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外源甜菜碱提高恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)DLL-1耐盐性的研究 被引量:4
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作者 何健 蒋建东 +2 位作者 贾开志 黄星 李顺鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期154-157,共4页
研究了外源甜菜碱对恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)DLL-1耐盐性的影响并对其渗透保护机制进行了初步的探讨;结果表明培养基中添加甜菜碱可以改善DLL-1细胞在高盐培养基中的生长情况,添加150mg/L的甜菜碱可以使DLL-1在1.2mol/L NaCl... 研究了外源甜菜碱对恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)DLL-1耐盐性的影响并对其渗透保护机制进行了初步的探讨;结果表明培养基中添加甜菜碱可以改善DLL-1细胞在高盐培养基中的生长情况,添加150mg/L的甜菜碱可以使DLL-1在1.2mol/L NaCl的基础盐培养基中生长,添加10mg/L的甜菜碱就足以显著缩短渗透胁迫条件下DLL-1细胞的延滞期和代时,增加生长量;和不添加对照相比,延滞期由24h缩短到6h,代时由60min缩短到35.7min,最大生长量OD610由1.29增长到1.57。在渗透胁迫条件下,细胞从外界快速吸收外源甜菜碱来代替自身相容性溶质的合成。 展开更多
关键词 外源甜菜碱 渗透保护 耐盐性 pseudomonas putida DLL-1
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趋化信号转导基因cheA突变对Pseudomonas putida DLL-1甲基对硫磷的趋化性及原位降解的影响 被引量:3
2
作者 文阳 蒋建东 +2 位作者 邓海华 蓝鸿 李顺鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期471-476,共6页
Pseudomonas putida DLL-1是一株甲基对硫磷(MP)高效降解菌株,同时对MP具有趋化性.cheA基因是菌株趋化信号转导过程中负责编码组氨酸激酶的基因,为了研究菌株趋化性在农药原位降解中的作用,通过基因打靶的方式使P.putida DLL-1染色体... Pseudomonas putida DLL-1是一株甲基对硫磷(MP)高效降解菌株,同时对MP具有趋化性.cheA基因是菌株趋化信号转导过程中负责编码组氨酸激酶的基因,为了研究菌株趋化性在农药原位降解中的作用,通过基因打靶的方式使P.putida DLL-1染色体上单拷贝的cheA基因失活,成功地获得了MP的趋化突变株P.putida DAK,突变株与野生菌株生长能力没有显著差异.通过土壤盆钵试验(MP浓度为50mg/kg),发现在灭菌与未灭菌土壤中趋化突变株对MP的降解能力低于原始出发菌株DLL-1约20%~30%,说明菌株DLL-1趋化性的丧失会减慢其对农药的降解,趋化性在农药的原位降解过程中发挥重要作用. 展开更多
关键词 趋化性 农药降解 pseudomonas putida DLL-1 cheA基因 甲基对硫磷
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Pseudomonas putida MnB1氧化分解菱锰矿的实验研究
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作者 陈笑夜 陆现彩 +3 位作者 李娟 刘欢 向婉丽 张蕊 《高校地质学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期407-415,共9页
自然界中,菱锰矿氧化形成锰的氧化物矿物是非常普遍的现象,在菱锰矿被氧化分解发生物相转变的过程中,碳酸盐溶解和锰的氧化往往同时发生,微生物可能起着催化作用。选取锰氧化模式菌株Pseudomonas putida Mn B1和广西梧州菱锰矿,通过菱... 自然界中,菱锰矿氧化形成锰的氧化物矿物是非常普遍的现象,在菱锰矿被氧化分解发生物相转变的过程中,碳酸盐溶解和锰的氧化往往同时发生,微生物可能起着催化作用。选取锰氧化模式菌株Pseudomonas putida Mn B1和广西梧州菱锰矿,通过菱锰矿在该细菌作用下发生转变的实验,利用场发射扫描电镜、扫描透射X射线显微成像等分析方法,研究了矿石表面形貌变化以及锰元素在细胞上的分布特征。结果表明细菌显著促进的菱锰矿的溶解,在此基础上,进一步探讨了细菌在菱锰矿氧化过程中的贡献,本实验结果丰富了次生锰矿床的微生物成因研究。 展开更多
关键词 pseudomonas putida MnB1 菱锰矿 氧化
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Strain Pseudomonas putida PAO-1 Isolate with Polyphosphate Accumulating and Elongation Ability
4
