野生毛樱桃SSR遗传多样性和遗传结构分析

利用11对SSR多态性引物对秦岭山脉5个居群11个亚居群104份野生毛樱桃材料进行遗传多样性和遗传结构分析,以明确中国樱桃的种质资源,为樱桃育种以及生产中改良樱桃砧木提供理论依据。结果显示：（1）11对引物共检测出110个等位位点,各引物扩增的多态性条带在5~13个之间;观察到的平均等位基因数（A）为10,有效等位基因数（Ae）为7.586 3。（2）秦岭山脉天水居群的多态性比率（PPB）为69.55%、长安居群为76.53%、太白居群为81.36%、华阴居群为85.00%、眉县居群为92.17%,5个居群总的多态性比率为81.62%,各位点平均期望杂合度（He）为0.864 0。（3）秦岭山脉野生毛樱桃各居群的基因分化系数（Gst）为0.081 2,居群内的遗传分化占91.88%,居群间的遗传分化占8.12%;基于Gst测得基因流（Nm）为2.827 3,秦岭山脉Nei遗传距离为0.489 7,香农信息指数为2.101 9。研究认为,秦岭山脉野生毛樱桃的遗传多样性水平较高,遗传分化主要存在于居群内,且基因交流没有受到阻碍,居群内现存的遗传多样性水平对遗传漂变不敏感,但居群间存在适中的基因交流可能会降低整个种群的再分化。

毛樱桃果实营养成分分析研究

对野生毛樱桃果实营养成分分析表明,果实中含有胡萝卜素、VA、VB1、VB2、VC、VD、VPP、VE等多种维生素,其中VC的含量高达63.5mg/100g,是一般水果的2～30倍。果实中矿物质和微量元素的测定结果表明,Ca、P、Fe等成分含量明显高于其它水果,特别是Ca的含量,高达160.7mg/100g,是一般水果含量的10～80倍。毛樱桃果实中含有17种氨基酸,氨基酸总含量为1992.5mg/100g,其中人体必需氨基酸含量为956.4mg/100g,占氨基酸总量的48%。

毛樱桃核壳及核仁挥发油成分分析

采用水蒸汽蒸馏法提取毛樱桃核壳及核仁中的挥发油,利用气相色谱/质谱(GC-MS)鉴定其化学成分.结果表明:毛樱桃核壳中有48个色谱峰,24种成分,占总挥发油质量分数的97.45%;核仁中有20个色谱峰,12种成分,占总挥发油质量分数的99.40%;其中质量分数最高的均为苯甲醛;二者所含成分的种类和相对质量分数相差较大.

野生毛樱桃生长期矿质营养含量变化与果实生长的关系

研究了野生毛樱桃生长期果实生长与叶果中7种矿质营养元素(Cu,Zn,Fe,Mn,Ca,Mg,K)的含量变化及其相关关系。结果表明,果实中Cu,Zn,Fe,Mn,Ca,Mg元素含量与果实生长呈负相关,其中Zn,Mg元素达显著水平;叶片中Cu,Zn,Fe,Mn,K元素含量与果实生长呈负相关,其中K元素达显著水平,叶片中Ca,Mg元素与果实生长呈正相关,其中Ca元素达显著水平。果实中各营养元素(除K外)生长期变化相互间均达极显著正相关。叶片中Ca与Mg元素呈极显著正相关;Zn,K均与Ca,Mg元素呈极显著负相关;Cu与Ca元素呈显著负相关;K与Zn,Cu元素呈显著正相关;Zn与Cu,Mn元素均呈显著正相关。叶片和果实中矿质营养元素间相关性均不显著。

毛樱桃果肉总黄酮最佳提取纯化工艺设计研究

目的探讨毛樱桃果肉总黄酮的最佳提取纯化条件,并验证所得产物的性质及活性.方法采取联合提取纯化法分离毛樱桃果肉总黄酮;采用红外光谱鉴定提取物的性质,并用小鼠足肿胀实验验证所得产物的生物学活性.结果联合提取纯化法所得产物得率较高,折合生药量平均达到0.833%,经红外光谱检测所得提取物与芦丁标准品有较高的一致性;小鼠足肿胀实验显示:所得产物抗炎活性显著,且呈剂量依赖性.结论联合提取纯化法具有较强的统一性,可使分离纯化更加协调有序地进行,节约时间,提高效率,该法所得毛樱桃果肉总黄酮具有较高的得率和纯度,产物品质和生物学活性良好,可推广利用.

