Pristane诱导狼疮鼠模型

系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus,SLE）是一种累及全身多系统器官组织的自身免疫性疾病,血清中存在以抗核抗体、抗dsDNA抗体为代表的多种自身抗体,目前病因、发病机理尚不完全清楚。合适的动物模型有助于对其进行研究。SLE动物模型分为自发性模型和诱导性模型。

慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型的诱导

目的 诱导慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型。方法 选用 (DBA 2×C57BL 6J)F1小鼠 ,通过尾静脉注射其母鼠DBA 2淋巴细胞诱导模型 ,观察 12周。结果 F1小鼠注射母鼠淋巴细胞后 2周产生自身抗体 ,出现蛋白尿 ,4周血脂、血肌酐、尿素氮轻度升高 ,肾脏病理仅有系膜细胞轻度增生 ,未见间质损害。 8周血生化指标明显改变 ,肾脏病理示肾小球系膜细胞中度增生 ,间质炎细胞浸润和肾小管大量蛋白管型 ,10～ 12周各项观察指标改变明显 ,病理出现局灶或弥漫肾小球硬化 ,免疫荧光示IgG、IgM、C3沿毛细血管壁及系膜区沉积。结论 慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型类似人类狼疮性肾炎 。

补肾清热毒方对慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠模型的影响

目的 :观察补肾清热毒方对慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)狼疮样小鼠模型的影响。方法 :模型雌鼠于诱导后第 4周 ,随机分为补肾清热毒方组、强的松组、模型组及未诱导的正常对照组 ,用药 8周后处死 ,观察小鼠血清抗dsDNA抗体、血肌酐、尿素氮、血脂及肾脏病理改变等指标。结果 :经补肾清热毒方和强的松治疗后 ,尿蛋白浓度、抗dsDNA抗体、血肌酐、尿素氮均有降低 (P <0 0 5或P <0 0 1 ) ,白蛋白升高 (P <0 0 5 ) ,而补肾清热毒方尚有降低胆固醇作用 (P <0 0 5 ) ,两药对系膜细胞增生及间质炎细胞浸润有减轻作用 (P <0 0 5 )。结论

青蒿琥酯片对狼疮样模型小鼠外周血淋巴细胞表面CD4、CD8、CD54表达的影响

目的：探讨青蒿琥酯片不同剂量对狼疮样小鼠部分免疫调节作用机制。方法：运用不同剂量的青蒿琥酯对8～10周龄的狼疮样小鼠进行干预治疗8d，观察其对狼疮样小鼠外周血淋巴细胞表面CD4、CD8、CD54表达的影响。结果：青蒿琥酯片对狼疮样小鼠外周血CD4、CD8的表达有升高的作用。对狼疮样小鼠外周血CD54的高表达有抑制作用，以高剂量组最为明显。结论：青蒿琥酯片可调节狼疮样小鼠的细胞免疫功能，抑制狼疮详小鼠的过度免疫反应。

红斑狼疮样雄性BXSB小鼠模型肾脏受累状况的研究

目的 :探讨系统性红斑狼疮样动物模型雄性BXSB小鼠肾脏病变进展状况。方法 :分别测定不同月份的BXSB小鼠的 2 4h尿蛋白含量及其肾脏免疫复合物沉积状况。结果 :雄性BXSB小鼠 2月龄出现肾脏病理改变 ,3月龄出现临床指标改变。结论 :雄性BXSB小鼠 2月龄出现肾脏病理改变 ,3月龄肾脏出现临床指标改变 。

自身抗原表位基因免疫诱导SLE样综合征小鼠模型的建立

通过自身抗原 Sm B/ B′主要表位进行基因免疫 ,诱导系统性红斑狼疮 ( SL E)样综合征的动物模型 ,为进一步探讨 SL E的发病机理奠定基础。以 RT-PCR的方法获得 Sm B/ B′主要表位编码基因 ,构建表达载体 pc DNA3 -Sm B/ B′,基因免疫后以免疫印迹法检测抗 Sm抗体、EL ISA检测抗 ds DNA抗体、免疫荧光法检测肾脏损伤。结果显示基因免疫后小鼠均产生抗 Sm抗体、抗 ds DNA抗体 ,且能诱发动物肾小球 Ig G类免疫复合物的沉积 ,表明自身抗原表位的基因免疫能成功诱导 SL E样综合征小鼠模型。

