人脐带干细胞外泌体对人毛乳头细胞增殖的影响

目的探究人脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSC-Exos)对人毛乳头细胞(HDPCs)增殖的影响,并对hUCMSC-Exos促毛发生长作用的机制进行初步探索。方法二步酶法分离HDPCs并进行体外培养,培养人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs),收集细胞培养上清,通过超高速离心法提取外泌体,并对其进行电镜、粒径及表面标记物鉴定。双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)诱导HDPCs建立雄激素性脱发细胞模型。将hUCMSC-Exos与HDPCs共培养,采用细胞增殖试验(EdU)检测诱导的HDPCs的相对活力。Real-time qPCR检测碱性磷酸酶(ALP)表达水平、Western blot检测β-catenin、Wnt10b、GSK-3β在蛋白水平的表达。结果所获取的HDPCs、h UC-MSCs和hUCMSC-Exos均符合毛乳头细胞、间充质干细胞及外泌体特征。EdU阳性细胞数显著增加,外泌体可有效促进HDPCs增殖(P<0.05),增强HDPCs活力,减轻DHT造成的损伤(P<0.05)。Real-time qPCR显示外泌体可增强ALP基因表达水平(P<0.05),增强毛囊诱导能力;Western blot证实β-catenin、Wnt10b、GSK-3β在蛋白水平的表达均有差异(P<0.05)。结论hUCMSCExos可促进DHT诱导的HDPCs增殖,增强其毛囊再生修复能力,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

益母草碱调节Hippo-YAP信号通路对结肠癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响

目的探讨益母草碱(Leo)调节Hippo-Yes相关蛋白(YAP)信号通路对结肠癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响。方法分别用0、1.875、3.75、7.5、15、30、60μg/mL Leo处理人结肠癌LOVO细胞48 h,筛选适宜的Leo浓度用于实验。将LOVO细胞分为空白组、Leo低剂量组、Leo中剂量组、Leo高剂量组、Leo高剂量+pcDNA组、Leo高剂量+pcDNA-YAP组,CCK-8法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测LOVO细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Bcl2相关X蛋白(Bax)、多药耐药关联蛋白1(MRP1)、P-糖蛋白(PGP)mRNA表达;Western blot检测LOVO细胞中YAP、结缔组织生长因子(CTGF)、富半胱氨酸蛋白61(CYR61)蛋白表达。以LOVO/五氟尿嘧啶(5-FU)细胞为研究对象,按照上述分组进行处理,并分为A-空白组、A-Leo低剂量组、A-Leo中剂量组、A-Leo高剂量组、A-Leo高剂量+pcDNA组、A-Leo高剂量+pcDNA-YAP组,CCK-8检测LOVO/5-FU细胞的耐药性。结果与空白组相比,Leo低剂量组、Leo中剂量组、Leo高剂量组LOVO细胞A_(450)值(分别为0.86±0.08、0.75±0.06、0.43±0.04比0.97±0.08)、EdU阳性细胞率[分别为(50.96±2.17)%、(43.37±2.05)%、(28.84±1.19)%比(57.75±2.36)%]、PCNA、MRP1、PGP mRNA表达及YAP(分别为2.05±0.17、1.78±0.14、1.23±0.11比2.36±0.19)、CTGF、CYR61蛋白表达降低,细胞凋亡率[分别为(15.54±0.65)%、(23.38±1.01)%、(36.69±1.78)%比(8.34±0.31)%]、Bax mRNA表达升高,且呈剂量依赖性(P<0.05);与Leo高剂量组、Leo高剂量+pcDNA组相比,Leo高剂量+pcDNA-YAP组LOVO细胞A_(450)值(分别为0.77±0.05比0.43±0.04、0.45±0.04)、EdU阳性细胞率[分别为(46.69±1.95)%比(28.84±1.19)%、(27.67±1.25)%]、PCNA、MRP1、PGP mRNA表达及YAP、CTGF、CYR61蛋白表达升高,细胞凋亡率、Bax mRNA表达降低(P<0.05);与A-空白组相比,A-Leo低剂量组、A-Leo中剂量组、A-Leo高剂量组LOVO细胞活力降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与A-Leo高剂量组、A-Leo高剂量+pcDNA组相比,A-Leo高剂量+pcDNA-YAP组LOVO细胞活力升高(P<0.05)。结论Leo可能通过抑制Hippo-YAP信号通路抑制结肠癌细胞增殖和化疗耐药性,促进细胞凋亡。

