白花前胡及前胡甲素对心肌缺血再灌注大鼠IL-6水平及Fas、bax、bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究中药白花前胡及其有效成分对缺血再灌注心肌IL-6水平及凋亡相关蛋白表达的影响。方法:开胸麻醉大鼠左冠状动脉前降枝经30 min缺血及120 min再灌注;放射免疫法测定血清IL-6水平;免疫组化法和计算机图像分析系统检测心肌Fas,bax及bcl-2蛋白表达;苏木精-依红染色法于光镜下观察嗜中性白细胞浸润。结果:白花前胡粗提物及前胡甲素(Pd-Ia)在降压和不影响心率的情况下,减少IL-6水平及Fas,bax,bcl-2蛋白的表达,增加bcl-2/bax的比率。IL-6水平与Fas,bax,bcl-2蛋白表达之间呈密切的线性正相关,而嗜中性白细胞只有轻微浸润。结论:白花前胡及Pd-Ia在防治缺血后心肌细胞死亡上显现新靶位,原因可能与心肌缺血再灌注期间机体自身调控即早基因IL-6,Fas,bax,bcl-2的表达有关。

白花前胡乙素通过SREBP1c/FASN信号通路抑制卵巢癌SK-OV-3细胞增殖的作用

目的研究白花前胡乙素抑制卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的作用及机制。方法通过CCK-8细胞活力检测法对不同浓度的白花前胡乙素作用24、48 h对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的影响;划痕实验考察20、40、60μmol/L白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3迁移的影响;20、40、60μmol/L白花前胡乙素给药作用24 h后,RT-qPCR检测c-Myc、细胞周期蛋白(Cyclin)D1等增殖基因mRNA的表达水平及胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1c、脂肪酸合成酶(FASN)等肿瘤细胞能量代谢关键基因mRNA的表达水平;Western印迹检测SREBP1c、FASN等蛋白的表达水平。结果不同浓度的白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖均具有抑制作用,且随着白花前胡乙素浓度升高,作用时间增长,对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的抑制作用增强;20、40、60μmol/L白花前胡乙素给药作用后能够抑制卵巢癌细胞SK-OV-3迁移,降低c-Myc、CyclinD1 mRNA基因表达效果,同时使其蛋白表达水平在一定程度上被降低。结论白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖具有抑制作用,其作用机制可能是通过SREBP1c/FASN信号通路调节卵巢癌细胞SK-OV-3能量代谢从而抑制其增殖。

两步晶化制备高性能a&b取向T型沸石膜

采用廉价的大孔α-Al2O3作为载体,通过二次晶种诱导+两步变温水热合成工艺,成功制备出薄而致密的高性能T型沸石膜。该方法能够充分发挥晶种的诱导成核作用,通过改变两阶段水热晶化温度和时间来控制晶种外延生长和晶体生长方向,最终获得了连续、无缺陷的a&b取向T型沸石膜。实验过程中详细考察了第一阶段的晶化温度、晶化时间以及第二阶段的晶化温度对沸石膜表面结构和性能的影响,并将最优两步晶化条件下制备的膜用于90wt%的异丙醇/水渗透汽化分离,在75℃下膜的通量为3.84 kg·m-2·h–1,分离因子大于10000。

艰难梭菌毒素A＆B测定在医院腹泻患者中的应用价值研究

目的研究艰难梭菌毒素A＆B（CDAB）测定在医院腹泻患者中的应用价值。方法 54例住院后出现腹泻的患者,均采取CDAB检测试剂与VIDAS分析仪进行粪便标本的毒素检测,结合患者的临床资料、治疗情况及细菌常规培养结果进行综合性分析。结果 54例患者经检测后,有9例患者检测出艰难菌毒素阳性,并且检测结果均与患者的临床诊治相符。9例CDAB阳性患者中,2例为神经外科患者、2例为风湿科患者、2例为肿瘤科患者、2例为脊柱外科患者、1例为儿科患儿,其年龄10~64岁,TV值为0.53~3.98。结论对腹泻患者进行艰难梭菌毒素A＆B测定具有重要的临床价值,CDAB检测试剂与VIDAS分析仪检测操作简单便捷、检测结果准确且快速,值得临床推广。

