条斑紫菜蛋白酶解物降血压活性

研究了以条斑紫菜为原料,采用木瓜蛋白酶制备紫菜蛋白活性寡肽,以ACE抑制率为评价指标,研究不同水解条件下酶解液的降血压活性,优化酶解工艺条件并测定酶解物的分子量。优化后的木瓜蛋白酶酶解工艺条件为pH7.5,温度50℃,底物浓度30 mg/mL,酶添加量600 U/g,在此条件下,水解4 h的酶解产物抑制活性达30%以上,ACE抑制肽的半抑制浓度IC50值为4.48 mg/mL。将制备的酶解液进行层析分析,测得具有降血压活性的紫菜蛋白酶解产物是相对分子质量小于2 000的活性肽。

条斑紫菜蛋白酶解液α-葡萄糖苷酶和DPP-Ⅳ抑制活性的表征及肽成分解析

在特定可控酶解条件下制备获得条斑紫菜1000 Da以下小分子多肽为主的蛋白酶解液,分析发现其具有对α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶Ⅳ(dipeptidyl peptidase Ⅳ,DPP-Ⅳ)的双酶抑制活性,且具有良好的pH值、温度稳定性和胃肠消化耐受性。将酶解液经超滤、纳滤、凝胶过滤层析分离纯化后,采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间质谱对活性成分进行鉴定,解析出2条多肽氨基酸序列为Ala-Pro、Pro-Gly-Gly-Val。按上述序列合成出这2条多肽(纯度99.69%)表征其对2种酶的抑制活性,结果表明:Pro-Gly-Gly-Val为双酶抑制肽,它对α-葡萄糖苷酶的IC50为18.60 mmol/L,对DPP-IV的IC50为17.80 mmol/L;而Ala-Pro只对DPP-IV有抑制作用,其IC50为4.65 mmol/L。