美洲大蠊提取物对前列腺癌细胞的抑制作用及相关机制研究

目的:研究美洲大蠊提取物(PA-CII-3)抗前列腺癌的作用及相关机制。方法:将对数生长期的PC3细胞分为对照组及实验组,在实验组细胞中依次加入1 000、1 200、1 400、1 600、1 800、2 000μg/mL的PA-CII-3溶液进行干预,采用CCK-8法筛取合适的药物浓度和作用时间。然后以1 400μg/mL的PA-CII-3溶液对PC3细胞持续干预72 h,采用CCK-8法和平板集落形成实验检测细胞增殖能力,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,分别采用Real-time qPCR法和Western blot法检测锌α2糖蛋白(ZAG)的mRNA和蛋白表达情况。结果:PA-CII-3干预后,PC3细胞的增殖和迁移能力均受到显著抑制(P<0.05,P<0.01),并促进了PC3细胞中ZAG的mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:PA-CII-3可能通过抑制PC3细胞的增殖和迁移及上调ZAG发挥抗前列腺癌作用。

lncRNA GIHCG靶向miR-429对食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的探讨长链非编码核糖核酸(lncRNA)GIHCG靶向微小核糖核酸-429(miR-429)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法常规培养人ESCC细胞系(EC9706、TE1、KYSE150细胞)及正常食管鳞状上皮细胞系(Het-1A细胞),用RT-PCR法筛选实验细胞。将对数生长期实验细胞随机分为si-NC组、si-GIHCG组,分别转染lncRNA敲低质粒阴性对照、lncRNA GIHCG敲低质粒。用RT-PCR法检测细胞中lncRNA GIHCG、miR-429表达,用CCK-8法检测细胞增殖能力[吸光度值(OD值)],用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,用Western blotting法检测细胞中细胞增殖表型蛋白[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)]和转移表型蛋白[基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]表达。将对数生长期实验细胞随机分为GIHCG-WT+miR-429 mimics组、GIHCG-WT+NC-mimics组、GIHCG-MUT+miR-429 mimics组、GIHCG-MUT+NC-mimics组,用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA GIHCG与miR-429的靶向关系。结果与Het-1A细胞比较,EC9706、TE1、KYSE150中lncRNA GIHCG相对表达量高(P均<0.05),miR-429相对表达量低(P均<0.05)。由于TE1细胞中lncRNA GIHCG的相对表达表达量最高、miR-429相对表达量最低,因此以TE1细胞作为实验细胞。与si-NC组比较,si-GIHCG组lncRNA GIHCG相对表达量低,miR-429相对表达量高,各时间OD值低,细胞移动距离百分比低,Cyclin D1、PCNA、MMP-2、MMP-9相对表达量低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与GIHCG-WT+NC-mimics组比较,GIHCG-WT+miR-429 mimics组荧光素酶相对活性低(P<0.05);GIHCG-MUT+miR-429 mimics组、GIHCG-MUT+NC-mimics组荧光素酶相对活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论ESCC细胞中lncRNA GIHCG高表达,miR-429低表达;敲低lncRNA GIHCG通过靶向调控miR-429抑制ESCC细胞增殖、迁移及侵袭。

丹参酮防治动脉再狭窄作用的实验研究

目的 :观察丹参酮对实验性动脉再狭窄的防治作用 ,并初步探讨其作用机制。方法 :雌性KM小鼠随机分为模型组、高剂量组、低剂量组 ,每组 12只。将小鼠左颈总动脉近动脉分叉处结扎 ,造成内膜增生、颈动脉狭窄模型。将模型组结扎动脉对侧血管作为正常组。术前两天开始给药 ,高、低剂量组分别灌胃给予丹参酮 6,3g·kg- 1·d- 1,模型组给予等体积的溶媒。给药 4周后 ,取颈动脉作HE染色 ,光镜下观察动脉形态并用图像分析系统分析动脉内膜面积、中膜面积、相对管腔面积及内膜 /中膜面积 ,用免疫组化测定增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平并计算阳性指数。结果 :与正常组比较 ,模型组管腔相对面积明显减小 (P <0 .0 1) ,内膜面积、中膜面积及内膜 /中膜面积增大 ,差异显著 (P <0 .0 1) ;与模型组比较 ,丹参酮低剂及高剂组的管腔相对面积均显著增大 (P <0 .0 1) ,内膜面积、中膜面积及内膜 /中膜面积均有减小 (P <0 .0 5) ,PCNA的表达明显减少 ,阳性指数显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :丹参酮可抑制由于血流动力学改变而引起的以平滑肌细胞增殖迁移为主要病理特征的内膜增生 ,提示对经皮腔内冠状动脉血管成形术 (PTCA)

