木醋液对帝王花种子萌发的影响

对帝王花种子吸水特性和种子活力进行测定,发现种子本身状况良好,种皮不是限制萌发的主要因素;用100倍、800倍、1 500倍3种浓度的木醋液浸种处理48 h,研究对其发芽率的影响,结果表明,稀释800倍的木醋液效果最好,其发芽率、发芽势和发芽指数均高于对照组。

不同预处理对2种山龙眼科种子出苗率的影响

采用播种前对种子进行不同浸种处理和低温恒温层积处理的方法,研究不同预处理对美极山龙眼(Protea eximia)、大叶山龙眼(Protea magnifica)出苗率的影响。结果表明,播种前对美极山龙眼种子采用4 g.L-1的烟丝水浸种24 h效果最好,能够提高种子的发芽率、发芽势和发芽指数;大叶山龙眼种子以低温恒温层积处理效果最佳,10 d后就有种子开始萌发,45 d后种子萌发率能达到92%,极显著高于对照。

酶解法制备香菇酱工艺条件的研究

在酶解法制备香菇酱的工艺中,采用正交试验设计分别对纤维素酶酶解条件和蛋白酶酶解条件进行了选择优化。结果表明,纤维素酶酶解的最佳工艺条件为酶解温度50℃、pH值6.5、酶用量0.3%、酶解时间60 min;蛋白酶酶解的最佳工艺条件为酶解温度50℃、pH值4.5、酶用量1%、酶解时间30 min,在此工艺条件下香菇酱的氨基酸含量为0.92%。

不同处理对山龙眼花卉红花卢卡树种子的发芽影响

为了探索提高红花卢卡树种子萌发的方法，开展了不同温度和药剂对种子发芽影响的试验。结果表明：适宜的温度条件对提高红花卢卡树种子萌发十分关键，昼温20℃、12h和夜温10℃、12h的温度条件下，红卢卡树种子起始发芽时间为17～18d、平均发芽天数约32d、发芽率60％左右、萌发指数0．0207，在此温室下，20％PEG（Polyethylene Glycol）和100-200mg/L GA3混合溶液浸泡18h处理没有效果。

不同氮磷钾配比对帝王花苗期生长的影响

为探明适宜帝王花苗期生长的氮、磷、钾肥水平,以1个月苗龄的帝王花苗木为试材,采用3因素3水平的正交试验设计研究了氮磷钾对苗木地径、高度、叶片生长的影响。结果表明,高钾比例不利于帝王花苗木生长,适合帝王花苗木生长的氮磷钾比例为1∶（0.3-0.5）∶（1-3）。

米曲霉M_3中性蛋白酶的提取及酶学特性研究

采用硫酸铵沉降法分离纯化米曲霉M3所产中性蛋白酶,并对其酶学性质进行了研究.结果表明:用硫酸铵沉降法所得粗酶粉的酶活力高达159781.1u/g;该酶的最适反应温度为50℃,最适作用pH值为7.5;该酶在30～40℃时具有良好的热稳定性,在pH值6.5～7.5的条件下酶是稳定的;NH1+4,K1+对该蛋白酶有明显的激活作用,Fe3+则对其表现出强烈的抑制作用.

卵巢癌及癌旁正常卵巢组织中USP2、USP14和UBE4A的差异表达

目的:探讨泛素特异性蛋白酶(USP)2、14和泛素因子E4A(UBE4A)在卵巢浆液性囊腺癌及癌旁正常卵巢组织间的表达差异。方法:采用RFDD-PCR、半定量RT-PCR和免疫组织化学染色方法检测USP2、USP14和UBE4A在40例卵巢浆液性囊腺癌患者卵巢癌组织及其癌旁正常卵巢组织上的表达差异。结果:泛素特异性蛋白酶USP2、USP14和UBE4A在卵巢浆液性囊腺癌组织中高表达,而在正常卵巢组织中无表达或低表达。结论:USP2、USP14和UBE4A在卵巢癌组织中表达上调,提示卵巢癌中泛素-蛋白酶体系统活动明显增强。

