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Mouse models of porcine circovirus 2 infection 被引量:1
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作者 Ting Ouyang Xiao-hui Liu +1 位作者 Hong-sheng Ouyang Lin-zhu Ren 《Animal Models and Experimental Medicine》 2018年第1期23-28,共6页
PCV2 is considered the main pathogen of porcine circovirus diseases and porcine circovirus-associated diseases(PCVD/PCVAD). However, the exact mechanism underlying PCVD/PCVAD is currently unknown. Mouse models of PCV2... PCV2 is considered the main pathogen of porcine circovirus diseases and porcine circovirus-associated diseases(PCVD/PCVAD). However, the exact mechanism underlying PCVD/PCVAD is currently unknown. Mouse models of PCV2 are valuable experimental tools that can shed light on the pathogenesis of infection and will enable the evaluation of antiviral agents and vaccine candidates. In this review, we discuss the current state of knowledge of mouse models used in PCV2 research that has been performed to date, highlighting their strengths and limitations, as well as prospects for future PCV2 studies. 展开更多
关键词 ANIMAL model mouse(Mus musculus) porcine CIRCOVIRUS 2(pcv2)
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Host immune response to infection with porcine circoviruses
2
作者 Ruihan Shi Lei Hou Jue Liu 《Animal Diseases》 2021年第3期140-149,共10页
Porcine circovirus type 2(PCV2),which serves as a major causative agent of PCV2-associated diseases and causes severe loss to the pig industry worldwide,can dysregulate the immune response and induce immunosuppression... Porcine circovirus type 2(PCV2),which serves as a major causative agent of PCV2-associated diseases and causes severe loss to the pig industry worldwide,can dysregulate the immune response and induce immunosuppression in PCV2-infected pigs.Similar to PCV2(porcine circovirus type 3(PCV3),a newly identified swine circovirus which might be closely associated with porcine dermatitis and nephropathy syndrome,reproductive disorder,and multisystemic inflammatoty responses,also interferes with host immune defense.Interaction between host immune system and PCVs is considered to be a crucial determinant of pathogenicity in pigs.Here,we sought to briefly discuss the current knowledge regarding the interaction of porcine circovirus type 2 and/or 3 with host immune cells and immune responses to better depict the viral immunomodulatory capacity,pathogenic mechanisms,and the future research direction in host immune responses to infection with PCV2 and PCV3. 展开更多