白藜芦醇抑制HCT116结肠癌细胞增殖与Wnt/β-catenin的关系研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及可能的分子机制。方法采用结晶紫染色和Western blot分析Res对HCT116细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞术和Western blot分析Res对HCT116细胞凋亡的促进作用;利用TCF4/LEF萤光素酶报告质粒检测Res对Wnt/β-catenin信号转导的影响。采用Western blot和PCR分析Res对HCT116细胞内β-catenin表达水平的影响。结果与对照组相比,Res能抑制HCT116细胞增殖,下调PCNA蛋白水平;流式细胞术和Western blot检测结果均显示,Res能明显促进HCT116细胞凋亡;报告质粒分析结果显示,Res呈浓度依赖性降低TCF4/LEF报告质粒萤光素酶活性(Res为20μmol·L-1时,P<0.05;Res为40或80μmol·L-1时,P<0.01);Western blot和PCR分析结果显示,Res不仅明显降低HCT116细胞中β-catenin的蛋白水平,同时也下调β-catenin mRNA的表达水平。结论Res能抑制HCT116细胞增殖并促进凋亡,其机制可能至少与Res下调β-catenin mRNA表达,抑制Wnt/β-catenin信号转导有关。

参与肺动脉平滑肌细胞增殖信号转导机制及信号转导抑制剂的研究进展

肺动脉高压是一种以肺血管阻力升高为特征,最终导致右心功能严重受限、衰竭甚至死亡的慢性进展性疾病。其组织病理学改变主要以肺血管重构为特点,而肺动脉平滑肌细胞在外周血管的异常增殖是肺血管重构的主要病理基础。该文主要对参与肺动脉平滑肌细胞增殖信号转导机制及信号转导抑制剂的研究进展作一综述。

番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析

目的考察番石榴酸（guavenoic acid，GA）对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞，给予GA（0.3、1、3、10、30 n·L^－1），并设空白对照组、溶媒对照组（0.1％ DMSO）、分泌模型组及阳性药组（150 nmol·L^－1格列苯脲含1‰DMSO），药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素，用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^－1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型（BIS）、高糖刺激胰岛素分泌模型（GSIS），用放射免疫法测定药物对 INS-1细胞胰岛素分泌的影响，结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较，GA 能明显地促进 INS-1胰岛细胞的增殖（P ＜0.01）并能明显增加 INS-1细胞内胰岛素含量（P ＜0.01），0.3～30 nmol·L －1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用（P ＜0.05或 P ＜0.01），0.3～30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 Insulin mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。结论GA 能促进 INS-1胰岛β细胞增殖；增加细胞内胰岛素含量与分泌量，可能与其上调 Insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。

粉防己甲素抑制人结肠癌细胞增殖与Wnt/β-catenin信号的关系研究

目的研究粉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法采用结晶紫染色和流式细胞分析检测Tet对HCT116细胞增殖的抑制作用;利用流式细胞术分析和Annexin-V EGFP染色检测Tet对HCT116细胞凋亡的影响;利用萤光素酶报告质粒法检测Tet对Wnt/β-catenin信号转导的影响;采用Western blot检测Tet对HCT116细胞内β-catenin蛋白水平的影响。结果与对照组相比,Tet能抑制HCT116细胞增殖,在5μmol·L-1时已明显抑制细胞增殖(P<0.05);流式分析和Annexin-V EGFP免疫荧光染色检测结果均显示,Tet能明显诱导HCT116细胞凋亡;与对照组相比,Tet处理组LEF/TCF4和Myc/Max报告质粒萤光素酶活性降低,并且Tet处理组细胞内β-catenin蛋白水平也明显下降。结论 Tet能抑制HCT116细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与Tet通过降低细胞内β-catenin蛋白水平,抑制Wnt/β-catenin信号转导有关。