东北毛樱桃红色素的提取及稳定性研究

以东北毛樱桃为原料,用酸性食用乙醇提取制得樱桃红色素,并对该色素的稳定性进行了研究。实验结果表明,该色素在酸性条件下对光、热、常用食品添加剂比较稳定,是一种价廉易得、安全可靠、使用方便的天然植物色素。

毛樱桃汁碳酸饮料生产工艺研究

分析了毛樱桃的营养成分 ,研究了果胶酶 ROHAPECT D5 S对毛樱桃的出汁率、粘度、澄清度的影响。结果表明 ,毛樱桃营养丰富 ,矿物质和维生素等含量较高 ;复合果胶酶处理对出汁率的影响显著 ,酶的浓度为 6 %、处理温度为 4 5℃、处理时间为 6 0 min时出汁率最高 ,达到 72 .8% ,提高了 11.6 % ;并且酶的浓度能极大地降低果汁的粘度 ,使果汁澄清度加大 ,差异显著 ;同时优选出毛樱桃汁碳酸饮料的最佳配方。

毛樱桃果实营养成分分析研究

对野生毛樱桃果实营养成分分析表明 ,果实中除含有糖、有机酸外 ,还含有丰富的维生素、矿物质及氨基酸等营养成分。果实中含有胡萝卜素、VB1、VB2 、VC、VD、VPP、VE 等多种维生素 ,其中VC 的含量高达 0 .6 35mg/ g ,是一般水果的 2～ 30倍。果实中矿物质和微量元素的测定结果表明 ,Ca、P、Fe等成分含量明显高于其它水果 ,特别是Ca的含量 ,高达 1.6 0 7mg/ g ,是一般水果含量的 10～ 80倍。毛樱桃果实中含有 17种氨基酸 ,氨基酸总含量为 19.92 5mg/ g ,其中人体必需氨基酸含量为 9.5 6 4mg/ g ,占氨基酸总量的 48%。

郁李仁中苦杏仁甙的HPLC分析

目的 :测定中药郁李仁中苦杏仁甙的含量。方法 :用甲醇提取苦杏仁甙 ,高效液相色谱法 (HPLC)分离 ,紫外可变波长检测器检测。Agilent 110 0Series高效液相色谱仪 ,YWG-C18( 10 μm ,2 5 0mm× 4 .6mm)色谱柱 ,流动相为水 -甲醇 -乙腈 ( 70 :2 5 :5 ) ,流速为 0 .6ml/min ,柱温 :30℃ ,检测波长 :2 2 5nm。结果 :郁李仁中苦杏仁甙的含量为 2 .67%± 0 .0 5。结论 :该方法操作简单 ,稳定 ,快捷 ,可作为郁李仁的质量监控方法。

不同制备工艺所得毛樱桃总黄酮的抗炎活性研究

目的探讨毛樱桃总黄酮的最佳提取工艺,测定提取物中总黄酮的含量,为毛樱桃进一步研究提供理论依据.方法采用系统溶剂萃取法对乙醇提取物毛樱桃总黄酮进行富集纯化,通过小鼠耳肿胀实验考察所得提取物的抗炎活性.结果优化的提取、纯化工艺可明显提高总黄酮的提取率;水、石油醚萃取物总黄酮含量分别为1.31%,5.59%,而乙酸乙酯萃取物中总黄酮的含量可达26.31%;3种萃取物对小鼠耳肿胀模型肿胀度(mg)的影响分别为11.03±3.44(水提物),11.29±2.92(石油醚提取物),6.56±2.59(乙酸乙酯提取物).结论毛樱桃总黄酮可通过乙醇提取,石油醚、水除杂,乙酸乙酯萃取富集,其得率、纯度及抗炎活性均显著提高.

