血清缺氧诱导因子-1α、内皮素-1及基质金属蛋白酶-9联合检测对颅内动脉瘤破裂出血142例手术预后的价值

目的探讨血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、内皮素-1(ET-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)联合预测颅内动脉瘤破裂出血术后预后不良的价值。方法选取2020年1月至2022年1月东台市人民医院收治的颅内动脉瘤破裂出血病人142例作为研究组,另选取同期健康体检者140例作为对照组,检测病人术前、入院1周(均为术后)、术后6个月血清HIF-1α、ET-1、MMP-9水平并进行比较。另依据病人出院6个月后预后情况,将其分为预后良好组(101例)和预后不良组(41例),对比预后良好组和预后不良组术前、入院1周、术后6个月血清HIF-1α、ET-1、MMP-9水平,分析颅内动脉瘤破裂出血病人预后不良的影响因素及血清HIF-1α、ET-1、MMP-9单项及联合检测对颅内动脉瘤破裂出血病人预后不良的预测价值。结果研究组术前血清HIF-1α、ET-1、MMP-9水平均高于对照组(P<0.05);研究组随访6个月预后不良发生率为28.87%(41/142),血清HIF-1α、ET-1、MMP-9水平经重复测量方差分析差异有统计学意义(P<0.05),预后不良组入院1周、术后6个月血清HIF-1α(42.43±3.05)μg/L和(41.53±4.52)μg/L、ET-1(14.27±1.24)ng/L和(13.96±2.04)ng/L、MMP-9(15.57±1.81)μg/L和(14.68±2.65)μg/L均低于术前(51.19±4.38)μg/L、(16.50±1.45)ng/L、(18.26±2.29)μg/L;预后良好组入院1周、术后6个月血清HIF-1α(40.78±1.53)μg/L和(34.87±4.68)μg/L、ET-1(13.12±2.16)ng/L和(10.05±1.96)ng/L、MMP-9(14.87±1.20)μg/L和(12.21±2.87)μg/L均低于术前(47.82±4.13)μg/L、(14.89±2.75)ng/L、(17.41±1.21)μg/L;预后良好组术后6个月血清HIF-1α、ET-1、MMP-9水平均低于入院1周(P<0.05)。预后不良组术前、入院1周、术后6个月血清HIF-1α、ET-1、MMP-9水平均高于预后良好组(P<0.05)。预后不良组多发动脉瘤、脑积水、Hunt-Hess分级Ⅳ~Ⅴ级、CT Fisher分级3~4级、手术时机为≥72 h、并发脑血管痉挛、并发脑梗死病人占比均高于预后良好组(P<0.05);Hunt-Hess分级Ⅳ~Ⅴ级、手术时机为≥72 h、术前及入院1周血清HIF-1α、ET-1、MMP-9高水平均是颅内动脉瘤破裂出血预后不良的危险因素(P<0.05);受试者操作特征曲线显示,术前及入院1周血清HIF-1α、ET-1、MMP-9三者联合预测颅内动脉瘤破裂出血病人预后不良的灵敏度(97.56%、95.12%)和曲线下面积(0.93、0.91)高于单独预测(P<0.05),特异度与单独评估比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论颅内动脉瘤破裂出血病人术前血清HIF-1α、ET-1、MMP-9水平均高于健康人群,术前和入院1周血清HIF-1α、ET-1、MMP-9高水平均是术后预后不良的独立危险因素,且对颅内动脉瘤破裂出血术后预后不良具有一定预测价值,但三者联合预测价值更高。