以红芪替换黄芪的益气养血复方含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗氧化的影响比较

目的:比较红芪替换益气养血复方中黄芪后,含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗氧化衰老的影响。方法:以相同剂量红芪替换益气养血复方中的黄芪,用MTT法确定含药血清最佳浓度和时间及对ConA诱导的老龄鼠脾淋巴细胞增殖的影响;用含药血清与老龄小鼠脾淋巴细胞共培养后,测定细胞SOD的活性,MDA、ROS的含量及培养上清中IL-2的含量。结果:含药血清浓度40%培养72 h益气养血含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激效果最佳,两种药物均可降低细胞内ROS水平,提高IL-2含量,且益红优于益黄。两种药物均能提高在ConA诱导下淋巴细胞的增殖能力,增强老龄鼠脾淋巴细胞内SOD活性,降低MDA含量,但两者之间无差异。结论:含黄芪及含红芪的益气养血复方含药血清均能起到一定的体外抗细胞衰老作用,且两者作用强度相似。

刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34^+造血干/祖细胞增殖分化能力的影响

目的:观察刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34+造血干/祖细胞(HSPC)增殖分化能力的影响。方法:采用MTT法测定活细胞OD值,计算CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率。免疫磁珠分选人脐血CD34+造血干/祖细胞,细胞记数、双色直接免疫荧光标记法和流式细胞仪分析细胞增殖分化能力变化。结果:MTT检测法显示,0.01~10μmol.L-1的CL1处理,剂量依赖性和时间依赖性地抑制胃癌SGC-7901细胞生长。经14 d的培养,与细胞对照组相比,10、1μmol.L-1的CL1细胞数有下降趋势,但差异无显著性;表达粒系/单核巨噬系细胞表型CD15和CD11b的细胞百分数无显著差异。经14 d的培养,与培养0 d比较,CD15显著增高(P<0.05),CD11b有增高趋势,但无显著性差异。结论:CL1对胃癌SGC-7901细胞的体外生长具有抑制作用,但对人脐带血CD34+HSPC的增殖、和向粒细胞、单核巨噬细胞分化无明显影响,表明CL1在抗肿瘤作用剂量下,不会明显抑制造血干/祖细胞向粒-单细胞的增殖分化,提示CL1可能不会引起明显的造血抑制。

转化生长因子-β(TGF-β)影响豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的研究

目的本研究探讨转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)体外刺激豚鼠巩膜成纤维细胞,观察豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。方法原代培养豚鼠巩膜成纤维细胞并鉴定,MTT法检测豚鼠巩膜成纤维细胞的增殖,培养液分别加入20 ng·m L-1TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3,分别于12 h、24 h、48 h、72 h,Real-time PCR检测α-SMA mRNA,Western-blotting和免疫荧光化学法检测其蛋白表达。结果与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.05),其中TGF-β1促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖作用最强(P<0.05);TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3均增加α-SMA的表达(均为P<0.001),TGF-β3促进α-SMA表达作用最强(P<0.001)。结论 TGF-β通过调控细胞外基质合成参与调控巩膜组织重塑。

桂皮醛对激素诱导的破骨细胞分化过程的保护作用及分子机制

目的研究桂皮醛对激素诱导的体外破骨细胞增殖分化及骨吸收功能增强的保护作用及分子机制。方法RANKL联合M-CSF体外诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞,分为对照组、地塞米松处理组和不同浓度(11.6、23.2、46.4μg·L-1)桂皮醛(cinnamic alde byde,CA)干预组;TRAP染色试剂盒鉴定成熟破骨细胞;MTT法观察地塞米松和桂皮醛在不同时间点对破骨细胞增殖的抑制作用;ELISA法检测细胞培养液上清中TRACP5b的表达水平;RT-PCR分析破骨细胞相关转录因子(RANK、NFATc1)mRNA的表达状态。结果地塞米松处理后,破骨细胞的增殖分化及骨吸收功能明显增强(P<0.05);而经不同浓度桂皮醛干预后,与地塞米松组相比,细胞增殖活性、上清液中TRACP-5b的含量以及RANK、NFATc1mRNA的表达水平随药物浓度的增加呈剂量依赖性降低(P<0.05)。结论桂皮醛可有效抑制激素诱导的破骨细胞的增殖及骨吸收功能,其作用机制可能是通过下调RANK以及下游NFATc1基因的表达。

