皮质酮对大鼠海马神经元电压门控性钙通道及其突触活动的影响

目的 研究皮质酮对海马神经元电压门控性钙通道和突触活动的影响 ,以阐明其作用机理。方法 以培养的新生大鼠海马神经元为标本 ,使用膜片钳技术的全细胞记录方式 ,通过压力注射给药的方法观察皮质酮对神经元电压门控性钙通道及其自发性突触活动的影响。结果 皮质酮 1、10和 10 0μmol·L- 1可使神经元电压门控性钙电流的幅度分别增加 (14± 8) %、(41± 13) %和 (5 8± 9) % ,其增强效应具有明显的浓度依赖性特征 ,但没有电压依赖性 ,也不改变钙通道的电学特征。 10 0 μmol·L- 1皮质酮可使海马神经元突触活动的发生频率增加约 4倍。在使用河豚毒素阻断神经元的突触传递活动后 ,皮质酮仍然可以诱发低频 (4.6± 1.0 )Hz低幅 (0 .18±0 .0 9)nA的兴奋性突触后电流。结论 皮质酮对海马神经元电压门控性钙电流及其突触活动有明显的增强作用。皮质酮的即刻增强效应可能与其调节基因表达的作用无关。

异丙酚对大鼠海马神经元低电压激活钙电流的抑制作用

目的:观察异丙酚对大鼠海马锥体神经元低电压激活钙电流[low-voltage-activated calcium currents,ICa(LVA)]的影响。方法:培养Wistar大鼠海马锥体神经元,采用全细胞膜片钳技术测定ICa(LVA)。加用不同浓度(3、10、30、100、300μmol/L)异丙酚后,计算ICa(LVA)抑制率,建立异丙酚的浓度-效应曲线,选择20μmol/L异丙酚作ICa(LVA)的激活及失活曲线。结果:3μmol/L的异丙酚对ICa(LVA)的电流幅度无影响;10、30、100、300μmol/L的异丙酚对ICa(LVA)的电流幅度抑制率分别为(12.6±4.1)%、(29.2±5.7)%、(36.6±5.3)%、(31.6±2.6)%。拟合后的浓度-效应曲线的IC50为16.8μmol/L,Hill系数为0.15。激活曲线的半数最大激活膜电位(V1/2)由(-10±1)mV移动到(-11±2)mV;K分别为12±1和8±1;失活曲线的V1/2分别为(-25±1)mV和(-25±5)mV,K分别为15±1和16±3。20μmol/L异丙酚均未使ICa(LVA)的激活曲线及稳态失活曲线发生明显移动。结论:异丙酚对ICa(LVA)通道有抑制作用,异丙酚对中枢神经系统的麻醉作用可能与ICa(LVA)抑制有关。

异丙酚对大鼠海马神经元高电压激活钙电流的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠海马神经元高电压激活钙电流[Ica（HVA）]的影响.方法 原代培养Wistar大鼠海马神经元,采用全细胞膜片钳技术测定Ica（HVA）.记录不同浓度（3、10、30、100、300 μmol/L）异丙酚下Ica（HVA）的峰电流密度,计算Ica（HVA）抑制率,并绘制异丙酚的浓度-效应曲线,计算半数抑制浓度（IC50）和Hill系数.并记录20 μmol/L异丙酚对Ica（HVA）激活和失活动力学的影响.结果 异丙酚3 μmol/L给药前、后Ica（HVA）峰电流密度差异无统计学意义（P＞0.05）;10、30、100、300 μmol/L异丙酚对Ica（HVA）峰电流密度抑制率分别为（24±6）%、（33±5）%、（36±7）%、（38±3）%.与给药前相比,异丙酚呈浓度依赖性地抑制Ica（HVA）峰电流密度（P＜0.05）.IC50为3.8 μmol/L,Hill系数为0.35.给药前、后最大激活膜电位为（4.0±2.0）mV和（3.8±1.6）mV,半数失活电压为（-32±5）mV和（-35±4）mV,斜率因子为31±5和35±6,给药前、后比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 异丙酚可显著抑制大鼠海马神经元Ica（HVA）,异丙酚对中枢神经系统的作用可能与抑制Ica（HVA）有关.

β淀粉样肽25—35对原代培养的海马神经元电压门控钙通道电流的影响

目的探讨β淀粉样肽25-35(Aβ_(25-35))对海马神经元电压门控的钙通道电流(VGCC)的作用。方法应用全细胞膜片钳技术记录海马神经元上的 VGCC,通过设定不同的钳制电压分别记录高电压激活的钙电流(HVA-I_(Ca))和低电压激活的钙电流(LVA-I_(Ca)),并观察 Aβ_(25-35)对其的影响。结果分别对原代培养的海马神经元急性胞外给予2μmol/L和10μmol/L 的凝聚态 Aβ_(25-35),在最大激活电压下加药后,I_(Ca)幅度分别是加药前的99.80%±0.02%及100.00%±1.58%,差异没有统计学意义。10 μmol/L 凝聚态 Aβ_(25-35)预孵育24 h 可增大,I_(Ca),对照组(未给 Aβ_(25-35))为(24.49±4.35)pA/pF,Aβ_(25-35)组(预孵育24 h)为(46.59±7.15)pA/pF,两组差异有统计学意义(P<0.05);但Aβ_(25-35)组的膜电容[(14.34±1.74)pF]与对照组[(14.44±0.97)pF]相比差异没有统计学意义。结论急性给予凝聚态 Aβ_(25-35)对 VGCC 没有影响,24 h 预孵育凝聚态 Aβ_(25-35)增大了 VGCC,而膜电容没有改变,提示凝聚态 Aβ_(25-35)可通过对细胞膜上钙通道进行分子调控以增大 VGCC。