耐亚胺培南铜绿假单胞菌外膜孔蛋白与β-内酰胺酶研究

目的探讨铜绿假单胞菌外科监护室分离株对碳青酶烯类抗菌药物耐药机制。方法琼脂稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC);提取β-内酰胺酶进行三维水解试验及等电聚焦电泳;紫外分光光度计测定酶活性;用PCR扩增IMP、VIM金属酶基因;用Western印迹分析外膜孔蛋白OprD2表达水平。结果从外科监护室分离的49株铜绿假单胞菌,有41株对亚胺培南耐药;耐药组34株菌产AmpC酶,其中8株同时产ESBLs酶,2株仅产ESBLs,未筛选出产金属酶菌株;亚胺培南耐药组酶活性(74.32±53.42)μmmol/mg与亚胺培南敏感组酶活性(8.7±16.16)μmmol/mg比较差异有统计学意义(P<0.01);耐药组OprD2表达均有不同程度的降低或缺失,而敏感组均正常表达OprD2,耐药组OprD2相对表达量(0.20±0.27)与敏感组(3.10±2.20)比较差异有统计学意义(P<0.01);未扩增出IMP、VIM金属酶基因。结论外膜孔蛋白OprD2表达降低或缺失以及高活性AmpC酶,是外科监护室耐亚胺培南铜绿假单胞菌的主要原因,与IMP、VIM金属酶关系不大。

铜绿假单胞菌医院感染与耐药性分析

目的探讨铜绿假单胞菌(PAE)医院感染的耐药性,为医院感染的监测与控制提供依据。方法采用美国MicroScan WalkAway-40细菌鉴定仪将PAE进行鉴定,并采用K-B纸片扩散法进行体外耐药监测及统计耐药率。结果2年中检出325株PAE,其中对耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)占总株数的14.8%;PAE分离率最高的病区为重症监护病房(ICU),占20.9%;其次为老年病科,占19.4%;第3为呼吸内科,占16.9%;IRPA对11种常用抗菌药物的耐药率明显高于非耐药株,IRPA除对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南等3种抗菌药物耐药率均<50.0%外,对其余8种抗菌药物耐药率均>50.0%。结论PAE的耐药性已十分严重,必须进行严密的监控,预防PAE导致的医院感染暴发流行。

白介素-17在铜绿假单胞菌肺部感染防御机制中的作用

目的以小鼠铜绿假单胞菌急性肺部感染为研究对象,探讨白介素-17(IL-17)对铜绿假单胞菌肺部感染的防御机制,为IL-17临床免疫治疗铜绿假单胞菌肺部感染提供理论和实践基础。方法检测小鼠急性铜绿假单胞菌肺部感染IL-17及其下游因子[IL-1β、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)]的表达水平,经气道滴入表达IL-17的正义质粒48 h后再感染铜绿假单胞菌,观察铜绿假单胞菌肺部感染小鼠6 h后的细菌清除率、IL-17的下游因子的表达水平,并观察小鼠的死亡率。结果①小鼠铜绿假单胞菌急性肺部感染IL-17及其下游因子IL-1β,MIP-2,G-CSF水平显著增高。②通过气道滴注表达IL-17的正义质粒后IL-17及其下游因子IL-1β、MIP-2、G-CSF水平显著增高,而且中性粒细胞计数也显著增加。③在铜绿假单胞菌急性肺部感染前预先经气管注入表达IL-17的正义质粒使IL-17高表达,导致局部产生IL-1β、MIP-2、G-CSF,细菌的清除率及小鼠生存率也显著提高。结论 IL-17在铜绿假单胞菌肺部感染的局部免疫反应中起一定作用。其机制可能是通过增加早期中性粒细胞募集到感染部位来实现的。

ICU患者感染铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的监测ICU铜绿假单胞菌的耐药性,更好地指导临床用药。方法收集本院2014年1月至2016年12月ICU送检的所有标本培养分离的铜绿假单胞菌并进行分析。结果共检出铜绿假单胞菌504株,占ICU检出所有病原菌第3位,约占14%。其中,2014年检出161株,2015年检出179株,2016年检出164株。耐药率由低到高前3位的抗生素分别是头孢哌酮/舒巴坦(13.9%)、头孢吡肟(29.4%)和哌拉西林/他唑巴坦(35.7%)。耐药率最高的抗生素为庆大霉素(57.7%)。耐药率大于50.0%的抗生素有头孢他啶、哌拉西林、美罗培南、庆大霉素和左氧氟沙星等。结论铜绿假单胞菌耐药率监测意义十分重要,可为临床合理使用抗生素提供依据和支持。

485株铜绿假单胞菌对18种抗菌药物的敏感性分析

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌的敏感性及变化趋势。方法对2004-2007年分离485株铜绿假单胞菌选用18种抗菌药物，采用K—B纸片扩散法进行药敏试验，按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准判断结果。结果对铜绿假单胞菌较敏感的抗菌药物是亚胺培南（80．8％），最不敏感的抗菌药物是头孢唑林（0），铜绿假单胞菌对抗菌药物的敏感性呈逐年下降的变化趋势。结论加强耐药性监测，合理应用抗菌药物十分重要。

医院感染铜绿假单胞菌的耐药性变迁分析

目的了解医院近年来铜绿假单胞菌的分布及耐药性变迁的特点,研究铜绿假单胞菌的耐药机制,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法对临床2009-2011年住院患者送检标本所分离的铜绿假单胞菌耐药率进行回顾性统计分析;用K-B纸片扩散法测定其对常用抗菌药物的耐药性。结果共检出阳性标本分离株2675株,其中铜绿假单胞菌有361株,占13.5%;铜绿假单胞菌对临床常用的抗菌药物哌拉西林、头孢曲松、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南的耐药率上升较快,分别由2009年的40.2%、60.8%、55.7%、58.8%、7.2%上升至2011年的55.6%、71.4%、63.5%、68.2%、15.1%;对头孢他啶、环丙沙星、阿米卡星与头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率尽管也有一定比例上升,但耐药率相对比较稳定且仍然较低。结论临床应加强对产酶菌和多药耐药菌的预防监测;应选择铜绿假单胞菌敏感的抗菌药物治疗,提高抗感染治疗水平。