盐炙对青娥丸主要成分溶出的影响

目的探讨盐炙对青娥丸中主要成分溶出的影响。方法采用HPLC法测定了青娥丸生品、清炒品、盐润品、盐炙品中15种指标性成分含有量。结果补骨脂酚经过炮制后含有量均呈显著性降低。与青娥丸生品相比,清炒后补骨脂苷、异补骨脂苷含有量显著升高,京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷含有量无显著变化,其他成分含有量均下降;盐水闷润后,补骨脂苷和异补骨脂苷含有量下降,补骨脂素与异补骨脂素含有量显著升高;盐炙后补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚含有量明显下降,补骨脂苷、异补骨脂苷、异补骨脂二氢黄酮含有量明显升高,其他成分无显著性变化。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于青娥丸的质量控制。

盐补骨脂含量测定方法的研究

目的建立盐炙补骨脂的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定盐补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量。色谱条件:流动相为甲醇-水(55∶45);检测波长为246nm;流速为1.0ml.min-1;柱温为25℃。结果补骨脂素进样量在0.0814～1.6280μg(r=0.99999),异补骨脂素进样量在0.0812～1.6240μg(r=0.99999)范围内,线性关系良好。结论该法简便、准确,重复性好,可用于盐补骨脂的含量测定。

补骨脂盐炙与盐蒸炮制工艺比较研究

目的:比较补骨脂盐炙品和盐蒸品中2种指标性成分的含量,筛选更优的炮制工艺。方法:在固定盐与药材质量比为1∶50、加水量为盐的4~5倍、盐水闷润时间为2 h的条件下,分别考察补骨脂在温度150、170、190℃下分别炒10、12、14 min的盐炙品和蒸制1、1.5、2、2.5 h后的盐蒸品中指标性成分补骨脂素和异补骨脂素的含量,比较两种炮制工艺的效果。结果:在固定条件下,指标成分的含量在盐炙品中以150℃下炒制12 min者最高,在盐蒸品中以蒸制1 h者最高;盐蒸品中的含量(1.49%)高于盐炙品(1.29%)(P=0.011)。结论:根据炮制品指标性成分含量的比较,补骨脂盐蒸法优于盐炙法。

盐炙对补骨脂丸中2种成分在脾肾阳虚泄泻大鼠体内药动学的影响

目的考察盐炙对补骨脂丸中补骨脂素、异补骨脂素在脾肾阳虚泄泻大鼠体内药动学的影响。方法通过灌胃给予氢化可的松注射液(15 mg/kg)和冰番泻叶水煎液(10 g/kg)建立脾肾阳虚泄泻模型。大鼠随机分为空白组(生理盐水)、补骨脂丸组(8 g/kg)及模拟补骨脂丸Ⅰ~Ⅲ组(盐补骨脂+生小茴香、生补骨脂+盐小茴香、生补骨脂+生小茴香,8 g/kg),于0.083、0.17、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、5、7、9、12、24 h采血,HPLC法测定补骨脂素、异补骨脂素血药浓度,计算主要药动学参数。结果与模拟补骨脂丸Ⅲ组比较,补骨脂丸组、模拟补骨脂丸Ⅰ组补骨脂素、异补骨脂素C_(max)、AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)升高(P<0.05,P<0.01),T_(max)延长(P<0.05,P<0.01),CL_(Z/F)降低(P<0.01),补骨脂丸组2种成分MRT_(0~∞)延长(P<0.05,P<0.01);模拟补骨脂丸Ⅱ组补骨脂素CL_(Z/F)降低(P<0.05),异补骨脂素AUC_(0~t)升高(P<0.01)。结论补骨脂丸中补骨脂、小茴香盐炙后,补骨脂素、异补骨脂素体内吸收提高,代谢减慢,从而可增强止泻作用。

高效液相色谱法测定盐炙补骨脂炮制前后三种主要成分的变化

目的:建立同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚3种主要有效成分含量的高效液相色谱方法,比较补骨脂盐炙品炮制前后三种成分含量的变化。方法:采用盐炙法对7个不同地区来源的补骨脂进行炮制,利用高效液相色谱法,甲醇-水梯度洗脱,检测波长246nm,测定炮制前后补骨脂素、异补骨脂素及补骨脂酚的含量。结果:盐炙法使补骨脂中的补骨脂素和异补骨脂素含量增加,使补骨脂酚的含量减少。结论:盐炙法使补骨脂中的三种主要有效成分含量发生了变化。

