马齿苋总黄酮对人红细胞膜封闭能力的影响

目的 建立超氧阴离子自由基 (O-2 )引发人红细胞膜氧化损伤实验模型 ,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜重封闭能力的影响。方法 以邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生 (O-2 )引发人红细胞膜氧化损伤 ,并以此为实验模型研究马齿苋总黄酮对红细胞膜封闭能力的影响。结果 O-2 能引起红细胞膜重封闭能力显著降低 ,其平均封闭度为41 9% ,而预先加入不同浓度的马齿苋总黄酮后能显著增加膜封闭能力 ,且存在明显的剂量效应关系。

马齿苋总黄酮对人红细胞膜的保护作用

为建立超氧阴离子自由基 (O2·- )引发人红细胞膜氧化损伤实验模型 ,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤的保护作用。以邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生 (O2·- )引发人红细胞膜氧化损伤 ,并以此为实验模型研究马齿苋总黄酮对红细胞膜封闭能力唾液酸、丙二醛 (MDA)含量的影响。结果显示 :(O2·- )能引起红细胞膜重封闭能力显著降低 ,其平均封闭度为 4 1 9% ,红细胞膜唾液酸含量较正常膜显著下降 ,MDA含量显著增加。而预先加入不同浓度的马齿苋总黄酮后能显著增加膜封闭能力 ,红细胞膜唾液酸含量较氧化膜显著增加 ,MDA含量显著降低。且存在明显的剂量效应依赖关系。提示 :马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤具有保护作用。

马齿苋总黄酮对缺氧/复氧致心肌细胞凋亡的影响

目的观察马齿苋总黄酮(PTF)对缺氧/复氧致H9c2心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Caspase-3 mRNA表达的影响。方法利用体外培养的H9c2心肌细胞建立缺氧/复氧模型,采用荧光染色法观察心肌细胞凋亡形态变化,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率、RT-PCR检测心肌细胞凋亡基因Caspase-3的表达。结果与A/R组比较,PTF组缺氧/复氧损伤后有部分细胞发生凋亡形态变化,但数量较A/R组明显较少;PTF组均可明显降低细胞凋亡率(P<0.05);PTF组可有效减少缺氧/复氧损伤的H9c2心肌细胞内Caspase-3 mRNA的表达。结论 PTF可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡,其作用可能是通过下调Caspase-3表达实现的。

马齿苋总黄酮对肝纤维化大鼠转化生长因子-β_1信号因子表达的影响

目的观察马齿苋总黄酮对肝纤维化大鼠转化生长因子(TGF)-β1基因及其蛋白表达的影响,探讨马齿苋总黄酮对肝纤维化的治疗作用机制。方法 SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型对照组、复方甘草酸苷组、马齿苋总黄酮组,各12只。除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射四氯化碳(CCl4)溶液2 mL·kg-1·d-1复制肝纤维化模型。复方甘草酸苷组灌胃复方甘草酸苷溶液15.75 mg·kg-1,马齿苋总黄酮组灌胃马齿苋总黄酮溶液35.6 mg·kg-1,正常对照组和模型对照组灌胃等体积纯净水。30 d后麻醉处死动物剖取肝脏,实时-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-Blot法检测肝脏细胞TGF-β1基因及蛋白表达。结果正常对照组、模型对照组、复方甘草酸苷组、马齿苋总黄酮组大鼠肝脏细胞中TGF-β1基因的相对表达量分别为0.725±0.130,7.493±1.410,3.016±1.240,2.668±1.150。马齿苋总黄酮可显著下调TGF-β1基因(P<0.01)及TGF-β1蛋白(P<0.01)的表达。结论马齿苋总黄酮可通过下调大鼠肝纤维化细胞TGF-β1基因及蛋白表达有效治疗肝细胞纤维化病变。

