-质谱联用法测定水浸提液的风味成分,共检出12类36种物质,主要成分为C2-C13的小分子的醇类、醛类、胺类。拟黑多刺蚁营养成分丰富,结构合理,综合应用前景十分广阔。

拟黑多刺蚁体外抑瘤作用研究

目的 通过拟黑多刺蚁对体外S180，H22，YAC－1肿瘤细胞DNA合成影响及细胞毒性作用，研究该蚁抑瘤效应及机制。方法 采用^3H-TdR掺入法和^125I-UdR释放法。结果 拟黑多刺蚁对S180，H22，YAC－1肿瘤细胞DNA合成均有明显抑制作用（P<0.05)，其抑制作用随剂量增加而增强。以对S180肿瘤细胞抑制作用最显著。同时证实，该蚁对YAC－1，S180肿瘤细胞均有毒性作用。结论 拟黑多刺蚁对肿瘤细胞具有直接杀伤和抑制生长的作用。

拟黑多刺蚁提取液可缓解小鼠体力疲劳

研究拟黑多刺蚁Polyrhachis vicina Roger提取液的缓解体力疲劳作用。采用清洁级雄性昆明种小鼠,拟黑多刺蚁水和乙醇双重提取液按8.3mL/kg.bw,16.7mL/kg.bw,25.0mL/kg.bw连续灌胃30d,测定小鼠负重游泳时间、血乳酸、血清尿素氮和肝糖原含量。结果:3个实验组及乙醇对照组小鼠负重游泳时间均显著长于蒸馏水对照组(P<0.05,P<0.01);8.3mL/kg.bw剂量组小鼠负重游泳时间显著长于乙醇对照组(P<0.01)。8.3mL/kg.bw剂量组小鼠3个时点血乳酸曲线下面积显著低于蒸馏水对照组和乙醇对照组(P<0.05、P<0.01),16.7mL/kg.bw剂量组小鼠3个时点血乳酸曲线下面积明显低于蒸馏水对照组(P<0.01)。乙醇对照组及拟黑多刺蚁提取液3个剂量组小鼠血清尿素氮含量均显著低于蒸馏水对照组(P<0.05、P<0.01),16.7mL/kg.bw剂量组小鼠血清尿素氮含量低于乙醇对照组(P<0.05)。拟黑多刺蚁提取液具有缓解体力疲劳的作用。