作者 DONG Xuetong TIAN Qing +3 位作者 ZHU Yanbin LI Fang YANG Bo LIU Yanbiao 《Journal of Donghua University(English Edition)》 CAS 2021年第6期539-548,共10页
Filamentous bacteria(FB)overgrowth is an important cause of sludge bulking in wastewater treatment plants(WWTPs).However,to date,methods for the cultivation and preservation of isolated FB in the laboratory have not b... Filamentous bacteria(FB)overgrowth is an important cause of sludge bulking in wastewater treatment plants(WWTPs).However,to date,methods for the cultivation and preservation of isolated FB in the laboratory have not been completely described.Furthermore,research on whether FB can function as phosphorus accumulating organisms(PAOs)is limited.In this study,a pure strain,a Pseudomonas putida PAO-1(P.putida PAO-1)isolate with phosphorus removal functions was isolated from the biofilm of an alternating anaerobic/aerobic biofilter(AABF),and its physiological characteristics were studied.Nitrate or nitrite could be used by the strain P.putida PAO-1 as electron acceptors for denitrification during phosphorus anoxic uptake,and 0.63 mg NO-3-N was consumed to reduce 1 mg soluble orthophosphate(SOP)by P.putida PAO-1.The strain P.putida PAO-1 consumed phosphorus within the optimal pH range of 6 to 8 and the temperature range of 25℃to 35℃.Cell deformity was a main morphological trait of the strain P.putida PAO-1,and it could elongate(with an elongation rate of 300%-500%)when it was subjected to oligotrophic or high-salt stress(15 g·L-1 NaCl).The findings in this study provide a microbiological reference for understanding the special characteristics of a denitrifying PAO. 展开更多
关键词 pseudomonas putida PAO-1 isolate(P.putida PAO-1) ELONGATION ACCLIMATION denitrification phosphorus accumulating organism(PAO)
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恶臭假单胞菌JP-1产腈水合酶的发酵工艺研究 被引量:1
5
作者 张刚 兰先德 +2 位作者 韩志华 曾云峰 尹光琳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期286-290,共5页
70年代以来,国外许多学者开展了用腈水合酶将丙烯腈一步水合生成丙烯酰胺的研究,其反应在常温常压下进行,转化率高(近100%),分离操作简单和产品纯度高。80年代中期日本就有用微生物转化法生产丙烯酰胺的工厂。
关键词 恶臭假单孢菌 产腈水合酶 发酵工艺
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用实时定量PCR方法测定萘降解质粒pND6-1的拷贝数 被引量:1
6
作者 李珊珊 李霞 +1 位作者 赵化冰 蔡宝立 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期109-112,共4页
Pseudomonas putida ND6是一个高效降解萘的菌株,含有101 858 bp的萘降解质粒pND6-1.用实时定量PCR方法测定了Pseudomonas putida ND6菌株中pND6-1的拷贝数为2.这是第一个测定分子大小超过100 kb的细菌大质粒拷贝数的报道.
