麻黄碱通过调控TGF-β1/NF-κB信号通路抑制小鼠的气道炎症反应

为了研究麻黄碱通过调控转化生长因子β1/核因子κB (transforming growth factor-β1/nuclear factor-κB,TGF-β1/NF-κB)信号通路对哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响,将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、麻黄碱低剂量组、麻黄碱高剂量组和地塞米松组,并利用卵清白蛋白(ovalbumin, OVA)联合氢氧化铝腹腔注射法构建小鼠哮喘模型。药物处理14 d后,通过无创性肺功能检测法测量小鼠气道反应性,采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE staining)观察小鼠肺组织病理情况,采用瑞氏-吉姆萨染色法分析小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中的炎症细胞比例,利用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测小鼠血清OVA特异性免疫球蛋白E (immunoglobulin E, Ig E)的表达水平及BALF中炎症因子的表达水平,利用免疫印迹法检测小鼠肺组织TGF-β1/NF-κB通路相关蛋白质的表达水平。结果显示,麻黄碱可以降低哮喘小鼠血清中OVA特异性Ig E及BALF中白细胞介素(interleukin, IL)-4、IL-5、IL-6、IL-13、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)的表达水平,并显著抑制肺组织中TGF-β1/NF-κB通路相关蛋白质的表达,从而显著抑制由OVA诱导的小鼠气道高反应性,并改善哮喘小鼠的肺部炎症。

基于Postn介导的TGF-β/NF-κB通路探讨绿原酸改善心肌肥大的作用及机制研究

目的探究绿原酸介导Postn/TGF-β/NF-κB通路改善心肌肥大的作用机制。方法采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导H9c2心肌细胞,构建心肌肥大模型。随机将细胞分为对照组、模型组、Postn-siRNA组、绿原酸组和Postn-siRNA+绿原酸组。测定各组细胞表面积及活性,各组心肌细胞Postn/TGF-β/NF-κB通路相关蛋白和mRNA表达情况,流式细胞术测定各组凋亡率。结果与对照组比较,模型组细胞表面积和凋亡率明显增大,细胞活性明显减少(P<0.05);与模型组比较,Postn-siRNA组和绿原酸组细胞表面积和凋亡率明显减小,细胞活性明显增加(P<0.05);与Postn-siRNA组和绿原酸组相比,Postn-siRNA+绿原酸组细胞表面积和凋亡率明显减小,细胞活性明显增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组Postn、α3、α5、β3、β5、NF-κB、TGF-β1蛋白及mRNA表达明显上调,ANP、BNP和β-MHC蛋白表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,Postn-siRNA组和绿原酸组细胞上述蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05),与Postn-siRNA组和绿原酸组相比,Postn-siRNA+绿原酸组细胞上述蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05)。结论绿原酸介导Postn/TGF-β/NF-κB通路调控细胞活性和凋亡,进而抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。

TLR4/NF-κB/TGF-β1信号通路与肾纤维化关系的研究进展

肾纤维化(RF)是影响慢性肾脏病进程的关键,严重危害人类的生命健康并带来经济负担。研究发现,信号通路、炎症等因素在RF的发生发展过程中发挥重要作用,其中,TLR4/NF-κB/TGF-β1信号通路与RF关系密切;Toll样受体(TLRs)信号分子通过激活下游核因子κB(NF-κB)信号通路共同发挥促进炎性因子释放而造成RF,转化生长因子-β1(TGF-β1)是一种可诱导细胞外基质(ECM)产生的致纤维化因子,从而引起RF。本文旨在探讨TLR4/NF-κB/TGF-β1信号通路与RF的关系,以了解该信号通路在RF发生发展过程中发挥的作用,从而为保护肾功能、延缓RF发生提供理论依据。