关键词 porcine circovirus(pcv) porcine circovirus-associated disease Lymphoid depletion Immune responses PATHOGENESIS
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Molecular detection of porcine circovirus type 3 in Shanxi Province,China
3
作者 Weidong Yue Yihui Liu +2 位作者 Xinrong Zhang Haili Ma Junping He 《Animal Diseases》 2021年第2期116-124,共9页
Porcine circovirus type 3(PCV3),which was first detected in the United States of America in 2015,is a potential threat to the swine industry.However,the prevalence of PCV3 in Shanxi Province,China,is unclear.In this r... Porcine circovirus type 3(PCV3),which was first detected in the United States of America in 2015,is a potential threat to the swine industry.However,the prevalence of PCV3 in Shanxi Province,China,is unclear.In this research,the prevalence and genetic diversity of PCV3 were investigated in above area.Lung tissue samples(n=491)from 19 pig slaughterhouses across 11 cities throughout Shanxi Province were analyzed for PCV3 infection by PCR in 2019.The results showed that PCV3 positive rates in slaughterhouses and individuals were 100%(19/19)and 86.76%(426/491),respectively.PCV2 and PCV3 double-positive rates in slaughterhouses and individuals were 100%(19/19)and 59.27%(291/491),respectively.PCR positive samples were further sequenced and 8 PCV3 isolates were identified.The nucleotide homology of these isolates with other PCV3 isolates in NCBI database was 97.45-99.90%.A phylogenetic analysis,based on the complete genomic sequence and ORF2,divided these PCV3 strains into 2 major groups.Based on A24A/and R27/K amino acid mutations of capsid protein,the 8 identified PCV3 strains were separated to 2 clades.This was the first detailed investigation into the epidemiology of PCV3 in Shanxi Province.Our findings enabled us to assess the possibility of widespread transmission from this region.Thus,current findings establish a basis for further studies of genetic variations in PCV3 strains circulating in China. 展开更多
关键词 CIRCOVIRUS PREVALENCE porcine circovirus type 3(pcv3) Phylogenetic analysis
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华东地区PMWS患病猪群PCV-2的检测及其基因特征 被引量:19
4
作者 王先炜 姜平 +2 位作者 李玉峰 张书霞 许家荣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期240-242,共3页
