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绿脓杆菌抗毒素精制方法与效价测定方法的研究
被引量:
2
1
作者
李景玉
王成怀
《微生物学免疫学进展》
1996年第1期6-10,共5页
本文采用胃酶消化──硫酸铵盐析法对绿脓杆菌外毒素A(PEA)免疫马血浆进行了试制提纯,对该法酶处理及热变性中影响精制效果的几个主要因素进行了比较试验,同时对文中采用的4种效价测定方法进行了筛选。结果表明,胃酶消化法可...
本文采用胃酶消化──硫酸铵盐析法对绿脓杆菌外毒素A(PEA)免疫马血浆进行了试制提纯,对该法酶处理及热变性中影响精制效果的几个主要因素进行了比较试验,同时对文中采用的4种效价测定方法进行了筛选。结果表明,胃酶消化法可用于PEA免疫马血浆的精制;效价测定以生物学方法(细胞毒性中和试验、小鼠致死毒性中和试验)为佳。综合比较试验的结果,本文拟订了PEA免疫马血浆精制的“修订法”并与“常规法”进行了精制比较。初步结果表明,修订法的精制效果优于常规法。
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关键词
绿脓杆菌抗毒素
抗毒素
精制方法
效价测定方法
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职称材料
绿脓杆菌外毒素A的最新研究进展
被引量:
9
2
作者
夏海华
于冲
+2 位作者
曲晓军
孙建华
王金英
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期81-85,共5页
在免疫缺失、囊肿性纤维化、烧伤烫伤等患者的临床继发感染中,绿脓杆菌是引起感染的主要病原菌之一,其合成的细胞外毒性物质—绿脓杆菌外毒素A(PEA)被认为是引起感染的最关键内在机制。该文对中外学者们在PEA的结构、功能、提取和纯化...
在免疫缺失、囊肿性纤维化、烧伤烫伤等患者的临床继发感染中,绿脓杆菌是引起感染的主要病原菌之一,其合成的细胞外毒性物质—绿脓杆菌外毒素A(PEA)被认为是引起感染的最关键内在机制。该文对中外学者们在PEA的结构、功能、提取和纯化方法、重组毒素、基因工程疫苗以及应用等方面的研究进行归纳总结,并对研究和应用中存在的问题加以分析,对预防和治疗绿脓菌感染、抗肿瘤、抗移植排斥和治疗自身免疫性疾病等具有重要而深远的意义。
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关键词
绿脓杆菌外毒素
a
(
pea
)
结构
功能
提取
纯化
重组毒素
基因工程疫苗
应用
原文传递
免疫单扩散法测定重组铜绿假单胞菌外毒素A蛋白含量方法的建立及其应用
3
作者
李燕婷
范锋锋
+5 位作者
冯宜扬
金鑫
吴朝今
赵志强
谢贵林
谭小梅
《中国新药杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第20期2346-2351,共6页
目的:探索建立免疫单扩散法测定不同料液中重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)蛋白含量新方法。方法:对缓冲液系统、最佳抗体浓度和最佳观测时间等关键因素进行摸索,确定方法的最佳条件。...
