蔡氏育肾培元方对辅助生殖中卵巢低反应改善作用的临床研究

目的探索蔡氏育肾培元方对辅助生殖中卵巢低反应(POR)的改善作用。方法选取74例POR患者,随机分为治疗组、对照组,每组37例。两组均于治疗前及12周后行拮抗剂方案超促排卵,期间治疗组予口服育肾培元方,对照组不服药。检测治疗前后两组患者血清卵泡刺激素(FSH)、抗缪勒氏管激素(AMH)、窦卵泡计数(AFC);再次拮抗剂方案促排后比较绒毛膜促性腺激素(hCG)日血E_2、子宫内膜厚度、≥18 mm卵泡数、促性腺激素(Gn)总剂量、Gn用药天数、获卵数、受精卵数、优质胚胎数、新鲜胚胎移植数、冷冻胚胎数、周期取消率、临床妊娠率。结果 (1)治疗组用药12周后,AFC及血清AMH水平较治疗前均显著升高(P<0.05),FSH水平明显下降(P<0.05),其中AFC、AMH显著高于对照组(P<0.05)。(2)再次超促排卵显示,治疗组的获卵数、hCG日≥18 mm卵泡数、hCG日子宫内膜厚度、受精卵数、鲜胚移植数及临床妊娠率都有增加趋势,Gn药量、Gn用药时间、周期取消率都有减少趋势,其中治疗组的优质胚胎数较对照组显著增加(P<0.05)。结论蔡氏育肾培元方可以改善POR患者卵巢储备功能,提高优质胚胎数,在中医药协助辅助生殖中有积极的治疗作用。

蔡氏育肾培元方对卵巢低反应患者卵巢颗粒细胞基因表达及分泌功能的影响

目的:探讨蔡氏育肾培元方对卵巢低反应(POR)患者卵巢颗粒细胞基因表达及分泌功能的影响。方法:选取检测合格的6例样本,随机分为治疗组与对照组,每组各3例。治疗组服用育肾培元方,对照组不用任何药物。于干预前及干预3个月后拮抗剂方案超促排卵,取两次取卵的卵巢颗粒细胞进行RNA-seq测序,并对相关差异基因进行q PCR和免疫印迹验证;同时对颗粒细胞进行分离培养,检测两组颗粒细胞的生长及分泌功能。结果:(1)RNA-seq测序显示,治疗组患者的颗粒细胞在药物治疗后表达上调的相关基因主要富集于免疫应答、细胞活化和细胞黏附等功能,且治疗组第二次取卵时上调的免疫应激基因的数量显著降低;通过进一步的基因富集分析表明,治疗组治疗3个月后卵巢颗粒细胞的卵泡发育相关基因及卵巢相关基因均较对照组上调。(2)通过对部分上调基因(PTPN6、CYBA、FOS、ITGB7等)以及一些下调基因(IL1B,TNFAIP3)的q PCR验证显示,这些基因的表达模式与RNA测序结果较为一致;另外,在表达上调基因中发现,部分基因与卵巢功能密切相关,如FOS和PTPN6基因。(3)免疫印迹结果显示,育肾培元方可改善PTPN6、CYBA、ITGB7及IL1B基因在颗粒细胞中的表达模式。(4)细胞实验证实,对照组颗粒细胞在体外培养过程中细胞贴壁能力较差,细胞活力较低,细胞突触不发达;而治疗组颗粒细胞在体外培养过程中细胞贴壁能力较强,细胞突触发达且细胞增殖速度较快。(5)对颗粒细胞体外分泌功能测定显示,治疗组的颗粒细胞分泌的雌二醇(E2)和孕酮(P)都显著高于对照组(P<0.05)。结论:育肾培元方可以降低POR患者的免疫应激反应,改善卵巢颗粒细胞卵巢及卵泡发育相关基因的表达模式,增强卵巢细胞的生长活性及分泌功能,从而改善了POR患者超促排治疗的卵巢反应性。