PRDX1对脂多糖诱导的小胶质细胞炎症反应及细胞凋亡的作用机制

目的旨在探讨PRDX1对脂多糖诱导的小胶质细胞BV2神经炎症损伤的作用及潜在机制。方法对于PRDX1 shRNA慢病毒感染实验,BV2细胞分为:对照组(BV2细胞进行正常培养),脂多糖处理组,NCshRNA慢病毒感染组(细胞经NCshRNA慢病毒感染48 h后,用脂多糖处理24 h组),PRDX1 shRNA慢病毒感染组(细胞经PRDX1 shRNA慢病毒感染48 h后,用脂多糖处理24 h组)。对于TLR4过表达实验,在慢病毒感染实验的基础上增加TLR4过表达组(细胞经PRDX1 shR⁃NA慢病毒感染及TLR4过表达慢病毒感染48 h后,用脂多糖处理24 h)。RT-qPCR和Westernblot分别用于检测mRNA和蛋白表达水平;采用ELISA法检测细胞培养上清液中炎症因子TNF-α和IL-6的分泌水平;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果ELISA检测结果显示,与脂多糖处理的BV2细胞相比,PRDX1 shRNA慢病毒感染组TNF-α和IL-6的含量均显著减少(P<0.01)。RT-qPCR结果表明,TNF-α和IL-6的mRNA表达水平和ELISA检测结果趋势一致。MTT法检测结果表明,与对照组相比,脂多糖处理组BV2细胞活力显著降低;而与脂多糖处理组相比,PRDX1 shRNA慢病毒感染组细胞活力明显升高。流式细胞术检测结果表明,与对照组相比,脂多糖处理组BV2细胞凋亡率明显增加,而与脂多糖处理组相比,PRDX1 shRNA慢病毒感染组细胞凋亡率明显减少。Westernblot结果显示,与对照组细胞相比,脂多糖处理组BV2细胞中TLR4表达显著上调(P<0.05);而与脂多糖处理组BV2细胞相比,PRDX1 shRNA慢病毒感染显著抑制脂多糖诱导的TLR4表达(P<0.05)。与PRDX1 shRNA慢病毒感染组相比,TLR4过表达组BV2细胞中炎症因子TNF-α及IL-6水平显著升高(P<0.05),细胞活力水平降低(P<0.05),且细胞凋亡水平显著升高(P<0.05)。结论沉默PRDX1明显促进脂多糖刺激BV2细胞活力,抑制脂多糖诱导的凋亡及炎症应答反应,其可能是通过正向调控TLR4来实现的。阐明PRDX1/TLR4信号轴在脂多糖诱导的BV2细胞损伤的重要作用,可能成为一个有前景的SCI潜在治疗靶点。

血浆CD89、PRDX1和AOPP水平在过敏性紫癜非肾型和肾型患者中的临床意义

目的回顾性研究CD89、PRDX1和AOPP在过敏性紫癜非肾型及肾型组中表达差异,为HSP发病机制及早期识别肾型紫癜提供参考。方法选取2020年12月~2023年4月于承德医学院附属医院确诊为过敏性紫癜的患者104例,并依据尿检结果,将其分为非肾型紫癜组(47例)和肾型紫癜组(57例),另选同时期体检科健康体检者为正常对照组(57例)。采用ELISA法检测各组CD89、PRDX1和AOPP的血浆水平。采用非参数检验和二元回归方程对结果进行分析,以ROC曲线分析血浆CD89、PRDX1和AOPP各自及联合对HSP肾型的诊断价值。结果肾型紫癜组血浆CD89、PRDX1和AOPP水平显著高于正常对照组及非肾型紫癜组,且非肾型紫癜组显著高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),多因素Logistic回归方程显示:CD89、PRDX1和AOPP的升高对肾型紫癜的影响具有统计学意义。ROC曲线显示三者联合对肾型紫癜有着更好的预测价值。结论血浆CD89、PRDX1和AOPP可能参与了过敏性紫癜及其肾型的发病,三者联合检测对HSP肾损害的发生的预测具有较好的临床价值。