用 PCR方法 ,对江苏、上海、山东、江西、安徽和浙江等省市 6 5家猪场 99例断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)肺脏和淋巴结病料 ,进行了猪圆环病毒 - 2 (PCV- 2 )基因检测 ,发现其中 18家猪场 2 1例病料为 PCV- 2阳性。源自安徽和上海的 P... 用 PCR方法 ,对江苏、上海、山东、江西、安徽和浙江等省市 6 5家猪场 99例断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)肺脏和淋巴结病料 ,进行了猪圆环病毒 - 2 (PCV- 2 )基因检测 ,发现其中 18家猪场 2 1例病料为 PCV- 2阳性。源自安徽和上海的 PCV- 2分离株经基因序列分析显示 ,2个分离株部分 ORF2 与国外分离毒株同源性为 92 %~99%。安徽分离株 AHHF6与韩国分离株 KSY- 1同源性为 99% ,而上海分离株 SHHT1与加拿大分离株 Imp.114 7同源性为 98%。上述结果表明 ,我国 PMWS患病猪群广泛存在 PCV- 2 ,不同地区 PCV- 2存在一定基因差异 。 展开更多
关键词 华东地区 PMWS 患病猪群 pcv-2 基因 猪圆环病毒 PCR
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猪圆环病毒(PCV)序列分析与进化 被引量:16
5
作者 马相如 陈焕春 +3 位作者 肖少波 刘正飞 曹胜波 张利达 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期105-108,共4页
从 Gen Bank数据库下载了世界各地分离的猪圆环病毒基因组全序列 ,并对其进行多重比对 ,绘制系统进化树 ,发现来自同一国家或地区的 PCV毒株亲缘关系较近。提取 PCV ORF1编码的蛋白质序列 ,进行多序列比较 ,分析保守氨基酸序列 ,搜索结... 从 Gen Bank数据库下载了世界各地分离的猪圆环病毒基因组全序列 ,并对其进行多重比对 ,绘制系统进化树 ,发现来自同一国家或地区的 PCV毒株亲缘关系较近。提取 PCV ORF1编码的蛋白质序列 ,进行多序列比较 ,分析保守氨基酸序列 ,搜索结构域相似序列 ,结果发现玉米线条病毒属与 PCV的起源有密切的关系。此外 ,在数据处理过程中通过自编程序结合互联网及免费软件 ,能迅速进行大规模序列比较分析 (35个序列以上 ) ,提高了生物数据分析处理的速度。 展开更多
关键词 序列分析 系统进化 生物信息学 猪圆环病毒
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猪传染性胸膜肺炎病料中PCV-2和PRRSV的PCR检测 被引量:9
6
作者 刁有祥 丁家波 +2 位作者 姜世金 崔治中 陈本龙 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期397-400,共4页
应用PCR方法对从山东省不同地区采集的2 5 3份猪传染性胸膜肺炎肺脏和12 5份临床健康猪肺脏进行PCV_2和PRRSV的检测。结果显示,在传染性胸膜肺炎猪肺脏中,171份为PCV_2阳性,阳性率达6 7 5 % ;10 1份样品为PRRSV阳性,阳性率达4 0 % ;其中... 应用PCR方法对从山东省不同地区采集的2 5 3份猪传染性胸膜肺炎肺脏和12 5份临床健康猪肺脏进行PCV_2和PRRSV的检测。结果显示,在传染性胸膜肺炎猪肺脏中,171份为PCV_2阳性,阳性率达6 7 5 % ;10 1份样品为PRRSV阳性,阳性率达4 0 % ;其中,6 8份样品同时检出PCV_2和PRRSV ,共感染阳性率达2 6 8%。而临床健康猪肺组织中,2 1份样品PCV_2检测结果为阳性,阳性率为16 8% ;12份样品PRRSV检测结果阳性,阳性率为9 6 % ,PCV_2和PRRSV共感染未检出。统计结果显示,传染性胸膜肺炎发病猪与临床健康猪PCV_2、PRRSV及PCV_2和PRRSV共感染的阳性率差异极显著,传染性胸膜肺炎发病猪的肺脏中PCV_2和PRRSV的检出率明显高于临床健康猪。上述检测结果提示。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 圆环病毒 呼吸与繁殖综合征病毒 共感染
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云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合症(PRDC)患病猪群中PRRSV,PCV-2,CSFV,PRV混合感染调查 被引量:25
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作者 舒相华 尹革芬 +4 位作者 杨志雷 宋春莲 李文贵 潘伟荣 刘旭川 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期54-58,共5页
针对云南省不同地区不同季节猪呼吸道疾病综合征进行流行病学调查,根据其临床特征,在不同规模养殖场共采集1 164份血清样品,利用ELISA和RT-PCR方法检测其猪瘟抗原CSFV,猪繁殖与呼吸综合征抗原PRRSV,猪伪狂犬病PRV gE抗体及猪圆环病毒2型... 针对云南省不同地区不同季节猪呼吸道疾病综合征进行流行病学调查,根据其临床特征,在不同规模养殖场共采集1 164份血清样品,利用ELISA和RT-PCR方法检测其猪瘟抗原CSFV,猪繁殖与呼吸综合征抗原PRRSV,猪伪狂犬病PRV gE抗体及猪圆环病毒2型PCV-2特异抗体。结果表明:各季节和不同生长阶段猪群存在一种及两种以上的病毒混合感染,四重感染相对较少。从全年看单独感染占39.10%,PCV-2感染率最高,其次是PRV,PRRSV和CSFV;二重感染占26.13%,以PCV-2+PRV最常见,其次是PCV-2+PRRSV、PRV+PRRSV;三重感染占8.05%,PCV-2+PRRSV+PRV最常见;有四重感染出现,仅占1.57%。从季节来看,春季和夏季混合感染最高,分别为76.53%和60.74%,冬季和秋季的混合感染率分别为59.50%和53.55%。从年龄和性别看,育肥猪的混合感染率高于仔猪,分别为68.66%和61.11%,种公猪的感染率高于母猪,分别为70.00%和55.51%。说明4种病毒有单独感染或混合感染,推测其中PCV-2在混合感染中可能充当免疫抑制的角色,混合感染使PRDC症状更明显,死亡率增高。 展开更多