白芍总苷通过下调TLR4/NF-κB/TGF-β_1信号通路改善阿霉素肾病大鼠肾纤维化

目的探讨白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对阿霉素肾病大鼠肾组织纤维化的影响及其机制。方法 30只健康雄性SD大鼠尾静脉注射阿霉素制备模型,成模后随机分为模型对照组(ADRN组)和白芍总苷干预组(TGP组),同时设立正常对照组(CON组);干预8周后ELISA法检测血清Cr、BUN;尿蛋白定量法测24 h尿蛋白;Masson染色观察肾脏纤维化程度;RT-PCR法检测肾组织TLR4/NF-κB/TGF-β1mRNA表达;免疫组化法检测肾组织TLR4/NF-κB/TGF-β1蛋白含量。结果与CON组相比,ADRN组大鼠血清Cr、BUN、24 h尿蛋白水平升高(P<0.01),肾组织纤维化程度加重(P<0.01),TLR4/NF-κB/TGF-β1表达升高(P<0.05);与ADRN相比,TGP组大鼠Cr、BUN、24 h尿蛋白水平下降(P<0.01),肾组织纤维化程度减轻(P<0.01),TLR4/NF-κB/TGF-β1表达下降(P<0.05)。结论 TGP可以改善阿霉素肾病大鼠的肾脏功能,减轻病理损伤,其机制可能与下调TLR4/NF-κB/TGF-β1通路进而改善阿霉素大鼠肾纤维化有关。

艾灸结合肺纤通络方对博莱霉素所致肺纤维化大鼠的治疗效果及对NF-κB/TGF-β_(1)/smad 3信号通路的调控作用

目的探究艾灸结合肺纤通络方对博莱霉素(BLM)所致肺纤维化(PF)大鼠的治疗效果及对NF-κB/TGF-β_(1)/smad 3通路的调控作用。方法从50只大鼠中随机选取10只为对照组,其余40只采用博莱霉素诱导建立PF模型,4只大鼠死亡,其余随机分为PF组、艾灸组、联合组及阳性组,各9只。艾灸组采用艾灸治疗,联合组在艾灸的穴位处滴加5滴肺纤通络方并艾灸至干燥,阳性组给予泼尼松3 mL·kg^(-1),PF组及对照组给予等剂量的生理盐水。连续给药30d后,测量各组血清炎症因子及氧化应激指标水平,观察肺组织病理学变化,检测NF-κB/TGF-β_(1)/smad 3通路蛋白表达情况。结果与对照组比较,PF组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及HYP、GSH水平升高,MDA水平降低,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3 mRNA水平升高,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3蛋白表达上调(P<0.05);与PF组比较,艾灸组、联合组及阳性组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及HYP、GSH水平降低,MDA水平升高,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3 mRNA水平降低,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3蛋白表达下调(P<0.05);与艾灸组比较,联合组及阳性组血清IL-1β、IL-6、TNF-α及HYP、GSH水平降低,MDA水平升高,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3 mRNA水平降低,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3蛋白表达下调(P<0.05);与联合组比较,阳性组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及HYP、GSH水平降低,MDA水平升高,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3 mRNA水平降低,NF-κB、TGF-β_(1)、smad 3蛋白表达下调(P<0.05)。结论艾灸结合肺纤通络方能够改善BLM所致PF大鼠炎症指标及氧化应激指标,对肺组织起到保护作用,其作用可能与NF-κB/TGF-β_(1)/smad 3通路有关。

基于NF-κB通路探讨宣肺解痉方治疗支气管哮喘气道重塑机制研究

目的观察宣肺解痉方治疗支气管哮喘的临床疗效,并基于核因子(nuclear factor,NF)-κB通路探讨宣肺解痉方改善气道重塑的作用机制。方法将河北中医药大学第一附属医院呼吸二科收治的68例支气管哮喘慢性持续期患者随机分为2组,对照组患者使用布地奈德福莫特罗粉吸入剂(160μg/4.5μg)治疗,治疗组患者在此基础上加用宣肺解痉方中药汤剂,连续治疗30 d后,比较2组患者临床症状评分、哮喘控制测试(asthma control test,ACT)评分、迷你哮喘生活质量问卷(mini asthma quality of life questionnaire,MiniAQLQ)评分及肺功能、气道重塑血清指标的变化。结果治疗组患者总有效率、ACT与MiniAQLQ评分、肺功能指标、人核因子κB抑制蛋白(nuclear factor-kappa-b inhibitor,IκB)α表达水平均较对照组明显上升(P<0.05);临床症状评分、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9与NF-κB p65表达水平均较对照组明显下降(P<0.05)。结论宣肺解痉方可以明显降低支气管哮喘慢性持续期患者血清中TGF-β1、MMP-9表达,提高临床疗效,其作用机制可能与通过下调NF-κB信号通路降低气道炎症水平有关。

