3种实时荧光PCR仪对120份新型冠状病毒检测标本的检测结果比较

目的对不同厂家生产的3种实时荧光PCR仪检测的同一批新型冠状病毒检测标本结果进行比较分析,考察3种实时荧光PCR仪对新型冠状病毒核酸检测结果的差异。方法采用同一厂家同一批号新型冠状病毒核酸检测试剂,运用3种不同型号实时荧光PCR仪对120例新型冠状病毒肺炎患者及密切接触者的咽拭子、尿液、唾液、粪便标本进行检测,采用SPSS20.0统计软件对检测结果和检测一致性进行分析。结果3种仪器检出率分别为42.50%、35.00%、38.33%。有95例患者标本通过3种仪器扩增后检测结果一致。以仪器A检测结果为参照,仪器B有21例检测结果不同,两者检出率差异无统计学意义(P>0.05),检测结果一致性一般(K=0.732);仪器C有14例检测结果不同,两者检出率差异无统计学意义(P>0.05),检测结果一致性好(K=0.821)。结论由于不同厂家生产的仪器原理和仪器使用维护状况不同导致检测结果存在一定差异,提示仪器厂家需进一步优化仪器性能,提高检测准确性;同时各检测机构应按照要求对PCR仪进行校准维护,确保仪器状态正常,并尽可能采取多种质控手段以确保检测结果准确性。

便携式核酸微全分析仪的设计与研发

目的:自主研制一款便携式核酸微全分析仪及配套微流控芯片,以满足快速现场分子检测的需要。方法:针对检测现场应用环境,采用低功耗电子元器件进行控制系统设计、轻质材料进行机械结构设计,进行小型化及低功耗开发;开发微型荧光检测模块、配套的荧光检测微流控芯片,研制一套新型的便携式核酸微全分析仪。结果:整套系统可以进行4通道荧光检测;微流控芯片一次性使用,一次处理4个样品;采用多重PCR-反向斑点杂交法快速定性检测人Y染色体3个AZF区的6个STS位点;检测禽流感病毒灵敏度为12.7 copies/μl,新城疫病毒灵敏度为63.3 copies/μl。结论:便携式核酸微全分析仪及配套微流控芯片仅用1台该仪器即可在90 min内实现从样本前处理、核酸提取、聚合酶链式反应(PCR)扩增到实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测的全过程。实现人乳头瘤病毒(HPV)、Y染色体缺失(YMD)、禽流感及新城疫病毒等疾病检测。便携式核酸微全分析仪能够满足进出口检验检疫,偏远地区快速疾病筛查等特殊环境下的快速现场分子诊断需要。

一体化核酸工作站在HPV分型检测中的应用评价

目的评价一体化核酸工作站在人乳头瘤病毒(HPV)分型检测中的临床应用价值。方法收集2021年4月至2021年8月于该院门诊进行宫颈癌筛查的241例患者的宫颈脱落细胞样本,每例样本均同步采用一体化工作站和分步式PCR流程检测HPV分型,一体化核酸工作站组为试验组,分步式PCR检测作为标准对照组,统计两种检测方法HPV分型的检测结果。结果一体化核酸工作站与标准PCR检验阳性符合率为99.26%,阴性符合率95.28%,总符合率97.51%;Kappa检验显示二者检测结果一致性良好(Kappa值0.949);器械重复性及稳定性较好;对10^(3)copies/mL以上水平28种HPV亚型能准确检出。结论一体化核酸工作站对HPV分型检测具有较高的准确率与灵敏度,诊断结果与分步式PCR检测检测结果一致性较好,证明一体化核酸工作站能够满足预期用途及HPV筛查的临床应用需求。

肉制品中牛源性成分的快速定性检测研究

文章通过选用磁珠法组织核酸提取试剂盒对畜肉制品中的DNA进行提取,使之适用于PCR检测技术,依据标准《畜肉制品中牛成分定性检测方法实时荧光PCR法》(SN/T 2557—2010)检测其中是否含有牛特异性基因序列,同时在提取时加入猪源作为干扰,并进行灵敏度试验,为验证提取、扩增过程及方法准确性,加做核酸提取空白、扩增空白对照、扩增阴性对照和扩增阳性对照。该方法选用的磁珠法组织核酸提取试剂盒提取效率高,抗干扰能力强,且该方法在检测结果分析中增加了质量控制,可排除假阴性结果,检测时间可缩短为4 h以内,可用于市售新鲜、冷冻畜肉和肉干、肉酱等畜肉制品中的牛成分快速定性检测。从而为打击不法商家和企业用低价猪肉代替或非肉冒充牛肉提供了有力的技术保障,维护了消费者权益。

血液病毒核酸检测仪器使用前的性能确认

目的:确认血液病毒核酸检测(NAT)仪器在使用前,其性能可以满足实际检测工作要求。方法:为确认设备的检测灵敏度、特异性、重复性、可靠性和防止污染等性能,设计4个试验组:联检试验组和鉴别试验组,将生理盐水标本和NAT质控品(HBV DNA、HIV-1RNA、HCV RNA)交叉放置于标本架上,进行NAT联检和鉴别检测;仪器比对组用同一批献血者标本在同类型的2台仪器上进行检测;污染评估试验组用生理盐水作为阴性标本进行NAT联检。结果:所有NAT检测结果均与预期一致。结论:血液病毒核酸检测设的各项性能满足实际检测工作要求。