关键词 pseudomonas putida ND6 pND6-1 实时定量PCR 质粒拷贝数
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恶臭假单胞菌Pseudomonas putida S-1强化微生物电解池丙硫醇降解性能的研究 被引量:1
7
作者 胡俊 刘如意 +1 位作者 於建明 陈建孟 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期310-317,共8页
采用恶臭假单胞菌(菌株S-1)强化微生物电解池的丙硫醇降解性能.结果显示,菌株S-1可促进阳极微生物的生长和加速电子的传递,阳极微生物膜厚度从36μm增加至70μm,氧化和还原峰值电流分别从0.10和0.12 mA增加到0.14和0.21 mA.菌株S-1强化... 采用恶臭假单胞菌(菌株S-1)强化微生物电解池的丙硫醇降解性能.结果显示,菌株S-1可促进阳极微生物的生长和加速电子的传递,阳极微生物膜厚度从36μm增加至70μm,氧化和还原峰值电流分别从0.10和0.12 mA增加到0.14和0.21 mA.菌株S-1强化了微生物电解池的降解性能,丙硫醇脱硫率和矿化率分别从25.1%和34.3%增加至81.7%和53.4%.由于丙硫醇中间产物无法全部鉴别和准确定量,采用矿化库伦效率来表征菌株S-1对电子利用率的提升,发现其值从37.1%增大至67.9%.菌株S-1提高了微生物电解池对丙硫醇的降解速率.采用Haldane模型进行动力学分析,发现最大比降解速率(v_(max))从3.0 mg∙L^(-1)∙h^(-1)∙cm^(-2)提高至3.4 mg∙L^(-1)∙h^(-1)∙cm^(-2).同时,菌株S-1丰富了阳极微生物多样性.高通量测序结果显示,Pseudomonas,Caldilinea、Thiobacillus、Methylophilus、Methylotenera、Chryseobacterium等菌属明显增加. 展开更多
关键词 微生物电解池 生物阳极 恶臭假单胞菌 丙硫醇 性能强化
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好氧反硝化菌AD-1处理大豆乳清废水厌氧出水的性能评价
8
作者 蔡广潞 吴培 +1 位作者 张国宁 吴世晗 《价值工程》 2011年第11期8-10,共3页
为了提高污水中氮素的去除效率,本研究自某大学微生物实验室开发的处理大豆乳清废水厌氧出水的CAAC(Continuous Aerobic-anaerobic Coupled)反应器污泥中筛选出1株高效好氧反硝化菌AD-1,经16S rDNA序列同源性比较和系统发育分析初步鉴... 为了提高污水中氮素的去除效率,本研究自某大学微生物实验室开发的处理大豆乳清废水厌氧出水的CAAC(Continuous Aerobic-anaerobic Coupled)反应器污泥中筛选出1株高效好氧反硝化菌AD-1,经16S rDNA序列同源性比较和系统发育分析初步鉴定为恶臭假单胞菌(pseudomonas putida)。通过摇瓶批次培养考察菌株AD-1对以硝酸盐为唯一氮源的DM反硝化培养基的脱氮性能。48h时AD-1的TN和NO3-N去除率分别达到63.31%和63.35%,NO2-N浓度虽始终处于较低水平却呈高低波动状态,培养后期CODcr/TN下降是限制AD-1反硝化效率的主要因素之一。AD-1处理大豆乳清废水厌氧出水时NO3-N去除率接近100%,具有较高效的反硝化特性。结果表明,该菌株可作为处理大豆乳清废水厌氧出水及其它含氮废水的生物强化剂。 展开更多
关键词 大豆乳清废水厌氧出水 好氧反硝化菌 恶臭假单胞菌AD—1 硝态氮还原酶系 亚硝态氮还原酶系
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Pseudomonas putida ND6中两个高度同源catA基因的分离、克隆及比较
9
作者 覃琨 李华英 +4 位作者 郭锦 李德金 胡骁 刘芳 赵化冰 《武警后勤学院学报(医学版)》 CAS 2017年第5期369-374,共6页
