前列腺素D2在小鼠溃疡性结肠炎癌变模型中的作用探讨

目的研究前列腺素D2(prostaglandin D2,PGD2)在实验性小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)癌变过程中的可能作用,并探讨其D类前列腺素受体1(D prostanoid receptor 1,DP1)拮抗剂(BWA868c)对癌变的可能预防作用。方法以经典氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)法建立小鼠UC相关癌变(UC associated carcinogenesis,UCAC)模型,并分为空白对照组(Con组)、模型对照组(AOM-Con组)、环氧合酶2抑制剂组(COX-2组)和DP1拮抗剂组(DP1组),评估小鼠的疾病活动指数(DAI)、结肠大体损伤及病理改变,ELISA法检测PGD2,Western blotting法检测COX-2、β-连环蛋白(β-catenin)的表达。结果AOM-Con组小鼠DAI升高,结肠可见多发隆起,病理以低级别或高级别上皮内瘤变为主,而COX-2组和DP1组的DAI评分、结肠损伤及β-catenin的表达均明显低于AOM-Con组(P<0.05);DP1组COX-2的表达与AOM-Con组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠UCAC模型中的结肠黏膜异型增生可能与PGD2相关;DP1拮抗剂对UC癌变可起到化学预防作用。

PGD2-DP1受体途径在人腹主动脉瘤形成中的作用

目的了解前列腺素D2（prostaglandin D2，PGD2）-DPI受体途径相关的酶前列腺素G／H合成酶（cyclooxygenase，COX）-1、COX-2和脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶（lipocalin—type prostagladin Dsynthase，L—PGDS）及DPI受体在人腹主动脉瘤（abdominal aortic aneurysm，AAA）组织中的表达定位，分析其与人AAA直径及破裂的相关性，探讨PGD2-DPI受体途径对人AAA的血管平滑肌细胞表型变异及炎性细胞趋化的影响。方法采用免疫组化及免疫荧光染色方法，检测已破裂、未破裂AAA组织和正常胸内动脉组织COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体表达，利用RT—PCR方法检测人AAA组织中COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体mRNA表达，使用Westernblot方法检测L—PGDS及DPI受体蛋白的表达，结合临床资料记录的AAA直径和是否破裂进行相关性分析。结果COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体表达于人AAA组织的结构性细胞和炎性细胞，L—PGDS的表达量与AAA的直径和破裂呈负相关，COX-2的表达量与AAA的直径呈正相关。结论人AAA中存在PGD2-DPI受体途径相关的酶及受体表达，且COX-2的表达量与AAA直径相关，L—PGDS表达量与AAA直径和破裂相关。

治疗哮喘的前列腺素D2受体拮抗药fevipiprant的研究进展

Fevipiprant具有全新抗哮喘的作用机制,是首个前列腺素D2受体抑制药,用于口服治疗嗜酸性粒细胞哮喘患者,可改善肺功能和削减嗜酸粒细胞炎症,安全性和耐受性较好,有良好的临床应用前景。

血浆PGD2检测在胃癌诊断中的临床价值

目的探讨血浆前列腺素D2(PGD2)水平在胃癌诊断中的临床价值。方法收集胃癌初诊患者、胃良性病变患者及体检健康者的血浆标本,采用酶联免疫吸附试验检测血浆PGD2水平,并分析血浆PGD2水平在不同组间及不同人群间的差异。采用蛋白免疫印迹法分析胃癌组织、癌旁组织、胃良性病变组织中前列腺素D2合成酶(L-PTGDS)及前列腺素D2受体(PTGDR2)的蛋白表达水平。结果胃癌患者血浆PGD2水平明显低于胃良性病变患者及体检健康者(P<0.05),胃良性病变患者与体检健康者PGD2水平差异无统计学意义(P>0.05)。有淋巴结转移的胃癌患者PGD2水平明显低于无淋巴结转移的胃癌患者(P<0.05),低分化胃癌患者血浆PGD2水平明显高于中、高分化胃癌患者(P<0.05),且血浆PGD2水平与胃癌细胞分化程度呈负相关(r=-0.279,P<0.05)。受试者工作特征曲线结果显示,PGD2诊断胃癌的最佳临界值为350.89 pg/mL,特异度为81.2%,灵敏度为72.9%。胃癌组织L-PTGDS、PTGDR2蛋白表达水平较癌旁组织、胃良性病变组织低(P<0.05),而癌旁组织与胃良性病变组织L-PTGDS、PTGDR2蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论血浆PGD2水平检测对胃癌具有一定的诊断价值,且对胃病变性质有初步鉴别诊断的作用。胃癌组织中L-PTGDS与PTGDR2蛋白表达水平降低,可为PGD2/PTGDR2信号通路在胃癌发生发展中的机制研究提供临床依据。