非小细胞肺癌患者外周血中可溶性程序性死亡配体-1、趋化因子配体9、基质金属蛋白酶9水平与预后生存的关系

目的 观察非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血可溶性程序性死亡配体-1(sPD-L1)、趋化因子配体9(CXCL9)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平与临床特征及预后生存的相关性。方法 我院收治的98例NSCLC患者(研究组),选取同期肺部良性病变患者50例(对照1组)、健康志愿者50例(对照2组),比较三组外周血sPD-L1、CXCL9、MMP-9表达水平。随访研究组治疗后1年的预后生存情况,分为生存组与病死组,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析sPD-L1、CXCL9及MMP-9对预后生存的预测价值。结果 研究组外周血sPD-L1、CXCL9、MMP-9水平较对照1组、对照2组高,对照1组较对照2组高(P<0.05);TNM分期为Ⅱ期患者CXCL9、MMP-9表达水平较Ⅰ期高,发生淋巴结转移患者sPD-L1、MMP-9表达水平较未发生淋巴结转移高(P<0.05);NSCLC患者TNM分期与CXCL9、MMP-9水平成正相关,淋巴结转移与sPD-L1、MMP-9水平成正相关(P<0.05);sPD-L1、CXCL9、MMP-9预测NSCLC患者预后的最佳截断值分别为1.915 ng/ml、1.980 ng/ml、179.030μg/L,且三项指标联合预测NSCLC患者预后生存情况的AUC及特异性均高于单一指标预测(P<0.05)。结论 NSCLC患者外周血sPD-L1、CXCL9、MMP-9表达水平上调,且与临床分期、淋巴结转移相关,三者联合对NSCLC患者预后有较高预测价值。

3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术应用效果及对血清MMP-9和IGF-1水平的影响

目的:探究3D打印技术在经鼻蝶窦入路垂体腺瘤(PA)切除术的应用效果及对血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法:选取2020年5月至2022年5月秦皇岛市第一医院收治的84例PA患者,按照随机数表法将其分为观察组和对照组,每组42例。对照组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术,观察组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术联合应用3D打印技术,比较两组肿瘤切除效果、围术期指标、视力改善情况、MMP-9和IGF-1水平,以及鼻腔功能的鼻气道阻力(NAR)、T&T嗅觉测试评分及并发症。结果:观察组肿瘤切除效果优于对照组,差异有统计学意义(U=2.286,P<0.05);观察组手术时间、术中出血量及住院时间均少于对照组,差异有统计学意义(t=4.780、11.438、11.842,P<0.05);术后3 d、7 d时观察组血清MMP-9和IGF-1水平低于对照组,差异有统计学意义(F=7.526、4.985,P<0.05);术后1个月、3个月时观察组NAR及T&T嗅觉测试评分低于对照组,差异有统计学意义(F=6.359、8.436,P<0.05);两组视力视野改善情况及并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术可提高肿瘤切除效果,优化手术操作,减少创伤,有利于减轻疼痛,改善嗅觉功能与视力视野,并能降低血清MMP-9、IGF-1水平,且安全性较高。

肝细胞癌患者血清ECM1、MMP-9和VEGF水平的变化及其意义

目的 探究肝细胞癌患者血清细胞外基质蛋白-1(ECM1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化及其意义。方法 对60例肝细胞癌患者进行回顾性分析,患者主要使用甲磺酸阿帕替尼进行治疗,必要时也可联合GEMOX方案肝动脉化疗栓塞术进行治疗。采用酶联免疫吸附法测定患者治疗前后的血清ECM1、VEGF、MMP-9水平。比较患者治疗前后ECM1、MMP-9和VEGF水平;比较不同临床病理特征(年龄、性别、血管侵犯、淋巴结转移、TNM分期、Edmondson分期和肿瘤直径)患者ECM1、MMP-9和VEGF水平。结果 治疗后,患者ECM1、MMP-9以及VEGF水平分别为(135.23±44.58)pg/ml、(421.25±87.56)μg/L和(657.56±54.56)pg/ml,均低于治疗前的(215.56±30.80)pg/ml、(499.56±30.56)μg/L、(798.02±50.79)pg/ml(P<0.05)。不同年龄、性别患者ECM1、MMP-9、VEGF水平比较差异无统计学意义(P>0.05);不同血管侵犯、淋巴结转移、TNM分期、Edmondson分期和肿瘤直径患者ECM1、MMP-9、VEGF水平比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ECM1、MMP-9、VEGF三者相互作用可促进肝癌细胞的转移,可根据其水平情况,了解患者肝细胞、肝功能健康状况。