目的:探索建立免疫单扩散法测定不同料液中重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)蛋白含量新方法。方法:对缓冲液系统、最佳抗体浓度和最佳观测时间等关键因素进行摸索,确定方法的最佳条件。在此基础上,对该方法的专属性、精密度、准确性和标准曲线的可靠性进行验证,并将该方法应用于r EPA柱层析纯化中不同样品目标蛋白含量的测定及回收率计算。结果:最佳缓冲系统为0.85%Na Cl溶液,最佳抗体用量为50μL·m L-1,最佳观测计算时间为4 h。方法具有较好的专属性、精密度、准确性和线性。结论:初步建立了免疫单扩散试验测定不同料液中r EPA蛋白含量新方法,为其纯化工艺的优化奠定了基础。
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关键词
免疫单扩散法
方法验证
重组铜绿假单胞菌外毒素
a
蛋白质纯化
收率
原文传递
题名
绿脓杆菌抗毒素精制方法与效价测定方法的研究
被引量:
2
1
作者
李景玉
王成怀
机构
卫生部兰州生物制品研究所
出处
《微生物学免疫学进展》
1996年第1期6-10,共5页
文摘
本文采用胃酶消化──硫酸铵盐析法对绿脓杆菌外毒素A(PEA)免疫马血浆进行了试制提纯,对该法酶处理及热变性中影响精制效果的几个主要因素进行了比较试验,同时对文中采用的4种效价测定方法进行了筛选。结果表明,胃酶消化法可用于PEA免疫马血浆的精制;效价测定以生物学方法(细胞毒性中和试验、小鼠致死毒性中和试验)为佳。综合比较试验的结果,本文拟订了PEA免疫马血浆精制的“修订法”并与“常规法”进行了精制比较。初步结果表明,修订法的精制效果优于常规法。
关键词
绿脓杆菌抗毒素
抗毒素
精制方法
效价测定方法
Keywords
pseudomonas
aeruginosa
exotoxin
a
(
pea
)
antitoxin
methods
of
purification
methods
of
titer determin
a
tion
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
绿脓杆菌外毒素A的最新研究进展
被引量:
9
2
作者
夏海华
于冲
曲晓军
孙建华
王金英
机构
黑龙江省科学院微生物研究所
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期81-85,共5页
基金
黑龙江省科学院研究基金项目("11种血清型绿脓杆菌PEA基因序列与其活性的关系研究")资助
文摘
在免疫缺失、囊肿性纤维化、烧伤烫伤等患者的临床继发感染中,绿脓杆菌是引起感染的主要病原菌之一,其合成的细胞外毒性物质—绿脓杆菌外毒素A(PEA)被认为是引起感染的最关键内在机制。该文对中外学者们在PEA的结构、功能、提取和纯化方法、重组毒素、基因工程疫苗以及应用等方面的研究进行归纳总结,并对研究和应用中存在的问题加以分析,对预防和治疗绿脓菌感染、抗肿瘤、抗移植排斥和治疗自身免疫性疾病等具有重要而深远的意义。
关键词
绿脓杆菌外毒素
a
(
pea
)
结构
功能
提取
纯化
重组毒素
基因工程疫苗
应用
Keywords
pseudomonas
aeruginosa
exotoxin
a
(
pea
)
structure
function
extr
a
ction
purification
recombin
a
nt toxin
genetic
a
lly engineered v
a
ccine
a
pplic
a
tion
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
免疫单扩散法测定重组铜绿假单胞菌外毒素A蛋白含量方法的建立及其应用
3
作者
李燕婷
范锋锋
冯宜扬
金鑫
吴朝今
赵志强
谢贵林
谭小梅
机构
兰州生物制品研究所有限责任公司
出处
《中国新药杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第20期2346-2351,共6页
基金
国家"重大新药创制"科技重大专项(2013ZX09402302-212)
文摘
目的:探索建立免疫单扩散法测定不同料液中重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)蛋白含量新方法。方法:对缓冲液系统、最佳抗体浓度和最佳观测时间等关键因素进行摸索,确定方法的最佳条件。在此基础上,对该方法的专属性、精密度、准确性和标准曲线的可靠性进行验证,并将该方法应用于r EPA柱层析纯化中不同样品目标蛋白含量的测定及回收率计算。结果:最佳缓冲系统为0.85%Na Cl溶液,最佳抗体用量为50μL·m L-1,最佳观测计算时间为4 h。方法具有较好的专属性、精密度、准确性和线性。结论:初步建立了免疫单扩散试验测定不同料液中r EPA蛋白含量新方法,为其纯化工艺的优化奠定了基础。
关键词
免疫单扩散法
方法验证
重组铜绿假单胞菌外毒素
a
蛋白质纯化
收率
Keywords
single immuno diffusion
method v
a
lid
a
tion
recombin
a
nt
pseudomonas
aeruginosa
exotoxin
a
(r EP
a
)
protein
purification
recovery r
a
te
分类号
R915 [医药卫生—微生物与生化药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绿脓杆菌抗毒素精制方法与效价测定方法的研究
李景玉
王成怀
《微生物学免疫学进展》
1996
2
下载PDF
职称材料
2
绿脓杆菌外毒素A的最新研究进展
夏海华
于冲
曲晓军
孙建华
王金英
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2012
9
原文传递
3
免疫单扩散法测定重组铜绿假单胞菌外毒素A蛋白含量方法的建立及其应用
李燕婷
范锋锋
冯宜扬
金鑫
吴朝今
赵志强
谢贵林
谭小梅
《中国新药杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
原文传递
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