大鼠哮喘模型中嗜酸性粒细胞上前列腺素D_2受体改变研究

目的:研究大鼠哮喘模型中外周血嗜酸性粒细胞(EOS)上前列腺素D2(PGD2)受体改变,了解其对EOS的调控作用。方法:动物模型复制:20只雄性SD清洁级大鼠,随机分2组(A组:卵白蛋白(OVA)激发组,B组:应用生理盐水雾化吸入组,为正常对照组),雾化诱喘。测定外周血和肺泡灌洗液(BALF)的EOS,并用放射配体分析其外周血EOS上的PGD2受体。结果:B组外周血和BALF的EOS计数较正常组显著增加,(外周血0.48±0.01和0.12±0.03(×109/L),BALF:1.21±0.47和0.39±0.24(×107/L));外周血EOS上CRTH2受体结合容量和总结合比正常对照组和增加(fmol/106细胞)(CRTH 2分别为:313.58±86.17和121.32±69.88;DP总结合分别为449.19±121.49和298.85±79.64)(P<0.01),DP1无显著性差异(A组180.72±47.44和B组198.68±87.22)(P>0.05)。结论:在大鼠哮喘模型中外周血和BALF中EOS绝对值增高,其表面DP总结合显著增加,主要与CRTH2受体(DP2)显著增加有关,DP1受体结合容量无显著改变,CRTH2结合容量增加可能与哮喘发病机制有关。

前列腺素D_2与睡眠调节

前列腺素Ｄ２(ＰＧＤ２)是目前已知最有潜力的内源性促睡眠物质之一。鼠脑脊液(ＣＳＦ)中ＰＧＤ２浓度与睡眠－觉醒周期一致,呈现节律性改变,并且随睡眠剥夺期间嗜睡倾向增加而增加。催化ＰＧＨ２转变为ＰＧＤ２的待异性酶有两种:Ｌｉｐｏｃａｌｉｎ型前列腺素Ｄ合成酶(Ｌ－ＰＧＤＳ)和脾型ＰＧＤＳ。Ｌ－ＰＧＤＳ主要在大脑蛛网膜和脉络丛产生,并分泌入ＣＳＦ。Ｌ－ＰＧＤＳ和ＰＧＤ_２在脑室系统、蛛网膜下腔及细胞外间隙中循环。循环中的ＰＧＤ２可与前脑头端基底腹内侧面的化学感受器中的前列腺素Ｄ２受体(ＤＰＲ)相互作用,通过活化具有腺苷Ａ２ａ。受体的神经元以产生促进睡眠的信号。ＰＧＤ２敏感区内ＤＰＲ的活化可导致腹侧视前区(ＶＬＰＯ)内神经元的活化,其可通过抑制结节乳头核(ＴＭＮ)而促进睡眠。相反,ＰＧＥ２在维持大脑清醒状态下起主要作用。ＰＧＤ２和ＰＧＥ２的平衡对正常睡眠－觉醒周期的维持十分关键。

前列腺素DP受体缺乏小鼠的睡眠-觉醒特征(英文)

