长爪沙鼠肾病变随年龄变化的研究

目的本实验通过对长爪沙鼠不同年龄段肾病理表现特征的研究,为相关肾病变研究提供基础数据支持。方法利用HE染色观察长爪沙鼠不同年龄段肾病理表现,利用CaseViewer对肾小球、肾小囊、近曲小管进行记录、分析;利用CaseViewer对肾病理评分进行分析。结果在12、48和72周时,可见肾小球增大,挤压肾小囊囊间隙;肾小球外周毛细血管扩张、充血;肾小球与肾小囊黏连,并破坏附近近曲小管;肾小囊壁层增厚、分层;48、72周时,可见近曲小管管腔内蛋白样均质红染物质和肾小球坏死;病理评分显示,随着年龄的增长,不论是雌性还是雄性,其肾病理程度都呈上升趋势。其中雄性长爪沙鼠,12与8周比较,72与48周比较,肾小体病理评分都出现极显著性增长(P<0.01);而雌性长爪沙鼠,12与8周比较,48与12周比较,72与48周比较,肾小体病理评分都出现极显著性增长(P<0.01)。结论在12~72周时,长爪沙鼠表现出广泛的肾病理损伤,并且随着年龄的增长肾病理损伤逐渐加重。

恩格列净改善高糖诱导HK-2细胞凋亡的机制探讨

目的探讨恩格列净改善人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡的机制。方法将HK-2细胞置于正常葡萄糖、高葡萄糖、高葡萄糖+不同浓度的恩格列净共干预环境下培养48 h。采用蛋白免疫印迹法检测肾脏沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)以及裂解的半胱天冬酶-3(cleaved Caspase-3)的表达水平。采用TUNEL染色评估HK-2细胞凋亡情况。结果蛋白免疫印迹结果显示,高葡萄糖培养48 h后HK-2细胞的TXNIP和cleaved Caspase-3表达水平均高于正常葡萄糖组,而SIRT1表达水平低于正常葡萄糖组(P均<0.05)。1000 nmol/L恩格列净和30 mmol/L葡萄糖共干预48 h后,HK-2细胞的TXNIP和cleaved Caspase-3的蛋白表达水平降低,SIRT1表达水平升高(P均<0.001)。TUNEL染色结果显示恩格列净和30 mmol/L葡萄糖共干预组较30 mmol/L葡萄糖组TUNEL阳性细胞数少,且1000 nmol/L恩格列净和30 mmol/L葡萄糖共干预组凋亡改善更明显。结论恩格列净可能通过上调SIRT1的表达、抑制TXNIP表达,改善高糖诱导HK-2细胞凋亡。

丹参酮ⅡA对脂多糖诱导人肾皮质近曲小管损伤的影响研究

目的:探究丹参酮ⅡA对人肾皮质近曲小管细胞活力及炎症的影响。方法:通过脂多糖诱导建立人肾皮质近曲小管细胞系(HK-2)炎症损伤模型,并给予丹参酮ⅡA干预;通过形态学观察、CCK8实验评估丹参酮ⅡA对HK-2细胞活力的影响,通过实时荧光定量PCR实验检测细胞炎症因子TNF-α及IL-1β的表达水平,以评价丹参酮ⅡA对HK-2炎症的影响。结果:给予脂多糖干预会导致HK-2出现异常增殖及形态异常,在4μg/mL浓度时其细胞增殖率达到最高。10、20、40、80μM的丹参酮ⅡA会导致HK-2的增殖率显著下降,并在一定程度上改善其细胞形态。20、40、80μM的丹参酮ⅡA可抑制脂多糖诱导的细胞异常增殖及炎症因子TNF-α和IL-1β的表达。结论:丹参酮ⅡA能改善人肾皮质近曲小管的异常增殖及炎症损伤。

大网膜包裹治疗肾包膜下积液

作者报道一双侧肾脏近曲小管漏尿导致肾小球滤出液持续漏出,而出现肾包膜下积液的病例。作者利用大网膜的血管网络所具备的强大的吸收能力,以大网膜包裹肾脏表面,形成内引流,使肾小球滤出液被重吸收,而治愈该病。经手术,患者痊愈出院并恢复体力劳动。作者认为该病与多囊肾的病理及临床表现差别很大,大网膜包裹手术是治疗该病的有效手段。

大黄不同炮制品和煎煮时间对TGF-β1诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞中E-cadherin和α-SMA浓度的影响

目的探讨不同大黄炮制品干预人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)的作用差异及筛选最佳的煎煮时间点。方法取生大黄、熟大黄、酒大黄、大黄炭饮片各350 g,均分为7份。每份药物分别煎煮5、7、9、10、15、20、30 min,最终制备浓度约1000 g/L药液。将145只大鼠随机分为生大黄组、熟大黄组、酒大黄组、大黄炭组,各组又分为5、7、9、10、15、20、30 min时间点的亚组,每个亚组5只,另设对照组5只。将各药物组大鼠分别给予相应的大黄煎剂以1.35 g/(kg·d)的剂量灌胃,对照组大鼠给予0.9%氯化钠2 ml灌胃,每日2次,第6日灌胃后制备含药血清。用大黄不同炮制品不同煎煮时间的含药血清干预经转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的HK-2细胞24 h,检测各组HK-2细胞中上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的浓度。结果α-SMA浓度最低的分别为生大黄10 min亚组(52.086 ng/ml)、熟大黄10 min亚组(44.596 ng/ml)、酒大黄9 min亚组(49.768 ng/ml)、大黄炭9 min亚组(58.470 ng/ml)。E-cadherin浓度最高的分别为生大黄10 min亚组(1.017 ng/ml)、熟大黄10 min亚组(1.325 ng/ml)、酒大黄9 min亚组(1.163 ng/ml)、大黄炭9 min亚组(0.787 ng/ml)。与大黄炭组比较,其余3组α-SMA浓度降低,E-cadherin浓度升高(P<0.05或P<0.01)。与熟大黄组比较,生大黄组和酒大黄组α-SMA浓度升高,E-cadherin浓度降低(P<0.05或P<0.01)。酒大黄组与生大黄组比较,α-SMA和E-cadherin浓度差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论大黄的四种炮制品均能有效抑制经TGF-β1诱导的HK-2细胞上皮间充质转化,其作用效果由强到弱依次均为熟大黄、酒大黄、生大黄、大黄炭,生大黄和熟大黄最佳煎煮时间为10 min,酒大黄和大黄炭最佳煎煮时间为9 min。