基于红参掺伪检查的大活络丸质量控制研究

目的:建立大活络丸中红参掺伪西洋参检查方法,以期更好地监测大活络丸的质量。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,以西洋参特征成分拟人参皂苷F11为检测指标,采用C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-10 mmol·L^(-1)甲酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃;电喷雾负离子扫描,多反应监测模式。结果:制剂基质效应不明显;拟人参皂苷F11在0.0117~1.167μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(R^(2)>0.9990),并与不同掺伪比例呈线性相关;平均回收率为95.2%,RSD=1.73%(n=6)。96批样品中,37批检出拟人参皂苷F_(11),5批超过拟定限度,涉及1家企业,不合格率5.2%。结论:本研究较全面地开展了大活络丸中红参掺伪西洋参检查方法的研制工作,且方法灵敏、准确,适用于大活络丸的质量监测。

UPLC-MS/MS检测补肾益脑胶囊中人参掺伪情况

目的:建立一种可测定补肾益脑胶囊制剂中非法添加西洋参的超高效液相色谱-质谱法,考察企业是否存在使用西洋参或其边角料替代人参投料的现象,为中药监管提供技术支持。方法:Phenomenex C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以10 mmoL·L^(-1)的乙酸铵(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱;流速为0.3 mL·min^(-1);柱温为40℃。采用电喷雾负离子模式进行多反应监测。结果:60批补肾益脑胶囊中有29批检出西洋参的专属成分拟人参皂苷F_(11),检出率为48.3%。结论:补肾益脑胶囊中存在人参掺伪的现象,该方法准确可靠,可作为补肾益脑胶囊中人参掺混西洋参的补充检验方法。

隔三七饼灸调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对创伤性骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

目的探究隔三七饼灸调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对创伤性骨关节炎(TOA)大鼠软骨损伤的影响。方法随机把SD大鼠分为假手术(sham)组、TOA组、隔三七饼灸组、扶他林组、隔三七饼灸+AMPK抑制剂(Compound C)组,采用经典Hulth方法复制TOA模型,HE染色和番红-固绿染色观察软骨组织病理改变,并进行Mankin’s评分;免疫组化检测软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)阳性表达情况;利用试剂盒检测软骨组织中炎性介质[(一氧化氮(NO),白介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α);基质金属蛋白酶-1、3(MMP-1.3)]水平;Western Blot、免疫共沉淀检测软骨组织中AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果与Sham组比较,TOA组软骨组织发生明显病变,软骨层变薄,表面出现裂隙样破坏,软骨细胞大量减少、排列紊乱,蛋白多糖明显丢失,Mankin’s评分增高;CollagenⅡ阳性表达下降,NO、IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-3水平增高(P<0.05);经隔三七饼灸、扶他林干预后,上述情况均得到改善,且隔三七饼灸干预改善更明显;在隔三七饼灸干预的同时给予AMPK抑制剂干预,隔三七饼灸的改善作用被削弱。与Sham组比较,TOA组软骨组织中AMPK磷酸化蛋白、SIRT1蛋白表达下降,NF-κB乙酰化蛋白、核NF-κB蛋白表达增高(P<0.05);经隔三七饼灸干预后,上述蛋白表达情况明显改善;在隔三七饼灸干预的同时给予AMPK抑制剂干预,隔三七饼灸的改善作用被削弱。结论隔三七饼灸能够减轻TOA大鼠软骨损伤,可能与调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路有关。

中药三七抗缺血再灌注损伤作用的研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)在组织损伤中非常常见,其病理过程较为复杂,可通过多种细胞因子及相关信号通路参与细胞损伤,对机体损伤严重。中医认为缺血再灌注损伤乃气血瘀滞所致,而中药三七具有活血化瘀、且毒副作用小的特点,其活性成分药理作用广泛,参与改善微循环、调节代谢、减轻应激及自噬等过程,从而改善重要器官缺血再灌注损伤。本文主要对近年来三七及其活性成分对缺血再灌注损伤的保护机制进行简要综述,为以后的研究提供参考。

