白香丹对PMS肝气逆证模型大鼠GABA_BR亚基分布及表达的影响

目的观察白香丹对经前期综合征(PMS)肝气逆证模型大鼠额区和下丘脑中γ-氨基丁酸(GABA)B1受体(GBR1)、γ-氨基丁酸B2受体(GBR2)分布及表达的影响,探讨白香丹对PMS肝气逆证的干预机制。方法通过旷场实验和阴道涂片法筛选健康雌性Wistar大鼠进入实验,采用电刺激法复制PMS肝气逆证大鼠模型,用免疫荧光双标记技术检测GBR1和GBR2在额区和下丘脑中的表达。结果与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠垂直得分、水平得分和总分均显著增加(P<0.01),GBR1和GBR2蛋白在额区和下丘脑中的表达水平降低(P<0.01);与模型组大鼠比较,白香丹组和巴氯芬组大鼠旷场得分显著降低(P<0.01,P<0.05),GBR1和GBR2蛋白在额区和下丘脑中的表达水平明显上升(P<0.01,P<0.05),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GABABR亚基(GBR1和GBR2)表达的下调可能与PMS肝气逆证的发生密切相关;白香丹可对GBR1、GBR2的表达起到调节作用。

经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑雌二醇α和孕酮受体表达的影响

目的:研究经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体表达的影响。方法:以情志刺激多因素法复制经前期综合征肝气逆证大鼠模型,经前平颗粒预防给药(10 g.kg-1,灌胃给药,连续5 d),采用免疫荧光细胞化学技术结合流式细胞仪检测大鼠下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体的蛋白表达量。结果:模型组大鼠下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体蛋白表达量与正常组相比显著降低(P<0.01),经前平颗粒组下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体蛋白表达量较模型组显著升高,接近于正常水平。结论:经前平颗粒可以上调下丘脑雌二醇α受体和孕酮受体蛋白表达水平,这可能是其治疗经前期综合征肝气逆证的作用机制之一。

经前平颗粒对PMS肝气逆证模型大鼠顶区和额区皮质中μ阿片受体表达的影响

目的探讨PMS肝气逆证与μ阿片受体表达量的关系以及经前平颗粒的微观作用机制。方法以脉冲电刺激法制备PMS肝气逆证大鼠模型,运用半定量RT-PCR和Western blot技术检测PMS肝气逆证模型大鼠顶区和额区皮质中μ阿片受体的表达量。结果 PMS肝气逆证模型大鼠顶区和额区皮质中μ阿片受体的表达量均显著降低,给予经前平颗粒后能显著提高该基因表达。结论 PMS肝气逆证的发生可能与脑中枢顶区和额区皮质中μ阿片受体表达量下降有关,调节该基因表达异常可能是经前平颗粒的部分药理作用靶点。

经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证大鼠脑μ阿片受体mRNA及蛋白表达的影响

目的观察经前平颗粒对经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)肝气逆证大鼠脑顶区皮质、额区皮质、下丘脑、海马μ阿片受体(μ opioid receptor,MOR)mRNA及蛋白的表达的影响。方法取20只大鼠制备PMS肝气逆证大鼠模型。造模后大鼠分为模型组、中药组,每组10只。另选取10只大鼠作为正常对照组(正常组)。造模同时,中药组大鼠给予经前平颗粒(1.6g/kg)灌胃,正常组和模型组大鼠给予等体积生理盐水(1mL/100g)灌胃,每天1次,连续5天。采用RT-PCR和Western blot法分别检测大鼠顶区皮质、额区皮质、下丘脑和海马MOR mRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠顶区皮质、额区皮质MOR mRNA及蛋白扩增产物电泳条带相对较弱,光密度值降低,顶区皮质、额区皮质MOR mRNA及蛋白相对表达降低;下丘脑、海马MOR mRNA及蛋白电泳条带相对较强,光密度值升高;下丘脑、海马MORmR-NA及蛋白相对表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,中药组大鼠顶区皮质、额区皮质MOR mRNA及蛋白扩增产物电泳条带增强,顶区皮质MOR mRNA表达升高,顶区皮质和额区皮质MOR蛋白相对表达升高;下丘脑和海马MOR mRNA及蛋白电泳条带亮度减弱,下丘脑和海马MOR mRNA相对表达降低,海马MOR蛋白相对表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 MOR在PMS肝气逆证大鼠不同脑区呈现特异性表达,经前平颗粒表现出相应调节作用。

经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证模型大鼠不同脑区γ-氨基丁酸A受体结合活性的影响

目的通过检测经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)肝气逆证模型大鼠大脑皮质和海马γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)结合活性变化,探讨中药经前平颗粒对PMS肝气逆证的干预作用。方法多因素综合刺激法复制PMS肝气逆证大鼠模型。放射性配体受体结合技术测定大鼠皮质和海马GABAAR的结合活性变化。结果与正常组相比,肝气逆证造模组大鼠大脑皮质和海马GABAAR结合活性均明显增加。与模型组相比,经前平颗粒组大鼠皮质和海马GABAAR活性均明显下降。结论大鼠皮质和海马GABAAR结合活性增加可能是PMS肝气逆证的重要机制之一。中药经前平颗粒可对GABAR结合活性含量异常变化起到调节作用。

白香丹胶囊对PMS大鼠皮层神经元细胞相对活力及GABA_A R介导氯离子通道的影响

目的:探讨白香丹胶囊(BXD)治疗经前期综合征(prem enstrual syndrom e,PMS)肝气逆证大鼠的中枢作用机制。方法:筛选合适大鼠,随机分为正常造模组、BXD给药组;采用旷场实验进行大鼠行为学评价,采用MTT法和全细胞膜片钳技术测定大鼠含药血清对离体皮层神经元细胞相对活力和γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)介导氯离子通道的影响。结果:旷场实验中,与正常模型组相比,BXD给药组大鼠水平得分、垂直得分及旷场实验总分均明显减少(P<0.05);MTT实验中,与正常模型组相比,给药24,48 h后,BXD给药组神经元MTT值显著增加(P<0.05);电生理实验中,离体大鼠皮层神经元细胞经正常模型组大鼠血清和BXD给药组大鼠血清处理后,曲线拟合参数EC50和nH分别为(63.5±8.2)μmol.L-1,(1.04±0.10)和(29.0±4.4)μmol.L-1,(1.07±0.16);其中EC50(正常)>EC50(BXD),差异有统计学意义(P<0.01),而nH(BXD)>nH(正常组),差异无统计学意义。结论:BXD可明显减少大鼠旷场实验得分,可有效提高大鼠皮层神经元细胞活力和GABAAR活性;paeon im etabolinsⅠ,paeonol可能就是BXD治疗PMS有效物质成分,而paeonol很可能通过作用于GABAAR这一靶点来发挥药效作用。