桂西地区HbH病的基因型特征和产前诊断研究

目的：明确桂西地区ＨｂＨ病的基因缺陷类型。方法：ＤＮＡ限制性内切酶ＢａｍＨＩ和ＢｇｌⅡ酶解、ＤＮＡ凝胶原位杂交、Ｈｂ电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳等。结果：３６例ＨｂＨ病患者标本中，检出缺失型ＨｂＨ病２８例（左侧缺失型２６例，右侧缺失型２例），非缺失型８例（其中ＨｂＨ－ＣＳ６例），５例产前诊断的胎儿中，３例为α地贫１杂合子，１例为α地贫２，１例为ＨｂＢａｒｔ′ｓ水肿胎。结论：桂西地区ＨｂＨ病基因类型以缺失型为主，其中左侧缺失型占大部分，非缺失型中也以ＨｂＨ－ＣＳ居多。

应用^(14)C鞘磷脂为基质测定鞘磷脂酶活性-诊断和产前诊断Niemann-Pick病的方法

神经鞘磷脂贮积症（Ｎｉｅｍａｎｎ－Ｐｉｃｋ）是一种严重的致命的先天性代谢障碍病，由于鞘磷脂酶缺乏引起。临床症状常与Ｇａｕｃｈｅｒ′ｓ，病以及其他一些先天性代谢病相似。早期诊断尤为重要。本文报道应用１４Ｃ－鞘磷脂为基质，测定正常早孕绒毛细胞，培养的皮肤成纤维细胞以及白细胞的鞘磷脂酶活性的结果以供临床鉴别诊断时参考。本法比较以前采用的成色底物法灵敏、准确、简便。

应用PCR产前诊断胎儿及孕妇梅毒感染的研究

目的:为了研究羊水聚合酶链反应(PCR)方法产前诊断胎儿先天梅毒以及梅毒对妊娠的影响,妊娠期梅毒的诊断治疗预后等问题。方法:对8例不同孕周患梅毒的孕妇抽取羊水用PCR方法检测梅毒螺旋体DNA;对22例患梅毒的孕妇应用青霉素或红霉素进行治疗并随访至分娩后;对261例因不良孕娩史而就诊妇女进行梅毒血清学检测并以无不良孕娩史普通妇科门诊病人111例作为对照。结果:8例羊水梅毒PCR检测结果6例阳性,2例阴性。其中1例阳性者终止妊娠,胎儿病理解剖证实有梅毒感染。22例梅毒孕妇经治疗3例失访,1例早产,18例足月分娩,新生儿临床及血清学检查均未见异常。因不良孕娩史而就诊妇女梅毒血清学阳性率(14.56%),明显高于无不良孕娩史的普通妇科门诊病人(5.40%)(P<0.01)。结论:羊水PCR梅毒DNA检测是诊断先天梅毒较好的方法,妊20周前胎儿可感染上梅毒。患梅毒的孕妇应早期足量正规治疗以防治胎儿感染。梅毒是导致不良孕娩史的重要原因。

联合应用STR与A/C连锁分析进行PKU的产前基因诊断

目的：对经典ＰＫＵ快速、高效易推广的产前基因诊断方法进行探讨。方法：用ＳＴＲ－Ａｍｐ－ＦＬＰ和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对云南１３个ＰＫＵ家系的ＰＡＨ基因内ＳＴＲ与Ａ／Ｃ位点进行连锁分析。结果：检出２２４２５２ｂｐ的ＳＴＲ８个等位片段，ＰＩＣ为０６９８、杂合率是５７６９％。用ＳＴＲ和ＳＴＲ加Ａ／Ｃ的１００％基因诊断率是４６１５％和６１５４％，且ＳＴＲ加Ａ／Ｃ对所有家系均能提供信息。完成１例风险胎儿的产前诊断和２例回顾性的基因诊断。结论：以ＳＴＲ－Ａｍｐ－ＦＬＰ为主要手段、辅以Ａ／Ｃ位点分析，是一简便、快速易于在基层医院推广的ＰＫＵ产前诊断方法。

