应用Fura－2／AM和Probenecid测定免疫细胞胞浆游离Ca^（2＋）浓度

人Ｂ细胞系Ｒａｊｉ和ＭΦ系Ｕ９３７细胞可将负载于胞内的Ｃａ￣（２＋）荧光示踪剂Ｆｕｒａ－２外排和房室化，质膜有机阴离子转运系统抑制剂Ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄ能阻断这些过程，而且对细胞Ｃａ￣（２＋）应答无不良影响。提示Ｒａｊｉ和Ｕ９３７细胞质膜上具有Ｆｕｒａ－２的转运系统；Ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄ可作为应用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ研究这些细胞Ｇ２￣（２＋）应答的试剂。

双氢杨梅素通过诱导自噬减轻慢性帕金森病小鼠的细胞焦亡和坏死性凋亡

目的探讨8周的双氢杨梅素(DHM)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)/丙磺舒(probenecid)(MPTP/p)诱导慢性帕金森病(PD)小鼠运动功能障碍的影响及其分子机制。方法C57BL/6小鼠腹腔注射MPTP/p构建PD模型,将60只健康雄性小鼠随机分为4组(n=15):对照组(Control)、模型组(PD)、DHM干预组(PD+DHM)、阳性对照NEC-1抑制剂组(PD+NEC-1)。除对照组外,其余小鼠(n=45)腹腔注射MPTP(25 mg·kg^(-1)·d^(-1))联合Probenecid(250 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每周2次,干预5周构建慢性PD模型。造模结束后,DHM干预组进行8周DHM灌胃处理(100 mg·kg^(-1)·d^(-1),5 d/周),阳性对照组进行5周NEC-1腹腔注射(6.25 mg·kg^(-1)·d^(-1),2 d/周)。随机选取小鼠进行运动协调性测试(n=10);免疫荧光染色观察黑质内TH、GFAP、Iba-1的表达(n=3);ELISA检测小鼠血清中IL-1β;试剂盒测定纹状体内LDH酶活性;RT-PCR测定TNF-α及IL-6的m RNA水平;Western blot检测小鼠纹状体中TH和病理蛋白α-syn、神经炎症、细胞焦亡、坏死性凋亡及自噬相关蛋白的表达。1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)激活Bv-2小胶质细胞,采用不同浓度的DHM(3.12、6.25、12.5μg/m L)及自噬抑制剂3-MA进行干预;Western blot检测干预后Bv-2细胞自噬及NLRP3炎症小体相关蛋白的表达水平;PI染色检测细胞的死亡情况。结果与对照组相比,PD组小鼠存在运动功能障碍,且TH的阳性细胞数及蛋白水平显著下降(P<0.001),而DHM干预显著改善了小鼠的运动协调能力,增加TH(P=0.0023),降低α-syn的表达(P<0.001)。8周的DHM干预降低了PD小鼠纹状体中胶质细胞异常活化,下调GFAP(P=0.045)和Iba-1(P<0.001)的表达;降低TNF-α(P=0.0015)、IL-6(P<0.001)的m RNA和蛋白水平,上调IL-4(P<0.001),减轻神经炎症反应;DHM通过下调Caspase1的活性、NLRP3炎症小体、GSDMD-N、IL-1β、IL-18的表达水平(P<0.001)抑制细胞焦亡;降低LDH、p-RIPK1、RIPK1、p-RIPK3、RIPK3、MLKL的水平(P<0.001),上调Caspase8(P=0.8944),改善坏死性凋亡;上调Beclin1和ULK1(P<0.001),下调p62和LC3Ⅰ(P<0.001),激活自噬。体外实验结果表明,不同浓度的DHM干预(3.25、6.5、12.5μg/m L)均可通过改善MPP+诱导的Bv-2细胞自噬受损,抑制NLRP3炎症小体的激活减轻炎症,而抑制自噬钝化了DHM的抗炎功效。结论DHM能改善慢性MPTP/p诱导PD小鼠的运动协调能力障碍,其机制可能是通过激活自噬抑制神经胶质细胞活化引起的神经炎症反应、细胞焦亡以及坏死性凋亡。