目的:探讨前列腺素DP受体(DPR)对小鼠睡眠-觉醒调节的影响。方法:在苯巴比妥麻醉下,于DPR基因敲除(KO)小鼠及其野生型( WT)小鼠大脑皮层及颈部肌肉分别植入脑电(Electroencepha-logram,EEG)和肌电(Electromyogram, EMG)电极,用EEG/EMG睡眠记录系统于20 00时开始连续记录24小时两种小鼠的脑电和肌电波,并用SLEEPSIGN软件进行分析。结果:两种小鼠表现出相同的睡眠-觉醒节律,且明时(8 00 -20 00)及暗时(20 00 -8 00)时相内两种小鼠的非快动眼(NREM)睡眠和快动眼(REM)睡眠总量无差异。但与WT小鼠相比,DPR-KO小鼠明时内的觉醒频率显著增高,NREM睡眠的平均时程显著缩短;且DPR-KO小鼠睡眠呈现低活性的θ波和高活性的δ波。结论:DPR在介导前列腺素D2诱导的睡眠中起着关键性调节作用,缺乏DPR将导致小鼠呈现低强度片段化的NREM睡眠和高警戒状态的REM睡眠。

前列腺素DP受体缺乏对小鼠脑内组胺含量的影响(英文)

目的 探讨前列腺素DP受体(DPR)缺乏对小鼠脑内组胺含量的影响。方法 在乙醚麻醉下,分别于明时(8:0 0AM )及暗时(8:0 0PM )断头处死野生型及DPR基因敲除型小鼠,迅速取出脑组织并分离出皮层、纹状体、海马、下丘脑、丘脑、中脑及脑干等脑区,制备匀浆并用HPLC荧光检测法测量其组胺含量。结果 明时处死,DPR基因敲除型小鼠皮层、下丘脑及丘脑中的组胺含量明显低于野生型小鼠;暗时处死DPR小鼠,仅丘脑中组胺含量显著降低。结论 DPR基因敲除型小鼠脑中组胺能神经活性显著降低,这一变化可能是该种小鼠尚能维持正常睡眠的代偿机制之一。

腺苷受体调节睡眠觉醒作用机制进展

腺苷是ATP代谢产物,在脑内广泛存在。腺苷受体分为A1、A2A、A2B和A3四种受体(re-ceptor,R)亚型。研究显示:内源性腺苷可能通过A1R和A2AR发挥睡眠调节作用。A1R在中枢系统分布广泛,兴奋位于觉醒系统组胺能、基底前脑胆碱能神经上的A1R,诱发睡眠;腺苷A2AR相对集中分布于前脑区,兴奋A2AR可引起强大的睡眠效应;A2AR可能介导内源性前列腺素D2的睡眠调节作用,是咖啡因促觉醒作用的主要靶点。A1R和A2AR在睡眠觉醒调节中的贡献,至今仍有很大争议,本文综述腺苷受体睡眠调节作用研究进展。

前列腺素D2及其受体CRTH2与支气管哮喘的最新研究进展

前列腺素D2（prostaglandinD2，PGD2）是由支气管哮喘（简称哮喘）患者的肥大细胞等分泌的一种主要的前列腺素类物质。尽管它在哮喘发病机制中的作用尚不完全清楚。但大量研究表明PGD2通过相应受体介导参与哮喘的形成。最近，对于新型Th2细胞上表达的化学趋向性受体同种分子（chemoattractantreceptorhomologousmoleculeexpressedonTh2cells，CRTH2）受体的研究取得新进展，前列腺素类受体（dprostanoidreceptor，DP）与CRTH2两者协同作用诱导炎症细胞迁移和细胞因子的产生，介导哮喘等过敏性疾病的发生发展过程。该篇主要综述PGD2及其受体CRTH2在哮喘发病中作用机制的最新研究进展。