三七粉口服联合氨甲环酸局部应用对老年股骨隆间骨折围手术期失血量的影响

目的 探讨三七粉口服联合氨甲环酸局部应用对老年股骨粗隆间骨折围手术期失血量的影响。方法 选取2020年8月—2022年8月期间河南省濮阳市中医医院收治股骨近端防旋髓内钉(Proximal Femoral Nail Anti-rotation, PFNA)治疗的老年股骨粗隆间骨折患者80例,按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组各40例。手术均由同一团队完成,治疗组患者术前口服三七粉,对照组患者术前不服用任何药物,且两组患者术中均对股骨髓腔和尾骨周围灌注氨甲环酸。测定两组患者手术前后血红蛋白(Hemoglobin, HB)、红细胞压积(Hematocrit, HCT)及D-二聚体水平,对两组患者术后进行Harris髋关节评分,统计两组患者总失血量、显性失血量、隐性失血量及血栓性并发症发生率。结果 术后7 d两组患者HB、HCT及D-二聚体水平均较术前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组HB、HCT水平较对照组降幅更小,D-二聚体水平较对照组降幅更多,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组总失血量、显性失血量及隐性失血量均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月两组患者Harris髋关节评分均较术后1个月上升,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者血栓性并发症发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 三七粉联合氨甲环酸局部应用的止血效果显著,有效降低股骨隆间骨折围术期失血量,且能有效抗凝,降低血栓性并发症的发生率,促进患者髋关节功能恢复。

参桂鹿茸丸中人参掺伪检查研究

目的:建立参桂鹿茸丸中人参掺伪检查方法,考察企业是否存在使用西洋参或其边脚料替代人参投料的现象,为中药监管提供技术支持。方法:以西洋参特征组分拟人参皂苷F11为掺伪检测依据,采用超高效液相色谱-串联质谱法,采用C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以甲醇和0.1%的甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温25℃;电喷雾正离子模式(ESI^(+)),多反应监测(MRM)模式进行检测。结果:拟人参皂苷F11进样浓度在12.32~616.00 ng·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系(R^(2)>0.9999);重复性试验的RSD为2.1%;平均回收率为102.6%,RSD=2.1%(n=9);43批样品中,16批样品检出西洋参,检出率高达37%。结论:该方法灵敏、准确,可作为参桂鹿茸丸中人参掺伪的检查方法。

三七及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳法鉴别

目的 :对三七及其混淆品进行蛋白多肽电泳鉴别。方法 :采用高效毛细管电泳法对三七及其混淆品蛋白多肽进行分析。结果 :三七及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳谱图有明显的差异。结论 :高效毛细管电泳可作为中药三七的生药鉴别方法。

三七及其混淆品的HPLC指纹图谱鉴定

目的 建立三七及其混淆品的指纹图谱鉴定方法。方法 采用 HPL C方法 ,测定三七、人参、西洋参、姜状三七、三七不同部位及其 2种混淆品的指纹图谱。结果 三七与人参、西洋参、姜状三七及其 2种混淆品的指纹图谱有明显区别 ,三七不同部位也有差异。结论 HPL C皂苷指纹图谱鉴别三七及其混淆品具有重复性好、特征性强、方法简便等特点 。

三七中人参三醇皂苷对脑缺血的保护作用

【目的】研究三七中人参三醇皂苷(PTS)对脑缺血的保护作用。【方法】将48只SD大鼠随机分为:假手术组、大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)模型组、PTS低(25mg/kg)、中(50mg/kg)、高(100mg/kg)剂量组和血栓通注射液(0.45mL/kg)组,通过行为学评分、脑含水量、脑梗塞范围和组织病理学检查等指标观察PTS对局灶性脑缺血的保护作用。同样将60只昆明小鼠随机分为:假手术组、不完全全脑缺血模型组、PTS低(25mg/kg)、中(60mg/kg)、高(120mg/kg)剂量组和血栓通注射液(0.45mL/kg)组,通过检测脑指数和脑伊文思蓝含量观察PTS对不完全全脑缺血的保护作用。【结果】对于大鼠,与模型组比较,PTS中、高剂量组均明显降低术后24h大鼠行为学评分,减轻缺血侧脑半球水肿程度(P<0.01);PTS低、中、高剂量组的缺血脑梗塞范围(19.0%±4.5%、16.4%±3.9%、16.4%±3.7%)明显低于模型组(23.5%±3.4%,P<0.05),缺血脑组织的病理改变也得到明显的改善,提示PTS对大鼠局灶性脑缺血有明显的保护作用。对于小鼠,PTS各剂量组的脑指数和脑伊文思蓝含量较模型组显著降低(P<0.05),提示PTS可通过抑制脑血管通透性的增加,从而降低脑指数,减轻脑水肿。【结论】PTS对大鼠大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)损伤、小鼠不完全全脑缺血损伤均具有明显的保护作用。