MMP-9与IGF-1在垂体腺瘤患者中的表达及其临床预测价值

目的探究MMP-9与IGF-1在垂体腺瘤患者中的表达及其临床预测价值。方法回顾性分析84例垂体腺瘤患者临床资料,分析不同病理垂体腺瘤患者的血清指标[基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)]水平差异。84例垂体腺瘤患者依据治疗后肿瘤直径大小和转移率分为缓解组(n=40)与未缓解组(n=44),采用受试者工作特征(ROC)曲线分析MMP-9、IGF-1对垂体腺瘤患者预后的评估效能。结果不同肿瘤直径的垂体腺瘤患者MMP-9、IGF-1水平比较无显著性差异(P>0.05);未发生淋巴结转移的患者MMP-9水平明显低于发生转移的患者,而IGF-1水平高于发生转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期为Ⅰ~Ⅱ期的垂体腺瘤患者MMP-9水平明显低于Ⅲ~Ⅳ期患者,而IGF-1水平高于Ⅲ~Ⅳ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。缓解组患者MMP-9低于同期未缓解组,IGF-1水平明显高于同期未缓解组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示血清中MMP-9与IGF-1的截断值分别为16.61 ng/L、229.06 ng/L,MMP-9预测ROC曲线下面积(AUC)为0.871(95%CI=0.778~0.935),敏感度75.61%,特异度92.50%,IGF-1预测ROC曲线AUC为0.851(95%CI=0.755~0.921),敏感度75.61%,特异度87.50%。结论血清中MMP-9,IGF-1水平与垂体腺瘤患者临床病理特征及预后情况密切相关,可通过早期检测结果进一步优化诊治措施。

输卵管阻塞性不孕患者血清TGF-β1、IL-2、MMP-9水平及临床意义

目的:分析输卵管阻塞性不孕患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-2(IL-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平变化及临床意义。方法:以本院2022年3月-2023年10月诊治的60例输卵管阻塞性不孕患者为病例组,正常妊娠分娩的女性50例为对照组。测定对比两组血清TGF-β1、IL-2、MMP-9水平,Pearson相关性分析血清指标间相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清指标诊断不孕效能,logistic多因素回归分析输卵管阻塞性不孕发生影响因素。结果:病例组术前血清TGF-β1(593.79±148.23 ng/L)、IL-2(3.90±0.75 ng/L)、MMP-9(384.88±86.87 ng/ml)水平均高于对照组(239.42±113.37 ng/L、3.09±0.84 ng/L、178.98±80.85 ng/ml),术后血清TGF-β1、IL-2、MMP-9水平较术前均下降,血清TGF-β1与IL-2、MMP-9,及IL-2与MMP-9均呈正相关(均P<0.05)。ROC曲线分析,诊断不孕TGF-β1曲线下面积(AUC)0.941、敏感度88.3%、特异度94.0%,IL-2 AUC 0.778、敏感度66.7%、特异度84.0%,MMP-9 AUC 0.946、敏感度88.3%、特异度86.0%,3指标联合诊断AUC为0.992,敏感度93.3%、特异度100.0%。logistic回归分析,血清TGF-β1、IL-2、MMP-9异常升高是输卵管阻塞性不孕发发生的危险因素(均P<0.05)。结论:输卵管阻塞性不孕患者血清TGF-β1、IL-2、MMP-9水平均高表达,且是不孕发生的危险因素,3者联合检测对输卵管阻塞性不孕有较高诊断价值。

基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株及其表型研究

目的 采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法 设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成Lenti-IDO1-gRNA慢病毒。利用Cas9慢病毒感染THP-1细胞获得稳定表达Cas9蛋白的细胞株,再经Lenti-IDO1-gRNA慢病毒感染敲除IDO1基因,有限稀释法获得单克隆细胞株。T7E1酶切检测gRNA打靶效率,PCR产物测序和Western blot鉴定IDO1基因敲除效果。CCK8法检测IDO1基因敲除对THP-1细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测对巨噬细胞标志物CD11b、CD68和CD14表达的影响,中性红法检测巨噬细胞吞噬功能。结果 成功构建了3种IDO1-gRNA重组质粒,3条gRNA均能有效编辑IDO1基因,以gRNA2编辑效率最高。经PCR产物测序和Western blot验证获得了3株THP-1 IDO1-KO单克隆细胞株,并发现IDO1基因敲除可抑制THP-1细胞增殖,下调THP-1巨噬细胞CD11b、CD68表达,上调CD14表达,增强THP-1巨噬细胞吞噬功能。结论 成功构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株;IDO1对THP-1细胞增殖活性、分化调节以及THP-1巨噬细胞吞噬功能调节有重要作用,为后续进一步探讨IDO1基因在巨噬细胞中的功能及机制研究奠定基础。