【目的】分别对恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)ND6基因组中基因高度同源的儿茶酚1,2-双加氧酶基因catA_1、catA_2进行克隆和原核表达,并进行生物信息学分析和酶学性质比较。【方法】通过生物信息学软件对catA_1和catA_2进行序列分析... 【目的】分别对恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)ND6基因组中基因高度同源的儿茶酚1,2-双加氧酶基因catA_1、catA_2进行克隆和原核表达,并进行生物信息学分析和酶学性质比较。【方法】通过生物信息学软件对catA_1和catA_2进行序列分析和进化树构建,利用经典的酶切连接方法和核酸外切酶III介导的无缝连接两种方法分别对catA_1和catA_2进行了表达载体的构建,对表达产物的酶学性质(最适反应温度,最适反应p H,耐热性,底物特异性等)进行了研究。【结果】catA_1和catA_2在基因序列上相似性为73.57%,两个酶的最适反应p H均为7.4,最适反应温度分别为45℃、50℃,Km值分别为1.28、1.66μmol/L,酶活力单位分别为9.00、8.35 U/mg,两个酶对儿茶酚和4-甲基儿茶酚具有较好的反应活性,在C12O分类中属于同一类型。【结论】本研究通过两种方式成功构建了高度同源性两个基因的表达载体,对于分离高同源性基因有一定的参考意义,同时通过对ND6菌株中同工酶的酶学性质进行研究和比较,加深了对ND6萘降解机制的理解,进一步探讨了冗余降解基因存在的意义。 展开更多
关键词 恶臭假单胞菌ND6 儿茶酚1 2-双加氧酶 不依赖连接酶的分子克隆 酶学研究
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A novel salicylaldehyde dehydrogenase-NahV involved in catabolism of naphthalene from Pseudomonas putida ND6 被引量:2
10
作者 ZHAO HuaBing LI YongJun +1 位作者 CHEN Wei CAI BaoLi 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2007年第14期1942-1948,共7页
A novel salicylaldehyde dehydrogenase involved in catabolism of naphthalene from Pseudomonas putida ND6, NahV, has been identified. NahV exhibited lower identity in amino acid sequence with the classic salicylaldehyde... A novel salicylaldehyde dehydrogenase involved in catabolism of naphthalene from Pseudomonas putida ND6, NahV, has been identified. NahV exhibited lower identity in amino acid sequence with the classic salicylaldehyde dehydrogenase, NahF, from P. putida ND6. This is the first report of an isofunctional enzyme of bacterial salicylaldehyde dehydrogenase. Comparison of Km and Vmax values of NahV and NahF demonstrated that NahF has a more efficient catalytic reaction than NahV, while NahV has much higher affinity for salicylaldehyde and NAD+. Both enzymes exhibited broad substrate speci- ficities and catalyzed the oxidation of salicylaldehyde, 5-chlorosalicylaldehyde, formaldehyde, m-nitrobenzaldehyde, o-nitrobenzaldehyde, o-methoxybenxaldehyde, glutaraldehyde, caprylic aldehyde, and glyoxal. However, the relative rates at which the substituted analogs are transformed differ considerably. NahV activity could be enhanced by Fe2+, Cu2+ and Zn2+; whereas NahF activity could only be stimulated by Fe2+. NahF is more stable than NahV at elevated temperatures. Dot-blot hybridization analyses showed that nahF-like genes occurred in all naphthalene-degradation bacteria isolated in this study, whereas nahV-like genes were present in only some naphthalene-degrading bacteria. 展开更多