功能性消化不良患者血清VIP、PRDX1、NF-κB水平与并发焦虑、抑郁的相关性研究

目的分析功能性消化不良(FD)患者血清血管活性肠肽(VIP)、过氧化还原蛋白1(PRDX1)、核因子-κB(NF-κB)水平与并发焦虑、抑郁的相关性。方法回顾性分析病例资料,选择2022年6月至2023年6月在我院门诊接受治疗的FD患者80例为研究对象,纳为FD组。同期选择于我院健康体检中心查体的健康人群80例为对照组,采集两组受检者空腹静脉血,采用酶联免疫吸附法检测血清VIP、PRDX1水平,采用流式细胞仪检测NF-κB水平,采用焦虑自评量表(SAS)评分、抑郁自评量表(SDS)评分评价两组受检者焦虑、抑郁情况,FD患者根据SAS评分、SDS评分得分分为单纯FD组(n=48)、FD-焦虑抑郁组(n=32),比较两组患者血清VIP、PRDX1、NF-κB水平,采用Pearson相关性分析FD患者血清指标与焦虑、抑郁相关性。结果FD组患者血清VIP、PRDX1、NF-κB水平明显高于对照组(P<0.05)。FD组患者SAS评分、SDS评分得分明显高于对照组(P<0.05)。FD-焦虑抑郁组患者血清VIP、PRDX1、NF-κB水平明显高于单纯FD组(P<0.05)。采用Pearson相关性分析显示,FD患者血清VIP、PRDX1、NF-κB水平与SAS评分呈明显正相关(r=0.512、0.493、0.577,P<0.05);FD患者血清VIP、PRDX1、NF-κB水平与SDS评分呈明显正相关(r=0.608、0.418、0.452,P<0.05)。结论FD患者血清VIP、PRDX1、NF-κB水平明显异常高表达,与焦虑、抑郁情绪存在一定相关性,VIP、PRDX1、NF-κB可能参与FD患者出现焦虑、抑郁过程,临床定期检测其水平变化有助于关注患者焦虑抑郁情况。

基于生信分析的KLF4、PRDX1在结肠癌中表达情况及临床相关性研究

目的本研究旨在通过TCGA和GEO数据库筛选与结肠癌预后相关的基因,结合临床数据验证关键基因对结肠癌术后复发转移的影响。方法基于GSE4486、GSE44076、GSE23408和GSE20970结肠癌数据集,筛选差异基因,利用STRING数据库和Cytohubba软件筛选出核心基因KLF4和PRDX1。通过TIMER和Prognoscan数据库分析KLF4和PRDX1基因对免疫浸润和患者生存期的影响,进行富集分析以探讨KLF4和PRDX1参与的生物学功能及信号通路,并分析其表达含量与免疫浸润基因和肿瘤增殖基因的相关性。本研究纳入156例结肠癌患者,检测肿瘤组织与癌旁组织中KLF4和PRDX1表达含量差异,并进行术后两年随访。多因素Cox回归分析KLF4和PRDX1表达含量与结肠癌复发转移的相关性。结果核心基因包括KLF4和PRDX1与结肠癌的预后密切相关。生存期分析表明,KLF4高表达和PRDX1低表达的患者生存期较长。KLF4与肿瘤免疫调控相关,其表达含量与CD4+T细胞、M1型巨噬细胞和B细胞浸润呈显著正相关性(均Rho>0.2,P<0.01),同时与M2型巨噬细胞浸润呈负相关性(Rho<-0.2,P<0.01)。PRDX1参与结肠癌细胞增殖的调控,其表达含量与细胞增殖基因KRAS、CDK1、CDK2、CDK4、E2F1表达含量呈显著正相关(Rho<-0.2,P<0.01)。与癌旁组织相比,结肠癌肿瘤组织中KLF4表达含量显著降低(0.27±0.02 V.S 0.97±0.03,P<0.05),而PRDX1表达含量显著升高(3.47±0.32 V.S 0.98±0.02,P<0.05)。多因素分析结果表明,KLF4低表达(HR=1.747,95%CI:1.543~2.885)和PRDX1高表达(HR=1.621,95%CI:1.342~2.143)是结肠癌术后复发转移的独立风险因素。结论KLF4低表达和PRDX1高表达是结肠癌术后复发转移的独立风险因素,KLF4、PRDX1表达情况可作为临床制定治疗方案的参考,同时为结肠癌的早期诊断和预后评估提供了新的靶点和策略。