血清TSP-1联合MMP-9对高血压脑出血患者血肿清除术后发生迟发性脑水肿的预测价值

目的探讨血清血小板反应蛋白(TSP)-1联合基质金属蛋白酶(MMP)-9对高血压脑出血(HCH)患者血肿清除术后发生迟发性脑水肿的预测价值。方法选取2020年1月至2023年6月北京市怀柔区中医医院和首都医科大学附属北京中医医院收治的126例HCH患者作为研究对象。所有患者均接受血肿清除手术治疗。观察所有患者术后迟发性脑水肿的发生情况,根据是否发生迟发性脑水肿分为发生组和未发生组。比较两组临床资料,采用多因素Logistic回归分析HCH患者血肿清除术后发生迟发性脑水肿的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清TSP-1、MMP-9对HCH患者血肿清除术后发生迟发性脑水肿的预测价值。结果126例HCH患者血肿清除术后有35例患者发生迟发性脑水肿,有91例患者未发生迟发性脑水肿。发生组血清TSP-1、MMP-9水平高于未发生组,血肿体积大于未发生组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清TSP-1、MMP-9单独及2项指标联合预测HCH患者血肿清除术后发生迟发性脑水肿的曲线下面积分别为0.761、0.769、0.810。多因素Logistic回归分析结果显示,TSP-1≥75.440 ng/mL、MMP-9≥183.265μg/L、血肿体积≥50.50 mL是HCH患者血肿清除术后发生迟发性脑水肿的危险因素(P<0.05)。结论血清TSP-1、MMP-9联合预测HCH患者血肿清除术后发生迟发性脑水肿的效能较高,二者有望成为预测其发生的有效指标,可为后续临床诊疗提供指导。

scAAV9-IGF-1对SOD1-G93A小鼠抗凋亡通路的作用

目的 探索以自我互补双链腺相关病毒9为载体介导的人胰岛素样生长因子-1 (scAAV9-IGF-1)对SOD1-G93A转基因小鼠抗凋亡通路的作用。方法 采用肌萎缩侧索硬化(ALS)的动物模型即转基因SOD1-G93A突变型及野生型(wild type-SOD1,WT-SOD1)小鼠,在其出生后60 d龄时,雌性同窝阳性SOD1-G93A转基因小鼠采用随机的方法分配到治疗组及溶剂对照组,治疗组全身多点肌肉注射scAAV9-IGF-1,溶剂对照组多点肌肉注射AAV9-GFP,同年龄WT-SOD1作为阴性对照组。在肌肉注射40~50 d后,利用PCR技术检测腰髓中IGF-1含量的变化,同时检测抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2的mRNA含量变化,通过免疫组化染色观察抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达。结果 PCR技术检测显示scAAV9-IGF-1处理后,腰髓中IGF-1的mRNA含量显著高于GFP对照组,抗凋亡通路因子Bclxl、Bcl-2的mRNA含量均高于溶剂对照组(均P<0.05),而与WT组差异无统计学意义。免疫组化染色结果显示,治疗组中抗凋亡通路蛋白Bcl-xl,Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达多于溶剂对照组,并且与WT阴性对照组相当。结论 scAAV9-IGF-1可以激活SOD1-G93A转基因小鼠模型中的抗凋亡通路,其通过上调Bcl-xl,Bcl-2的mRNA水平,进而增加Bcl-xl、Bcl-2的蛋白表达,从而产生抗凋亡的作用。

