紫草素对糖尿病周围神经病变大鼠的治疗作用及对腺苷酸活化蛋白激酶/核因子E2相关因子2信号通路的影响

目的:探究紫草素对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的治疗作用及对腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响。方法:构建DPN模型,将建模成功的48只大鼠随机分为模型组、紫草素低剂量组、紫草素高剂量组和甲钴胺片组,每组12只。另取12只大鼠作为对照组。紫草素低、高剂量组大鼠分别给予12.5、25 mg/kg紫草素灌胃,甲钴胺片组大鼠给予0.14 mg/kg甲钴胺片灌胃,对照组和模型组大鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,每日给药1次,连续8周。观察各组大鼠坐骨神经病理学变化。检测大鼠坐骨神经感觉神经传导速度(SNCV)和运动神经传导速度(MNCV),血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β,坐骨神经超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、AMPK、Nrf2 mRNA和蛋白水平。结果:对照组大鼠坐骨神经结构正常;模型组大鼠坐骨神经髓鞘变薄,出现白色结缔物质,间隙加宽,可见明显炎症细胞浸润;紫草素低、高剂量组大鼠坐骨神经病变程度依次减轻;甲钴胺片组和紫草素高剂量组大鼠坐骨神经病理学变化无明显差异。与对照组比较,坐骨神经SNCV和MNCV、血清SOD水平以及坐骨神经AMPK、Nrf2 mRNA和蛋白水平显著降低,血清TNF-α、IL-6及坐骨神经MDA水平显著升高(均P<0.05)。与模型组比较,坐骨神经SNCV和MNCV、血清SOD水平以及坐骨神经AMPK、Nrf2 mRNA和蛋白水平依次升高,血清TNF-α、IL-6及坐骨神经MDA水平依次降低(均P<0.05)。甲钴胺片组和紫草素高剂量组上述各项指标比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:紫草素能抑制DPN大鼠炎症反应和氧化应激,保护大鼠坐骨神经,其机制可能与激活AMPK/Nrf2信号通路有关。

补充大豆蛋白对大鼠离心运动后骨骼肌细胞骨架Desmin和Vimentin的影响

目的:观察补充蛋白质对骨骼肌细胞骨架desmin和vimentin免疫染色的影响,研究蛋白质对运动性骨骼肌微结构损伤的保护作用。方法:雄性SD大鼠100只按补充安慰剂、大豆分离蛋白,运动与不运动,以及运动后即刻、12 h、24 h和48 h等不同时间随机分为10组,所有动物膳食平衡1 w后进行实验。运动组大鼠以(20±1)m/min的速度,坡度为-16°,持续性跑台训练120 min。实验组和对照组所有动物在膳食平衡期间每天分别灌胃15%大豆分离蛋白2 ml和等量的纯净水。结果:补充大豆分离蛋白可减轻大鼠离心运动后骨骼肌细胞骨架desmin免疫染色的丢失,增强vimentin免疫染色。

北京地区对卷曲霉素和阿米卡星耐药结核分枝杆菌的rrs和tlyA基因突变研究

目的探讨北京地区结核分枝杆菌卷曲霉素（Cm）和阿米卡星（Am）耐药与rrs基因和ayA基因突变相关性。方法采用比例法对保存的临床菌株进行Cm和Am药敏试验测定，并对其中的临床菌株rrs基因和tlyA基因进行PCR、测序分析。筛选得到了10株Am耐药菌株、25株Cm耐药菌株、15株Am和Cm交叉耐药菌株，并选择了30株敏感菌株作为对照分析。数据采用SPSS17．0进行统计分析，组间率的比较采用Fisher精确概率法检验，P〈0．05为差异有统计学意义。结果tlyA基因突变结果显示，Cm耐药菌株有6株突变（24．0％，6／25），与敏感菌株相比差异有统计学意义（P〈0．05），Am耐药菌株、Am和Cm交叉耐药菌株与敏感菌株相比差异无统计学意义（P〉0．05）；在rrs基因检测中，Am耐药、Cm耐药、Am和Cm交叉耐药突变率分别有30．0％（3／10）、8．0％（2／25）和26．7％（4／15），敏感菌株中也有10．0％（3／30）突变株，3组耐药菌株与敏感菌株比较，差异均无统计学意义（F=2．353、0．06、1．161，P值均〉0．05）。在3组中，rrs基因A1401G突变位点突变比例分别是10．0％（1／10）、8．0％（2／25）和13．3％（2／15），1株在Am和Cm交叉耐药双位点突变，共计6株A1401G位点突变菌株，与敏感菌株比较无统计学意义（P〉0．05）。另一突变位点C1402T在Am、Am和Cm交叉耐药中各1株。结论结核分枝杆菌tlyA基因可能与Cm耐药相关，与Am耐药不相关；rrs基因A1401G和C1402T突变可能与Am和Cm交叉耐药有关。