FK506对狼疮样小鼠肾组织钙调神经磷酸酶活性的影响

目的:观察慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样肾炎小鼠模型肾组织中钙调神经磷酸酶(CaN)活性,及FK506的调控作用。方法:cGVHD狼疮样小鼠模型随机分两组:模型组和FK506治疗组,每组10只。采用发色底物法检测CaN活性。结果:(1)模型组肾小球硬化指数及小管间质损伤总积分显著高于正常组(P<0.001);FK506治疗后肾脏病变明显减轻;(2)模型组肾组织中CaN活性显著增强,与正常对照组肾组织CaN活性相比差异有显著性(P<0.001);FK506组肾组织中CaN活性显著回降(P<0.05);(3)狼疮样肾炎小鼠肾组织中CaN活性与肾小球硬化指数及小管间质损伤总积分呈正相关关系(r1=0.626,P<0.01;r2=0.772,P<0.05)。结论:cGVHD狼疮样小鼠肾组织CaN异常活化,FK506在改善肾组织病理改变的同时,对CaN活性亦起抑制作用。

狼疮鼠模型的研究分析

SLE动物模型研究主要有自发性小鼠模型和诱导性小鼠模型,自发性小鼠模型侧重研究遗传因素对SLE发病的影响,诱导性小鼠模型侧重于研究环境因素、性激素、感染等因素对SLE发病的影响。对狼疮鼠模型的研究,有助于探索SLE的发病机制,并为SLE治疗提供了可靠的实验基础。

敲除小鼠Ormdl3基因可部分缓解降植烷诱导的狼疮表型

目的探讨ORMDL3基因与系统性红斑狼疮(SLE)临床表型之间的关系。方法采用TALEN技术构建Ormdl3基因敲除小鼠。取纯合敲除小鼠(Ormdl3^-/-)与同窝野生小鼠(Ormdl3^+/+)各20只,分为4组,分别腹腔注射降植烷与PBS各0.5 mL,在注射3个月和6个月后比较各组小鼠24 h尿蛋白水平,HE染色比较肾脏损伤程度,称重比较脾脏质量、体质量,流式细胞术比较脾脏组织CD4^+/CD8^+T细胞比例。结果(1)注射降植烷3个月及6个月后,Ormdl3^-/-敲除小鼠脾脏肿大程度低于同时注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠;(2)Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷6个月后,24 h尿蛋白水平较同样注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠差异无统计学意义(P=0.066);HE染色结果显示Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷后肾脏损伤程度较注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠轻。(3)降植烷诱导的Ormdl3^+/+野生小鼠脾脏CD8^+T细胞比例下降(P<0.05),进而导致CD4^+/CD8^+T细胞比例升高(P<0.05),而Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷后能够抵抗CD4^+/CD8^+T细胞比例上升的趋势。结论Ormdl3基因缺失可部分缓解降植烷诱导的狼疮小鼠模型表型程度,初步提示ORMDL3可能在导致SLE发病过程中具有一定作用。

中药联合环磷酰胺治疗SLE模型鼠的实验研究

目的观察中西医结合治疗SLE模型鼠的疗效。方法80只小鼠随机分为3个实验组和1个对照组,腹腔注射细菌脂多糖(LPS)2.5mg/kg构建SLE模型鼠,3个试验组在造模后24h分别给予中药清热解毒补肾方(B)、环磷酰胺(C)、中药+环磷酰胺(D)灌胃治疗,对照组(A)给予灌胃蒸馏水。15天后观察测定各组动物死亡率、24h尿蛋白含量、肾脏免疫复合物沉积情况。结果D组动物死亡率明显低于其余各组(P分别<0.05,0.01);各治疗组(B,C,D组)动物24h尿蛋白及动物肾小球免疫复合物沉积均明显低于对照组(A组),尤以中西医结合治疗组最为明显(P分别<0.05,0.01)。结论中药清热解毒补肾方及西药环磷酰胺对狼疮样模型小鼠均有良好的治疗作用,而两者联用效果最好。

清热解毒补肾方治疗SLE肾模型鼠的实验研究

目的：观察清热解毒补肾方治疗SLE肾模型鼠的疗效。方法：80只小鼠随机分为3个试验组和1个对照组，腹腔注射细菌脂多糖（LPS）2．5mg／kg制造SLE模型鼠，3个试验组在造模后24小时分别给予中药清热解毒补肾方（B）、泼尼松（C）、中药＋泼尼松（D）灌胃治疗，对照组（A）给予蒸馏水灌胃。15天后观察各组死亡率，24小时尿蛋白含量和抗核抗体检测。结果：与A组相比，试验组的死亡率、24小时尿蛋白和血清ANA的滴度均明显低于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。D组血清ANA的滴度又明显低于B组（P〈0．01）。结论：中药清热解毒补肾方对SLE有治疗作用。