关键词 猪呼吸道疾病综合征 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪伪狂犬病病毒
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PRRSV人工单独感染及其与PCV2人工联合感染的病理学比较 被引量:12
8
作者 彭长凌 高崧 刘秀梵 《徐州医学院学报》 CAS 2006年第1期49-52,共4页
目的比较猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和断奶仔猪多系统萎缩综合征(PMWS)的病理学变化。方法用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪。在攻毒前后分别于耳缘静脉采血,用HerdChek IDEX... 目的比较猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和断奶仔猪多系统萎缩综合征(PMWS)的病理学变化。方法用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪。在攻毒前后分别于耳缘静脉采血,用HerdChek IDEXX Kit测其血清抗体。PRRSV和PCV2联合感染猪分别在感染后1周、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1周、2周和3周剖杀。剖杀后采集肺、脾、扁桃体和腹股沟淋巴结,用甲醛溶液固定,组织石蜡切片以观察显微病理变化。结果剖检结果和石蜡切片结果均显示了试验猪在攻毒后发生程度不一的间质性肺炎及相应的显微病变。结论PRRSV和PCV2联合感染引起的病变比PRRSV单独感染要严重。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒 病理变化
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PCV与PEDV混合感染的实验室检测 被引量:2
9
作者 杨克礼 陈文杰 +6 位作者 郭锐 周丹娜 袁芳艳 刘泽文 刘威 高婷 田永祥 《江西农业学报》 CAS 2022年第2期160-165,共6页
对采自湖北省内16家规模化养猪场的650份组织样品分别进行猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)和猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的病原学检测。结果表明:除PCV4未检出阳性外,PCV1、PCV2、PCV3、PEDV单一感染... 对采自湖北省内16家规模化养猪场的650份组织样品分别进行猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)和猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的病原学检测。结果表明:除PCV4未检出阳性外,PCV1、PCV2、PCV3、PEDV单一感染的样品阳性率分别为1.08%、4.15%、2.46%和6.46%;在双重感染中,以PEDV+PCV2的阳性率最高,达3.54%,其次为PCV2+PCV3,其阳性率为1.54%;在多重感染中,以PEDV+PCV2+PCV3的阳性率最高,为2.00%。虽然PEDV、PCV感染的阳性率较前期调查结果有所下降,但它们在湖北省内流行仍较广,且以混合感染为主。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 猪流行性腹泻病毒 混合感染 检测
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PRRSV、PCV-2临床感染猪外周血中ACTH含量的变化 被引量:1
10
作者 王全溪 李巧苹 +1 位作者 许文滉 罗奕梁 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第1期68-72,共5页
采集61头有呼吸道疾病症状猪的病料,采用分子生物学方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、PRRSV变异株、猪圆环病毒2型(PCV-2)的检测,并采集血液分离血清,用放射性免疫法检测其外周血中促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量.结果表明:PCV-2... 采集61头有呼吸道疾病症状猪的病料,采用分子生物学方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、PRRSV变异株、猪圆环病毒2型(PCV-2)的检测,并采集血液分离血清,用放射性免疫法检测其外周血中促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量.结果表明:PCV-2核酸阳性率为72.13%,PRRSV为39.34%,PRRSV变异株为22.95%;临床存在混合感染,特别是PRRSV与PCV-2的混合感染,感染率达16.39%;PRRSV、PRRSV变异株和PCV-2的感染均比对照组极显著地提高ACTH的含量,其中以PRRSV变异株与PRRSV的混合感染对ACTH的影响最大,ACTH含量达32.20 pg.mL-1.可见,PRRSV、PCV-2的感染促进了ACTH的分泌,增加猪的应激反应,从而降低病猪的免疫功能. 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 猪圆环病毒2型(pcv-2) 促肾上腺皮质激素(ACTH)