脑胶质瘤p53基因突变与临床病理的关系

[目的]探讨p53突变在脑胶质瘤发生发展中的作用及其与临床病理特征的关系。[方法]利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR鄄SSCP)及LSAB免疫组化法对已确诊的48例脑胶质瘤进行p53基因突变以及蛋白表达的检测。[结果]48例胶质瘤中p53蛋白阳性表达率41.7%(20/48)。在高级别(Ⅲ、Ⅳ级)中p53表达率明显高于低级别(Ⅱ级)的肿瘤,分别是63.2%、27.6%(P<0.05)。PCR鄄SSCP检测发现17例(35.4%)呈现p53基因突变,均位于5～8外显子,突变例数依次为7(41.2%)、1(5.9%)、4(23.5%)、5(29.4%)。两种方法检测的符合率为89.6%(43/48)。p53基因的突变与患者性别、年龄、肿瘤部位及大小无关。[结论]胶质瘤中p53突变多在第5～8外显子,p53基因突变在胶质瘤的发生进展中起重要作用。

禽病原性大肠杆菌O_2和O_（78）外膜蛋白型的初步研究

从１１个禽败血症Ｏ＿２和Ｏ＿（７８）大肠杆菌分离株提取的主要外膜蛋白（ＯＭＰ＿ｓ），出现了３个ＯＭＰ型。其中６个Ｏ＿２分离株、５个Ｏ＿（７８）分离株可分别归为２个ＯＭＰ型，但有１个ＯＭＰ型为两者所共有。结果表明，从江苏地区所分离到的禽病原性大肠杆菌具有多样性的ＯＭＰ型，而且这２个血清型菌株中存在着共同的ＯＭＰ型。

Ras蛋白激活物类似物-1基因在胃癌细胞株中的表达及生物学意义

目的:研究Ras蛋白激活物类似物-1基因(Ras protein activator like-1,RASAL1)在正常胃黏膜上皮细胞、胃癌细胞株中的表达情况及其生物学意义。方法:采用RT-PCR和Western blot分别检测高分化胃腺癌细胞株MKN-28、中分化胃腺癌细胞株SGC-7901、低分化胃腺癌细胞株BGC-823和正常胃黏膜上皮细胞株GES-1中RASAL1基因在mRNA水平和蛋白水平的表达,应用基因测序法检测上述3种胃癌细胞株中K-Ras基因第一外显子第12密码子点突变情况,并分析其意义。结果:RT-PCR和Westernblot检测结果显示,与正常胃黏膜上皮细胞相比,在3种不同分化胃腺癌细胞株中,RASAL1基因的表达在mRNA水平和蛋白水平均下调(P<0.05),分化程度越低表达下调越明显;测序结果表明3种胃腺癌细胞株中均未发现K-Ras基因第一外显子第12密码子点突变。结论:RASAL1基因在含野生型K-Ras的胃癌细胞中呈低表达状态,其表达水平与胃癌的恶性程度有一定的关系。

创伤性颅脑损伤标志物的研究进展

创伤性颅脑损伤(TBI)严重危害人类的生活和健康,在众多创伤性疾病中最易引起患者残疾和死亡。如何客观、快速、准确、早期对TBI做出诊断和严重程度分级,对TBI的临床治疗和预后起着重要作用。颅脑损伤标志物在损伤早期就可出现在血清和脑脊液中,其敏感性和特异性往往比影像学检查更具优势。现就常见的TBI标志物研究现状和实际应用情况予以综述。