心肺复苏后大鼠神经细胞Caspase-3表达与细胞凋亡关系的实验研究

目的探讨心肺复苏后大鼠脑组织Caspase-3表达与细胞凋亡的关系。方法建立窒息联合冰氯化钾致大鼠心脏骤停／心肺复苏（CA／CPR）的动物模型，于各时相点断头留取脑组织，采用免疫组化的方法观察CPR后脑组织Caspase-3蛋白的表达，TUNEL检测神经细胞凋亡。结果对照组脑组织内仅有少量TUNEL阳性细胞；ROSC后3h出现表达阳性细胞，ROSC后6h表达开始增多，ROSC后12h进一步上升（P〈0．05），其后各组均处于高水平表达。Caspase-3表达均在ROSC后24h显著增加，直至ROSC后72h，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01），Speamaa等级相关检验Caspase-3表达与细胞凋亡明显相关（r=0．909）。结论CA／CPR后大鼠脑线粒体Caspase-3蛋白高表达可能是细胞凋亡增加的原因之一。

土壤干旱和盐胁迫对帕洛特王幼苗生长及生理特性的影响

以山龙眼科木本切花植物帕洛特王1a生扦插苗为材料,研究其对土壤干旱和盐胁迫的生长、形态及生理生化反应的影响。结果表明:干旱及盐胁迫对帕洛特王幼苗的生长及各器官的生物量积累无显著影响。干旱条件下,根/冠比显著增加,说明该植物可以通过地上地下生物量的分配来积极地适应干旱。盐胁迫下,帕洛特王幼苗叶片相对含水量显著下降,叶绿素a含量显著上升,抗氧化酶活性及可溶性渗透调节物质也显著增加,说明该植物可通过一系列生理生化特性的改变来积极抵抗盐胁迫。在该研究中,干旱处理及盐处理对帕洛特王植株影响较小,说明帕洛特王对于土壤干旱及盐分具有一定的耐受性。

高压均质辅助酶解法制备香菇酱

在蛋白酶水解法制备香菇酱的工艺中,首先研究高压均质对原料进行细胞破碎处理的操作条件,采用正交试验设计对影响蛋白酶水解效果的条件进行选择优化。结果表明,高压均质处理的最佳均质压力为40 MPa,最佳均质次数为2次,蛋白酶水解的最佳工艺条件为酶解温度40℃,pH4.5,酶用量0.5%,酶解时间60 min,在此工艺条件下香菇酱的氨基酸含量为0.88%。

复合诱变在毛霉高产蛋白酶菌株选育中的应用

为了选育出生长速度快、孢子数量多、酶活力高的毛霉菌株,从而改善和提高腐乳品质,采用物理和化学复合诱变处理3.3039菌株,并经控温培养,筛选得到 4 株产酶较出发菌株高的菌株。通过性能比较获得1株产蛋白酶活力高的菌株 MR10。将此菌种连续传代 3 次,进行产酶性能和遗传稳定测定,表明此株MR10在较高温度下生长旺盛,产酶能力高,具有较好的遗传稳定性。

脑苷肌肽对有机磷中毒性迟发性神经病变大鼠学习记忆能力及血浆钙激活的中性蛋白酶、神经疾病靶标酯酶影响研究

目的:探讨脑苷肌肽注射液对有机磷中毒性迟发性神经病变(OPIDN)大鼠学习记忆能力及血浆钙激活的中性蛋白酶(CANP)、神经疾病靶标酯酶(NTE)的影响。方法:先对健康雄性SD大鼠进行学习记忆功能筛选,选择其中20只大鼠作为空白组,而后对其余大鼠进行乐果乳油给药造模,乐果乳油给药14d后选择其中症状相似的60只完全随机分为三组:对照组[蒸馏水1.25ml/(kg·d)]、甲钴胺组[甲钴胺片1.25mg/(kg·d)]、联合组[甲钴胺片1.25mg/(kg·d)、脑苷肌肽注射液1.25ml/(kg·d)]。对不同分组的大鼠进行相应的治疗,测定治疗4周后大鼠学习记忆能力,分别测定治疗2、4周后大鼠血浆组织中NTE和CANP表达水平。结果:染毒大鼠干预前血浆NTE蛋白水平显著低于空白组大鼠(P<0.05),甲钴胺组和联合组大鼠治疗后血浆NTE水平上升(P<0.05),其中联合组大鼠治疗后血浆NTE水平最高(P<0.05)。染毒大鼠干预前血浆CANP蛋白水平显著高于空白组大鼠(P<0.05),甲钴胺组和联合组大鼠治疗后血浆CANP水平下降(P<0.05),其中联合组大鼠治疗后血浆CANP水平最低(P<0.05)。染毒后的三组大鼠中,联合组大鼠记忆再现能力最佳(P<0.05)。结论:脑苷肌肽注射液对于OPIDN大鼠的记忆能力和神经细胞损伤修复均具有积极作用。