语义结构复杂异常的语符“A and B”

“AandB”是最常见的词组形式 ,也是最简单的常用组词结构。对其作语法分析很容易 。

前胡丙素对Ang II致离体血管平滑肌细胞肥厚及胞内钙、NO含量和信号转导的影响

目的 前胡丙素 (Pra C)对血管紧张素II(AngII)致离体培养大鼠血管平滑肌细胞 (SMCs)肥厚模型胞内游离钙浓度、NO含量和信号转导的影响。方法 以AngII刺激SMCs形成肥厚模型 ,用倒置显微镜测定SMCs面积 ;用Fura 2 AM测定单细胞内 [Ca2 + ]i,Griess法测定NO含量 ;在PMA和ST(PKC激动剂及抑制剂 )、PTX(Gi蛋白敏感毒素 )作用下观察Pra C对KCl和NE所致胞内 [Ca2 + ]i浓度变化的影响。结果 Pra C组SMCs细胞面积较肥厚组减小3 9 0 1% ,并接近正常细胞水平 ;NO含量明显增加 ;胞内 [Ca2 + ]i对KCl和NE激动的反应明显低于肥厚组。PMA使肥厚SMCs [Ca2 + ]i升高 ,而ST及PTX则使之降低 ,Pra C均使之恢复正常。结论 Pra C抑制AngII致体外培养细胞SMCs肥厚 ,改善肥厚细胞因PKC和Gi蛋白的信号转导改变所致的 [Ca2 + ]i改变。

前胡甲素通过PPARα抑制LPS诱导的内皮细胞的炎症反应

目的探讨前胡甲素(Pd-Ia)对脂多糖(lipopolysaccha-ride,LPS)诱导的内皮细胞中细胞因子表达的影响及其作用机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用1mg·L-1LPS和不同浓度的Pd-Ia(10,20,40μmol·L-1)孵育24 h,采用荧光实时定量PCR检测TNF-α、IL-1β、PPARs(过氧化物酶体增殖激活受体)的表达。进一步在HUVECs中采用siRNA干扰PPARα后观察Pd-Ia的抗炎效应的变化。结果①Pd-Ia可以抑制LPS诱导的内皮细胞中TNF-α、IL-1β的表达。②Pd-Ia选择性上调LPS诱导的内皮细胞中PPAR-α的表达,而对PPAR-β、PPAR-γ的表达没有影响。③采用了siRNA特异性沉默PPARα后,Pd-Ia对TNF-α、IL-1β的下调作用被一定程度的逆转。结论 Pd-Ia对LPS诱导的内皮炎症反应有抑制作用,其机制与激活PPARα有关。

基于近红外光谱技术绿色快速预测前胡中白花前胡甲素含量

目的:基于近红外光谱技术(NIRS)建立前胡中白花前胡甲素的定量模型,实现对前胡质量的绿色快速评价。方法:运用高效液相色谱法(HPLC法)测定130份前胡样品的白花前胡甲素含量并采集其漫反射NIRS光谱,采用标准正态变换(SNV)法预处理光谱,并基于最小偏二乘回归法(PLS)建立前胡中白花前胡甲素的定量校正模型。结果:此模型校正集的均方根误差和相关系数分别为0.1047和0.9380,交叉验证的均方根误差和相关系数分别为0.1230和0.9180,预测集的均方根误差和相关系数分别为0.1251和0.8815。从此模型的校正集、预测集以及交叉验证结果来看,模型具有很高的预测精度。结论:此研究使用NIRS技术所建前胡的定量模型稳定可靠,可实现对市场前胡的质量的绿色快速鉴别,并为维护消费者利益和临床使用安全性,提供了科学依据。