关键词 水杨醛 异化作用 分解代谢 假单胞菌
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甲氰菊酯降解酶的海藻酸钙凝胶固定化研究 被引量:2
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作者 林淦 韩萍 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期126-128,共3页
海藻酸钙凝胶固定甲氰菊酯降解酶.实验室条件测定固定化酶对甲氰菊酯的降解特性.甲氰菊酯降解酶的固定化条件为:海藻酸钠质量浓度20g/L;酶蛋白质量浓度1.0g/L;固定化时间12h;粒径5mm;固定化酶对甲氰菊酯的降解pH稳定范围为5.... 海藻酸钙凝胶固定甲氰菊酯降解酶.实验室条件测定固定化酶对甲氰菊酯的降解特性.甲氰菊酯降解酶的固定化条件为:海藻酸钠质量浓度20g/L;酶蛋白质量浓度1.0g/L;固定化时间12h;粒径5mm;固定化酶对甲氰菊酯的降解pH稳定范围为5.0—10.0,稳定温度范围为25—50℃,适应性范围均较游离酶有所提高。Lineweaver—Burk法测定出固定化酶对甲氰菊酯的Km=298.13nmol·mL^-1,Vmax=43.48nmol·mL^-1·min^-1。最优条件下,固定化酶活力为游离酶活力的80%,制备的固定化酶可以重复连续利用3次。 展开更多
关键词 固定化酶 甲氰菊酯 海藻酸钙 pseudomonas putida CP-1
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恶臭假单胞菌产羰基还原酶的发酵条件优化 被引量:1
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作者 何军邀 白东亚 王普 《发酵科技通讯》 CAS 2017年第4期243-248,共6页
从土样中筛选得到一株产羰基还原酶的菌种恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)ZJPH1606,该菌能不对称催化2'-三氟甲基苯乙酮合成(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇,对映体过量值超过99.0%.通过单因素考察产酶培养基组成发现:葡萄糖、牛肉膏... 从土样中筛选得到一株产羰基还原酶的菌种恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)ZJPH1606,该菌能不对称催化2'-三氟甲基苯乙酮合成(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇,对映体过量值超过99.0%.通过单因素考察产酶培养基组成发现:葡萄糖、牛肉膏和MgSO_4·7H_2O对酶活的影响较为明显,进一步采用响应面法对产酶培养基进行了优化.结果表明:最优发酵培养基组成为葡萄糖38.5g/L,牛肉膏32.7 g/L,MgSO_4·7H_2O 1.1 g/L.在最适培养条件下,菌体酶活力达0.31 U/g,较优化前提高了71.0%.该研究结果丰富了羰基还原酶数据库的基因序列,为高效合成(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇提供了新途径. 展开更多
关键词 恶臭假单胞菌 羰基还原酶 菌种筛选 (R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇 培养基优化
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两段式生物脱硫工艺对沼气中H_2S去除效果的实验研究 被引量:3
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作者 周贤友 徐瑛 +4 位作者 孙永明 孔晓英 袁振宏 邢涛 牛红志 《新能源进展》 2015年第2期105-110,共6页