反相高效液相色谱法在补骨脂提取物3种主要成分含量测定中的应用

目的采用反相高效液相色谱法,建立同时测定补骨脂提取物中补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚含量的方法。方法采用Epic C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-水,梯度洗脱;流速:1.0 m L/min;柱温:30℃;检测波长250 nm。结果该法测定补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚分别在0.0563~0.3379、0.0523~0.3139、0.1280~0.7680μg范围内线性关系良好,相关系数均为0.9999。平均加样回收率分别为100.66%(n=6)、RSD=1.77%,100.43%(n=6)、RSD=1.45%和99.41%(n=6)、RSD=1.63%。结论本方法简便、准确、灵敏、重复性好,可作为补骨脂提取物中补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚的含量控制方法。

医院制剂补肺胶囊提取工艺提升研究

目的优选补肺胶囊的最佳的提取工艺条件。方法运用高效液相色谱法(HPLC)测定黄芪甲苷、补骨脂素和异补骨脂素以及总多糖四个指标的含量,将某一指标成分以各提取工艺中提取出的含量最高(m_(max))的计100分,综合评分方法为:f=m_(测)/m_(max)×100,综合评分=f_(黄芪甲苷)×0.4+f(补骨脂素+异补骨脂素)×0.3+f_(总多糖)×0.3。结果优选提取工艺条件为浸泡1h,煎煮3次,每次2h,60℃减压浓缩至1.2~1.35g/ml,最佳浓缩温度为80℃,常压干燥时综合评分最高。结论在优化条件下,工艺稳定可行,综合评分最高,可为补肺胶囊的质量控制及工业生产提供科学参考。

D-最优设计响应面法结合UHPLC优选补骨脂药材炮制工艺

目的采用D-最优设计响应面法结合UHPLC技术优选补骨脂药材炮制工艺。方法以补骨脂药材炮制工艺的关键参数闷润时间、炒制温度及加盐量为自变量,进行D-最优设计;以UHPLC检测获得的补骨脂药材中9种主要指标成分补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素、补骨脂宁、补骨脂查耳酮和补骨脂酚炮制前后的质量分数变化为因变量,进行响应面分析;并结合单因素试验优化炒制时间,优选出补骨脂药材炮制工艺。结果补骨脂药材的最佳炮制工艺为在100 g补骨脂药材中加入2.10 g盐,闷润12 h,在80℃炒制30 min。结论利用D-最优设计响应面法结合UHPLC能够优选补骨脂药材炮制工艺参数,提高炮制工艺的稳定性和重复性,为提高补骨脂盐炙品的质量均一性和临床用药安全性提供技术支持。

切换波长HPLC法同时测定大鼠体内补骨脂3种有效成分

目的:建立同时测定大鼠血清、肝脏、肾脏中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚含量的方法。方法:大鼠灌胃补骨脂药材粉末(3.0 g/kg)30 min后取血清、肝脏、肾脏样品,以切换波长高效液相色谱法测定血清、肝脏、肾脏样品中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚质量浓度。色谱柱为Agilent ODS-C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为0.1%甲酸水-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0ml/min,柱温为30℃,检测波长为295 nm(氯霉素)、246 nm(补骨脂素、异补骨脂素)、260 nm(补骨脂酚)。结果:在大鼠血清、肝脏匀浆液、肾脏匀浆液中,补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚质量浓度均在0.1~10.0 mg/L范围内同各指标成分与内标物峰面积之比呈良好线性关系,精密度的RSD<7%,加样回收率的RSD<5%。结论:该方法简便、准确,可用于同时测定给药后血清、肝脏、肾脏中补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚的含量。

炮制时间对盐补骨脂中10种化学成分的影响

目的建立同时测定补骨脂Psoralea corylifolia中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查耳酮、补骨脂宁、新补骨脂异黄酮和补骨脂酚10种化学成分的方法,并探讨炒制时间对盐补骨脂中10种成分的影响。方法采用UPLC法,色谱条件:C18柱(50 mm×4.6 mm,1.8μm),流动相为乙腈-水,采用梯度洗脱,体积流量1 m L/min,检测波长250 nm,柱温30℃。结果被测定的10种成分色谱峰在15 min分析时间内均有良好的分离度,精密度RSD均小于3%;在室温条件下24 h内稳定;各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r≥0.997 0);平均加样回收率96%~105%,RSD均小于3%。结论本方法操作简便,快速,测定结果准确可靠,可用于补骨脂的质量控制。随炒制时间的延长,香豆素类成分呈现先降后升再降趋势,黄酮类、补骨脂酚及10种成分总量有降低趋势。