白藜芦醇对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响．方法:MTT法检测不同浓度(0,10,20,50,100．200μmol/L)Res处理24,48,72 h对SGC7901细胞的抑制率．流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的早期凋亡率．电镜扫描观察SGC7901细胞形态学改变,分光光度法检测caspase-3活性．结果:Res在20-300μmol/L浓度范围内．以浓度和剂量依赖的方式抑制胃癌细胞的增殖(P＜0．01)．经0,10,20,50,100,200μmol/L Res处理24 h后,细胞凋亡率分别为1．17%,3．73%, 8．75%,23．35%,63．97%和70．10%,晚期凋亡和坏死的细胞比例分别为5．66%,7．22%,9．86%, 6．91%,12．51%及11．98%,各组之间差异不大．电镜下见到典型的细胞凋亡的形态学改变．100μmol/L Res处理后6 h caspase-3活性增加,18 h达高峰,24 h后下降,48 h仍高于正常(0．135±0．036 vs 0．069±0．008,P＜0．05)．经20,50,100μmol/L Res处理18 h后的细胞的caspase-3活性分别为0．169±0．017．0．247±0．028,0．353±0．044(P＜0．01),较对照组(0．063±0．006)分别增加2．68倍、3．92倍和5．61倍．结论:Res通过诱导caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,诱导细胞凋亡．

TGF-β3与熊果酸抑制人结肠癌细胞增殖作用的研究

目的研究TGF-β3与熊果酸(ursolic acid,UA)抑制结肠癌细胞增殖作用的关系及可能的分子机制。方法采用结晶紫染色法和流式细胞术分析不同浓度UA对HCT116细胞增殖的作用。利用Western blot和流式细胞术等方法分析UA对HCT116细胞凋亡的影响。通过RT-PCR和(或)Western blot实验分析UA在HCT116细胞中对TGF-β3、Smad2/3和β-catenin表达及磷酸化水平的影响。采用TGF-β3重组腺病毒和特异性抑制剂以及萤光素酶报告质粒分析TGF-β3介导UA抑制结肠癌细胞增殖的可能分子机制。结果UA能明显抑制HCT116细胞增殖,诱导G1期阻滞,并促进其凋亡。UA能明显降低TGF-β3的mRNA和蛋白表达水平;UA对Smad2/3的总蛋白水平无明显影响,但能明显降低Smad2/3的磷酸化水平;外源性过表达TGF-β3可部分逆转UA对HCT116细胞增殖的抑制作用,TGF-β3特异性抑制剂则增强UA对HCT116细胞增殖的抑制作用;UA降低β-catenin蛋白水平,并明显抑制Wnt/β-catenin信号转导;外源性过表达TGF-β3促进β-catenin蛋白表达,并部分逆转UA对β-catenin蛋白表达的抑制效应;TGF-β3特异性抑制剂增强UA对β-catenin蛋白表达的抑制作用。结论 UA能抑制结肠癌细胞HCT116增殖并诱导凋亡,其作用可能是通过下调TGF-β3表达,进而抑制Wnt/β-catenin信号转导。

体外RNA干扰抑制RegⅣ基因表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:拟探讨RegⅣ基因在胃癌细胞中的表达及干扰该基因对胃癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:应用实时定量PCR方法检测九株胃癌细胞株中RegⅣ基因的mRNA表达.针对RegⅣ基因设计三条小干扰RNA片段(siRNA1、siRNA2、siRNA3),瞬时转染高表达胃癌细胞株,实时定量PCR方法检测转染后RegⅣ基因的mRNA的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:以永生化正常胃黏膜细胞株GES-1作为参照,除MKN-45和SNU-1胃癌细胞株外,其余胃癌细胞株中RegⅣ表达水平均升高5倍以上,尤以SNU-16细胞株明显,其RegⅣ的表达水平高出GES-1细胞数千倍,遂选用SNU-16细胞进行RNA干扰.合成的三对siRNA对RegⅣ基因表达均有明显抑制作用,抑制率分别为79.3%、77.4%和60.4%.选用siRNA1干扰SNU-16细胞株后96h和120h,其细胞增殖率受到明显抑制(P=0.0057,0.0173).流式细胞仪检测显示72h细胞凋亡率明显增加(P=0.0231).结论:干扰RegⅣ基因具有抑制胃癌细胞增殖,促进凋亡的作用,RegⅣ基因可能成为胃癌基因靶向治疗的分子靶点.