尿毒症脑病腹膜透析前后神经胶质纤维酸性蛋白变化与影像学评价

目的 通过检测腹膜透析前后血清神经胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic potein,GFAP）水平的变化联合头颅磁共振（MRI）影像学比较评估腹膜透析治疗尿毒症脑病（uremic encephalopathy,UE）的疗效和预后.方法 将未进行过透析治疗的慢性肾功能衰竭（chronic renalfailure,CRF）患者按有无中枢神经系统异常分为UE组和尿毒症对照组,并选择来自同期门诊健康体检的人群作为健康对照组.UE组和尿毒症对照组在腹膜透析治疗前及治疗后1周、2周、4周分别测定血清GFAP水平和行头颅MRI检查.结果 治疗前,UE组血清GFAP水平高于尿毒症对照组和健康对照组（均P＜0.01）;UE组中检出MRI异常信号灶的患者占18/38（47.4％）,尿毒症对照组中检出MRI异常信号灶的患者占2/40（5％）,2组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）.随着腹膜透析的进行,UE组血清GFAP水平逐渐下降,头颅MRI异常信号逐渐减轻.至治疗后4周,UE组血清GFAP水平基本降至正常水平,大部分患者中枢神经系统损害的症状完全消失,仅有5例患者遗留有轻度的认知功能减退,5例中其中4例（占10.5％）患者遗留有长T1长T2信号.结论 血清GFAP水平联合头颅MRI影像学比较可以作为临床上评估UE患者神经系统损害程度及透析治疗的疗效和预后的有效手段之一.

两种方法检测分娩期孕妇解脲支原体、沙眼衣原体宫内感染的分析

目的 了解分娩期孕妇解脲支原体 (Uu)、沙眼衣原体 (CT)感染的发病率及其对不良妊娠结局的影响。方法 采用PCR方法检测宫颈分泌物、羊水配对标本Uu、CT -DNA ,及蛋白芯片方法检测孕妇空腹血清、脐动脉血血清配对标本Uu、CT—IgG抗体。结果 1 1 6例分娩期孕妇宫颈分泌物Uu、CT的阳性率分别是 37 93% ,5 1 7% ,而羊水中Uu、CT的检出率为 0 %。孕妇血清Uu、CT感染率分别是 38 1 4 % ,1 4 6 6 % ,脐动脉血血清Uu、CT阳性率 1 9 83% ,6 90 % ,血行性宫内感染垂直传播率约为 5 0 %。Uu或CT阳性组孕妇胎膜早破、胎儿宫内窘迫、相对性脐带过短发生率显著高于Uu和CT阴性组孕妇 (P <0 0 5 )。结论 分娩期孕妇Uu和CT感染与胎膜早破、胎儿宫内窘迫、脐带缠绕有关。Uu、CT蛋白芯片方法是一种检测Uu、CT感染的新方法 ,值得临床推广应用。

鹅细小病毒国内分离株主要结构蛋白(VP2-VP3)基因的克隆和序列分析

根据国外已发表的鹅细小病毒 (GPV) A株基因组核苷酸序列设计了一对引物 ,对国内两株鹅细小病毒毒株 (GPV CC株 )和 (GPV FS株 )主要结构蛋白 (VP2 - VP3)基因进行 PCR扩增 ,并克隆到p CR3.1T载体 ,分别获得正向、反向连接重组质粒 p VPC1、p VPC2和 p VPF1、p VPF2 ,经酶切鉴定筛选出阳性克隆质粒并进行核苷酸序列分析比较 ,序列分析结果表明 :GPV CC株和 GPV FS株 VP2 - VP3的核苷酸大小分别为 176 4bp和 176 3 bp,其中 GPV CC株与 A株同源性达到 98.9% ;GPV FS株缺失一个碱基 ,与 A株同源性为 93.5 % ,与 GPV CC株同源性为 93%。

陇东旱塬区机械粒收玉米新品种品质分析

为筛选出适合陇东旱塬区机械籽粒直收的优质丰产玉米新品种,采用DA7200型近红外品质分析仪对平凉市泾川县高平玉米籽粒机械直收试验的20个玉米品种的籽粒进行了蛋白质、脂肪和淀粉含量测定。结果表明,有13个品种的蛋白质、脂肪和淀粉含量都达到了国家级玉米品种审定标准,其中MC703、新玉108、瑞普909、联创825、先玉698、MC618和京科999在淀粉和蛋白质含量较高的同时,脂肪含量也比较高,淀粉、蛋白质和脂肪含量3个指标比国家级玉米品种审定标准分别高1.45%~3.33%、7.50%~21.25%和16.67~43.33%。结合产量和籽粒机械粒收指标数据,从参试品种中筛选出3个品质指标均较高且适宜旱塬区机械粒收的丰产优质玉米新品种是可行的。