马齿苋总黄酮对异丙肾上腺素致心肌缺血损伤的影响

目的:观察马齿苋总黄酮(portulaca oleracea total flavones,POTF)对异丙肾上腺素(isoproteronol,ISO)致小鼠实验性心肌缺血的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:采用腹腔注射ISO诱导小鼠造成心肌缺血的动物模型,记录小鼠标准Ⅱ导联心电图(ECG)及心肌含水量(MWC)、心肌指数(MI)的变化,检测血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca^(2+)-ATPase活性变化;观察小鼠常压密闭条件下的存活时间。结果:POTF给药组能明显降低J点抬高程度;提高小鼠耐急性缺氧的能力;降低心肌缺血小鼠血清中LDH、CK、MDA的含量;升高心肌组织SOD、Ca^(2+)-ATPase活性,MDA含量降低;心脏重量参数显示对POTF心肌水肿有明显的抑制作用。结论:POTF对急性心肌缺血损伤具有保护作用,其作用可能与增强抗氧化能力、抑制过氧化脂质、提高耐缺氧能力有关。

蒲黄总黄酮对Palmitate培养下的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖代谢的影响

目的:探讨蒲黄总黄酮(PTF)对骨骼肌细胞葡萄糖代谢的影响。方法:PTF处理棕榈酸(Palmitate)诱导而致胰岛素抵抗(IR)的C2C12骨骼肌细胞,采用XTT法观察药物对细胞活性的影响;通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量;3H-葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率。结果:0.25mmol/LPalmitate培养16h,造成C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗量下降34.66%,0.5g/LPTF可使其葡萄糖消耗量显著增加,且呈一定的时间依赖效应,与罗格列酮(ROS)相比,统计学差异显著(P<0.05);0.25mmol/LPalmi-tate培养16h,使C2C12骨骼肌细胞葡萄糖摄取率下降30.43%,造成骨骼肌细胞胰岛素抵抗(IR)模型,0.5g/LPTF可使IR模型葡萄糖转运率增加32.39%,ROS可使其转运率增加45.88%,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PTF能显著增加C2C12骨骼肌细胞的葡萄糖消耗和摄取,这可能是PTF改善骨骼肌IR的机制之一。

马齿苋总黄酮对血小板源性生长因子致家兔血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:研究马齿苋总黄酮(Portulaca totalflavone,PTF)对血小板源性生长因子-BB型(PDGF-BB)致血管平滑肌细胞(Vascularsmoothmuscle cell,VSMC)增殖的影响并探讨其机制。方法:采用组织贴壁法培养家兔胸主动脉血管平滑肌细胞,细胞计数法观察PTF(8、24、72mg/L)对PDGF-BB所致的VSMC增殖作用的影响;氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入方法测定VSMC DNA的合成;流式细胞仪分析增殖细胞周期,荧光分光光度计测定VSMC内[Ca2+]i。结果:PTF以浓度依赖方式抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖、DNA合成,血管平滑肌细胞处于G1/G0期的细胞数增多,而G2/S期的细胞数显著减少(P<0.01);能抑制高K+诱导的VSMC内[Ca2+]i升高(P<0.01)。结论:PTF可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖,其作用机制可能与其降低VSMC内高钙浓度[Ca2+]i有关。

马齿苋总黄酮提取工艺研究

目的采用正交试验优选提取马齿苋中总黄酮的最佳工艺条件。方法以总黄酮含量为指标,通过正交试验考察料液比、提取次数、提取时间等因素对马齿苋总黄酮提取率的影响,优选马齿苋总黄酮的水提取工艺。结果最佳条件为料液比为1∶20,煎煮2次,每次1.5 h。结论采用水煎煮法提取马齿苋中总黄酮,方法简单,成本低廉。

新疆马齿苋中总黄酮的微波提取及含量测定

目的 :从马齿苋中提取总黄酮 ,并测定其含量。方法 :微波技术提取马齿苋总黄酮后用比色法测定总黄酮含量。结果 :测得马齿苋中总黄酮含量 5 .790 % ,平均回收率为 97.6 % ,相对标准偏差 (RSD)为 1.43% (n=6 )。结论 :首次运用微波技术干燥马齿苋并从中提取总黄酮 ,反应速度加快 ,提高了提取效率。