苯溴马龙与磺丙舒治疗痛风的随机对照研究

本文对７４例痛风患者进行随机对照试验，比较苯溴马龙（ｎ＝３９）与丙磺舒（ｎ＝３５）的临床疗效和安全性，结果表明，苯溴马龙组（苯组）总有效率高于丙磺舒组（丙组），分别为９７．４４％和８５．７１％和８５．７１％（ｐ＞０．０５）；治后１周血尿酸下降值苯组高于丙组，分别为２２８．４９±９１．０１和１６８．０３±１３７．４３μｍｏｌ／Ｌ（ｐ＜０．０５）；同期尿酸排泄苯组亦高于丙组。两组副反应发生率分别为２０．５１％及５４．２９％，苯组明显低于丙组（ｐ＜０．００１）。本文表明苯溴马龙较丙磺舒显效更快、副反应少、耐受性良好。

丙磺舒对阿莫西林在猪体内的药代动力学影响

本实验采用高效液相色谱法测定猪血浆中阿莫西林的浓度,研究了丙磺舒对阿莫西林在健康猪体内药物动力学的影响。结果表明,单剂量肌肉注射阿莫西林后,阿莫西林吸收迅速,药峰时间为(0.19±0.11)h,药物浓度为(7.21±3.27)μg/mL,其动力学模型为一级速率一室模型。使用丙磺舒后,阿莫西林的半衰期由(0.86±0.18)h延长到(2.77±1.02)h(P<0.05),AUC由(12.38±5.69)μg/mL·h增加至(35.24±18.62)μg/mL·h,药峰时间为(0.42±0.32)h,药峰浓度为(6.24±3.43)μg/mL·h。

酚红外排水平评价肺上皮细胞多药耐药相关蛋白1的功能

目的:以酚红为多药耐药相关蛋白1(MRP1)的底物,丙磺舒为其抑制剂,通过酚红的外排水平建立评价肺上皮细胞MRP1的功能的方法。方法:小鼠静脉注射酚红(250mg/kg),30min后进行肺泡灌洗,测定灌洗液中酚红的浓度,并以雾化吸入MRP1特异性抑制剂丙磺舒(150mg/kg)作为对照,观察给予抑制剂前后灌洗液中酚红浓度及灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值的变化,来评价小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。结果:与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒后,血浆中酚红浓度无显著性差异,但与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒60min后,其肺泡灌洗液中酚红浓度、灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值显著性降低。结论:肺泡灌洗液中酚红的外排水平反映小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。

稳定表达hOAT1的HEK293细胞系的建立及鉴定

目的构建人肾脏近曲小管阴离子转运体1(human organic anion transporter 1,hOAT1)-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒,获得稳定表达pEGFP-hOAT1的HEK-293细胞系。方法构建EGFP与hOAT1的融合基因表达载体pEGFP-hOAT1,并利用FuGENE 6转染试剂将其转染至HEK293细胞中,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,经G418抗性筛选获得稳定转染细胞株。用RT-PCR法、qRT-PCR法和Western blot技术,检测稳定转染细胞及正常细胞hOAT1 mRNA和蛋白的表达情况,并进一步用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)考察稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力,以及丙磺舒对hOAT1的抑制作用。结果使用该文的方法,细胞转染率可达90%。RT-PCR、qRT-PCR、Western blot,以及对氨基马尿酸摄取、丙磺舒抑制实验结果显示,相对于正常组,转染细胞在荧光显微镜下呈绿色荧光,其hOAT1表达均呈阳性(P<0.01);稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力明显升高(P<0.05),且丙磺舒对hOAT1有明显的抑制作用(P<0.05)。结论高效快速地建立了稳定高表达hOAT1的HEK293细胞系,为核苷类膦酸类似物这类药物引起的临床剂量依赖性肾毒性的机制研究奠定了模型基础,也为体外研究hOAT1底物或抑制剂的筛选提供了一个便利的工具。