大鼠支气管哮喘模型中前列腺素D2水平和嗜酸粒细胞上受体改变研究

目的前列腺素D2(PGD2)通过嗜酸粒细胞(EOS)上前列腺素受体(DP1/CRTH2)调控其分化、成熟、迁移和募集功能,本研究试图了解在哮喘时外周血PGD2水平和EOS上DP1/CRTH2受体表达改变,探讨哮喘时EOS气道中浸润的机制。方法 20只雄性SD清洁级大鼠,随机分为正常对照组、哮喘组,每组10只。用卵白蛋白(OVA)雾化诱喘。用放射配体法分析其外周血EOS上的PGD2受体;用ELISA测定大鼠血中PGD2水平;肺组织病理切片,HE染色镜检。结果与正常对照组相比,哮喘组大鼠支气管壁有显著的淋巴细胞和EOS浸润,具有典型的哮喘病变,哮喘组外周血PGD2水平显著高于正常对照组(P<0.01),哮喘组外周血和支气管肺泡灌洗液中EOS计数较正常对照组显著增加(P<0.01);哮喘组与正常对照组相比外周血EOS上DP总结合和CRTH2受体结合容量显著增加(P<0.01),DP1差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠哮喘模型中外周血PGD2水平增高,同时EOS细胞上CRTH2受体表达增多,增高的PGD2可通过CRTH2信号转导途径,使EOS趋化作用增强,向气道内浸润,产生炎症效应,导致哮喘病理上EOS浸润特征。

腺苷和睡眠觉醒调节

腺苷作为神经调质,调节多种神经生物学功能。随觉醒时间延长,动物脑内腺苷水平逐渐增高,在睡眠期显著降低。因此,腺苷被认为是调节睡眠的内稳态因子之一。腺苷受体(receptor,R)有A1R、A2AR、A2BR和A3R四种亚型,其中A1R和A2AR与诱导睡眠相关。激活A1R可抑制促觉醒神经元诱导睡眠,也可抑制促眠神经元导致觉醒,其作用存在脑区依赖性。A2AR介导内源性前列素D2的促眠作用,A2AR激动剂具有最强的促眠效应,阻断A2AR引起觉醒,在睡眠觉醒调节中扮演重要角色。本文综述腺苷调节睡眠和觉醒的研究进展,讨论腺苷受体激动剂和拮抗剂在睡眠疾病治疗中的潜在价值及存在问题。

DP_2拮抗剂抑制哮喘模型小鼠气道炎症的作用机制及与激素的比较

目的探讨DP2拮抗剂抑制哮喘模型小鼠气道炎症的作用机制,并比较其同吸入激素的差异。方法 SPF级BALB/c小鼠24只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、吸入激素干预组(C组)和DP2拮抗剂干预组(D组),每组6只,用卵白蛋白(OVA)雾化诱喘。应用Pro Cyte DxTM全自动血细胞分析仪进行支气管肺泡灌洗液细胞分类计数,Western blot方法检测肺组织DP1和DP2蛋白的表达。结果与B组相比,C、D两组的嗜酸性粒细胞计数、DP1和DP2蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。D组的DP2蛋白水平较A组显著下降(P<0.01),C组的DP2蛋白水平较A组亦有下降(P<0.05),C、D两组之间比较有统计学异常(P<0.05)。DP1的蛋白表达水平在A、C、D组之间无统计学差异。结论 DP2拮抗剂能通过抑制其蛋白表达水平从而减少气道的嗜酸性粒细胞浸润,达到抑制哮喘模型小鼠气道炎症的作用。DP2拮抗剂对DP2蛋白表达的抑制作用强于吸入激素,或可作为新的药物用于支气管哮喘的治疗。