结核分枝杆菌Pup-蛋白酶体系统研究进展

蛋白酶体途径是真核细胞中除溶酶体外降解蛋白质的又一主要途径,参与细胞的多项生理功能调控。2008年在结核分枝杆菌中发现了原核类泛素蛋白(prokaryotic ubiquitin-like protein,Pup)。Pup在辅助因子Dop、PafA、Mpa的作用下,可以泛素化标记多种蛋白,再将其导入蛋白酶体降解。Pup-蛋白酶体系统的靶蛋白FabD、PanB、Ino1、Icl、SodA、MtrA等涉及物质代谢、信号传导通路、毒性因子、致病性、细菌在宿主体内的持留等多个方面。蛋白酶体抑制剂使蛋白酶体的功能受到限制,Pup标记底物的累积导致的基因表达的间接改变,对结核分枝杆菌抗外界压力和致病性的能力产生影响。Pup-蛋白酶体系统的发现揭示了原核生物中一个崭新的蛋白质降解机制,有望成为抗结核病药物治疗的新靶点。本文对结核分枝杆菌Pup-蛋白酶体的研究进展作一综述。

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究──Ⅱ53－A_6菌株原生质体形成及再生最佳条件的研究

以地衣状芽孢杆菌５３－Ａ６为出发菌株，考察了各种因素对原生质体形成和再生的影响．在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体，５３－Ａ６菌原生质体形成率和再生率分别达９９．７％和３０．９％。通过光学显微镜和电镜技术，观察了原生质体形成再生和原生质体聚集现象。

蛋白质降解功能障碍与帕金森病

蛋白质错误折叠、聚集和沉积是许多常见神经退行性疾病的发病机制，包括帕金森病（ Parkinson＇s disease， PD）。神经细胞依赖于蛋白质的质量控制系统即蛋白质的降解途径，以维持细胞内蛋白质的动态平衡。分子伴侣、泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system， UPS）和自噬溶酶体途径（autophagy -lysosomal pathway， ALP）都是该系统的重要组成部分，它们均起到调节错误折叠或去除异常蛋白质的作用。越来越多的研究表明， UPS及ALP功能障碍和PD的发病机制密切相关。易聚集蛋白α-突触核蛋白（α-synuclein，α-Syn）被认为是PD最主要的致病蛋白质，破解该蛋白质的降解机制显得尤为重要。在本文中，我们具体介绍了蛋白质降解途径在PD中的作用， UPS和ALP在降解异常蛋白质过程中的不同贡献，并以α-Syn为研究对象，探讨了不同降解途径之间的相互作用。利用蛋白质降解途径中的潜在治疗靶点，可有望改善并减少PD的发生及进展。

皇后帝王花种皮特性对种子休眠的影响

以皇后帝王花种子为实验材料,对其进行形态解剖、种皮超微结构观测、种皮透水性与含水量检测,以了解皇后帝王花种皮结构与种子休眠的关系。结果表明:(1)皇后帝王花种子的种皮分为3层,外种皮的栅栏结构增强了种子的不透性,高度木质化的中种皮使种子坚硬,内种皮较薄却被一层不易透水的蜡质包裹;(2)酸蚀处理能使皇后帝王花种子种皮表面结构疏松,种皮变薄,种孔露出。但酸蚀4 h种子的中种皮及内种皮已经出现破坏性开裂,严重影响到胚活力;(3)完整干种子与酸蚀0.5 h种子在前14 h均能快速吸水,吸水50 h后近饱和状态,自此,二者吸水率小范围波动直至完全饱和;(4)酸蚀处理种子并不能使胚更好的吸水保水。因此,皇后帝王花种皮结构对胚的吸水并未形成阻碍,但不能排除其对胚呼吸的影响及对胚根的伸长和生长产生机械阻力的可能。