不同剂量丙磺舒对头孢克罗药物动力学的影响

目的 :观察不同剂量丙磺舒 (Pro)对头孢克罗 (Cef)药动学的影响 ,为两者联用提供依据。方法 :家兔 30只随机分成 5组 ;Cef 5 0mg·kg- 1组 ,Cef5 0mg·kg- 1+Pro 5 0mg·kg- 1组 ,Cef 5 0mg·kg- 1+Pro 10 0mg·kg- 1组 ,Cef 5 0mg·kg- 1+Pro2 0 0mg·kg- 1组 ,Cef 2 5mg·kg- 1+Pro 10 0mg·kg- 1组。灌胃给药后于不同时间股静脉取血 ,HPLC法测定Cef血药浓度 ,NDST程序计算药动学参数。结果 :在给予Cef 5 0mg·kg- 1条件下 ,随Pro联用剂量的增大 ,Cef的Cmax、AUC增高而Cl/F、V/F减少 ;Cef2 5mg·kg- 1+Pro 10 0mg·kg- 1组各参数 (除Cl/F外 )与Cef 5 0mg·kg- 1组差异不显著。结论 :Pro可明显改变Cef的药动学 ,在实验剂量范围内其影响程度与丙磺舒剂量有关。Cef 2 5mg·kg- 1联用Pro10 0mg·kg- 1可产生Cef 5 0mg·kg- 1的血药水平。

氨苄青霉素/丙磺舒胶囊的临床疗效与安全性研究

采用随机对照多中心临床研究 ,使用氨苄青霉素 /丙磺舒胶囊治疗急性细菌性感染患者 10 4例。其中 5 0例与进口氨苄青霉素胶囊治疗同类患者 5 0例进行随机对照试验 ;5 4例为开放性试验。试验组和对照组痊愈率与有效率均无显著性差异。试验组细菌清除率为 86 7% ,与对照组虽无显著性差异 ,但其耐药率为 7 1% ,低于对照组。不良反应发生率为 5 0 %。结果表明氨苄青霉素 /丙磺舒胶囊是一高效、安全的抗菌素。

氨苄西林／丙磺舒胶囊的人体生物等效性研究

目的:研究2种氨苄西林／丙磺舒胶囊的人体生物等效性。方法:20名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服受试制剂或 参比制剂,采用高效液相色谱法分别测定人血浆中氨苄西林和丙磺舒的浓度,利用3p97软件对各药动学参数进行方差分析和双单 侧t检验。结果:受试制剂与参比制剂中氨苄西林的AUC分别为(19．527±5．835)、(18．424±5．807)(μg·h)／ml,Cmax分别为 (5．468±1．460)、(5．360±1．936)μg／ml,tmax分别为(2．250±0．866)、(2．350±1．027)h,t1／2ke分别为(1．188±0．364)、 (1．203±0．382)h;丙磺舒的AUC分别为(92．924±17．176)、(87．558±22．587)(μg·h)／ml,Cmax分别为(13．635±2．308)、 (13．931±2．176)μg／ml,tmax分别为(2．450±1．245)、(2．650±0．961)h,t1/2ke分别为(3．747±0．749)、(3．784±0．711)h。经方 差分析和双单侧t检验,上述药动学参数无统计学差异(P>0．05)。结论:2种氨苄西林／丙磺舒胶囊具有生物等效性。