灵芝孢子粉对PTZ致痫大鼠神经细胞野生型p53表达的影响

目的观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马野生型p53(wtp53)蛋白表达的影响。方法将60只成年SD大鼠随机分为空白对照组,癫痫模型组,灵芝孢子粉用药高、中、低剂量组共5组。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药各组大鼠腹腔注射亚惊厥剂量的PTZ35mg/(kg.d),直至达到点燃标准;用药组以灵芝孢子粉灌胃。采用免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区wtp53蛋白的免疫反应性。结果大鼠海马CA1区wtp53蛋白表达模型组明显高于对照组(P<0.01);用药高剂量组wtp53蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论灵芝孢子粉能明显抑制wtp53蛋白的表达,可能是其对癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制,从而是对脑组织起保护作用的分子机制之一。

营养因素与蛋白质周转(综述)

本文就有关营养因素对蛋白质周转的影响做了综述,主要讨论了营养水平、蛋白质和能量采食量、氨基酸平衡、饲粮纤维素及补偿生长与蛋白质周转的关系。同时,也讨论了部分营养因素对蛋白质周转影响的机理,并指出了目前存在的部分问题。

延边黄牛饲养标准的研究

通过延边黄牛绝食、维持能量代谢试验、消化和代谢试验、饲养试验、泌乳性能试验、役用性能，并参照美国ＮＲＣ饲养标准、韩牛饲养标准及我国肉牛、奶牛饲养标准，制定了延边黄牛维持、妊娠、产奶、生长、育肥、役用牛的干物质采食量、能量、蛋白质、矿物质、维生素的需要量。

+Gz暴露对大鼠大脑皮层HSP70蛋白表达的影响

目的:观察+G z暴露对大鼠大脑皮层HSP70蛋白表达水平的影响,探讨+G z暴露致脑损伤的机理。方法:100只SD大鼠随机分为对照组,+2 G z暴露组,+6 G z暴露组,+10 G z暴露组,各组在G暴露后的6 h、1、2、4、6 d处死,免疫组织化学方法观察大鼠脑皮层HSP70蛋白表达情况,并对结果进行统计分析。结果:3个+G z暴露组的HSP70蛋白表达水平均显著高于对照组;不同G值之间的比较表明,+6 G z组HSP70蛋白表达水平最高,+10 G z组最低。结论:+G z暴露对大鼠大脑皮层HSP70蛋白表达水平有显著影响。

北京地区对卷曲霉素和阿米卡星耐药结核分枝杆菌的rrs和tlyA基因突变研究

目的探讨北京地区结核分枝杆菌卷曲霉素（Cm）和阿米卡星（Am）耐药与邢基因和ayA基因突变相关性。方法采用比例法对保存的临床菌株进行Cm和Am药敏试验测定，并对其中的临床菌株rrs基因和tlyA基因进行PCR、测序分析。筛选得到了10株Am耐药菌株、25株Cm耐药菌株、15株Am和Cm交叉耐药菌株，并选择了30株敏感菌株作为对照分析。数据采用SPSS17．0进行统计分析，组间率的比较采用Fisher精确概率法检验，P〈0．05为差异有统计学意义。结果tlyA基因突变结果显示，Cm耐药菌株有6株突变（24．O％，6／25），与敏感菌株相比差异有统计学意义（P〈0．05），Am耐药菌株、Am和Cm交叉耐药菌株与敏感菌株相比差异无统计学意义（P〉0．05）；在m基因检测中，Am耐药、Cm耐药、Am和Cm交叉耐药突变率分别有30．0％（3／10）、8．0％（2／25）和26．7％（4／15），敏感菌株中也有10．0％（3／30）突变株，3组耐药菌株与敏感菌株比较，差异均无统计学意义（F=2．353、0．06、1．161，P值均〉0．05）。在3组中，Ⅲ基因A1401G突变位点突变比例分别是10．0％（1／10）、8．0％（2／25）和13．3％（2／15），1株在Am和Cm交叉耐药双位点突变，共计6株A1401G位点突变菌株，与敏感菌株比较无统计学意义（P〉0．05）。另一突变位点C1402T在Am、Am和Cm交叉耐药中各1株。结论结核分枝杆菌tlyA基因可能与Cm耐药相关，与Am耐药不相关；rrs基因A1401G和C1402T突变可能与Am和Cm交叉耐药有关。