血清PRDX1、Lp-PLA2、Survivin水平变化与急性缺血性脑卒中患者NIHSS评分的相关性及临床意义

目的探讨血清过氧化还原蛋白1(PRDX1)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、生存素(Survivin)水平变化与急性缺血性脑卒中(AIS)患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性及临床意义。方法选取许昌医院2020年12月—2022年9月收治的125例AIS患者为研究对象,根据入院时NIHSS评分将患者分为轻度组(n=46,NIHSS<4分)、中度组(n=52,4分≤NIHSS≤15分)、重度组(n=27,NIHSS>15分),根据治疗后90 d改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为预后良好(n=86,mRS≤2分)和预后不良(n=39,mRS>2分)两个亚组。比较3组(入院时)血清PRDX1、Lp-PLA2、Survivin水平与NIHSS评分相关性;对比不同预后患者(入院时、治疗7 d、14 d)血清各指标水平;对比各指标不同水平对AIS患者预后不良的危险度。结果轻度组血清PRDX1、Lp-PLA2、Survivin低于中度组,中度组各指标低于重度组,与NIHSS评分均呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);治疗7 d、14 d后,预后不良患者血清PRDX1、Lp-PLA2、Survivin水平高于预后优良患者,差异有统计学意义(P<0.05);治疗7 d、14 d后高水平患者预后不良危险度是低水平患者2.134、3.280、2.677倍/3.693、4.917、3.497倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清PRDX1、Lp-PLA2、Survivin水平变化与AIS患者NIHSS评分密切相关,能为临床病情判断及预后评估提供参考依据。

血清PRDX1、8-iso-PGF2α、miR-29b水平变化与AIS患者疾病转归的关系及临床意义

目的:探讨血清过氧化物氧化还原蛋白(Peroxiredoxin 1,PRDX1)、8-异前列腺素F2α(8-iso-prostaglandin F2α,8-iso-PGF2α)、微小RNA-29b(miRNA-29b,miR-29b)水平变化与急性缺血性脑卒中(Acute Ischemic Stroke,AIS)患者疾病转归的关系及临床意义。方法:将我院2020年1月-2021年5月收治的138例AIS患者为研究对象,根据患者出院后随访3个月的改良Rankin量表(Menopause Rating Scale,mRS)评分将患者分为预后良好组(86例,mRS≤2分)和预后不良组(52例,mRS>2分)。比较两组治疗14d后血清PRDX1、8-iso-PGF2α、miR-29b水平,分析其与mRS评分的相关性。探讨治疗14d后血清PRDX1、8-iso-PGF2α、miR-29b水平联合检测对AIS患者预后不良的预测价值,并计算PRDX1、8-iso-PGF2α、miR-29b不同水平患者预后不良的危险度。结果与预后良好组相比,治疗14d后预后不良组血清PRDX1、8-iso-PGF2α水平较高,miR-29b水平较低(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,治疗14d后血清PRDX1、8-iso-PGF2α水平与mRS评分呈正相关,miR-29b水平与mRS评分呈负相关(P<0.05);治疗14d后血清PRDX1、8-iso-PGF2α、miR-29b联合预测不良预后的AUC为0.915,高于三者的单独预测不良预后的AUC(0.773、0.813、0.788)。PRDX1、8-iso-PGF2α、miR-29b高水平患者预后不良危险度是低水平的1.901、2.906、0.437倍。结论:血清PRDX1、8-iso-PGF2α、miR-29b水平与AIS患者预后有关,且联合检测能提高预测预后不良的临床价值。

PRDX1在肿瘤中作用机制的研究进展

过氧化物酶1(peroxiredoxin 1,PRDX1)是新近发现的非硒依赖的过氧化物酶家族的重要成员,广泛存在于原核生物和真核生物中。PRDX1作为一个过氧化物酶分子,在细胞质中,参与活性氧族(ROS)相关的多种信号通路的调节;在细胞核中,PRDX1具有分子伴侣功能,与多种核转录因子结合调节其功能改变。近年研究发现PRDX1与多种肿瘤的发生、发展、侵袭和转移密切相关,并且在乳腺癌和食管癌中具有双向调节作用。本文将对PRDX1的结构功能及在多种肿瘤的研究进展进行综述。