ICAM-1参与系统性红斑狼疮中免疫球蛋白产生的实验研究

目的:探讨ICAM-1在系统性红斑狼疮(SLE)免疫球蛋白产生中的作用。方法:流式细胞术检测分析SLE患者、健康者、anti-CD3 Ab/IFN-α刺激健康者CD4^+T细胞及Pristane诱导的狼疮样小鼠及对照鼠中CD4^+T细胞的活化表型;分选获得Pristane处理小鼠来源的CD4^+T细胞和B细胞,并于体外交叉共培养,加入ICAM-1阻断抗体或同型对照抗体,ELISA检测培养上清中IgG和IgM水平。结果:SLE患者及anti-CD3 Ab/IFN-α刺激健康者CD4^+T细胞表达HLA-DR,CD69和ICOS等分子的细胞比例明显高于对照组。Pristane诱导的狼疮样小鼠CD4^+T细胞的活化程度也显著高于对照;Pristane诱导的狼疮样小鼠血清中抗snRNP和抗dsDNA自身抗体水平显著高于对照组;Pristane处理小鼠来源的活化CD4^+T细胞与B细胞共培养可以促进B细胞产生IgM和IgG。而经抗ICAM-1抗体阻断处理的培养上清中IgM含量低于对照组,而IgG含量显著高于对照组。结论:Pristane来源的活化CD4^+T细胞可促进B细胞分化,ICAM-1分子可能在B细胞分化早期发挥作用,但不利于IgM型向IgG型的类别转换,为ICAM-1在SLE中抗体类别转化的分子机制提供新的理论依据。

阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液的抗抑郁样效果

阿魏酸(ferulic acid,FA)是一种广泛存在的低毒酚酸,阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)则是其钠盐。先前的研究已经证实,阿魏酸钠具有显著的神经保护和神经发生增强作用及抗抑郁效果。该研究的目的在于探讨阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液可能的抗抑郁效果。PC12细胞在含80μmol/L阿魏酸钠的DMEM培养基中孵育6d,无菌条件下制备阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞液的无细胞滤液,测定PC12细胞裂解液无细胞滤液中残留的阿魏酸钠量。以慢性不可预期的多种刺激制造大鼠抑郁模型,用行为学、形态学、免疫组织化学和BrdU掺入等方法观察并检测阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液对慢性应激大鼠抑郁模型行为学、海马的组织病理学、海马和大脑皮质的神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达及神经发生的影响。实验证实,阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液能改善抑郁症样模型大鼠的行为学障碍,上调其海马和大脑皮质NGF和BNDF的表达,增加海马神经干细胞/神经前体细胞的增殖。由此可见,阿魏酸钠诱导分化的PC12细胞裂解液的无细胞滤液有明显的抗抑郁效果,而其抗抑郁效果可能源自它的上调NGF和BNDF,以及其增强神经发生作用。

白芍总苷调节TLR9/MyD88/NF-κB通路改善系统性红斑狼疮小鼠肾脏损伤

目的:基于Toll样受体9/髓样分化因子88/核转录因子-κB(TLR9/MyD88/NF-κB)信号通路研究白芍总苷(TGP对MRL/lpr狼疮模型小鼠肾脏损伤的干预作用,探讨TGP防治系统性红斑狼疮(SLE)的部分免疫学机制。方法:将SPF级MRL/lpr雌性小鼠随机分为4组,模型组、地塞米松组(0.15 g·kg^(-1))、TGP高、低剂量组(0.078、0.039 g·kg^(-1)),雌性C57BL/6J小鼠设为空白组,每组7只;各组小鼠每天同一时间段给予相应药物或生理盐水灌胃。4周后采集标本,称取肾脏、脾脏质量,计算脏器指数;生化分析法检测各组血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肾脏组织病理学变化;马松(Masson)染色评估小鼠肾脏组织纤维化程度;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-2、干扰素-α(IFN-α)、IL-4和抗核抗体(ANA)的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织中TLR9、MyD88、NF-κB p65的mRNA表达;免疫荧光法检测肾组织中TLR9、NF-κB p65蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾、脾组织中TLR9、MyD88、NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠SCr、BUN及脾脏指数和肾脏指数明显升高(P<0.05),肾组织病理损伤和纤维化程度明显增强;血清IFN-α、IL-4及ANA水平显著升高,IL-2水平明显降低(P<0.05);肾脏和脾脏中TLR9、MyD88及NF-κB p65的mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,TGP高、低剂量组小鼠SCr、BUN及脾脏指数和肾脏指数明显降低(P<0.05),肾组织病理损伤和纤维化程度明显减轻;血清IFN-α、IL-4及ANA水平明显下降(P<0.05),IL-2水平明显升高;肾脏和脾脏组织中TLR9、MyD88和NF-κB p65等分子mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:TGP可能通过调控TLR9/MyD88/NF-κB信号通路,进而抑制其下游相关炎症因子表达,发挥免疫调节及抗SLE肾脏损伤作用。