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PCV2感染对猪肺泡巨噬细胞Fc受体数量和吞噬功能的影响 被引量:1
11
作者 周双海 赵东升 +1 位作者 郭鑫 杨汉春 《北京农学院学报》 2006年第1期21-23,共3页
将猪圆环病毒2型(PCV2)BF株经口、鼻接种40日龄健康普通仔猪,在接种后不同时间宰杀,收集肺泡巨噬细胞(PAM),同时设立对照组。用EA花环试验测定Fc受体数目,用吞噬鸡红细胞试验测定吞噬功能,来分析PCV2感染对PAM某些生物学活性的影响。结... 将猪圆环病毒2型(PCV2)BF株经口、鼻接种40日龄健康普通仔猪,在接种后不同时间宰杀,收集肺泡巨噬细胞(PAM),同时设立对照组。用EA花环试验测定Fc受体数目,用吞噬鸡红细胞试验测定吞噬功能,来分析PCV2感染对PAM某些生物学活性的影响。结果显示,PAM表面Fc受体数和吞噬鸡红细胞数的变化规律一致,与对照组相比,两者数量在接种后3 d时下降至最低,之后回升,14 d时基本恢复正常。本研究表明,PCV2感染可引起PAM吞噬和清除病原的能力出现短暂下降。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪肺泡巨噬细胞 FC受体 吞噬
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猪PCV-2和附红细胞体混合感染的实验报告
12
作者 周学万 曾凯 崔尚金 《四川畜牧兽医》 2005年第4期20-21,共2页
采取成都某猪场7头病猪料,经PCR检测后,有4头呈PCV-2阳性。以PCV-2阳性病料接种PK-15猪肾传代细胞,经分离和鉴定,获得PCV-2成都株。该猪场同时流行猪附红细胞体病,存在PCV-2和E.suis的混合感染。
关键词 pcv-2 混合感染 实验报告 猪附红细胞体病 PCR检测 传代细胞 猪场 成都 阳性 病猪 接种 病料
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检测PRRSV-Ⅰ、PRRSV-Ⅱ和PCV-2多重PCR方法的建立及初步应用 被引量:4
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作者 徐艇 刘长龙 +1 位作者 石逢庄 袁世山 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第2期24-30,共7页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virns,PRRSV)欧洲株(PRRSV-I)、北美株(PRRSV-II)常与猪圆环病毒2型(Porcine Circorirns type2,PCV-2)呈混合感染,严重影响养猪业的经济效益。本文根据GenBank... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virns,PRRSV)欧洲株(PRRSV-I)、北美株(PRRSV-II)常与猪圆环病毒2型(Porcine Circorirns type2,PCV-2)呈混合感染,严重影响养猪业的经济效益。本文根据GenBank上已发表的PRRSV北美型(PRRSV-I)、PRRSV欧洲型(PRRSV-II)、圆环病毒2型(PCV-2)的基因组全序列,分别设计了3对能特异性扩增PRRSV-I、PRRSV-II和PCV-2的引物,建立并优化了可同时检测PRRSV-I、PRRSV-II和PCV-2三种病毒的多重PCR方法,通过对临床病料的检测,证实了此方法具有高特异性、高灵敏度、高效率、低成本的特点,适合大量样本的分析与鉴定。利用该方法能在24h内对样品进行检测并获得结果,因此本方法的建立对这3种病毒的早期快速诊断有十分重要的意义。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 猪圆环病毒2型(pcv-2) 多重PCR
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PPV-VP2蛋白和PCV2-Cap蛋白二联亚单位疫苗的研究 被引量:1
14
作者 刘国阳 华涛 +5 位作者 乔绪稳 唐波 常晨 侯继波 李锦春 张道华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第9期18-26,34,共10页
【目的】研制PCV2ORF2基因编码的Cap蛋白与PPV VP2结构蛋白二联亚单位疫苗。【方法】设计截去NLS信号肽序列的Cap蛋白氨基酸序列和VP2蛋白氨基酸全序列,分别进行大肠杆菌偏嗜密码子优化,构建重组表达质粒,利用大肠杆菌表达系统表达出可... 【目的】研制PCV2ORF2基因编码的Cap蛋白与PPV VP2结构蛋白二联亚单位疫苗。【方法】设计截去NLS信号肽序列的Cap蛋白氨基酸序列和VP2蛋白氨基酸全序列,分别进行大肠杆菌偏嗜密码子优化,构建重组表达质粒,利用大肠杆菌表达系统表达出可溶性的Cap蛋白和VP2重组蛋白。将重组蛋白纯化后分别与ISA201佐剂混合制备单苗和二联亚单位疫苗,免疫ICR小鼠,同时设立PBS空白对照和大肠杆菌BL21对照。首免后21d进行加强免疫,利用MTT比色法、细胞中和试验法和ELISA法对免疫小鼠淋巴细胞的转化功能及细胞因子(IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α)mRNA水平、免疫后中和抗体效价以及ELISA抗体水平进行检测。