前胡丙素对培养心肌细胞^（45）Ca^（2＋）摄入及细胞内游离钙的影响

利用培养的乳鼠心肌细胞测定细胞４５Ｃａ２＋的摄入及细胞内游离钙的浓度。结果表明，前胡丙素（Ｐｒａ－Ｃ）１０－１００μｍｏｌ·Ｌ－１依浓度抑制４５Ｃａ２＿的摄入，并抑制由３０μｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所引起的４５Ｃｓ２＋摄入的增加，同时Ｐｒａ－Ｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素所诱发的４５Ｃａ２＿摄入的增加也有抑制作用。Ｐｒａ－Ｃ１０μｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１能抑制细胞外高钾（３０，５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高，同时Ｐｒａ－Ｃ３０ｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ－１在无钙及含ＣａＣｌ２１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的溶液中所引起的［Ｃａ２＋］，的增加也有抑制作用。提示前胡丙素对心肌细胞的作用与其阻滞钙通道有关。

前胡丙素对肾血管性高血压大鼠脑肾ATP酶活力的影响

用两肾一夹模型观察肾血管性高血压大鼠血压与脑、肾细胞膜ATP酶活力的变化及前胡丙素（PraeruptorinC，Pra－C）对上述变化的影响。两肾一夹术后16周大鼠血压由（14．7±1．3）升至（27．1±1．8）kPa，脑、肾细胞膜Na+、K+－ATP酶活力分别下降至（7．3±2．5）和（14．7±1．2）μmol／（mg·h），Ca（2+）－ATP酶活力分别下降至（15．8±2．8）和（16．1±2．3）μmol／（mg·h）。与高血压组相比，Pra－c[20mg／（kg·d）]灌胃9周组在血压降至正常的同时，脑、肾细胞膜Na+、K+－ATP酶活力分别增高至（11．2±1．8）和（21．7±6．2）μmol／（mg·h），Ca+－ATP酶活力分别增高至（19．9±3．2）和（21．9±2．7）μmol／（Mg·h）。提示：肾血管性高血压时伴有脑、肾细胞膜ATP酶活力的下降，Pra－C的有效降压作用与维护脑、肾细胞膜ATP酶活力的正常有关。

苏黄止咳胶囊中白花前胡甲素对咳嗽变异性哮喘的改善作用

目的探讨苏黄止咳胶囊中白花前胡甲素对咳嗽变异性哮喘(CVA)的影响。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)、苏黄止咳胶囊组(7 g/kg)和白花前胡甲素低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),采用腹腔注射致敏剂(1 mg/mL卵清蛋白和10 mg/mL氢氧化铝)和雾化吸入1%卵清蛋白的方法构建CVA大鼠模型,第14天起灌胃给予相应剂量药物,给药14 d后,HE、Masson和PAS染色观察肺组织病理变化,血细胞分析仪检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数,ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5、IL-13、MUC5AC水平。采用脂多糖(LPS)诱导建立RAW264.7细胞炎症模型,分别以4、8、16μmol/L白花前胡甲素和0.25 mg/mL苏黄止咳胶囊处理,Griess法检测细胞中NO水平,荧光显微镜下观察细胞中ROS表达。RT-qPCR法检测肺组织和细胞中IL-6、IL-1β、COX-2、iNOS、PPAR-γmRNA表达,Western blot法检测肺组织和细胞中p-P65、P65、p-IκBα、IκBα、NLRP3、caspase-1(p20)、IL-1β蛋白表达。结果体内实验结果表明,白花前胡甲素能减少CVA大鼠咳嗽次数(P<0.01),延长咳嗽潜伏期(P<0.05,P<0.01),减少BALF中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞数(P<0.05,P<0.01),降低BALF中IL-4、IL-5、IL-13、MUC5AC水平(P<0.01)和肺组织中IL-6、IL-1β、COX-2、iNOS mRNA表达(P<0.05,P<0.01),降低P65、IκBα蛋白磷酸化及NLRP3、caspase-1(p20)、IL-1β蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。体外实验结果表明,白花前胡甲素能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中NO的释放,降低细胞中ROS水平(P<0.01);降低细胞中IL-1β、COX-2、iNOS mRNA表达(P<0.05,P<0.01),升高PPAR-γmRNA表达(P<0.05),降低P65、IκBα蛋白磷酸化和NLRP3蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论白花前胡甲素可能是通过抑制NF-κB信号通路活化并降低NLRP3炎症小体的表达,发挥抗炎和止咳作用,从而改善咳嗽变异性哮喘,是苏黄止咳胶囊的主要止咳功效成分之一。