Prdx1与肿瘤

Prdx1(peroxiredoxin 1)属于过氧化物氧化还原酶蛋白(peroxiredoxin,Prdx)家族成员,是一类在对抗活性氧簇(ROS)、抗氧化过程中发挥关键作用的蛋白质,在多种肿瘤组织中高表达,其表达与肿瘤细胞增殖、分化、转移、复发及放化疗的敏感性密切相关。本文就Prdx1的结构、在肿瘤中的生物学功能及其信号调控机制等进行综述,为寻找新的肿瘤生物治疗靶点提供依据。

PRDX1在人胰腺导管腺癌中的表达及其与病理指标的关系

目的探讨过氧化还原蛋白1(peroxiredoxin 1,PRDX1)在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中的表达及与临床病理学参数的关系并评价其判断预后的价值。方法采用免疫组织化学法分析117例PDAC组织石蜡切片及41例癌旁正常胰腺组织石蜡切片中的PRDX1表达,对PRDX1表达水平与临床病理指标进行相关性分析,进行生存分析。采用Western blotting和实时定量PCR(qRT-PCR)检测9对配对新鲜PDAC组织及癌旁正常胰腺组织中PRDX1蛋白质和mRNA水平的表达。结果免疫组化显示PRDX1在PDAC中表达阳性率高于癌旁正常胰腺组织,差异有统计学意义(x^2=9.761,P<0.01);新鲜PDAC中PRDX1蛋白及mRNA表达明显高于配对的癌旁正常胰腺组织(t=9.187,P<0.01;t=7.829,P<0.011);PRDX1表达与肿瘤直径、肿瘤TNM分期、淋巴结转移、病理分级有关(x^2=8.876,P<0.01;x^2=4.342,P<0.05;x^2=9.273,P<0.01;x^2=6.943,P<0.01);PRDXl与术后复发率相关(x^2=7.326,P<0.01),PRDX1表达与生存期呈负相关(r=-0.845,P<0.05)。结论 PRDX1表达与PDAC的恶性程度有关,可作为判断PDAC预后的预测因素。

PRDX1在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的:检测PRDX1蛋白在食管鳞癌中的表达,并分析其表达异常与临床病理学参数之间的相关性。方法:构建含144例食管鳞癌的组织芯片,免疫组化检测PRDX1蛋白的表达,统计学分析其临床意义及食管癌患者总生存期之间的关系。利用PRDX1 shRNA敲降PRDX1表达,MTT法观察癌细胞增殖能力的变化。结果:免疫组化结果显示PRDX1在食管鳞癌中的表达率为66.7%(96/144),而癌旁粘膜中呈弱表达。PRDX1的高表达与淋巴结转移和疾病进展呈正相关。单因素生存分析表明PRDX1蛋白阳性表达患者较阴性患者预后更差。而PRDX1的下调表达可抑制食管癌细胞的增殖。结论:PRDX1在食管鳞癌的发生进展过程中发挥了重要作用,是食管鳞癌患者治疗的潜在靶点之一。

Prdx1、Spy1、p27^(kip1)蛋白在肝细胞肝癌中的表达及其相关性

目的:探讨Prdx1、Spy1、p27^(kip1)蛋白在肝细胞肝癌中的表达及相关性。方法:应用Western blot及免疫组化检测肝癌及相应的癌旁组织中Prdx1、Spy1、p27^(kip1)的表达;免疫共沉淀分析Prdx1、Spy1的相互作用;Western blot分析Prdx1、Spy1相互结合对p27^(kip1)蛋白表达的影响。结果:Prdx1、Spy1在肝癌组织及肝癌细胞中高表达,与p27^(kip1)表达呈负相关;Prdx1、Spy1相互结合使p27^(kip1)的表达水平下调,此作用与Prdx1的抗氧化物活性无关。结论:Prdx1、Spy1蛋白的表达与肝细胞肝癌的发生发展有关,两者的表达可能在肿瘤的恶性进展中起协同作用,而与p27^(kip1)的表达呈拮抗作用。