氟比洛芬酯对放射性心脏损伤模型大鼠NF-κB/TGF-β1信号通路的影响

目的:探究氟比洛芬酯(FA)对放射性心脏损伤(RIHD)模型大鼠NF-κB/TGF-β1信号通路的影响。方法:50只大鼠按随机数字法分为对照组、照射组、FA低剂量组、FA中剂量组、FA高剂量组,每组10只。除对照组不照射外,其余各组心脏照射20 Gy,放疗结束当天给药,FA低、中、高剂量组尾静脉分别注射5、10、20 mg/kg FA,直至放疗后4周结束。试剂盒检测大鼠血清中肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性;HE染色观察大鼠心肌组织形态;ELISA检测血清中TNF-α、IL-6、IL-10水平;RT-qPCR和免疫组化检测心肌组织中NF-κB、TGF-β1 mRNA和蛋白水平。结果:照射组大鼠心肌细胞出现明显水肿现象、心肌缺血、坏死严重,并伴有大量炎症浸润,横肌消失,核固缩或溶解;随着FA剂量升高,细胞逐渐恢复正常,排列规律,仅出现少量炎症浸润现象。与对照组相比,照射组血清中cTnT、CK-MB、TNF-α、IL-6水平、心肌组织病理评分、心肌组织中MDA含量、MPO活性,NF-κB、TGF-β1 mRNA水平和蛋白平均积分吸光度升高(P<0.05),血清中IL-10水平,心肌组织中SOD活性降低(P<0.05);FA能降低血清中cTnT、CK-MB、TNF-α、IL-6水平、心肌组织病理评分、心肌组织中MDA含量、MPO活性,NF-κB、TGF-β1 mRNA水平和蛋白平均积分吸光度,提高血清中IL-10水平及心肌组织中SOD活性。结论:FA可缓解RIHD心肌组织炎症损伤,可能与抑制NF-κB/TGF-β1信号通路有关。

TGF-β1上调LSD1表达激活ERK/NF-κB p65通路促进胃癌增殖的实验研究

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)上调赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)表达激活下游细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)/核因子κBp65(NF-κB p65)信号通路促进胃癌细胞增殖的作用机制。方法利用外源性人重组TGF-β1作用于人胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901、AGS和正常胃黏膜细胞系GES-1。MTT法检测各组细胞增殖活性。Western blotting法检测LSD1蛋白表达。将MGC-803细胞分为5组:空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+TCP(LDS1抑制剂)组、TGF-β1+SIS3(SMAD3抑制剂)组、TGF-β1+SCH772984(ERK1/2抑制剂)组。Western blotting法检测p-SMAD2、p-SMAD3、p-ERK1/2、p-p65蛋白和核p65蛋白表达。采用免疫荧光染色法检测p65在细胞核中的定位。结果TGF-β1可促进MGC-803、SGC-7901、AGS细胞的增殖活性,且上调LSD1蛋白表达,呈浓度和时间依赖性。与TGF-β1组比较,TGF-β1+TCP组MGC-803细胞LSD1蛋白表达下调,增殖抑制率降低(P<0.05)。与空白对照组比较,TGF-β1组MGC-803细胞LSD1、p-SMAD2、p-SMAD3、p-ERK1/2、p-p65和核蛋白p65蛋白表达量升高(P<0.05)。与TGF-β1组比较,TGF-β1+SIS3组LSD1蛋白表达无差异(P>0.05),TGF-β1+SCH772984组LSD1蛋白表达明显降低(P<0.05),p65蛋白核定位量也减少。结论LSD1在TGF-β1促进胃癌细胞增殖中发挥着重要作用,可能与TGF-β1上调LSD1表达与激活下游ERK/NF-κB p65信号通路,促进p65核转移有关。