HPLC-CAD法同时测定小儿清肺化痰颗粒中6种成分的含量

目的建立高效液相色谱法联合电雾式检测器(HPLC-CAD)法同时测定小儿清肺化痰颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、白花前胡甲素及白花前胡乙素的含量,为小儿清肺化痰颗粒的质量控制提供参考。方法采用HPLC-CAD法,色谱柱为Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)-10 mmol·L^-1甲酸铵(甲酸调p H=4.0)(B),梯度洗脱(0~10min,5%A;10~15 min,5%~20%A;15~30 min,20%~30%A;30~40 min,30%~55%A),流速0.8 mL·min^-1,进样量20μL,CAD雾化器温度为35℃,柱温40℃,测定小儿清肺化痰颗粒中6种活性成分的含量。结果盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、白花前胡甲素及白花前胡乙素的质量浓度分别在0.019~0.480 mg·m L^-1(r=0.9998),0.008~0.210 mg·m L^-1(r=0.9998),0.029~0.720 mg·m L^-1(r=0.9993),0.012~0.300 mg·m L^-1(r=0.9998),0.004~0.100mg·mL^-1(r=0.9994),0.004~0.110 mg·m L^-1(r=0.9997)内与峰面积呈良好的线性关系。盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、白花前胡甲素及白花前胡乙素的平均加样回收率分别为99.0%、99.2%、99.4%、99.1%、98.8%及98.8%,RSD分别为1.1%、1.3%、1.4%、0.90%、1.2%及0.70%(n=6)。结论该方法准确、重复性好、灵敏度高,可用于小儿清肺化痰颗粒多成分的质量控制研究。

Box-Behnken响应面法优化疏风定喘颗粒黄芩组的提取工艺研究

目的:利用Box-Behnken响应面法对疏风定喘颗粒黄芩组的提取工艺进行优化。方法:以黄芩苷、白花前胡甲素和固含转移率为考察指标,在单因素试验的基础上,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数4个因素对提取工艺的影响,再结合Box-Behnken中心组合设计试验,进一步优化醇提工艺参数。结果:单因素试验结合Box-Behnken响应面法优选黄芩组的最佳工艺为:8倍量70%乙醇,提取两次,每次1.0 h,在此条件下黄芩苷、白花前胡甲素的转移率分别达到89.57%、87.90%,固含转移率为32.35%。结论:单因素试验结合响应面法可用于优化疏风定喘颗粒黄芩组的提取工艺,该工艺稳定可行,为工业化生产提供科学的依据。