小鼠二免21d后进行PPV和PCV2混合攻毒,利用Real-time PCR法定量测定攻毒后小鼠脾脏的病毒含量。【结果】成功构建了重组质粒pET32a-Cap和pET32a-VP2,表达出可溶性蛋白Cap和VP2,经GEM颗粒和饱和硫酸铵沉淀法纯化蛋白,获得的PCV2Cap蛋白质量浓度为1 213μg/mL,PPV VP2蛋白质量浓度为1 025μg/mL。两种蛋白混合乳化制苗后无相互免疫抑制作用,并且能够诱导机体产生良好的体液免疫和细胞免疫应答。免疫后42d,单苗免疫组和二联亚单位疫苗组PCV2ELISA抗体效价均能达到800以上,中和抗体达到32~38,PPV HI抗体效价均高于6,PPV中和效价高于300,并且诱导机体产生强烈的淋巴细胞增殖反应,提高IL-4和IFN-γ的mRNA表达水平。攻毒试验结果显示,免疫组小鼠脾脏中PCV2和PPV含量显著低于对照组,免疫组组间无显著性差异。【结论】利用大肠杆菌表达的PCV2Cap蛋白和PPV VP2蛋白制备的二联亚单位疫苗免疫ICR小鼠,其抗体水平与Cap、VP2单苗免疫水平相当,且对ICR小鼠有较好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 CAP蛋白 VP2蛋白 可溶性表达 二联亚单位疫苗 猪细小病毒 猪圆环病毒
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仔猪PRRSV和PCV2混合感染的诊断及病毒基因型分析 被引量:2
15
作者 于海丽 陶伟杰 +3 位作者 刘佳卉 单虎 杨海燕 张传美 《动物医学进展》 北大核心 2022年第6期119-124,共6页
为查明某猪场仔猪发病死亡原因,对该场送检的2头发病仔猪进行病理剖检,无菌采集肺脏、脾脏、心脏等组织样品,进行细菌分离鉴定及常发病毒病猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)... 为查明某猪场仔猪发病死亡原因,对该场送检的2头发病仔猪进行病理剖检,无菌采集肺脏、脾脏、心脏等组织样品,进行细菌分离鉴定及常发病毒病猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪流感病毒(SIV)、猪细小病毒(PPV)等病原的PCR检测,并对核酸阳性的病原进行测序和遗传进化分析。结果表明,病料中未分离到致病菌;PCR检测PRRSV和PCV2呈阳性。对PRRSV的ORF5基因和PCV2的ORF2基因进行遗传进化分析发现,检测到的PRRSV属于NADC30-like亚群,PCV2属于PCV-2b基因型。通过病理剖检和实验室检测,确定该猪场存在PRRSV和PCV2的混合感染,建议该场采取消毒隔离、紧急免疫、防止继发感染等措施,成功控制了病情的发展,研究结果为猪场相关疾病的诊断及防控提供了一定的参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 检测 遗传进化分析
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Detection of PCV2 DNA by SYBR Green I-based quantitative PCR 被引量:8
16
作者 HABIB Mudasser 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期162-169,共8页
We developed an assay for the detection and quantitation of porcine circovirus type 2 (PCV2) with the SYBR Green I-based real-time PCR. The real-time PCR provides a broad dynamic range, detecting from 103 to 1011 copi... We developed an assay for the detection and quantitation of porcine circovirus type 2 (PCV2) with the SYBR Green I-based real-time PCR. The real-time PCR provides a broad dynamic range, detecting from 103 to 1011 copies of DNA per reaction. No cross-reactions were found in specimens containing PCV1. Because of the high sensitivity and specificity of the assay with a relatively rapid and simple procedure, real-time PCR can be used as a routine assay for the clinical diagnosis of PCV2 infection. In this study we applied real-time PCR assay to 80 clinical samples, collected from 40 pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) and 40 healthy pigs in comparison with conventional PCR assay. In 56 of 80 samples, PCV2 DNA was de-tected by conventional PCR assay. All samples positive for PCV2 DNA in conventional PCR assay were also positive in real-time assay, and 12 of 24 samples that tested negative for PCV2 DNA in the conventional assay were tested positive in real-time PCR assay. Real-time PCR assay increased the number of samples in which PCV2 was detected by 15%. It is, therefore, considered to be a useful tool for the detection of PCV2. 展开更多