LncRNA LINC00665通过miR-9-5p调节ATF1表达促进甲状腺乳头状癌进展

目的 探究LncRNA LINC00665通过miR-9-5p调节转录激活因子(ATF)1表达,促进甲状腺乳头状癌(PTC)的进展。方法 收集手术切除的PTC组织及癌旁组织80例,qRT-聚合酶链反应(PCR)分析PTC组织及癌旁组织、PTC细胞系中LINC00665与miR-9-5p的相对表达,分析LINC00665与miR-9-5p在PTC中的相关性。B-CPAP细胞分为对照组、阴性对照组、shLINC00665组和shLINC00665+miR-9-5p-inhibitor组,进行对应转染。Target Scan Human预测和双荧光素酶报告基因检测分析LINC00665、ATF1和miR-9-5p的靶向调节关系。CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,流式检测细胞凋亡,Western印迹检测PTC及癌旁组织ATF1和细胞ATF1、凝血酶敏感蛋白(TSP)-1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平,体内异种移植实验检测肿瘤发展能力,免疫组化检测肿瘤ATF1表达。结果 与癌旁组织相比,PTC组织中LncRNA LINC00665、ATF1表达量显著升高,LncRNA LINC00665与miR-9-5p水平呈显著负相关(P<0.05)。与Nthy-ori3-1相比,TPC-1、KTC-1、B-CPAP、HTori-3的LINC00665表达量均显著升高,miR-9-5p表达量均显著降低(P<0.05)。LINC00665与miR-9-5p、miR-9-5p与ATF1存在结合位点,LINC00665靶向抑制miR-9-5p, miR-9-5p靶向抑制ATF1。与对照组相比,shLINC00665组细胞增殖活性、迁移与侵袭能力、Bcl-2表达量、皮下肿瘤生长速度与ATF1表达量显著降低,凋亡率、TSP-1、Bax表达量显著升高(P<0.05);与shLINC00665组相比,shLINC00665+miR-9-5p-inhibitor组细胞增殖活性、迁移与侵袭能力、Bcl-2表达量、皮下肿瘤生长速度与ATF1表达量显著提升,凋亡率、TSP-1、Bax表达量显著下降(P<0.05)。结论 LncRNA LINC00665能够靶向调控miR-9-5p表达,降低miR-9-5p对ATF1的抑制,促进PTC发展。

血清MMP-9、sTREM-1对输尿管结石患者术后泌尿系统感染的预测价值

目的探讨血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)对输尿管结石患者术后泌尿系统感染(UTI)的预测价值。方法选取2021年10月至2022年10月在该院泌尿外科收治的输尿管结石患者中术后发生UTI的68例患者(UTI组)和未发生UTI的68例患者(非UTI组)作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清MMP-9、sTREM-1水平。采用Spearman法分析UTI组血清MMP-9、sTREM-1水平与临床资料的相关性,受试者工作特征曲线分析血清MMP-9、sTREM-1水平对输尿管结石患者术后UTI的预测价值,以及多因素Logistic回归分析输尿管结石患者术后UTI发生的影响因素。结果与非UTI组相比,UTI组血清MMP-9、sTREM-1水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析发现,UTI组患者血清MMP-9和sTREM-1水平呈正相关(r=0.585,P<0.001)。二者联合预测输尿管结石患者术后UTI的曲线下面积(AUC)为0.961(95%CI:0.934~0.988),其灵敏度、特异度分别为73.36%和85.68%,二者联合预测的AUC高于MMP-9和sTREM-1单独预测的AUC(Z=25.420,P<0.001;Z=21.531,P<0.001)。MMP-9、sTREM-1水平是输尿管结石患者术后UTI发生的影响因素(P<0.05)。结论输尿管结石术后UTI患者血清MMP-9、sTREM-1水平升高,二者水平检测对输尿管结石患者术后UTI的发生具有重要预测价值。

血清PCSK9、ICAM-1与ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后的关系

目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)与急性冠脉综合征(ACS)合并糖尿病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后心肌损伤及预后的关系。方法将2020年1月至2022年3月该院收治的58例ACS合并糖尿病患者纳入研究。患者行PCI手术后,根据是否发生心肌损伤,分为心肌损伤组(n=24)和心肌未损伤组(n=34)。对患者术后进行12个月的随访,根据是否发生主要不良心血管事件(MACE)分为预后不良组(n=20)和预后良好组(n=38)。比较不同组别的患者血清PCSK9、ICAM-1水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清PCSK9、ICAM-1水平对ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后不良的预测价值。结果心肌损伤组患者血清PCSK9、ICAM-1水平高于心肌未损伤组(P<0.05)。预后不良组患者血清PCSK9、ICAM-1水平高于预后良好组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清PCSK9联合血清ICAM-1的预测价值最高,其用于预测ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后不良的曲线下面积(AUC)最大,分别为0.865和0.820。结论血清PCSK9、ICAM-1水平与ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后密切相关,两者联合检测对患者心肌损伤及预后不良的预测价值最高。

circPVT1靶向调控miR-195-5p/SOX9轴影响结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化