马齿苋总黄酮对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察马齿苋总黄酮对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)增殖的抑制作用及机制。方法由细胞计数、MTT法测定细胞增殖率,采用羟胺法、TBA方法分别测定培养液中SOD活性、MDA含量。结果马齿苋总黄酮(16.0、32.0、64.0μg/ml)以浓度依赖方式抑制RASMC增殖及抑制氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导RASMC增殖,可诱导少量RASMC凋亡,马齿苋总黄酮预处理24 h后已出现明显的抗增殖作用,提高培养液中SOD活性、降低MDA含量。结论马齿苋总黄酮具有抗RASMC增殖作用,该作用与提高SOD活性、降低MDA含量有关。

马齿苋总黄酮对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察马齿苋总黄酮对大鼠主动脉平滑肌细胞（RASMC）增殖的抑制作用及机制。方法由细胞计数、MTT法测定细胞增殖率，采用羟胺法、TBA方法分别测定培养液中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果马齿苋总黄酮（16．0、32．0、64．0μg／ml）以浓度依赖方式抑制RASMC及氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导RASMC增殖，可诱导少量RASMC凋亡。马齿苋总黄酮预处理24h后已出现明显的抗增殖作用，提高培养液中SOD活性[（95．2±25．6）U／ml比（73．6±21．4）U／ml]、降低MDA含量[（3．78±0．52）nmol／L比（4．52±0．74）nmol／L]，与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论马齿苋总黄酮具有抗RASMC增殖作用，该作用与提高SOD活性、降低MDA含量有关。

马齿苋总黄酮对缺血再灌注心肌细胞损伤的保护作用

目的研究马齿苋总黄酮(portulaca total flavone,PTF)对新生大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法取体外培养的新生大鼠心肌细胞于缺氧24 h复氧1 h造成缺血再灌注(I/R)损伤模型,观察细胞损伤情况,并将PTF终浓度为5、10、20 mg/L分别加入培养基中,预处理24 h后,再置于上述缺氧复氧环境中培养,测定以上不同条件下心肌细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并测定各组细胞内Ca^(2+)浓度。结果与正常对照组相比较,缺血组和再灌组细胞上清液中LDH、CK、MDA含量明显升高(P<0.01),SOD活力则显著降低(P<0.01),缺血组和再灌组细胞内Ca^(2+)浓度均明显升高(P<0.01)。而用PTF预处理后缺血组和再灌组的LDH、CK、MDA显著低于用药前(P<0.01),SOD高于缺血组和再灌组(P<0.01);PTF组(20mg/L)对正常心肌细胞内Ca^(2+)浓度影响小(P>0.05);与PDGF-BB诱导增殖组比较,PTF(5、10、20 mg/L)药物干预组心肌细胞Ca^(2+)浓度明显降低(P<0.05),且存在明显的剂量效应关系。结论 PTF对缺血再灌心肌细胞有保护作用,其作用机制可能与增强抗氧化能力、减轻钙超载有关。

马齿苋总黄酮对大鼠心功能和动脉血压的影响

目的:观察马齿苋总黄酮对麻醉大鼠心功能和颈动脉血压的影响。方法:采用powerlab生物信号记录分析系统同步动态记录动脉血压、II导心电图、心室最大收缩功能、心室最大舒张功能、左室内压最大上升速率(dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)。结果:马齿苋总黄酮2.25mg/100g、4.50mg/100g、9.00mg/100g分别静脉给药,给药后5min开始起效,0.5h～1h达高峰,可持续2h～4h。与对照组比较,治疗组各项指标均具有显著性差异。结论:马齿苋总黄酮剂量依赖性增强心功能,升高血压,但对心率几乎无影响。