关键词 porcine CIRCOVIRUS type 2 (pcv2) REAL-TIME PCR Sensitivity
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兰州地方分离PCV毒株ORF2阅读框的测序分析与原核表达鉴定 被引量:1
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作者 傅昱 郝晓芳 +3 位作者 卢曾军 孙普 胡永浩 刘在新 《湖南农业科学》 2010年第4期23-27,共5页
根据GenBank中发表的PCV1和PCV2的ORF2基因序列,设计合成了一对共用引物,用PCR的方法从兰州本地病料中分离出毒株,通过PK-15的增殖,扩增出ORF2序列,测序分析后发现分离毒株序列与PCV1的ORF2序列同源性达到99.1%~99.4%。根据GenBank中P... 根据GenBank中发表的PCV1和PCV2的ORF2基因序列,设计合成了一对共用引物,用PCR的方法从兰州本地病料中分离出毒株,通过PK-15的增殖,扩增出ORF2序列,测序分析后发现分离毒株序列与PCV1的ORF2序列同源性达到99.1%~99.4%。根据GenBank中PCV2的ORF2序列对目的序列进行了改造、优化和合成后,目的序列和pET-32a载体连接,转化BL21(DE3)细胞后,挑取阳性克隆。对鉴定后的融合质粒用IPTG诱导,裂解液经过SDS-PAGE分析、纯化操作和Western-Bloting分析,表明改造合成ORF2序列在大肠杆菌中得到了表达,并能被PCV2阳性血清所识别。 展开更多
关键词 pcv 分离鉴定 ORF2基因优化 克隆 表达
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Epizootiological surveillance of porcine circoviruses in free-ranging wild boars in China
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作者 Wenjie Gong Haiying Du +9 位作者 Tong Wang Heting Sun Peng Peng Siyuan Qin Haidong Geng Zheng Zeng Wangwang Liang Hongquan Ling Changchun Tu Zhongzhong Tu 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2023年第5期663-670,共8页
Four species of porcine circoviruses(PCV1–4)have been reported to circulate in Chinese domestic pigs,while the epizootiology of these viruses in free-ranging wild boars in China remains unknown.In this study,tissue a... Four species of porcine circoviruses(PCV1–4)have been reported to circulate in Chinese domestic pigs,while the epizootiology of these viruses in free-ranging wild boars in China remains unknown.In this study,tissue and serum samples collected from diseased or apparently healthy wild boars between 2018 and 2020 in 19 regions of China were tested for the prevalence of PCV1–4 infections.Positive rates of PCV1,PCV2,and PCV3 DNA in the tissue samples of Chinese wild boars were 1.6%(4/247),58.3%(144/247),and 10.9%(27/247)respectively,with none positive for PCV4.Sequence analysis of viral genome showed that the four PCV1 strains distributed in Hunan and Inner Mongolia shared 97.5%–99.6%sequence identity with global distributed reference strains.Comparison of the ORF2 gene sequences