皇后帝王花种子休眠及解除方法研究

皇后帝王花(Protea magnifica)种子具有休眠性,不经任何处理难以发芽。本研究以皇后帝王花种子为试验材料,通过测定皇后帝王花种子生活力、种子萌发率、种子各部分粗提液对白菜种子发芽的影响,并以不同的方式(短时高温+变温层积、酸蚀处理+变温层积、赤霉素处理+变温层积)处理种子,研究皇后帝王花种子的休眠原因及解除方法。结果表明:试验所用皇后帝王花种子的生活力高达90.00%,但不去除种皮的完整种子30 d内不发芽。种皮粗提液不仅抑制白菜种子的发芽,还显著影响白菜种子的根与地上部分的生长。皇后帝王花种子的休眠可能是种皮的机械障碍和种皮的内源抑制物共同引起的综合休眠。时长为2 min的不同高温(40~120℃)处理+变温层积、不同时间(10~70 min)的98%浓硫酸酸蚀处理+变温层积、不同浓度(0.3、0.5、0.7 mg/L)的赤霉素溶液处理+变温层积都可以打破种子的休眠,提高皇后帝王花种子发芽率和发芽势。其中各处理分别以60℃的短时高温处理、30 min的酸蚀处理、0.7 mg/L的赤霉素溶液处理效果最好。综合比较,30 min的酸蚀处理为解除皇后帝王花种子休眠的最佳方法。此外,赤霉素处理对皇后帝王花种子的休眠解除有着一定的促进作用,但相比其他两种处理方式效果并不理想。

帝王花引种驯化初探

通过引种6个帝王花品种,在海南三亚开展帝王花的引种驯化研究。试验发现:引种成活率最高的季节是每年冬季,放置于设施大棚中,引种品种中苏珊娜的引种驯化表现最好,基质选择椰糠(低盐)添加珍珠岩,成活率为35%。试验结果以期为海南引种驯化帝王花提供参考。

帝王花种子无菌播种和快速繁殖研究

[目的]建立帝王花无菌播种和快速繁殖技术体系。[方法]以MS或1/2MS为基础培养基,添加不同激素组合,筛选适宜的诱导、增殖及生根培养基。[结果]1/2MS+6-BA 0.01 mg/L为帝王花种子最佳诱导培养基,培养14 d种子萌动,35 d形成幼苗;MS+6-BA 1.00 mg/L+IBA 0.01 mg/L为最适宜的增殖培养基,增殖倍数达2.83倍;1/2MS+IAA 1.00 mg/L为最佳生根培养基,生根率达96%,苗高达4.2 cm;将种苗栽植于泥炭∶珍珠岩=3∶1的基质上,其移栽成活率为85%。[结论]该研究为快速繁殖帝王花优质种苗奠定了基础。

蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型海马区HSP70表达

目的观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导帕金森病大鼠模型海马区HSP70表达。方法将Lactacystin 10μg(2μl)经立体定向仪注射到大鼠(Lactacystin组,n=36)左侧黑质致密部,对照组(n=36)以等体积生理盐水代替;分别在药物注射后24h、3d、5d、7d、9d、11d、14d、18d和21d提取海马标本,通过免疫组化和RT-PCR观察HSP70的表达。结果Lactacystin组大鼠海马区HSP70表达较对照组高,表现为注药24h后表达开始增高,5d达高峰,11d开始减少;且海马区表达分布呈CA3>CA2>CA1。结论Lactacystin诱导帕金森病大鼠海马区HSP70表达增高,且呈明显区域性和时间依从性;增加的热休克蛋白可能参与拮抗蛋白酶体抑制毒性而起到神经细胞保护作用。