腺苷A_(2A)受体激动剂CGS21680模拟前列腺素D_2诱发大鼠生理性睡眠

目的内源性前列腺素(prostaglandin,PG)D2能增加基底前脑下蛛网膜下腔内的腺苷水平,可能作用于腺苷A2A受体,诱发睡眠。本实验观察腺苷A2A受体特异性激动剂CGS21680和PGD2促眠作用的异同。方法手术插入不锈钢导管至大鼠基底前脑下蛛网膜下腔,同时埋植脑电波和肌电波记录电极,术后2周,经导管微量恒速灌注PGD2(200pmol·0.2μL-1·min-1)或CGS21680(10pmol·0.2μL-1·min-1),同步记录脑电波和肌电波,分析睡眠量、睡眠强度及睡眠时相转换等参数。结果与人工脑脊液自身对照相比,PGD2和CGS21680都显著增加慢波睡眠(非快动眼睡眠)量和睡眠强度,两者在时相转化和各波段时程上表现出高度的相似性。CGS21680增加快动眼睡眠量,而PGD2不引起快动眼睡眠量的增加。结论腺苷A2A受体激动剂CGS21680能模拟PGD2诱发的慢波睡眠,提示腺苷A2A受体是诱导生理性睡眠的重要靶点之一。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体对早孕期绒毛组织及细胞滋养细胞浸润能力的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及其配体对早孕期绒毛组织及细胞滋养细胞浸润能力的影响。方法采用免疫组化方法、免疫荧光细胞化学染色法、蛋白印迹法和RT-PCR 技术检测20例孕6～8周(早孕早期组)及20例孕11～12周(早孕晚期组)绒毛组织及细胞滋养细胞中的 PPARγ蛋白及其 mRNA 的表达;并检测不同浓度 PPARγ激动配体——15-脱氧-前列腺素 J_2(15-d-PGJ_2)和曲格列酮,以及不同浓度拮抗配体——双酚丙烷二环氧甘油醚(BADGE)对原代无血清培养的细胞滋养细胞浸润能力的影响。结果 (1)PPARγ蛋白在早孕早期组和早孕晚期组绒毛组织中均有表达,主要定位在细胞滋养细胞核中,合体滋养细胞及绒毛问质细胞中无表达。(2)早孕早期组绒毛组织和培养的细胞滋养细胞中,PPARγ蛋白表达水平分别为1.35±0.08、1.13±0.11,PPARγ mRNA 表达水平分别为36.0±5.1、13.4±3.1;早孕晚期组绒毛组织和培养的细胞滋养细胞中,PPARγ蛋白表达水平分别为1.17±0.03、0.86±0.05,PPARγ mRNA 表达水平分别为23.3±5.5、6.1±1.3,早孕晚期组 PPARγ蛋白及其 mRNA 表达水平明显低于早孕早期组,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)PPARγ激动配体15-d-PGJ_2和曲格列酮均有抑制细胞滋养细胞的浸润的作用。15-d-PGJ_2浓度为1、10μmoL/L,曲格列酮浓度为10μmoL/L 时,早孕早期组细胞滋养细胞浸润指数分别为0.57±0.03、0.43±0.02、0.50±0.06,早孕晚期组分别为0.69±0.02、0.59±0.03、0.66±0.05,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)PPARγ拮抗配体 BADGE 浓度为20、50μmol/L 时,早孕早期组细胞滋养细胞浸润指数分别为1.23±0.07和1.58±0.04;早孕晚期组分别为1.05±0.03和1.38±0.08,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PPARγ在调节滋养细胞浸润过程中起重要作用;在早孕期胎盘绒毛组织,PPARγ激动配体可抑制滋养细胞浸润;PPARγ拮抗配体可促进滋养细胞浸润,且能部分逆转激动配体的作用。

PTGDS在前列腺癌中的表达及其与AR的相关性研究

目的:挖掘前列腺癌进展相关基因并探讨其在前列腺癌中的表达以及与临床参数之间的关系,预测其对前列腺癌进展和预后的影响。方法:通过Oncomine和GEO数据库筛选前列腺癌组织和癌旁组织的测序数据;运用R语言分析数据得到差异表达基因,取交集后筛选出前列腺素D2合成酶(PTGDS);分析其与前列腺癌临床参数以及与雄激素受体(AR)的相关性,通过基因富集分析(GSEA)研究PTGDS在肿瘤中可能的作用和功能。结果:PTGDS在前列腺癌组织中较正常组织呈现相对低表达;免疫组化进一步证实这种表达模式;PTGDS与多种临床参数相关,PTGDS低表达预示更差的预后;GSEA结果提示PTGDS与前列腺癌和AR密切相关,PTGDS表达水平与AR呈明显负相关。结论:PTGDS在前列腺癌中低表达,与前列腺癌的发生发展及多个临床参数相关,且与AR呈负相关,有潜力成为前列腺癌诊断和预后的新的生物标记物。