人参皂苷Rg3对低密度脂蛋白诱导的肾小球系膜细胞TGF-β/Smad/NF-κB通路及细胞凋亡的影响

目的:分析人参皂苷Rg3对低密度脂蛋白(LDL)诱导人肾小球系膜细胞(HMC)转化生长因子-β/Smad/核因子kappa B(TGF-β/Smad/NF-κB)通路及细胞凋亡的影响。方法:将HMC细胞分为对照组(不做任何处理)、LDL组(40μg/ml的LDL处理)、人参皂苷Rg3低浓度组(LDL 40μg/ml+人参皂苷Rg315μmol/L)、人参皂苷Rg3中浓度组(LDL 40μg/ml+人参皂苷Rg330μmol/L)、人参皂苷Rg3高浓度组(LDL 40μg/mL+人参皂苷Rg360μmol/L)。采用MTT法检测HMC细胞增殖活性;Western Blotting法检测通路相关蛋白TGF-β、Smad2、Smad3、NF-κB以及B淋巴细胞瘤基因相关x蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)和半胱天冬酶-3(Caspase-3)细胞凋亡相关蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,LDL组HMC细胞增殖活性、TGF-β、Smad2、Smad3、NF-κB蛋白表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与LDL组相比,人参皂苷Rg3低、中、高浓度组HMC细胞增殖活性、TGF-β、Smad2、Smad3、NF-κB、Bcl-2蛋白表达水平明显降低,HMC细胞凋亡率、Bax和Caspase-3的蛋白水平明显升高,并呈浓度依赖性,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:人参皂苷Rg3可抑制LDL诱导的HMC细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与TGF-β/Smad/NF-κB信号通路密切相关。

六味地黄丸通过调控NF-κB及TGF-β/Smad双信号通路减轻糖尿病肾病炎症及纤维化

【目的】基于核因子kappa B(NF-κB)及转化生长因子β(TGF-β)/Smad双信号通路,观察六味地黄丸对糖尿病肾病炎症及纤维化的影响,探讨其对肾保护作用机制。【方法】将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组10只。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素法复制糖尿病大鼠模型。中药组给予大鼠六味地黄丸(剂量为6.75 g·kg-1·d-1)灌胃,正常组、模型组给予大鼠等体积生理盐水灌胃。给药12周后取材,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、24h尿蛋白量(24h-Pro),采用苏木素—伊红(HE)与Masson染色观察肾组织病理变化,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肾组织NF-κB、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、TGF-β、alpha平滑肌抗体(α-SMA)、Smad2、Smad3、Smad7的表达。【结果】生化指标结果显示:与正常组比较,模型组大鼠FBG、BUN、SCr、24h-Pro升高(P<0.01);六味地黄丸治疗后上述指标均有所改善(P<0.05)。HE与Masson染色结果显示,模型组肾小球官腔变窄、系膜基质增生及炎症细胞浸润,而中药组有所改善。Western blot结果显示:与正常组比较,模型组的NF-κB、MCP-1、TGF-β、α-SMA、Smad2、Smad3表达均呈明显上调,而Smad7表达降低(P<0.01);中药组NF-κB、MCP-1、TGF-β、α-SMA、Smad2、Smad3表达下调,Smad7表达上调(P<0.05)。【结论】六味地黄丸具有肾脏保护作用,其机制可能与通过调控NF-κB及TGF-β/Smad双信号通路,从而减轻糖尿病肾病炎症损伤和纤维化有关。