马齿苋总黄酮对异丙肾上腺素致心肌缺血损伤的影响

目的观察马齿苋总黄酮(Portulaca oleracea total flavones,POTF)对异丙肾上腺素(isoproteronol,ISO)致小鼠实验性心肌缺血的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法 60只昆明种小鼠随机分为6组,即正常对照组、缺血模型组、POTF给药组(80、40、20 mg/kg)、普萘洛尔给药组(5 mg/kg);采用腹腔注射ISO诱导小鼠造成心肌缺血的动物模型,记录小鼠标准Ⅱ导联心电图ST段(J点)上移值及心肌含水量(MWC)、心肌指数(MI)的变化,观察小鼠常压密闭条件下的存活时间;检测血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、MDA、Ca2+-ATPase活性变化。结果 POTF给药组能明显降低J点上移值;延长心肌缺血小鼠常压缺氧存活时间(P<0.05);降低心肌缺血小鼠血清中LDH、CK、MDA的含量(P<0.05);升高心肌组织SOD、Ca2+-ATPase活性,降低MDA含量(P<0.05);明显减少MWC、MI。结论 POTF对小鼠急性心肌缺血损伤具有保护作用,其作用可能与增强抗氧化能力、抑制脂质过氧化、提高耐缺氧能力有关。

马齿苋总黄酮微乳的制备及经皮渗透研究

目的:以马齿苋总黄酮为模型药物,制备治疗湿疹的经皮给药中药有效组分微乳。方法:通过单因素试验及伪三元相图的绘制筛选微乳组分,并以药物体外经皮渗透速率进一步优化微乳处方。结果:优选处方为肉豆蔻酸异丙酯-Cremophor EL-丙三醇-水(6.5:29.25:29.25:35),平均粒径为24.54nm;马齿苋总黄酮稳态透皮速率为114.70μg·cm-2·h-1,比原湿疹搽剂的透皮速率提高了17倍。结论:马齿苋总黄酮微乳性状均一,澄清透明,质量稳定,透皮性能好。

马齿苋总黄酮通过调控TRB3表达对支气管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的探讨马齿苋总黄酮(PTF)是否通过调控tribbles同源蛋白3(tribbles homolog 3,TRB3)表达影响缺氧/复氧(H/R)诱导的支气管上皮细胞损伤。方法体外培养人支气管上皮细胞BEAS-2B,建立H/R诱导的细胞损伤模型,使用低(10 mg·L^(-1))、中(20 mg·L^(-1))、高浓度(40 mg·L^(-1))PTF处理细胞;用试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与Western blot法分别检测TRB3的mRNA及蛋白表达水平;再将si-TRB3、pcDNA-TRB3分别转染至BEAS-2B细胞,采用上述方法检测转染后LDH、MDA、SOD的水平及细胞凋亡率;Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)蛋白表达量。结果与对照组比较,H/R组LDH、MDA的水平升高,SOD的水平降低,细胞凋亡率升高,Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,TRB3 mRNA及蛋白水平升高;与H/R组比较,H/R+PTF不同浓度组LDH、MDA的水平均降低,SOD的水平升高,细胞凋亡率降低,Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,TRB3 mRNA及蛋白水平降低;与H/R+si-NC组比较,H/R+si-TRB3组LDH、MDA的水平降低,SOD的水平升高,细胞凋亡率降低,Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高;TRB3过表达可减弱PTF对H/R诱导的支气管上皮细胞损伤的作用。结论马齿苋总黄酮可能通过下调TRB3的表达从而减轻H/R诱导的支气管上皮细胞损伤。

马齿苋总黄酮对H2O2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨马齿苋总黄酮(portulaca oleracea total flavones, POTF)对过氧化氢(H2O2)所诱导的PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法:通过MTT比色法检测马齿苋总黄酮对PC12细胞增殖的影响;并用H2O2诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,通过四唑盐(MTT)和乳酸脱氢酶(LDH)比色法检测马齿苋总黄酮保护PC12细胞免受H2O2损伤的效果;利用试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)含量和培养液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)含量观察马齿苋总黄酮的抗氧化效果;通过试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及实时荧光定量PCR(q-PCR)和Western blot检测硫氧还蛋白(Trx)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的转录和蛋白水平,初步探讨马齿苋总黄酮的抗氧化机制。结果:马齿苋总黄酮在320μg/mL浓度范围内对PC12细胞增殖无影响,而马齿苋总黄酮浓度达到640μg/mL时对PC12细胞有一定的毒性作用;马齿苋总黄酮随剂量依赖地提高细胞内SOD、CAT和GSH-Px活性和调节Trx和iNOS的转录水平,减少ROS和NO的产生和增加GSH的含量,从而保护H2O2对PC12细胞的氧化损伤,尤以160 mg/kg最显著。结论:马齿苋总黄酮对H2O2致PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高细胞的抗氧化能力有关。