云南三七工厂化育苗工程技术体系分析

结合三七的生长特性,从系统工程视角分析了三七工厂化育苗的基本工艺流程;将三七工厂化育苗周期划分为播种前期准备、播种期实施和播种后期管理三个阶段,分析了各阶段相关设施设备的现状,指出设备选型过程中出现的问题。提出研发适宜三七的精密播种机,针对三七育苗不同生长阶段对自动控制设备进行改进,研发三七大田移载与精准施肥相关设备,研发三七机械化收获与烘干工程等设备的建议。

三七总皂苷抗炎作用机制的实验研究

以角叉菜胶 (Car) 2 5 mg/kg sc诱导大鼠气囊滑膜炎为模型 ,分别采用 L owry法、试管稀释法、硫代巴比妥酸分光光度法 ,观察了三七总皂苷 (Pn S)对气囊滑膜炎渗出液中蛋白含量、白细胞数量及脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量的影响 ,此外 ,采用细胞色素 C还原法及放射免疫分析法 ,进一步观察了 Pn S对渗出液中中性粒细胞(Neu)释放超氧阴离子 (O÷2 )及其胞内 c AMP含量的影响。结果发现 :Pn S 6 0 ,12 0 ,2 40 m g/kg 3个剂量组均能剂量依赖性地抑制 Car诱导的白细胞游出和蛋白渗出 ;显著降低 MDA含量、抑制 Neu释放 O÷2 ;但能升高 Neu内c AMP含量。提示 Pn S对大鼠气囊滑膜炎具有明显抗炎作用 ,其抗炎机制与升高 Neu内 c AMP从而抑制氧自由基生成。

三七总甙对肝星状细胞增殖及胶原生成的影响

目的:探讨三七总甙抗肝纤维化作用机制。方法:按常规方法分离正常大鼠肝星状细胞,用三七总甙药物温育液作用于传一代培养的肝星状细胞,~3H-TdR掺入观察细胞增殖,ELISA法测定上清及细胞层Ⅰ型胶原含量,改良Lowry's法测定细胞层总蛋白以校正细胞数。结果:三七总甙不同浓度组均能抑制肝星状细胞增殖及细胞内外Ⅰ型胶原生成,尤以细胞外的抑制更为明显,与对照组及2.5×10^(-7)M秋水仙碱组比较差异显著。结论:三七总甙抗肝纤维化作用可能是通过抑制肝星状细胞增殖及细胞内外Ⅰ型胶原生成来实现的。

新疆枸杞及枸杞三七复方有效成分的抗衰老作用

探讨新疆枸杞水浸液及其与三七浸提成分复方后的抗衰老作用。采用D-半乳糖皮下注射法建立衰老实验动物模型,以黄嘌呤氧化酶法测定对照组和给药后小鼠血清总超氧化物歧化酶(SOD)的活力并以硫代巴比妥酸(TBA)法测定小鼠血清丙二醛(MDA)的含量。同时进行了实验动物抗疲劳实验检测并观察了肾脏形态学变化。结果表明,新疆枸杞单味及其与三七复方给药后小鼠血清SOD,MDA及抗疲劳等指标均与衰老模型组不同(P<0.05或P<0.01)。给药组与衰老模型组小鼠肾小球形态大小、基底膜厚度、内皮细胞窗口分布均有显著差异,新疆枸杞与三七复方后抗衰老作用更为显著。

三七根腐病病原鉴定及药剂防治研究

从云南省文山州三七产地采集的根腐病标本分离出三种致病镰刀菌,即茄病镰孢(Fusarium solani(Mart)Sacc);尖孢镰孢(Fusarium oxysporumSchl);串珠镰孢中间变种(Fusarium moniliform Var.intermeclium Neish＆Keggett).其中后两种为首次报道.选用11种杀菌剂进行室内带药PDA平板抑菌和田间灌根试验,以甲霜灵锰锌和杀毒矾防效最佳.

三七叶提取物对大鼠脑缺血模型的影响

目的 :观察三七叶提取物对大鼠大脑中动脉缺血模型的影响。方法 :通过栓线法造成大脑中动脉缺血 ,观察三七叶提取物对缺血大鼠的行为状态、脑缺血面积、脑组织形态学的作用。结果 :三七叶提取物 42 .0、2 1.0、10 .5mg/kg能明显改善大鼠脑缺血后的行为状态 ,缩小缺血范围 ,降低缺血程度 。

丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注后海马区AI及Fas/FasL、TNF-α表达的影响