白花前胡丁素对慢性阻塞性肺疾病慢性缺氧模型大鼠心肌损伤的防护作用

目的探讨白花前胡丁素(PD)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)慢性缺氧(CH)模型大鼠心肌损伤的防护作用。方法采用烟熏联合鼻饲脂多糖复制COPD大鼠模型,正常气压下持续缺氧(氧浓度9.5%~10.5%)处理COPD模型大鼠4周,以复制COPD+CH大鼠模型。实验分为COPD组(等体积生理盐水),COPD+CH组(等体积生理盐水),PD低、高剂量组(0.1、0.5 mg/mL),核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路抑制剂全反式维甲酸(ATRA)组(0.5 mg/kg),PD高剂量+ATRA组(PD 0.5 mg/mL+ATRA 0.5 mg/kg),腹腔注射药物或生理盐水,PD及生理盐水给予频率为每日1次、连续4周,ATRA为每日1次、连续2周(建模第15天起给药)。采用苏木素-伊红(HE)染色、TUNEL法分析心肌组织损伤程度及细胞凋亡情况并计算凋亡率,酶联免疫吸附法测定肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、丙二醛(MDA)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)水平,流式细胞仪测定活性氧(ROS)水平,Western blot法测定Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果与COPD组比较,COPD+CH组大鼠心肌组织病理损伤及炎性反应加重,细胞凋亡率显著升高;大鼠血清CK-MB、LDH、cTnI、ROS、IL-6、IL-1β、MDA水平显著升高;Nrf2蛋白表达水平显著降低,HO-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与COPD+CH组比较,PD低、高剂量组大鼠心肌组织病理损伤及炎性反应减轻,细胞凋亡率显著降低,大鼠血清CK-MB、LDH、cTnI、ROS、IL-6、IL-1β、MDA水平显著降低,大鼠心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著升高;ATRA组大鼠心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与ATRA组比较,PD高剂量+ATRA组大鼠心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论PD可保护COPD+CH模型大鼠心肌,其机制可能与提升Nrf2/HO-1信号通路活性有关。

杏苏止咳颗粒质量标准研究

目的提升杏苏止咳颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中的前胡、陈皮和桔梗进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中白花前胡甲素的含量,色谱柱为Shiseido Capcell C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(65∶35,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为321 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果前胡、陈皮、桔梗的薄层色谱斑点清晰,分离度好,且阴性对照无干扰。白花前胡甲素的质量浓度在2.056~51.4μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于3.0%(n=6);平均加样回收率为99.21%,RSD为2.01%(n=6)。样品中白花前胡甲素的含量为0.0711~0.2182 mg/g(n=3)。结论该方法操作简便、重复性好、结果准确,可用于杏苏止咳颗粒的质量控制。

前胡丙素对培养大鼠心肌细胞内游离Ca^(2+)的影响

用Fura-2/AM技术直接观察前胡丙素(Pra-C)对培养大鼠心室肌细胞内游离钙的影响。结果显示Pra-C浓度为0.1～1.0μmol·L^(-1)可明显抑制CaCl_2,高K^+和Bay K 8644引起[Ca^(2+)]i增加,并且有剂量—效应关系,对ouabain引起的[Ca^(2+)]i增加无明显作用。结果提示Pra-C降低心肌细胞[Ca^(2+)]i的作用与抑制电压依赖性钙通道有关。

BIM与WBS

建筑工程数据具有其因果关系,智能建造的重点在于建造技术。BIM技术应该植根于建造技术。WBS是项目的综合工具,WBS的每个工作节点就是建造过程的基本方法与工艺,是建造技术的体现,也是智能建造的落脚点,更是BIM系统的基本组件。不同的WBS分解结构就会产生不同的BIM系统。文章分析了基于WBS第四级的open BIM方法及其存在问题,阐明了基于WBS第三级的P-BIM方法,以建造技术为本发展智能(开发分部分项工程软件)建造,为我国BIM落地提出了新的研究方法与发展方向。

雪梨止咳糖浆中11个成分的含量测定及化学计量学分析

目的 测定雪梨止咳糖浆中11个成分的含量,并建立其化学计量学分析方法,为其质量控制提供依据。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法同时测定12批雪梨止咳糖浆中苦杏仁苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、蔷薇酸、委陵菜酸、马斯里酸、科罗索酸、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素E的含量。采用化学计量学分析方法对12批样品进行质量评价。结果11个待测成分分别在各自质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 1);精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD均小于2.00%;平均加样回收率在96.90%~100.01%之间(RSD均小于2.00%)。聚类分析结果显示,12批样品可聚为3类;主成分分析结果显示,前2个主成分可代表雪梨止咳糖浆中11个成分88.53%的信息量;偏最小二乘法-判别分析结果显示,蔷薇酸、苦杏仁苷和白花前胡甲素是影响雪梨止咳糖浆质量的主要差异标志物。结论 所建方法可用于雪梨止咳糖浆的质量控制。