毛樱桃总黄酮对全身炎症反应小鼠的保护作用

目的探讨毛樱桃总黄酮(PTF)对酵母多糖(ZYM)诱导的全身炎症反应综合征(SIRS)小鼠的保护作用和机制.方法将60只雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组(0.125 mg/kg)、PTF低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),预防性灌胃给药7 d后给小鼠腹腔注射ZYM(500 mg/kg),24 h后检测小鼠体温、白细胞数量,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β及IL-6的含量,生化法检测小鼠血清中SOD和MDA的含量,HE染色法观察小鼠肺组织、肾组织及肝组织病理形态学表现.结果与模型组比较,PTF组小鼠体温显著升高(P<0.01),白细胞数量增多(P<0.05);TNF-α、IL-1β及IL-6含量均显著降低(均P<0.01);SOD含量提高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);肺组织、肾组织和肝组织病理学病变减轻.结论PTF可抑制ZYM诱导的SIRS小鼠血清中炎症因子的分泌,并能减少氧化应激损伤,对SIRS小鼠具有保护作用.

毛樱桃总黄酮对小鼠皮肤增生性瘢痕的抑制作用及其机制

目的:探讨毛樱桃总黄酮(PTTTF)对小鼠皮肤增生性瘢痕(HS)形成的作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将96只ICR雄性小鼠随机分为空白对照组,模型对照组(给予相同剂量的涂膜剂空白基质),低、中和高剂量毛樱桃涂膜剂(PTTP)组(分别给予0.4、 0.8和1.6 mg·L~(-1)PTTP),阳性对照复方醋酸地塞米松乳膏(DXM)组,每组16只。除空白对照组外,其余各组小鼠均采用皮肤打孔器,以脊柱为中线在背部两侧制造2个直径为10 mm的全层皮肤缺损模型,每天给药1次,每次给药0.1 mL涂抹。每天观察各组小鼠创面愈合情况,计算伤口愈合率。分别于造模第10、20、30和40天处死每组小鼠4只,取创面全层皮肤组织。采用HE染色观察HS皮肤组织病理形态表现,Western blotting法检测各组小鼠皮肤瘢痕组织中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3 (Cleaved caspase-3)、 B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果:与模型对照组比较,造模第40天时,低、中和高剂量PTTP组小鼠创面愈合率分别为98.94%、99.14%和99.04%,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色,与模型对照组比较,各剂量PTTP组小鼠伤口愈合较快,逐渐恢复到正常皮肤结构,有皮脂腺、毛囊和汗腺等皮肤附属器生成。Western blotting法检测,与模型对照组比较,各剂量PTTP组小鼠皮肤瘢痕组织中Cleaved caspase-3和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结结论论:PTTTF可促进伤口愈合,对小鼠HS的形成具有一定的抑制作用,其作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。

毛樱桃总黄酮对RAW264.7细胞中炎症因子水平的影响及其机制

目的:探讨毛樱桃总黄酮(PTTTF)对脂多糖(LPS)诱导的细胞炎症模型中炎症因子的影响,阐明其作用机制。方法:通过LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7和人中性粒细胞(PMN)建立细胞炎症模型,将细胞分为对照组、模型组、地塞米松(DXM)组和不同剂量(0.4、4.0和40.0 mg·L^-1)PTTTF组。采用RT-PCR法检测RAW264.7细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达水平;采用Western blotting 法检测RAW264.7细胞中核转录因子κB(NF-κB)及信号通路关键分子细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、C-Jun氨基末端激酶1/2(JNK)和磷酸化JNK (p-JNK)蛋白表达水平;采用流式细胞术检测RAW264.7细胞S期细胞百分率和PMN细胞凋亡率。结果:与对照组比较,模型组RAW264.7细胞中IL-1β、IL-6、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05或 P<0.01),NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显升高(P<0.01),S期细胞百分率明显升高(P<0.05),PMN细胞凋亡百分率明显降低(P<0.05)。与模型组比较,4.0及40.0 mg·L^-1 PTTTF组和DXM组RAW264.7细胞中IL-1β、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或 P<0.01),NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显降低(P<0.05),S期细胞百分率明显降低(P<0.05或 P<0.01),PMN细胞凋亡率明显升高(P<0.05或 P<0.01)。结论: PTTTF能够下调LPS诱导的细胞炎症模型中炎症因子表达水平,该作用可能与其降低S期细胞百分率,促进其凋亡,并下调NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达有关。