早孕期母血循环中胎儿细胞的检测

自行设计引物并建立早孕妇女外周血中胎儿细胞检测的巢式ＰＣＲ方法、计算机辅助设计的两对引物位于Ｙ染色体ＺＰＹ基因保守区内，扩增产物分别是３５４ｂｐ和３０７ｂｐ，该引物具有高度的特异性和敏感性。应用该引物对３１例６１４周的早孕妇女连续采血基因扩增，１９例妊娠男性胎儿妇女外周血中孕６周即有胎儿细胞检出１／１９（５３％），ＺＰＹ基因检出率随孕周增加而增高，而到孕１２周则达到１８／１９（９４７％），总有效率可达９６８％。提示该方法检测胎儿细胞ＤＮＡ是可行的、且胎儿细胞最早进入母血循环的时间存在明显的个体差异，利用母血中胎儿细胞进行产前诊断的最佳采血时间以孕１２周以后为宜，并应注意假阳性结果的判断。

华北地区汉族人群中ApoB与YNZ22的VNTR多态性及其在产前诊断中的应用

为了解ＡｐｏＢ和ＹＮＺ２２ 在中国人中的多态性分布及其在产前诊断中鉴别母体细胞污染的应用价值，采用ＰＣＲ方法，对华北地区１１０ 名无关汉族个体进行了上述两个ＶＮＴＲ的扩增片段长度多态性（ＡＦＬＰ） 分析。ＡｐｏＢ位点发现１３ 个等位基因，其中２７ ，５１ ，５３ 国内未见报道，其基因频率０－００５０－３４５，基因型２０ 种，无偏倚估计期望杂合性０－７６４，多态信息量０－７６。ＹＮＺ２２ 位点发现１１ 个等位基因，２７ 种基因型，基因频率０－００９０－１９１ ，无偏倚估计期望杂合性０－８７５，多态信息量０－８７２。对８ 例用于产前诊断的早孕绒毛组织及其父母ＤＮＡ样本分析结果表明，１ 例绒毛组织含母亲的两条等位片段，证明母体细胞污染的存在。采用ＰＣＲ方法进行ＶＮＴＲ 的多态性分析，操作简便，快速，信息量丰富，不仅在亲子鉴定和法医学应用中，而且在鉴别绒毛组织的母体细胞污染，提高产前诊断的准确性方面具有重要意义。

假肥大型肌营养不良症(DMD/BMD)产前基因诊断的研究报告

本文报告了２１人次中期妊娠ＤＭＤ／ＢＭＤ风险胎儿羊膜腔穿刺产前基因诊断的研究结果，其中包括４人次非缺失突变型，３人次外显子８缺失突变型，３人次外显子１７缺失突变型，３人次外显子４５缺失突变型，５人次外显子４８缺失突变型，２人次外显子１９缺失突变型及１人次外显子４４缺失突变型ＤＭＤ风险胎儿的产前基因诊断。风险胎儿羊水细胞ＤＮＡ的产前基因诊断内容包括三部分，即（１）应用ＰＣＲ扩增Ｙ染色体上特异性片段所进行的胎儿性别鉴定（如ＳＲＹ基因）；（２）应用ＰＣＲ扩增特异性ＤＭＤ基因外显子所进行的男性胎儿ＤＭＤ缺乏突变分析及；（３）应用ＤＭＤ基因上或旁侧多态性位点所进行的确诊患者或携带者的连锁分析（如ＳＴＲ４９）。研究结果发现２１人次风险胎儿中男女胎儿分别为１３和８。１３个男性胎儿中，２个发生在非缺失突变ＤＭＤ家系，另外１１个发生在缺失突变ＤＭＤ家系，经ＤＭＤ基因ＳＴＲ４９－ＰＣＲ及缺失突变分析发现，９例为患病男胎；８例，女性胎儿中，经ＤＭＤ基因ＳＴＲ－ＰＣＲ４９连锁分析发现２例为患病女胎。临床上已采用中期妊娠引产术中止了这１１例患胎的妊娠，剩下已被确诊的１０例正常胎儿则继续妊娠至分娩，并获得预期健康的孩子。本研究结果提示?

应用SSCP对苯丙酮尿症家系进行产前诊断

应用ＳＳＣＰ（单链构象多态性）对５个含外显子７的ＣＧＡ（Ａｒｇ２４３）→ＣＡＡ（Ｇｌｎ２４３）突变的杂合家系进行第二胎早期产前诊断，结果显示有２例胎儿携带有该种突变，在我们建议下行人工流产终止妊娠；另３例胎儿不携带该种突变，其中两例正常妊娠分娩，并于产后和生后半年进行生化检测均示正常，另一例尚未分娩。