肿瘤标记蛋白Prdx1-pMSCV质粒的构建和鉴定

目的构建含有过氧化物氧化还原酶1(Prdx1)基因的pMSCV重组质粒,转染至人气道上皮细胞内,并进行鉴定,为进一步研究Prdx1在细胞内的功能奠定基础。方法构建Prdx1-pMSCV质粒,将Prdx1mRNA编码区序列克隆至pMSCV载体上,测序验证后大量提取,转染至BEAS-2B细胞内,细胞内可高表达Prdx1蛋白,收集总mRNA和蛋白裂解液分别进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Prdx1-mRNA和蛋白质印迹(Western blot)检测Prdx1蛋白变化。观察质粒转染后细胞内Prdx1高表达。结果重组质粒经限制性内切酶EcoRⅠ和BglⅡ双酶切及测序鉴定均证实Prdx1基因已正确克隆到pMSCV质粒载体中。Western blot结果进一步证实Prdx1-pMSCV重组质粒构建正确。结论本研究正确构建了Prdx1-pMSCV质粒。

人脑胶质瘤中PRDX-1、EGFR、PI3K、PTEN的表达及相关性

目的探讨PRDX-1、EGFR、P13K和PTEN在不同恶性程度人脑胶质瘤中的表达及意义。方法用免疫组化sP法检测PRDX-1、EGFR、P13K及PTEN在156例人脑胶质瘤手术切除标本中的表达，Image—ProPlus6．0（IPP6．0）图像分析软件检测阳性部位平均吸光度值（A）进行定量分析，单因素方差分析及Dunnett’s T3检验比较组间差异，Pearson相关分析检验PRDX-1、EGFR、P13K及PTEN表达水平间的相关性。结果PRDX-1、EGFR及P13K的表达水平在I-Ⅳ级胶质瘤中差异显著（P〈0．05），且随胶质瘤恶性程度增加呈升高趋势；PTEN的表达水平在I～Ⅳ级胶质瘤中差异显著（P〈0．05），且随胶质瘤恶性程度增加呈降低趋势。PRDX-1与PTEN、PTEN与P13K在胶质瘤中的表达水平均呈显著负相关（r=-0．407、r=-0．429，P〈0．05）；P13K与EGFR在胶质瘤中的表达水平呈显著正相关（r=0．293，P〈0．05）。结论PRDX-1、EGFR、P13K表达水平随胶质瘤等级上升而增高，PTEN表达水平则随胶质瘤等级上升而下降。上述蛋白可能通过PRDX-1／PTEN／EGFR／P13K途径在人脑胶质瘤的恶性演变中发挥重要作用。

Prdx1调节HO-1翻译水平促进巨噬细胞清除脾脏沉积血红素

为研究Prdx1在AH(Aniline Hydrochloride)诱导溶血性贫血小鼠模型中调控巨噬细胞清除脾脏沉积血红素的作用及其相关分子变化,腹腔注射AH,采用倒置显微镜、流式细胞仪、动物血液分析仪检测小鼠的溶血性贫血症状;通过免疫组织化学、Western Blot方法和RT-PCR技术检测Prdx1调控巨噬细胞清除脾脏沉积血红素的相关信号分子变化。结果表明,AH通过抑制HO-1的翻译水平诱导的Prdx1-/-小鼠脾脏血红素沉积显著高于野生型小鼠,HO-1的mRNA水平显著提高从而负反馈调节Nrf2的转录水平,引起Nrf-2/HO-1信号通路阻滞。