FTY-720通过TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路对小鼠肺纤维化模型的影响

目的探讨FTY-720对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法将40只无特定病原体级健康雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、博来霉素组、生理盐水+FTY-720对照组、博来霉素+FTY-720组,每组各5只,在7天、14天处死小鼠,共8组。应用HE染色和Masson染色观察肺组织炎症及肺纤维化情况;通过瑞士-吉姆萨染色计数支气管肺泡灌洗液细胞;BCA法测定BALF蛋白含量;ELISA方法检测BALF上清液中炎症因子IL-1β、TNF-α的表达水平;免疫组织化学法检测肺组织中COL1A1的表达水平;Western blot方法检测TGF-β1、p-P38 MAPK和NF-κB表达水平的变化。结果FTY-720显著降低BLM诱导增加的小鼠肺组织细胞外胶原沉积;减少小鼠肺组织BALF中IL-1β和TNF-α表达水平,和蛋白质含量、细胞数;FTY-720抑制TGF-β1活性与P38 MAPK的磷酸化,进而抑制NF-κB的表达与活化。结论FTY-720通过抑制TGF-β1/P38 MAPK/NF-κB信号通路,进而抑制博来霉素诱导小鼠的肺纤维化。

慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道重构及NF-κB/TGF-β1通路的影响

目的研究慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道重构及NF-κB/TGF-β1信号通路的影响。方法 24只Wister大鼠随机分为4组:空白对照组(A组),哮喘模型组(B组),0.9%氯化钠溶液组(C组,哮喘小鼠经鼻雾化吸入0.9%氯化钠溶液5周),烟曲霉暴露组(D组,哮喘小鼠经鼻雾化吸入烟曲霉5周),每组6只。B、C、D组采用卵清蛋白(OVA)致敏+OVA反复激发的方法建立大鼠哮喘模型。大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)涂片检测总细胞数及嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞百分比;肺组织切片HE染色观察大鼠肺组织病理改变并计算支气管周围胶原纤维面积(Wac)、气道管壁总面积(Wat)和管壁平滑肌面积(Wam),Masson染色观察气道黏膜下胶原沉积情况;采用Western blot检测肺组织中NF-κB、TGF-β1蛋白表达。结果与B、C组比较,D组大鼠肺组织出现黏膜褶皱增多,部分黏膜上皮脱落,黏膜下水肿,支气管管腔内炎性细胞增多,支气管黏膜下及支气管管壁血管周围炎性细胞浸润程度加重;与B、C组比较,D组总细胞计数、嗜酸性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比及Wat、Wam、Wac均明显升高(P<0.05);D组Ⅰ型胶原纤维、Ⅲ型胶原纤维平均IDO值和胶原纤维厚度明显大于B、C组(P<0.05),肺组织胶原沉积程度加重;D组NF-κB、TGF-β1蛋白表达高于B、C组(P<0.05)。结论慢性烟曲霉暴露促进嗜酸粒细胞等炎症细胞活化和胶原沉积,加重哮喘大鼠气道重构,其作用机制可能与持续激活NF-κB/TGF-β1信号通路有关。

经筋微创松解疗法联合嘎日迪-15味丸对膝骨性关节炎患者TLR4/MyD88/NF-κB信号转导通路及TGF-β_1水平的影响

目的:探讨经筋微创松解疗法联合嘎日迪-15味丸对膝骨性关节炎(KOA)患者TLR4/MyD88/NF-κB信号转导通路及转化生长因子β_1(TGF-β)1水平的影响。方法:将KOA患者98例(98膝)随机分为2组各49例,对照组给予嘎日迪-15味丸治疗,实验组在对照组基础上给予经筋微创松解疗法,疗程均为2个月;观察2组治疗效果,比较2组治疗前后膝关节WOMAC评分、关节液中前列腺素E_2(PGE)2、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、TGF-β_1水平、关节软骨中Toll样受体4 (TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核因子κB (NF-κB)蛋白表达。结果:总有效率实验组为89.90%,对照组为71.43%,2组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗后2组功能、关节疼痛、僵硬等评分均较治疗前降低(P <0.05),且实验组各项评分均低于对照组(P <0.05)。治疗后2组关节积液TGF-β_1、PGE_2、MMP-9水平均较治疗前降低(P <0.05),且实验组各项指标水平均低于对照组(P <0.05)。治疗后2组关节软骨MyD88、TLR4、NF-κB蛋白表达水平较治疗前降低,且实验组各项指标水平均低于对照组(P <0.05)。结论:经筋微创松解疗法联合嘎日迪-15味丸治疗KOA疗效显著,其作用机制可能与降低MyD88、TLR4、NF-κB蛋白表达及TGF-β_1、PGE_2、MMP-9水平有关。