目的:探究环状RNA浆细胞瘤变体易位1(circPVT1)靶向调控微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养人正常结肠上皮细胞NCM-460、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)至对数期,将SW480细胞分为对照组(正常培养SW480细胞不进行转染)、空载质粒组(转染空载质粒)、circPVT1沉默组[转染circPVT1小干扰RNA(siRNA)质粒]、miR-195-5p过表达组[转染miR-195-5p模拟物(mimics)质粒]、SOX9沉默组(转染SOX9 siRNA质粒)、circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组(转染circPVT1 siRNA和miR-195-5p siRNA质粒)。各组转染相应质粒后培养48 h。荧光定量PCR法检测NCM-460细胞、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)和各组SW480细胞circPVT1、miR-195-5p、SOX9 mRNA的表达;噻唑蓝和流式细胞仪分别检测各组SW480细胞增殖和凋亡;蛋白印迹法检测各组SW480细胞SOX9、凋亡和EMT相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9的靶向关系。结果:与NCM-460细胞比较,SW480细胞、HCT116细胞、HCT29细胞、LOVO细胞、SW620细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达显著升高,miR-195-5p表达显著降低(P<0.05);其中,SW480细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达最高,miR-195-5p表达最低;故选择SW480细胞进行后续实验。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组circPVT1、SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低,miR-195-5p表达显著升高(P<0.05);miR-195-5p过表达组miR-195-5p表达显著升高,SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);SOX9沉默组SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组、miR-195-5p过表达组、SOX9沉默组细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。与circPVT1沉默组比较,circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组miR-195-5p、凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著降低,SOX9 mRNA及蛋白、细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著升高(P<0.05)。circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9存在靶向调控关系。结论:沉默circPVT1可以靶向上调miR-195-5p表达,抑制SOX9表达,进而抑制SW480细胞增殖和EMT进程,促进其凋亡。

细胞角蛋白19片段、蛋白激酶B和糖类抗原19-9水平联合超声内镜检查术对胃肠道间质瘤的鉴别价值

目的分析细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、蛋白激酶B(PKB)和糖类抗原19-9(CA19-9)水平联合超声内镜检查术(EUS)对胃肠道间质瘤和非胃肠道间质瘤的鉴别价值。方法前瞻性纳入2020年1月-2023年7月该院收治的69例胃肠道间质瘤患者作为研究组,另择同期78例非胃肠道间质瘤患者(胃肠道平滑肌瘤25例,胃肠道神经鞘瘤53例)作为对照组。比较两组患者一般资料、EUS指标和肿瘤标志物,绘制受试者操作特征曲线(ROC curve),分析血清CYFRA21-1、PKB和CA19-9水平单独检测,以及联合EUS,对胃肠道间质瘤的诊断价值。结果与对照组比较,研究组灰度平均值、灰度标准偏差、血清CYFRA21-1、PKB和CA19-9水平更高(P<0.05)。不同性别和年龄的胃肠道间质瘤患者,灰度平均值、灰度标准偏差、血清CYFRA21-1、PKB和CA19-9水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与肿瘤直径≤5 cm、病理性核分裂象≤5个/50 HPF的胃肠道间质瘤患者比较,肿瘤直径>5 cm、病理性核分裂象>5个/50 HPF的胃肠道间质瘤患者,灰度平均值、灰度标准偏差、血清CYFRA21-1、PKB和CA19-9水平更高(P<0.05)。将胃肠道间质瘤纳入阳性,非胃肠道间质瘤纳入阴性,ROC curve显示,联合检测胃肠道间质瘤的诊断价值高于EUS、血清CYFRA21-1、PKB和CA19-9水平单独检测,曲线下面积(AUC)为0.936,敏感度为82.61%,特异度为91.03%。结论在胃肠道间质瘤中,CYFRA21-1、PKB、CA19-9水平、灰度平均值和灰度标准偏差升高,CYFRA21-1、PKB和CA19-9水平联合EUS在胃肠道间质瘤中诊断价值较高。