丙磺舒对阿莫西林在家兔体内的药动学影响

目的：观察丙磺舒对阿莫西林在健康家兔体内药动学的影响。方法：采用微生物杯碟法测定兔血清中阿莫西林的浓度。结果：阿莫西林单剂量肌内注射后，吸收迅速，Tmax=(0．78±0．09)h，Cmax=(0．87±0．30)μg·mL-1，其代谢模型为一级速率一房室模型。当阿莫西林和丙磺舒等剂量伍用时丙磺舒对阿莫西林药动学参数的影响达到最大值：阿莫西林的t1／2由(2．06±0．09)h延长至(5．50±0．52)h，AUC由(4．07±0．05)μg·mL-1·h增加至(13．75±3．09)μg·mL-1·h，Cmax由(0．87±0．30)μg·mL-1增加至(6.30±1．46)μg·mL-1，且三者统计学差异极显薯(P<0 01)。结论：丙磺舒对阿莫西林的药动学参数的影响呈S型。当两者等剂量（？）用时影响最大。

氨苄西林丙磺舒胶囊在健康男性体内的生物等效性评价

目的对中国男性健康志愿者口服氨苄西林丙磺舒胶囊后进行生物等效性评价。方法选取20名海南医学院男性健康志愿者,采用单剂量双周期、随机和交叉试验设计,口服氨苄西林丙磺舒胶囊0.75g后,以HPLC法分别测定不同时间点的氨苄西林和丙磺舒血药浓度。并利用DAS 2.0软件计算其药动学参数和进行统计学分析。结果参比制剂与受试制剂的氨苄西林主要药动学参数T_(max)、C_(max)、AUC_(0→12)和AUC_(0→∞)分别为(2.05±0.56)h和(2.13±0.46)h;(10.47±4.40)mg/mL和(10.65±4.22)mg/mL;(59.77±27.24)(mg·h)/mL和(62.68±24.56)(mg·h)/mL;(68.18±30.34)(mg·h)/mL和(71.78±28.76)(mg·h)/mL。丙磺舒主要药动学参数T_(max)、C_(max)、AUC_(0→24)和AUC_(0→∞)分别为(1.98±0.82)h和(1.75±0.73)h;(18.41±5.67)mg/mL和(19.78±5.45)mg/mL;(109.41±41.34)(mg·h)/mL和(113.07±38.78)(mg·h)/mL;(114.47±41.24)(mg·h)/mL和(118.88±38.21)(mg·h)/mL。参比制剂与受试制的氨苄西林、丙磺舒主要药动学参数经统计学分析均无显著性差异。结论两制剂具有生物等效性。

高效液相色谱法测定人血浆中氨苄西林、丙磺舒的血药浓度的价值

目的 建立测定氨苄西林、丙磺舒血药浓度的高效液相色谱法。方法 色谱柱：Symmetry Shield^TM RP18柱（5μm,150mm×3．9mm）；流动相氨苄西林：0．068mol／L的磷酸二氢钾溶液（pH3．0）-乙腈（92：8，V／V），丙磺舒：水-乙腈-1mol／L的磷酸二氢钾溶液．1mol／L冰醋酸（59．5：39．8：0．62：0．08，V／V，加入0．15％的三乙胺调至pH2．76）。流速均为1．4ml／min；检测波长氨苄西林为210nm，丙磺舒为254nm。结果 氨苄西林的浓度在1．25～40μg/ml范围内线性关系良好（r=0．9999），丙磺舒的浓度在0．625～20μg／ml范围内线性关系良好（r=0．9999）。结论 本法操作简便，灵敏，快速．重现性好，适用于人体药动学研究。

含丙磺舒高分子药物纳米微球的制备

非甾体抗炎药丙磺舒与甲基丙烯酸 2 羟乙酯 (HEMA)反应制得含丙磺舒单体HP ,此单体在乙醇 /水体系中与甲基丙烯酸甲酯 (MMA)共聚得到含丙磺舒高分子药物纳米微球 ,聚合产物用1H NMR ,FTIR ,GPC和TEM进行了表征。结果表明HP中丙磺舒以酯键连接到甲基丙烯酸 2 羟乙酯上 ,微球由HP和MMA的共聚物构成 ,平均直径为 ( 90± 5 )nm ,含丙磺舒 4 7 4 % ,含药量较高。