毛樱桃与李子杂交新品种的早期鉴定

以毛樱桃与李子品种"晚黄李"杂交后代F1-2为试材,采用叶片形态学观察、染色体检验、分子SRAP技术检测方法,研究了杂交后代与父母本的真实性关系,以期为樱桃新品种选育及配套栽培技术提供参考依据。结果表明:杂交后代F1-2是毛樱桃与"晚黄李"的杂交种,其遗传基础更多来自于毛樱桃。

毛樱桃总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞抗炎作用研究

利用LPS诱导的RAW264.7的细胞炎症模型,该研究检测了毛樱桃总黄酮对IL-6、IL-1β、PGE2生成的影响,同时,检测了毛樱桃总黄酮对COX-1和COX-2表达的影响。结果显示,当浓度为0.4、4μg/mL时,毛樱桃总黄酮对LPS诱导的RAW264.7生成IL-6、IL-1β及PGE2均有显著抑制作用(P<0.05);当浓度为40μg/mL时,毛樱桃总黄酮对LPS诱导的RAW264.7的COX-1表达无明显影响;对LPS诱导的RAW264.7的COX-2表达具有明显的抑制作用。结果表明,毛樱桃总黄酮可以显著抑制细胞炎症因子IL-6、IL-1β、PGE2的生成,并且可以明显抑制COX-2表达,而对COX-1表达影响不明显。

干红毛樱桃酒酿造工艺研究

毛樱桃果实破碎榨汁时添加5％的白酒大曲,室温下处理6h,可使出汁率提高13.6％。采用苹果酸—乙醇发酵的生物降酸法降低毛樱桃汁的酸度,加入果酒酵母前添加8％—10％的裂殖酵母1号培养液,3d后使酸度平均降低10.4g/1,降酸率达54％在发酵过程中,采用带皮渣发酵4d,然后分离皮渣继续发酵的方式,并且采取15℃的低温发酵工艺,使酒的色香味保持较好的状态。

毛樱桃乙醇提取物的试验研究

目的:通过现代科学方法确定毛樱桃抗冻伤乙醇提取的最佳工艺。方法:采用正交实验设计法优选毛樱桃的最佳提取工艺,采用兔耳冻伤模型进行提取物抗冻伤实验研究。结果:毛樱桃加8倍量95%乙醇,采用索氏提取器回流提取2次,每次1.5h,此条件下的提取率最高,该提取物在兔耳冻伤试验中能明显减轻兔耳局部冻伤组织红肿等炎症反应,防止水泡产生和组织坏死,对兔耳轻、中度冻伤有显著的治疗作用。结论:本研究确定了毛樱桃最佳醇乙提取工艺,且提取物具有显著的抗炎及抗冻伤作用。

毛樱桃红色素稳定性的研究

利用分光光度法系统研究了毛樱桃果实红色素的稳定性,从而为该色素的开发和利用提供科学依据。实验结果表明:pH值对该色素的影响明显,宜在酸性食品中应用;某些金属离子如(Na+、Al3+﹑Zn2+、Cu2+)、葡萄糖、蔗糖、VC对该色素影响很小;还原剂(Na2SO3)对该色素有一定的不良影响,而Fe3+、氧化剂(H2O2)则对其有严重的破坏作用;低浓度(<0.06944mol/L)的苯甲酸钠对该色素无影响,高浓度(>0.06944mol/L)的则有明显的降解作用。