目的探讨丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注海马区细胞凋亡指数(AI)、Fas/FasL、TNF-α表达的影响。方法运用大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型,将动物随机分为假手术组、模型组、丹龙醒脑片组、尼莫地平组,采用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡神经细胞。采用免疫组织化学法,观察海马区Fas/FasL、TNF-α的表达。结果丹龙醒脑片能显著减轻神经细胞的损伤;假手术组有一定量的Fas/FasL、TNF-α表达,缺血后Fas/FasL、TNF-α迅速增加,丹龙醒脑片组显著抑制Fas/FasL、TNF-α的表达,模型组和丹龙醒脑片组、尼莫地平组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论抑制由缺血再灌注损伤诱导的Fas/FasL、TNF-α表达可能是丹龙醒脑片具有脑保护作用的机制之一。

中药三七的超细粉碎工艺与产品物性研究

以中药三七为研究对象 ,用高频振动磨进行干式超细粉碎 ,简要介绍了三七超细粉体的制备工艺过程和工艺特点 ,考察了超细粉碎过程中三七粉体的色泽变化。采用激光衍射法分析了粉体颗粒的粒度。

HPLC-ELSD及紫外分光光度法测定三七中皂苷的含量

采用反相高效液相色谱蒸发激光散射检测器测定三七中人参皂苷 Rg1 的含量。色谱柱为 CL C- ODS (6 .0mm× 15 0 m m) ,流动相为乙腈 -水 (30∶ 70 ) ,蒸发激光散射检测器。定量方法简单 ,准确。回收率为 10 0 .5 0 % ,RSD为 1.82 %。并用紫外分光光度法测定了三七中总皂苷的含量 ,结果和 HPL C法基本一致 ,说明该方法定量准确 ,回收率为 10 1.5 0 % ,RSD为 1.44 %。结论认为两方法均可以控制三七的质量。

三七总皂苷对糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:观察三七总皂苷对糖尿病大鼠肾脏CTGFmRNA表达的影响及其对肾脏的保护作用,以探讨三七总皂苷防治DN的可能作用机制。方法:用STZ诱导大鼠DM模型,并将成模大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组),三七总皂苷组(PNS组)和氨基胍组(AG组),同时建立正常对照组(NC组)。PNS组给予三七总皂苷100mg.kg?1.d?1灌胃,AG组给予氨基胍100mg.kg?1.d?1灌胃,DM组及NC组给予生理盐水1mL.100g?1.d?1灌胃,共8周。观察各组大鼠的血糖,24h尿蛋白定量,肾脏肥大指数及肾小球体积的变化,肾脏CTGFmRNA表达的变化。结果:①SD大鼠用STZ造模后,血糖明显升高(P<0.01),而PNS组、AG组及DM组比较血糖无显著差异(P>0.05)。②DN组24h尿蛋白定量与NC组相比有明显增高(P<0.01),PNS组、AG组与DN组比较,24h尿蛋白定量减少(P<0.01),PNS组与AG组比较差异不明显(P>0.05)。③DM组与NC组比较,肾重/体重明显增加(P<0.01),PNS组、AG组与DN比较,肾重/体重显著降低(P<0.01),PNS组与AG组比较差异不明显(P>0.05)。DM组大鼠的MGA与MGV均较NC组增大(P<0.05);PNS组、AG组的MGA、MGV则较DM组小(P<0.05),PNS组与AG组比较差异不明显(P>0.05)。④与NC组比较,DM组大鼠肾脏CTGFmRNA表达明显增高(P<0.01),PNS组、AG组大鼠肾脏CTGFmRNA表达较DM组降低(P<0.05),PNS组与AG组比较差异不明显(P>0.05)。结论:三七总皂苷具有降低糖尿病大鼠尿蛋白,减轻糖尿病大鼠肾脏肥大,下调肾脏结缔组织生长因子表达的作用,与西药氨基胍相比无明显差异。

丹酚酸B与三七总皂苷不同配比对大鼠离体心脏冠脉流量的影响

[目的]探讨丹酚酸B、三七总皂苷协同应用对大鼠离体心脏冠脉流量的影响。[方法]应用均匀设计的方法,将丹酚酸B与三七总皂苷的不同配比设计为6个水平,应用Langendorff系统进行离体心脏恒压灌流,记录6组实验给药前后大鼠的冠脉流量。[结果]丹酚酸B与三七总皂苷在升高大鼠冠脉流量上不存在线性回归关系,6组实验中以1号实验丹酚酸B/三七总皂苷为20mg/30mg升高大鼠冠脉流量最佳。[结论]丹酚酸B、三七总皂苷协同应用对大鼠离体心脏冠脉流量有很大影响。