马齿苋总黄酮对缺氧/复氧致心肌细胞损伤的影响及机制研究

目的:研究马齿苋总黄酮(PTF)对缺氧/复氧致心肌细胞损伤的影响及机制。方法:利用体外培养的H9c2心肌细胞建立缺氧/复氧模型。将培养的心肌细胞分为5组:正常对照组、缺氧/复氧损伤模型组、缺氧/复氧损伤加10 mg·L-1PTF组、缺氧/复氧损伤加20 mg·L-1PTF组、缺氧/复氧损伤加40 mg·L-1PTF组。MTT法检测心肌细胞存活率,荧光分光光度法测定心肌细胞内钙离子浓度,比色法测定心肌细胞培养液中一氧化氮(NO)浓度,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率、RT-PCR检测心肌细胞凋亡基因Caspase-3 mRNA的表达。结果:与A/R组比较,PTF组(终质量浓度为10,20,40 mg·L-1)均可明显提高缺氧/复氧损伤的心肌细胞存活率,降低NO浓度、细胞内钙离子浓度、细胞凋亡率[(18.25±2.64,P<0.05),(13.83±1.52,11.21±1.76,P<0.01)],PTF组可有效减少缺氧/复氧损伤心肌细胞内Caspase-3 mRNA的表达。结论:PTF可通过抑制心肌细胞内钙超载、减轻过量NO的细胞毒性作用、下调Caspase-3表达,从而保护心肌细胞。

马齿苋总黄酮对垂体后叶素诱发小鼠急性心肌缺血的保护作用

目的观察马齿苋总黄酮(POTF)对垂体后叶素(Pit)诱发小鼠急性心肌缺血的影响。方法 ip Pit予小鼠,建立急性心肌缺血模型,记录小鼠标准Ⅱ导联心电图(ECG)的变化,观察小鼠存活时间、心肌指数(MI)、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca^(2+)及血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、MDA的变化。结果 POTF能提高小鼠耐急性缺氧的能力、对PIT诱发小鼠Ⅱ导联ECG异常有明显改善,同时升高心肌组织中SOD的活性,降低MDA、Ca^(2+)的含量及降低血清中CK、LDH的水平,心脏重量指数显示POTF对心功能也有明显的改善作用。结论 POTF能保护Pit诱发的小鼠急性心肌缺血损伤,其作用机制可能与降低心肌细胞内钙离子浓度、抑制脂质过氧化有关。

马齿苋总黄酮对缺血缺氧刺激下血管平滑肌细胞蛋白激酶C活性的影响

目的观测马齿苋总黄酮(PTF)对缺血缺氧刺激下血管平滑肌细胞钙超载及蛋白激酶C(PKC)的影响。方法用Fura-2/AM作Ca2+指示剂,检测PTF对正常培养及缺血缺氧作用下家兔主动脉血管平滑肌细胞Ca2+浓度及PKC的活性的改变。结果 PTF对正常培养家兔主动脉血管平滑肌细胞[Ca2+]i浓度无明显影响;PTF(8,16,32,64 mg·L-1)剂量依赖性抑制缺血缺氧缺氧致血管平滑肌细胞[Ca2+]i升高;PTF对正常培养家兔主动脉血管平滑肌细胞胞浆、胞膜PKC活性均升高;PTF处理后胞浆PKC活性下降,胞膜PKC活性上升。结论PTF可能抑制缺氧致血管平滑肌细胞钙超载,调节缺氧条件下血管平滑肌细胞PKC活性。