荔枝核总黄酮对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞内NF-κB、α-SMA表达的影响

目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝星状细胞T6(HSC-T6)细胞增殖的影响及其相关分子机制。方法 0.25%胰蛋白酶消化收集细胞,用含10%FBS的DMEM+5μg/L TGF-β1培养液配成单细胞悬液。(1)MTT法检测细胞增殖活力。将细胞接种于96孔培养板中,设TGF-β1组,对照组(含5‰DMSO),TFL80、160、320、640、800组(80、160、320、640、800 mg/L TFL),每组设3个复孔。加药24、48、72 h后,采用酶标仪测定490 nm处各孔吸光度(A)值并计算细胞抑制率;根据半数抑制质量浓度(IC50)确定后续实验的药物浓度组及药物作用时间。(2)采用PCR和Western blot分别检测HSC-T6细胞核转录因子(NF)-κB、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白的表达。将细胞接种于10 cm培养皿中,设TGF-β1组,对照组(含5‰DMSO),TFL125、250、500组(125、250、500 mg/LTFL),分组培养48 h后测定。结果同一作用时间点,随着TFL浓度的增高,HSC-T6细胞的A值基本逐渐降低,细胞抑制率逐渐上升。TGF-β1组NF-κB、α-SMA mRNA和蛋白表达量与对照组差异均无统计学意义,TFL125组与TGF-β1组、对照组差异均无统计学意义。随着TFL浓度的增高,HSC-T6细胞NF-κB、α-SMA mRNA和蛋白表达量基本逐渐降低。结论 TFL可抑制活化的HSC-T6细胞增殖,其可能通过抑制NF-κB、α-SMA的表达来发挥抗肝纤维化作用。

荔枝核总黄酮治疗胆汁淤积性肝纤维化大鼠的实验研究

核因子κB（NF-κB）是一个多功能核转录因子[1]。最近研究结果表明,NF-κ B在肝纤维化的发生和发展过程中起着至关重要的作用。本课题组前期研究结果显示,荔枝核总黄酮（TFL）对胆汁淤积性肝纤维化大鼠有较好的抗纤维化作用。本研究采用胆总管结扎术制备继发性胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型,观察不同剂量的TFL对肝脏NF-κB蛋白表达的影响,探讨其治疗胆汁淤积性肝纤维化大鼠的分子靶向机制。

石柑子总黄酮的超声波提取及抗氧化活性的研究

研究超声波萃取石柑子总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性。通过正交试验设计确定了石柑子总黄酮超声波萃取的最佳条件,用DPPH法研究石柑子总黄酮对自由基的清除作用。最佳提取工艺为甲醇体积分数50%,固液比1∶25(g/mL),提取功率为135 W,提取时间40 min,总黄酮的提取率为1.65%。石柑子总黄酮对DPPH的清除率随质量浓度增大而增大,随时间增大而增大,90 min后清除率基本不变,IC50为3.65×10-2 mg/mL。超声波萃取石柑子总黄酮的工艺便捷、效率高;石柑子总黄酮对DPPH·有较好的清除能力,具有较强的抗氧化活性。