showed that 80 PCV2 strains widely distributed in 18 regions shared 79.5%–100%sequence identity with reference strains from domestic pigs and wild boars,and were grouped into PCV2a(7),PCV2b(31)and PCV2d(42).For PCV3,17 sequenced strains shared 97.2%–100%nucleotide identity at the genomic level and could be divided into PCV3a(3),PCV3b(2)and PCV3c(12)based on the phylogeny of ORF2 gene sequences.Serological data revealed antibody positive rates against PCV1 and PCV2 of 11.4%(19/167)and 53.9%(90/167)respectively.The data obtained in this study improved our understanding about the epidemiological situations of PCVs infection in free-ranging wild boars in China and will be valuable for the prevention and control of diseases caused by PCVs infection. 展开更多
关键词 porcine circoviruses(pcvs) EPIZOOTIOLOGY Wild boar China
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三种猪繁殖障碍性病毒混合感染的分子生物学调查 被引量:34
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作者 许立华 王玲 +1 位作者 芦银华 陈溥言 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期40-43,共4页
根据GenBank登录的PRRSVORF7、PCV 2ORF1基因及PRVTK基因的核苷酸序列设计合成引物 ,建立了分别用于检测PRRSV、PRV及PCV 2的RT PCR及PCR方法。应用该方法对 77份可疑病料进行了检测 ,以调查猪群中PCV 2与PRRSV和 (或 )PRV混合感染情况... 根据GenBank登录的PRRSVORF7、PCV 2ORF1基因及PRVTK基因的核苷酸序列设计合成引物 ,建立了分别用于检测PRRSV、PRV及PCV 2的RT PCR及PCR方法。应用该方法对 77份可疑病料进行了检测 ,以调查猪群中PCV 2与PRRSV和 (或 )PRV混合感染情况。结果表明 ,2 4份样品表现为PRRSV与PCV 2混合感染 ,占样品总数的 31.2 % ;17份样品检测为PRRSV与PRV混合感染 ;9份样品表现为PCV 2与PRV混合感染 ,占 11.7% ;另外 ,还有一定比例的三重感染 ,共 8个样品 ,占 10 .4 %。结果显示 ,猪群中PRRSV、PRV与PCV 展开更多
关键词 猪繁殖障碍 混合感染 猪生殖与呼吸综合征病毒 伪狂犬病病毒 猪圆环病毒
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猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组克隆与序列分析 被引量:14
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作者 曹胜波 陈焕春 +3 位作者 肖少波 赵俊龙 吕建强 钱平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期137-141,共5页
参照国外发表的猪Ⅱ型圆环病毒 (porcinecircovirustype 2 ,PCV - 2 )全基因组序列 ,设计一对PCV - 2特异性引物 ,用该室分离的PCV - 2豫A株感染PK - 15细胞 ,从中提取PCV - 2复制型基因组DNA ,并以之为模板进行PCR扩增。回收PCR产物 ,... 参照国外发表的猪Ⅱ型圆环病毒 (porcinecircovirustype 2 ,PCV - 2 )全基因组序列 ,设计一对PCV - 2特异性引物 ,用该室分离的PCV - 2豫A株感染PK - 15细胞 ,从中提取PCV - 2复制型基因组DNA ,并以之为模板进行PCR扩增。回收PCR产物 ,构建重组测序质粒T -PCV - 2。测序结果表明 ,猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组为 176 7bp ,与GenBank收录的PCV - 2国外分离株核苷酸的同源性可高达 97%。序列分析表明 ,复制型豫A株的基因组包含 10个读码框架 ,其中ORF1、ORF2是其两个最主要的读码框架 ,分别编码 314、2 34个氨基酸。豫A株和PCV - 1间的ORF1、ORF2的氨基酸序列同源性分别为 85 %、6 6 % ,与其它PCV - 2毒株间的ORF1氨基酸同源性均在 98%以上 ,而ORF2的氨基酸同源性为 92 %~ 97%。 展开更多
关键词 猪Ⅱ型圆环病毒豫A株 全基因组克隆 序列分析 pcv-2
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