本研究采用两段式生物脱硫工艺,以异养脱硫菌Pseudomonas putida DS1(假单胞菌属)为菌株,研究了硫化物负荷、溶解氧(DO)、气液体积比、p H值等工艺参数对硫化物脱除效果的影响。实验结果表明:DO影响Pseudomonas putida DS1对硫化物的去... 本研究采用两段式生物脱硫工艺,以异养脱硫菌Pseudomonas putida DS1(假单胞菌属)为菌株,研究了硫化物负荷、溶解氧(DO)、气液体积比、p H值等工艺参数对硫化物脱除效果的影响。实验结果表明:DO影响Pseudomonas putida DS1对硫化物的去除率,当硫化物负荷为40 g·m-3·h-1、DO为1.5 mg·L-1时,S2-去除率达90.6%以上;硫化物负荷与DO呈线性关系,随着硫化物负荷增加,DO逐渐增大;硫化物去除率随硫化物负荷的增加而降低,当硫化物负荷小于80 g·m-3·h-1时,硫化物去除率大于90%;当硫化物负荷大于80 g·m-3·h-1时,硫化物去除率低于90%;当沼气中H2S浓度为3 000±10 ppm、气液比为15∶1时,H2S去除率达93.6%;循环液p H值为8.0时,沼气中H2S的去除率达94.0%,Pseudomonas putida DS1对S2-去除率达96.9%,硫化物的转化产物主要为单质S0。 展开更多
关键词 pseudomonas pufida DS1菌株 两段式 沼气 生物脱硫
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大蒜内参基因筛选及AsACO基因对盐胁迫和促生菌的响应分析 被引量:1
14
作者 王启璋 张祥林 +1 位作者 韩睿 田洁 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期3297-3306,共10页
【目的】筛选大蒜在盐胁迫下的稳定内参基因,并分析1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(AsACO)对盐胁迫和促生菌的响应表达特性,为深入探究促生菌的促生机制及大蒜对盐胁迫的响应机制研究提供理论参考。【方法】以乐都紫皮大蒜为试材,采用... 【目的】筛选大蒜在盐胁迫下的稳定内参基因,并分析1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(AsACO)对盐胁迫和促生菌的响应表达特性,为深入探究促生菌的促生机制及大蒜对盐胁迫的响应机制研究提供理论参考。【方法】以乐都紫皮大蒜为试材,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测5个内参基因ACT、UBC、HIS3、18S rRNA、TUB在盐胁迫下的表达稳定性,结合GeNorm、NormFinder和BestKeeper筛选出最稳定的内参基因,并分析恶臭假单胞菌UW4对盐胁迫下AsACO基因表达的影响。【结果】5个候选内参基因引物的特异性强、无引物二聚体。GeNorm分析得出候选内参基因稳定性排名为18S rRNA=TUB>HIS3>UBC>ACT,NormFinder分析得出内参基因稳定性排名为18S rRNA>HIS3>TUB>UBC>ACT,BestKeeper分析得出内参基因稳定性排名为UBC>HIS3>18S rRNA>TUB>ACT,最终以几何平均数综合分析得出18S rRNA为最稳定的内参基因。以18S rRNA为内参基因,检测出AsACO基因表达具有明显的组织特异性,在叶片中的相对表达量明显高于根。整个处理过程中,盐胁迫明显诱导AsACO基因在不同处理时间及不同组织中表达上调,根和叶片中AsACO基因的相对表达量分别在2 d和12 h时达最高,较正常培养(CK)分别显著升高124.43%和238.34%(P<0.05,下同),与盐胁迫处理相比,盐胁迫+浇施恶臭假单胞菌UW4处理显著降低AsACO基因在不同处理时间根和叶片中的相对表达量,其中在2 d和12 h时降幅较大,分别降低了112.08%和343.34%。【结论】18S rRNA是盐胁迫下大蒜中最稳定的内参基因。盐胁迫可诱导大蒜根和叶片中AsACO基因的上调表达,从而间接促进ACO和乙烯水平升高,加速由乙烯调控的细胞衰老,甚至死亡,但盐胁迫下恶臭假单胞UW4具有抑制AsACO基因表达的作用,以减少ACO和乙烯的合成,从而延缓大蒜细胞衰老,提高逆境耐受性。 展开更多
关键词 大蒜 盐胁迫 内参基因 1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO) 恶臭假单胞菌UW4
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利用微生物生产丙烯酰胺的研究 被引量:2
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作者 孙韦强 伍登熙 +2 位作者 尹光琳 余正齐 李族光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期169-172,共4页