超声内镜、巨噬细胞抑制因子-1、糖类抗原19-9联合诊断胰腺癌的临床价值分析

目的探究超声内镜、巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)、血清肿瘤标志物糖类抗原19-9(CA19-9)联合诊断胰腺癌的临床价值。方法选取2019年3月至2022年3月在南京医科大学附属苏州市立医院行超声内镜检查的100例高度疑似胰腺癌患者作为观察组,同期来院进行体检的50例健康志愿者作为对照组。采用化学发光法检测CA19-9水平,采用酶联免疫法检测MIC-1水平并进行组间比较。以术后患者的病理检查结果为金标准,比较超声内镜、MIC-1、CA19-9分别及联合应用对胰腺癌的诊断价值。结果2组研究对象的血清CA19-9、MIC-1水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组相比较,观察组患者的血清CA19-9、MIC-1水平更高,差异有统计学意义(P<0.05)。超声内镜、MIC-1、CA19-9三者联合诊断的敏感度(84.21%)均低于三者分别诊断(92.11%、90.79%、90.79%),特异度(91.67%)均高于三者分别诊断(79.17%、83.33%、75.00%)。三者联合诊断的阳性预测值为96.97%,阴性预测值为64.71%。结论在对胰腺肿瘤进行良恶性诊断时,采用超声内镜、MIC-1、CA19-9联合诊断可以有效提高其诊断效能。

玉屏风颗粒通过调控TLR9/AP-1信号通路对过敏性鼻炎大鼠鼻黏膜重塑、白三烯水平及免疫调节的作用

目的 探究玉屏风颗粒通过调控Toll样受体(TLR)9/激活蛋白(AP)-1信号通路对过敏性鼻炎大鼠鼻黏膜重塑、白三烯水平及免疫调节的作用。方法 选取大鼠60只,除健康10只外其余建立过敏性鼻炎模型,所有大鼠分为健康(A)组、模型(B)组、玉屏风颗粒低剂量(C低)组、玉屏风颗粒中剂量(C中)组、玉屏风颗粒高剂量(C高)组、氯雷他定(D)组,各10只。分组后给予相应药物干预。其中,C高、中、低组用5.40、2.70、1.35 g/kg灌胃,D组以0.90 mg/kg灌胃,A、B组每天进行等体积生理盐水灌胃,均连续干预30 d。经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4、组织胺(HIS)、血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、免疫球蛋白(Ig)E,苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态,对鼻黏膜中嗜酸性粒细胞(EOS)检测,Western印迹检测细胞癌基因fos蛋白(C-Fos)、原癌基因蛋白(C-Jun),反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测白三烯受体(CysLT1-R)和CysLT2-R基因mRNA表达。结果 与A组比较,B组血清中IL-4、TNF-α、IgE、HIS表达、鼻黏膜组织中EOS细胞及CysLT1和CysLT2 mRNA表达、C-Fos、C-Jun蛋白水平明显增加(P<0.05);与B组相比,C中组血清中IL-4、TNF-α、IgE、HIS表达、鼻黏膜组织中EOS细胞及CysLT1和CysLT2 mRNA表达、C-Fos、C-Jun蛋白表达明显降低(P<0.05);与C中组比较,C高组血清中IL-4、TNF-α、IgE、HIS表达、鼻黏膜组织中EOS细胞及CysLT1和CysLT2 mRNA表达、C-Fos、C-Jun蛋白表达明显降低(P<0.05);与C高组比较,D组血清中IL-4、TNF-α、IgE、HIS表达、鼻黏膜组织中EOS细胞及CysLT1和CysLT2 mRNA表达、C-Fos、C-Jun蛋白表达明显升高(P<0.05);且B组与C低组比较无明显差异(P>0.05),C中组与D组比较无明显差异(P>0.05)。A组鼻腔内黏膜组织良好,无EOS浸润、充血;B组与C低组鼻腔内黏膜组织损坏严重,大量EOS浸润产生及黏膜上皮脱落,黏膜下腺体增生和血管扩张充血;C中组与D组鼻黏膜仍有部分肿胀及嗜酸性粒细胞,仍有炎性浸润现象;C高组鼻腔黏膜中仍有少量水肿和轻度血管扩张现象,EOS浸润明显降低。结论 过敏性鼻炎大鼠经玉屏风颗粒治疗后,白三烯表达降低,黏膜病理及免疫功能改善,机制可能与调节TLR9/AP-1信号通路相关。