腹泻型肠易激综合征患者肠黏膜PRDX1、FXR的表达及其相关性分析

目的探讨腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者肠黏膜PRDX1、FXR的表达及其相关性。方法选取2016年5月—2018年9月在海口市中医医院就诊的81例IBS-D患者为观察组,根据肠易激综合征病情严重程度量表(IBS-SSS)积分将观察组分为3个亚组,19例轻度组(75~175分),45例中度组(>175~300分),17例重度组(>300分)。另选取与观察组年龄相匹配的同期该院健康体检者90例为对照组。采用HE染色观察肠黏膜组织结构形态及炎症反应,采用免疫组织化学染色法检查观察组、对照组肠黏膜PRDX1、FXR的表达,采用Spearman分析观察组肠黏膜PRDX1、FXR与IBS-SSS积分的相关性。结果观察组肠黏膜PRDX1阳性表达率比对照组高(P<0.05),FXR阳性表达率比对照组低(P<0.05)。重度组肠黏膜PRDX1阳性表达率高于轻度组和中度组(P<0.05),轻度组FXR阳性表达率高于中度组和重度组(P<0.05),中度组FXR阳性表达率高于重度组(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组IBS-SSS积分依次升高(P<0.05)。Spearman结果显示,观察组肠黏膜PRDX1阳性表达率与IBS-SSS积分呈正相关(r_(s)=0.516,P=0.000),FXR阳性表达率与IBS-SSS积分呈负相关(r_(s)=-0.575,P=0.000)。结论IBS患者肠黏膜PRDX1阳性表达率较高,FXR阳性表达率较低,且与IBS-SSS积分存在相关性,可能成为IBS-D新的生物标志物及治疗靶点。

Prdx1通过P38MAPK通路影响肺癌VM的形成

目的:检测Prdx1在肺癌中的表达,探讨Prdx1对肺癌血管生成拟态(vasculoenic mimicry,VM)形成的影响,并深入研究其影响机制。方法:利用CD31/PAS双重染色及免疫组织化学法检测并分析VM及Prdx1的表达关系。将Prdx1表达质粒转染至肺癌细胞系A549、H1299中,诱导Prdx1外源性升降表达。Western blot检测转染前、后Prdx1、EMT相关蛋白(E-cadherin、Vimentin)、VM相关蛋白(VE-cadherin、VEGF)、P38MAPK通路相关蛋白(P38、P-P38)表达变化情况;A549-Prdx1细胞系加入P38MAPK通路的抑制剂SB203580后,检测(P38,P-P38、VEGF)的表达变化情况;三维,划痕和侵袭实验检测Prdx1对细胞成管、迁移、侵袭能力的影响。结果:Prdx1与患者VM的形成、淋巴结转移、不良预后密切相关。Prdx1升表达高E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调,VE-cadherin、VEGF表达上调,P38MAPK中P38表达不变,P-P38表达上调。细胞的迁移侵袭成管能力显著增强。Prdx1低表达后与上述结果相反。A549-Prdx1细胞系中加入P38MAPK通路抑制剂SB203580后,VEGF高P-P38随剂量的增加而降低,而P38总蛋白不变。结论:Prdx1在肺癌中高表达,可能通过P38MAPK通路影响患者VM的形成。

UCH37与PRDX1相互作用影响肝癌细胞迁移和侵袭的机制研究

目的探讨泛素羧基末端水解酶37(UCH37)与过氧化物酶1(PRDX1)相互作用影响肝癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法在293T细胞内过表达UCH37后,采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测PRDX1、c-Myc蛋白表达水平的变化,以及PRDX1蛋白泛素化水平。应用免疫共沉淀技术检测UCH37与c-Myc、PRDX1与c-Myc、UCH37与神经前体细胞表达发育调控蛋白4(NEDD4)之间的相互结合关系,并采用激光共聚焦技术检测上述3组蛋白质在细胞内的共定位关系。结果前期研究已证实,UCH37和PRDX1分别能促进和抑制肝癌细胞的迁移和侵袭。本研究显示,UCH37与NEDD4之间存在相互作用,并通过NEDD4促进PRDX1的泛素化降解增加,使其呈低表达。随着UCH37转染质粒量的梯度增高,用相同量的PRDX1进行免疫共沉淀后,发现与PRDX1结合的c-Myc蛋白表达量逐渐降低。细胞质和细胞核蛋白的Western blotting检测结果显示,随着UCH37转染质粒量的梯度增高,细胞核内的c-Myc表达量逐渐升高。结论UCH37高表达后促进了PRDX1的泛素化降解,使其呈低表达,继而可减少PRDX1与c-Myc的结合,释放的c-Myc聚集在细胞核内促进了肝癌的进展。