葵花盘粉有效成分对小鼠高尿酸血症的治疗作用

目的:探讨葵花盘粉主要成分小分子肽、生物碱、总黄酮和多糖等对小鼠高尿酸血症的治疗作用,阐明葵花盘粉对小鼠血尿酸(UA)水平和大鼠关节肿胀的影响及对肝和肾组织的保护作用。方法:取昆明雄鼠96只,随机分为8组,各组12只,一组为空白对照组,其余用作高尿酸血症模型制备。高尿酸血症模型造模成功的小鼠随机分为模型组、阳性对照(别嘌醇)组、小分子肽组、生物碱组、总黄酮组、多糖组和葵花盘粉组,分别灌胃给药,给药7d后检测各组小鼠血UA水平;取每组小鼠肝和肾组织,采用HE染色法观察各组小鼠肝和肾组织形态表现。在雄性SD大鼠膝关节腔注射3mg尿酸钠,建立大鼠急性痛风性关节炎模型。实验分为空白组、模型组、阳性对照药秋水仙碱组、不同浓度(0%、20%、40%、60%、80%和100%)乙醇葵花盘提取物(SDE)组,每组4只。分别测定0、12、24和48h大鼠关节周长。采用ELISA试剂盒检测各组大鼠血清中相关炎症因子白细胞介素10(IL-10)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)水平。结果:与模型组比较,别嘌醇组、小分子肽组、生物碱组、总黄酮组和葵花盘粉组小鼠血UA水平均在给药后明显降低(P<0.05),其中别嘌醇组小鼠血UA水平降低最大,小分子肽组次之。HE染色观察,小分子肽组小鼠肝小叶内肝细胞及肝细胞索清晰,肝细胞胞质饱满,且肾细胞与空白对照组比较未见异常。注射尿酸钠48h后,与模型组比较,SDE组大鼠关节肿胀度最多减少27.1%。与模型组比较,20%SDE组大鼠血清IL-10水平明显升高(P<0.01),血清中MIP-1α水平亦明显升高(P<0.01)。结论:葵花盘粉可降低血UA水平,并对肝和肾组织有一定的保护作用,且可通过提高机体抗炎活性降低机体炎症反应,实现抗痛风性关节炎活性的作用。

INDUCTION OF ANTI-HMW-MAA IMMUNITY BY ANTI-IDIOTYPIC MAB MK2-23-IL-2 FUSION PROTEIN

The rusion or IL-2 to anti-id mAb MK2-23 which bears the internal image or human highmolecular weight melanoma-associated antigen (HMW-MAA) was used to immunize a group ofBALB/c mice. The results demonstrate that the rusion protein is capable or eliciting significant levelsof specific Abs against HMW-MAA without use of carrier proteins or adjuvants. The rusion proteinwith or without conjugating to KLR appear to be uniqu, in its ability to induce high titers of anti-anti-idAbs, whereas the mAb MK2-23 in combination with IL-2 did not. We conclude that anti-idMK2-23-IL-2 fusion protein is a potential immunogeu eliciting significant anti-tumor immunity.

浑浊尿对尿液分析仪测定蛋白的影响

目的探讨如何降低浑浊尿对尿液分析仪测定蛋白时的影响。方法由一位技术熟练的技师将各种不同蛋白浓度的浑浊尿各30例,置室温用水平式离心机以2000r/min离心10min后,取其上清液按标本顺序编排好,用尿液分析仪测定。结果浑浊尿离心前后检测结果明显不同,原蛋白+++者阴性结果占73%,原蛋白++者阴性结果占70%,原蛋白+者阴性结果占60%。而没有浑浊的尿,离心对其蛋白检测基本没什么影响。结论尿液分析仪测定浑浊尿蛋白结果有明显偏差,采用离心沉淀可大大地排除其影响,具有可行性,能够减少假阳性结果,对临床分析有实际意义。

酵母双杂交系统筛选和验证与RARα-V相互作用的蛋白

目的利用酵母双杂交技术筛选与RARα-V相互作用的蛋白，研究RARα-V的作用靶点及其生物学功能。方法构建诱饵质粒pGBKT7-RARα-V，利用酵母双杂交技术从K562细胞cDNA文库中筛选与RARα-V相互作用蛋白的基因序列，并通过酵母回转试验与GST pull-down技术进行验证。结果成功构建诱饵质粒，且没有毒性、渗漏和自激活现象；利用酵母双杂交技术筛选到16个能与RARα-V相互作用的蛋白质；经酵母回转试验得到8个阳性克隆；并经GST pull-down技术在体外验证了RARα-V与JTV-1蛋白的相互作用。结论在细胞内RARα-V与多种蛋白有相互作用，白血病的发病机制可能与这些蛋白相互作用所致的生物学功能改变有关。