慢性胃炎患者血清IGF-1、PCSK9与幽门螺杆菌感染之间的关系及其临床意义

目的探讨慢性胃炎患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与幽门螺杆菌(Hp)感染之间的关系及诊断价值。方法选取本院于2022年5月至2023年8月收治的125例慢性胃炎患者为研究对象,分为Hp阴性组(n=47)和Hp阳性组(n=78),另选取同期健康体检者122例为健康组。血清IGF-1、PCSK9、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)采用ELISA检测;血清IGF-1和PCSK9水平与IL-6和IL-10的相关性采用Pearson分析;慢性胃炎Hp感染的影响因素采用多因素Logistic回归分析;ROC评估血清IGF-1和PCSK9水平对慢性胃炎Hp感染的诊断价值。结果Hp阳性组血清IGF-1水平低于Hp阴性组低于健康组(P<0.05),Hp阳性组血清PCSK9高于Hp阴性组高于健康组(P<0.05)。Hp阳性组G-17和PGⅠ水平低于Hp阴性组(t=4.986、7.369,P<0.05),PGⅡ、IL-6和IL-10水平高于Hp阴性组(t=3.950、7.429、2.594,P<0.05)。慢性胃炎患者血清IGF-1水平与IL-6和IL-10呈显著负相关(r=-0.417、-0.503,P<0.001),血清PCSK9水平与IL-6和IL-10呈显著正相关(r=0.526、0.475,P<0.001)。IGF-1、PCSK9、G-17、PGⅠ和IL-6为慢性胃炎Hp感染的影响因素(OR=0.817、1.366、0.801、0.854、1.953,P<0.05)。血清IGF-1和PCSK9联合诊断慢性胃炎Hp感染的AUC为0.910(95%CI:0.846~0.954),显著大于IGF-1(Z=2.856,P=0.004)和PCSK9(Z=3.113,P=0.002)单独诊断的AUC。结论慢性胃炎Hp感染患者血清IGF-1水平较低、PCSK9水平较高,血清IGF-1和PCSK9联合诊断慢性胃炎Hp感染的价值较高。

铑催化7-辛烯醛氢甲酰化反应合成1,9-壬二醛

脂肪族二醛是一类重要的工业化学品中间体,可以经过氧化、还原、还原酯化、还原胺化等反应获得二酸、二醇、二酯、二胺等各种重要的化学品.我们报道了一种以丁二烯下游中间体—7-辛烯醛为原料的铑催化氢甲酰化反应合成1,9-壬二醛的方法,考察了不同膦配体对催化剂性能的影响,对反应工艺条件进行了研究和优化.使用Rh(I)/Xantphos催化剂,较优工艺条件下, 7-辛烯醛转化率>99%,直链壬二醛收率86%,醛产物正异比27, TON可达49 500.最后,对7-辛烯醛的氢甲酰化主反应和副反应机理进行了探讨.

植物乳杆菌1-9代谢水苏糖机制研究

从发酵羊乳中筛选分离得到1株乳酸菌,经分子生物学鉴定为植物乳杆菌1-9,且该菌株对水苏糖具有优异的代谢效果。为研究植物乳杆菌1-9代谢水苏糖机制,以水苏糖为唯一碳源绘制生长曲线并通过高效液相色谱法分析代谢产物短链脂肪酸含量变化,采用薄层层析法探究植物乳杆菌1-9代谢水苏糖历程,在监控水苏糖关键代谢酶基因表达的基础上分析发酵液中相关酶活变化。结果表明:植物乳杆菌1-9代谢水苏糖产生的主要短链脂肪酸为乙酸和戊酸,发酵液中最高质量浓度分别为28.64 mg/mL和2.74 mg/mL;短链脂肪酸的积累导致发酵液pH值显著降低至4.00左右。结合水苏糖代谢历程、基因表达及酶活变化,推断植物乳杆菌1-9基因组中5-359可编码α-半乳糖苷酶,其作用于水苏糖末端α-半乳糖苷键,生成半乳糖、少量乳糖和蔗糖并被植物乳杆菌1-9代谢。研究结果旨在为基于植物乳杆菌与水苏糖的合生元的合理设计及相关产品开发提供理论参考。

1-溴-9-芴酮的合成研究

1-溴-9-芴酮是一种重要的有机光电材料中间体。本文以2-溴苯甲酸甲酯、苯硼酸、1,2-二溴乙烷为原料,经Suzuki偶联反应、酯水解反应、邻位金属化反应、分子内环化反应得到目标化合物,产物结构经^(1)H NMR和GC-MS确证。本文采用的合成方法简单、产品收率及纯度高,总收率达69.3%,GC纯度达到99.5%,适合规模化生产。