TGF-β1通过NF-κB上调成骨细胞自噬的作用

目的探讨TGF-β1、NF-κB通路与自噬间关系,为进一步了解牙齿萌出通道形成过程中骨动态平衡调节机制提供新的实验依据。方法按照加入NF-κB通路阻断剂SN50和TGF-β1浓度不同,将成骨细胞分为以下12组:NC组:无SN50+无TGF-β1;KD1组:无SN50+TGF-β1(0.01ng/ml);KD2组:无SN50+TGF-β1(100ng/ml);KD3组:SN50(6.25μg/ml)无TGF-β1;KD4组:SN50(6.25μg/ml)+TGF-β1(0.01ng/ml);KD5组:SN50(6.25μg/ml)+TGF-β1(100ng/ml);KD6组:SN50(12.25μg/ml)+无TGF-β1;KD7组:SN50(12.25μg/ml)+TGF-β1(0.01ng/ml);KD8组:SN50(12.25μg/ml)+TGF-β1(100ng/ml);KD9组:SN50(25μg/ml)+无TGF-β1;KD10组:SN50(25μg/ml)+TGF-β1(0.01ng/ml);KD11组:SN50(25μg/ml)+TGF-β1(100ng/ml)。单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)法检测自噬小体形成,Simple Western assays法检测LC3a蛋白表达。结果NF-κB通路未被阻断时,TGF-β1可以上调成骨细胞自噬功能,但与浓度无显著相关性。浓度为25μg/ml SN50阻断NF-κB信号通路后成骨细胞自噬功能明显低于对照组,此时,再次加入TGF-β1不能上调成骨细胞自噬水平。结论TGF-β1可能通过NF-κB影响成骨细胞的自噬功能,具体分子调控机制需进一步研究。

中药通过调控不同信号通路治疗糖尿病肾脏疾病机制研究进展

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病引起的慢性微血管病变之一,多发于糖尿病患者,以大量蛋白尿、高血压、水肿等为主要临床表现,其中30%~40%的患者会进展至终末期肾病。中药在改善肾脏疾病的临床症状、保护肾功能等方面优势明显,通过总结近年来中药对核因子κB(NF-κB)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、酪氨酸激酶/信号转导与转录激活因子(JAK/STAT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β/Smad(TGF-β/Smad)等信号通路的调控,以期阐明中药治疗DKD的作用机制,为中药治疗DKD提供更多理论支持。但是,当前中药治疗DKD的分子作用机制仅局限于动物或细胞水平的研究,缺乏临床实践研究,未来需要进一步紧密结合临床,注重成果转化,使中药防治DKD体系更为完善。

上调miR-181a抑制香烟提取物诱导的支气管上皮细胞致炎因子生成与collagen IV、fibronectin和α-SMA表达

目的:探讨微小RNA-181a(miR-181a)对香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells, HBECs)致炎因子生成与IV型胶原蛋白(collagen IV)、纤连蛋白(fibronectin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,并分析其可能的机制。方法:RT-qPCR检测CSE诱导下HBECs中miR-181a的表达情况。转染miR-181a mimic后经ELISA检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的水平;Western blot检测collagen IV、fibronectin和α-SMA的表达;并进一步评估NF-κB/TGF-β1/Smad3信号通路的活性。结果:CSE可显著增加HBECs中致炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和TGF-β1的生成,显著上调collagen IV、fibronectin和α-SMA的表达,同时细胞内miR-181a的表达明显降低(P<0.05);转染miR-181a mimic可显著抑制CSE诱导的HBECs致炎因子生成及collagen IV、fibronectin和α-SMA表达(P<0.05)。此外,Western blot的结果显示转染miR-181a mimic可抑制CSE诱导的NF-κB/TGF-β1/Smad3信号活性(P<0.05)。结论:上调miR-181a表达可部分逆转CSE诱导的HBECs致炎因子的释放及collagen IV、fibronectin和α-SMA表达,其作用机制可能与抑制NF-κB/TGF-β1/Smad3信号通路的活化有关。