丙烯酰胺主要用于生产聚丙烯酰胺。聚丙烯酰胺是一种用途十分广泛的精细化工产品,可以制成絮凝剂用于废水处理,也可以制成纸浆增强剂用于造纸工业,近年来,聚丙烯酰胺取代了天然植物胶而应用于原油的深度开采。丙烯酰胺的生产工艺早期采... 丙烯酰胺主要用于生产聚丙烯酰胺。聚丙烯酰胺是一种用途十分广泛的精细化工产品,可以制成絮凝剂用于废水处理,也可以制成纸浆增强剂用于造纸工业,近年来,聚丙烯酰胺取代了天然植物胶而应用于原油的深度开采。丙烯酰胺的生产工艺早期采用硫酸法,因存在产品精制困难,环境污染等问题而被淘汰。近年来,美。 展开更多
关键词 丙烯酰胺 微生物 生产
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一株产1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶的氢氧化细菌的分离鉴定及酶活力测定 被引量:10
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作者 付博 王卫卫 +1 位作者 唐明 陈兴都 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期395-399,共5页
【目的】以结瘤豆科植物紫花苜蓿根际土壤为研究材料,筛选具有ACC脱氨酶活力的氢氧化细菌,探索氢氧化细菌植物促生作用机制。【方法】利用持续通H2的气体循环培养体系、矿质盐固体培养基,分离、培养氢氧化细菌,观察菌株形态并测定生理... 【目的】以结瘤豆科植物紫花苜蓿根际土壤为研究材料,筛选具有ACC脱氨酶活力的氢氧化细菌,探索氢氧化细菌植物促生作用机制。【方法】利用持续通H2的气体循环培养体系、矿质盐固体培养基,分离、培养氢氧化细菌,观察菌株形态并测定生理生化特征;16SrDNA序列分析法构建系统发育树;采用薄层层析法筛选ACC脱氨酶阳性菌株,茚三酮显色法测定ACC脱氨酶活力。【结果】分离的37株细菌中有8株菌氧化氢和自养生长能力较强,初步确定为氢氧化细菌,从中筛选出1株ACC脱氨酶阳性菌株WMQ-7。菌株WMQ-7的形态特征、生理生化特征与恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的特征基本一致;16SrDNA序列(GenBank登录号为EU807744)在系统发育树中与恶臭假单胞菌同属一个类群,序列同源性99%。鉴定菌株WMQ-7为恶臭假单胞菌,其ACC脱氨酶活力为0.671U/μg。【结论】采用气体循环培养体系分离氢氧化细菌,克服了传统配气法的局限。ACC脱氨酶阳性菌株的筛选,为深入研究氢氧化细菌作为植物根际促生菌的菌株特性和促生机制提供理论依据。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 氢氧化细菌 ACC脱氨酶 16S rDNA 系统发育树 恶臭假单胞菌
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恶臭假单胞菌ND6菌株中与萘降解相关的新型水杨醛脱氢酶NahV
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作者 赵化冰 李永君 +1 位作者 陈威 蔡宝立 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1257-1262,共6页
在大肠杆菌中表达了Pseudomonas putida ND6菌株中与萘降解有关的水杨醛脱氢酶同工酶NahV,并对其酶学性质进行了研究.结果表明,NahV与ND6菌株中经典的水杨醛脱氢酶NahF的氨基酸序列同源性较低,是一种新的水杨醛脱氢酶.对NahV和NahF的酶... 在大肠杆菌中表达了Pseudomonas putida ND6菌株中与萘降解有关的水杨醛脱氢酶同工酶NahV,并对其酶学性质进行了研究.结果表明,NahV与ND6菌株中经典的水杨醛脱氢酶NahF的氨基酸序列同源性较低,是一种新的水杨醛脱氢酶.对NahV和NahF的酶动力学研究结果表明,NahF具有更高的催化效率,而NahV对水杨醛和NAD+的亲和力更强.ND6菌株的NahV和NahF都有较宽的底物范围,可以催化水杨醛、5-氯水杨醛、甲醛、间硝基苯甲醛、邻硝基苯甲醛、邻甲氧基苯甲醛、戊二醛、辛醛和乙二醛的脱氢反应,但对不同底物的催化效率不同.Fe2+,Cu2+和Zn2+对NahV有激活作用,而NahF只能被Fe2+激活.NahF具有更好的热稳定性,在50℃保温30min仍有72.8%的酶活力,而NahV则丧失了88.8%的酶活力.DNA斑点杂交结果表明,类nahF基因在本研究检测的两种来源的萘降解细菌中都存在,而类nahV基因只存在于一种来源的萘降解细菌中. 展开更多
关键词 pseudomonas putida ND6萘降解质粒 pND6-1 水杨醛脱氢酶 NahV DNA杂交
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