硝酸铋与丙磺舒合用对顺铂肾毒性的防护作用

毒性剂量的顺铂（ＣＰ３０μｍｏｌ·ｋｇ－１ｉｐ）可引起血尿素氮（ＢＵＮ）升高。硝酸铋（ＢＮ）５μｍｏｌ·ｋｇ－１于ＣＰ前４８和２４ｈｓｅ，丙磺舒（Ｐｒｏ）７００μｍｏｌ·ｋｇ－１于ＣＰ前１５，１ｈ及ＣＰ后５ｈｉｇ，或ＢＮ与Ｐｒｏ二者半量合用，按上述给药，均能抑制ＣＰ引起的ＢＵＮ升高，尤以ＢＮ＋Ｐｒｏ组抑制作用显著。肾脏光镜和电镜标本显示，ＣＰ使肾小管受损严重；ＢＮ组，Ｐｒｏ组和ＢＮ＋Ｐｒｏ组均使ＣＰ引起的肾小管受损减轻，尤以ＢＮ＋Ｐｒｏ组减轻明显。ＢＮ２．５－２０μｍｏｌ·ｋｇ－１剂量依赖性地诱导小鼠肾脏金属硫蛋白合成。Ｐｒｏ可使ＣＰ后２４ｂ肾铂含量明显降低；Ｐｒｏ或Ｐｒｏ＋ＢＮ使尿铂累积排出量增加，血浆铂浓度降低。提示ＰＦＯ防护ＣＰ肾毒性与其减少肾铂分布，增加尿铂排出有关。

慢性帕金森病小鼠模型的建立及其行为学稳定性研究

目的探讨慢性MPTP帕金森病小鼠模型的建立方法及其行为学稳定的评价。方法小鼠先腹腔注射辅佐剂二丙苯磺胺（250mg／kg），0．5h后皮下注射MPTP（15mg／kg），每周2次，5周内总共注射10次。第7周开始观察小鼠的行为学变化，每周1次，连续观察6周。然后用免组化方法观察黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞数的变化。结果模型组与对照组（腹腔及皮下注射生理盐水）相比，造型结束后连续6周表现出稳定而明显的行为困难，第6周对照组与模型组的行为得分分别为（1996．7±281．3）分和（1369．0±149．4）分，（P〈0．05），开始制模起12周后黑质部位酪氨酸羟化酶免疫阳性细胞仍显著减少，对照组黑质部位TH阳性细胞数为（30．4±4．7）个，平均灰度为182．29±8．67，而模型组则分别为（20．5±3．9）个和（158．88±13．88）个，2组间差异显著（P〈0．01），显示出帕金森动物模型的典型特征。结论联合使用MPTP与Pmbeneeid可以成功制作帕金森病慢性小鼠模型，目该模型在造型结束后至少可稳定6周以上。

丙磺舒对多药耐药相关蛋白的逆转作用及其对药代动力学的影响与应用

多药耐药相关蛋白(MRP)载体在药物的体内处置过程中发挥了重要的作用,丙磺舒对MRP有较好的抑制作用。本文对MRP的表达及其对药物体内过程的影响,丙磺舒对MRP的逆转作用及其对并用药物药代动力学的影响与应用作一综述。

高效液相色谱法测定人血清中氨苄西林、丙磺舒的浓度研究

目的：建立测定人血清中氨苄西林、丙磺舒浓度的高效液相色谱法。方法：（1）氨苄西林,以诺氟沙星为内标,血清样品用0.6%的高氯酸沉淀蛋白后进行测定;色谱柱为HigginsTMC18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为有机相（甲醇-乙腈-异丙醇,100∶2∶5,v/v）：水相（0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH3.5）=23∶77;检测波长210 nm;流速1.0 ml/min;柱温30℃。（2）丙磺舒,以缬沙坦为内标,血清样品用乙腈沉淀蛋白后进行测定;色谱柱为HigginsTMC18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为有机相（甲醇-乙腈,400∶275,v/v）：水相（乙酸-水,1∶60,v/v）=77∶23;检测波长280 nm;流速1.0 ml/min;柱温30℃。结果：氨苄西林在0.14~11.2μg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.999 5）,最低检测限为0.14μg/ml;丙磺舒在0.20~16.0μg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.999 1）,最低检测限为0.20μg/ml。结论：高效液相色谱法操作简便、灵敏、专一性好,适用于人体药动学研究。