类圆环病毒因子P1感染对猪外周血T淋巴细胞含量和增殖活性的影响

探讨类猪圆环病毒因子P1感染对猪细胞免疫功能的影响。将12头30日龄广西巴马小型猪随机分成试验组和对照组,每组6头。在猪感染P1后第3,8,17,24,31和40天,采用血常规和单色流式细胞术分析猪外周血T淋巴细胞的含量,通过WST法对其增殖活性进行检测。P1感染组的T淋巴细胞数量(绝对数和相对数)整体趋势低于对照组,而两组的T淋巴细胞增殖活性没有显著差别。P1感染对机体的细胞免疫功能有一定程度的影响。

神经细胞粘附分子对人恶性脑胶质瘤细胞株体内外增殖能力的影响

目的 :探讨神经细胞粘附分子 ( neural cell adhesion molecule,NCAM)对人脑胶质瘤细胞株 U2 51 MG增殖行为的影响。 方法 :将外源性 NCAM-1 40质粒转入 U2 51 MG细胞株 ,采用流式细胞仪及培养细胞增殖动力学方法比较转染前后细胞的细胞周期、增殖细胞核抗原 ( proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达及群体增殖速度 ;在裸鼠颅内原位接种上述细胞 ,观察成瘤率及肿瘤大小。 结果 :NCAM转染后细胞的体外增殖速度减慢 ( P<0 .0 5) ,S期细胞减少 ,PCNA表达率下降 ;裸鼠颅内接种的成瘤率显著降低 ( P<0 .0 1 ) ,肿瘤体积明显较小。 结论 :转染外源性 NCAM在体外、体内均可抑制人脑胶质瘤细胞株 U2 51 MG的增殖。

富血小板血浆和浓缩生长因子对人牙周膜细胞增殖和成骨分化影响的研究

目的研究富血小板血浆(PRP)和浓缩生长因子(CGF)对人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖及成骨分化的影响。方法分离、培养并鉴定hPDLCs;制备人全血、PRP和CGF,分别进行血小板计数;分别将全血(对照组)、PRP(PRP组)和CGF(CGF组)与hPDLCs共培养,CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力;使用1%、5%、10%的PRP和CGF分别对hPDLCs处理24、48、72 h,进行成骨诱导,Western blot法检测成骨相关转录因子Runx2、Osx、Dlx5和Msx2的相对表达量。结果PRP、CGF可促进hPDLCs的增殖和迁移(P<0.05),提高促进成骨相关因子Runx2、Osx、Dlx5的表达并降低抑制成骨因子Msx2的表达(P<0.05)。结论PRP、CGF能促进hPDLCs的增殖和迁移,并促进成骨分化相关转录因子的表达。

小剂量顺铂联合5-氟尿嘧啶对胃癌细胞增殖抑制及其机制的研究

目的:探讨小剂量顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)在体外联合用药对SGC-7901胃癌细胞及胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU细胞增殖及其相关基因表达的影响。方法:采用MTT法观察在小剂量DDP、5-FU联合用药前后SGC-7901与SGC-7901/5-FU存活率的差异,同时应用免疫组化方法检测SGC-7901与SGC-7901/5-FU中p53、Fas/FasL基因的表达情况。结果:DDP与5-FU均有抑制肿瘤细胞增殖作用,且有浓度相关性;尤以DDP联合5-FU后对细胞存活率的影响明显高于两种药物的单独使用(P<0.01),小剂量DDP联合应用5-FU时效果最明显,但对SGC-7901/5-FU细胞增殖抑制作用明显小于SHC-7901;小剂量联合DDP+5-FU,p53、FasL基因表达的阳性率显著高于单纯的5-FU组或DDP组(P<0.01),而Fas基因表达则相反。结论:小剂量DDP联合5-FU对胃癌细胞具有明显抑制作用,对耐药株也有一定抑制作用,但效果弱于非耐药株。p53、Fas/FasL基因对胃癌细胞的增殖活性有重要作用,在小剂量DDP联合5-FU比各单药应用组基因的改变更明显(P<0.01)。