大黄[庶虫]虫丸经p38 MAPK/NF-κB/TGF-β1通路抑制小鼠硅肺纤维化的机制探讨

目的:运用中医经方大黄[庶虫]虫丸干预小鼠硅肺纤维化模型,观察其对小鼠硅肺纤维化的影响并探讨其作用机制。方法:选用SPF级雄性昆明种小鼠36只,分为正常组,模型组,大黄?虫丸高、中、低剂量(1.560,0.780,0.390 g·kg^(-1))组,汉防己甲素组(0.039 mg·kg^(-1)),每组6只。除正常组外,其余组均用静式染毒法连续40 d吸入二氧化硅(SiO2)粉尘复制小鼠硅肺纤维化模型,并用相应药物进行干预28 d后处死小鼠,获得血清和肺组织样品,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL^(-1)β),IL-6和羟脯氨酸(HYP)的含量,运用肺组织样本进行病理切片观察,并采用蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测肺组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),核转录因子-κB(NF-κB),转化生长因子-β1(TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Smad2,Smad3,Smad7的蛋白和mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组中的TNF-α,IL^(-1)β,IL-6和HYP的含量均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,大黄[庶虫]虫丸高剂量组能够明显降低小鼠血清中TNF-α,IL-6和HYP的含量(P<0.05,P<0.01),可见大黄[庶虫]虫丸能够减轻硅肺小鼠肺部炎症。同时,与正常组比较,模型组中的p38 MAPK,NF-κB p65,TGF-β1,α-SMA,Smad2和Smad3蛋白和mRNA表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),Smad7蛋白和mRNA表达水平均显著降低(P<0.01);与模型组比较,大黄?虫丸高剂量组中的p38 MAPK,NF-κB p65,TGF-β1,α-SMA,Smad2和Smad3蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),Smad7蛋白和mRNA表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:大黄[庶虫]虫丸能改善硅肺小鼠肺泡炎症、细胞外基质沉积的情况,因而起到减轻纤维化的作用,这可能是通过调节p38 MAPK/NF-κB/TGF-β1通路来实现的。

黄酮类化合物对免疫相关信号通路的调控作用研究进展

黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、保护心血管、降压、抗菌、抗病毒和抗肿瘤等多种生物活性和药理作用。近年来,黄酮类化合物的免疫调节作用也引起了相关研究人员的重视,论文就黄酮类化合物对免疫相关信号通路(NF-κB信号通路、Toll样受体和JAK-STAT信号通路等)的调控作用进行总结和归纳,以期为揭示黄酮类化合物的免疫调节作用机制研究提供参考。

骨关节炎发生发展相关信号通路的研究进展

骨关节炎(OA)是以关节进行性退变为特征,以关节疼痛为主要临床表现的退行性疾病。在OA的发生发展过程中各种信号通路起到重要作用,目前研究较多的有MAPK信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路、TGF-β信号通路、NF-κB信号通路及mTOR信号通路。以上信号通路多可被外界刺激激活,在炎性反应的调控、软骨细胞及细胞外基质的代谢调节中起重要作用。通过对这些信号通路的研究,寻找通路上游或下游的关节效应因子,可为OA提供更加行之有效的治疗方法。

TGF-β/Smad、MAPK/ERK、NF-κB信号通路对肝纤维化的影响

肝纤维化是肝脏对各种慢性肝损伤的自身病理修复过程,是发展为肝硬化的必经阶段。本文介绍了TGF-β/Smad信号通路、MAPK信号通路、NF-κB信号通路在肝纤维化发生发展过程中的重要作用。