注射用复方氨苄西林钠药代动力学研究

目的:考察注射用复方氨苄西林钠的药代动力学特征。方法:HPLC法检测注射家兔后不同时间血浆的氨苄西林与丙磺舒药代动力学参数。结果:以氨苄西林钠计,注射用复方氨苄西林钠300 mg/kg组能够显著的增加氨苄西林半衰期,由(23±10)min增至(31±15) min,AUC由(8．5±0．9)mg/(h·mL)增至(6．2±0．8) mg/(h·mL),注射用复方氨苄西林钠120 mg/kg组氨苄西林AUC由(2．8±0．9)mg/(h·mL)增至(5．7±1．0)mg/(h·mL),注射用复方氨苄西林钠50 mg/kg组氨苄西林AUC由(0．7±0．2)mg/(h·mL)增至(1．5±0．3)mg/(h·mL)(P＜0．05或P＜0．01)。结论:注射用复方氨苄西林钠具有增强注射用氨苄西林钠活性的作用。

联用丙磺舒对头孢克洛药动学的影响(英文)

目的：研究与不同剂量丙磺舒（Probenecid）联用对头孢克洛（Cefaclor）药动学的影响及其定量关系。并探讨其可能机制。方法：头孢克洛血、尿药浓度监测：雄性家兔24只，随机分成4组。各组给药剂量如下：Ⅰ组头孢克洛50mg·kg^-1；11组头孢克洛50mg·kg^-1联用丙磺舒100mg·kg^-1；Ⅲ组头孢克洛50mg·kg^-1联用丙磺舒250mg·kg^-1；Ⅳ组头孢克洛50mg·kg^-1联用丙磺舒625mg·kg^-1。灌胃给予丙磺舒0．5h后，再给予头孢克洛，于用药后不同时间取血、尿液样本。HPLC法测定头孢克洛血药及尿药浓度，DAS软件计算药动学参数。血浆蛋白结合率测定：实验分组及剂量同上，给药1h后取血。以平衡透析法测定头孢克洛血浆蛋白结合率。结果：当丙磺舒联用剂量在0～250mg·kg^-1范围内时，随丙磺舒联用剂量增大，头孢克洛的T1/2ka、Tmax、Cmax、AUC等参数相应增大而CL／F及Vd／F相应降低（P〈0．01）；但当丙磺舒联用剂量达625mg·kg^-1时，头孢克洛的Cmax，降低（P〈0．01），AUC、CUF则稳定于联用丙磺舒250mg·kg^-1时的水平。在本实验剂量范围内，随丙磺舒联用剂量增大，头孢克洛原型尿排泄峰时间逐渐后移，生物半衰期延长及总尿药排泄率显著降低（P〈0．01）。丙磺舒联用剂量在0～250mg·kg^-1范围内，随丙磺舒联用剂量增大，头孢克洛血浆蛋白结合率显著降低（P〈0．01），但当丙磺舒联用剂量达625mg·kg^-1时，头孢克洛血浆蛋白结合率反与头孢克洛单用时水平相当（P〉0．05）。结论：联用丙磺舒可以明显改变头孢克洛的药动学过程，使其Vd、CL降低，Cmax增高，AUC增大，生物半衰期延长，总尿药排泄率降低。

痛风宁颗粒治疗慢性痛风性关节炎30例临床研究

为观察痛风宁颗粒对慢性痛风性关节炎的疗效 ,对 3 0例男性慢性痛风性关节炎患者进行 3 0 d的治疗 ,并设立丙磺舒组 3 0例进行治疗对照 ,结果表明痛风宁具有较好的降低血尿酸和改善关节功能的作用 。