脂多糖作用于气道上皮细胞后对prdx1表达的影响分析

目的分析脂多糖(LPS)作用于气道上皮细胞后对prdx1表达的影响。方法在DMEM/F12培养基(含10%胎牛血清)中培养正常人的气道上皮细胞株(BEAS-2B),将培养的细胞收集起来计数后分别在6孔培养板中或培养皿中铺板,待细胞贴壁12 h后再将浓度不同但体积相同的LPS分别作用于气道上皮细胞。将体积相同的磷酸盐缓冲液(PBS)加入对照组。12 h、24 h后收集细胞,提取细胞RNA、蛋白。结果 1 mg/L LPS 12 h组、10 mg/L LPS 12 h组、1mg/L LPS 24 h组、10 mg/L LPS 24 h组气道上皮细胞prdx1 mRNA表达均显著高于对照组(P <0. 05),而在气道上皮细胞prdx1 mRNA表达方面,10 mg/L LPS 24 h组<1 mg/L LPS 24 h组<1 mg/L LPS 12 h组<10 mg/L LPS 12 h组(P <0. 05)。0. 1 mg/L LPS 12 h组、0. 5 mg/L LPS 12 h组、1 mg/L LPS 12 h组、5 mg/L LPS 12 h组、10 mg/L LPS 12 h组气道上皮细胞prdx1蛋白表达均显著高于对照组(P <0. 05),而在气道上皮细胞prdx1蛋白表达方面,0. 1 mg/L LPS 12 h组<0. 5 mg/L LPS 12 h组<1 mg/L LPS 12 h组<10 mg/L LPS 12 h组<5 mg/L LPS 12 h组(P <0. 05)。结论 10 mg/L LPS作用于气道上皮细胞12 h后会提升prdx1基因与蛋白表达。

Prdx1通过维持线粒体稳态调节巨噬细胞的极化

为了研究过氧化物还原酶1(peroxiredoxin 1,Prdx1)在巨噬细胞极化过程中的作用,使用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)联合干扰素γ(interferon gamma,IFNγ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)处理小鼠白血病单核巨噬细胞(mouse leukemia cells of monocyte macrophage,RAW264.7),敲除Prdx1标记为Prdx1~(-/-)组,采用流式细胞术检测巨噬细胞分化标志物,采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞因子水平,检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric-oxide synthase,iNOS)和精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)活性反应以及Prdx1~(-/-)细胞氧化损伤情况,通过能量分析仪检测细胞胞外酸化率和氧消耗速率,线粒体膜电位染料(mitochondrial membrane potential dye,JC-1)荧光探针法检测线粒体膜电位,荧光染色法检测线粒体超氧化物水平,并用线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除剂处理RAW264.7细胞来评估细胞极化情况。结果表明,敲除Prdx1导致巨噬细胞ROS、过氧化氢和8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHDG)水平升高,线粒体拷贝数降低,线粒体内膜转位酶23(translocase of inner mitochondrial membrane 23,TIM23)蛋白和热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)表达减少,线粒体膜电位下降,超氧化物增多,三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate,ATP)水平降低;在1型巨噬细胞(type 1 macrophage,M1)中敲除Prdx1,细胞外酸化率(extra cellular acidification rate,ECAR)增加,在2型巨噬细胞(type 2 macrophage,M2)中敲除Prdx1,耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)降低。这表明敲除Prdx1能够通过损伤巨噬细胞线粒体来降低其氧化磷酸化功能,导致巨噬细胞倾向M1型极化而抑制其向M2型极化,本研究可为巨噬细胞介导的免疫治疗提供新的治疗策略。

老年骨肉瘤术后组织过氧化物氧化还原蛋白-1、C-myc和P53的表达及相关性

目的检测老年人骨肉瘤术后组织中过氧化物氧化还原蛋白(PRDX)-1、人C-myc癌基因产物(C-myc)和突变型P53基因(P53)的表达及临床意义。方法老年骨肉瘤术后组织68例作为观察组,49例老年人骨样骨瘤组织作为对照组,应用免疫组化SP法检测PRDX-1、C-myc和P53的表达。结果观察组PRDX-1、C-myc和P53表达阳性率明显高于对照组,观察组PRDX-1、C-myc和P53表达与肿瘤最大径、转移、分期及脉管浸润相关。观察组PRDX-1和P53、C-myc和P53表达具有正相关性。结论老年人骨肉瘤术后组织中PRDX-1、C-myc和P53高表达,不仅可以促进骨肉瘤的恶变进程,还可以使肿瘤处于高度增殖状态。PRDX-1和C-myc对肿瘤的促进作用可能与对P53的调节有关。