炮制对补骨脂中12种化学成分含量的影响

目的:比较补骨脂生品及3种炮制品的各项检查指标及化学成分的差异,为补骨脂不同炮制品的临床使用提供参考。方法:按《中国药典》2015年版标准,测定补骨脂生品、炒品、盐炙品及酒炙品的杂质、水分、总灰分和酸不溶性灰分,通过HPLC比较补骨脂不同炮制品中主要化学成分的差异。结果:补骨脂生品及3种炮制品的杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分测定结果均符合《中国药典》2015年版的要求。通过对照品比对及文献查阅确定了12个主要化学成分,即补骨脂苷,异补骨脂苷,补骨脂素,异补骨脂素,新补骨脂异黄酮,补骨脂甲素,补骨脂定,补骨脂乙素,补骨脂二氢黄酮甲醚,corylifol A,4'-O-甲基补骨脂查尔酮和补骨脂酚。结论:补骨脂酚有肾毒性和肝毒性,炮制后补骨脂酚在酒炙品和盐炙品中含量均较生品下降,说明酒炙和盐炙具有炮制减毒的作用;与生品相比,盐炙品中补骨脂素和异补骨脂素含量显著升高,这与补骨脂盐炙后温肾助阳作用增强相关。4'-O-甲基补骨脂查尔酮在炮制品中含量显著升高,而补骨脂二氢黄酮甲醚含量显著降低,这可能是由补骨脂二氢黄酮甲醚在高温下发生降解转化而成。上述这些成分的改变可能是不同炮制品临床功效产生差异的主要原因。

正交试验结合指纹图谱优选补骨脂-肉豆蔻药对醇提工艺

目的优选补骨脂-肉豆蔻药对醇提的最佳工艺条件。方法通过L9(34)正交试验设计,考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响,以HPLC指纹图谱特征峰总面积与补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚的量以及干浸膏得率为综合评判指标。结果最佳醇提工艺为乙醇体积分数50%,乙醇6倍用量,每次提取2 h,提取3次。结论本法为补骨脂-肉豆蔻药对醇提工艺的确定提供了依据。

盐补骨脂标准汤剂质量评价体系的建立

目的建立盐补骨脂标准汤剂质量评价体系。方法收集了15批合格的补骨脂药材,炮制成符合《中国药典》2015年版规定的盐补骨脂饮片,制备盐补骨脂标准汤剂冻干粉,建立HPLC指纹图谱,对共有色谱峰进行指认,并结合飞行时间质谱确定其主要化学组成。结果苯并呋喃苷类和呋喃香豆素类为盐补骨脂标准汤剂的主要成分。测定15批标准汤剂的出膏率为16.31%~20.59%,指标成分补骨脂素、异补骨脂素总量为1.17%~1.50%,转移率为13.55%~23.57%,且指纹图谱相似度均大于0.9。结论建立了稳定、可靠的盐补骨脂标准汤剂全面质量评价方法,为盐补骨脂配方颗粒及相关制剂的质量控制提供参考。

补骨脂炮制历史沿革和机制研究进展及质量标志物(Q-Marker)预测

补骨脂Psoralea Fructus具有温肾壮阳、健脾等功效,但因辛热而燥,长用有伤阴之嫌,炮制可缓和偏燥之性,在我国传统中医药历史上应用广泛。通过查阅相关医学典籍及文献,对补骨脂的炮制方法历史沿革及现代炮制机制的研究进展进行总结。从化学成分可测性、成分与传统功效相关性、药动学及体内过程等对补骨脂的质量标志物(quality marker,Q-Marker)进行预测分析,初步确定补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂二氢黄酮、补骨脂异黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂酚等为其可能的Q-Marker,为补骨脂的炮制工艺传承、质量标准制定以及临床应用提供参考。

盐补骨脂饮片标准汤剂分析研究

中药饮片标准汤剂是以中医理论为指导,临床应用为基础,参考现代提取方法,经标准化工艺制备而成的单味中药饮片水煎剂,其质量标准的建立有利于临床用药的规范化。该研究通过对盐补骨脂饮片的标准汤剂进行研究,制备了12批盐补骨脂饮片标准汤剂,并对其中补骨脂素、异补骨脂素进行含量测定,计算转移率,测定出膏率及p H,同时建立了HPLC特征图谱分析方法。由研究结果可得,12批合格的盐补骨脂饮片标准汤剂中补骨脂素和异补骨脂素转移率分别为17. 10%~26. 40%,14. 70%~22. 70%,干膏得率14. 7%~27. 0%,p H 5. 4~6. 9,并用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A)软件进行指纹图谱分析,确定了7个共有峰,对12批盐补骨脂饮片标准汤剂分别进行相似度评价,其相似度均大于0. 9。该研究中盐补骨脂标准汤剂制备方法规范,标准汤剂指纹图谱相似度高,其方法精密度、稳定性、重复性及加样回收率均良好,建立了便捷、可靠的质量评价方法,可为盐补骨脂标准汤剂及配方颗粒质量控制提供参考。

补骨脂炮制前后水煎液致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤作用比较

目的探讨补骨脂炮制前后致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤的差异。方法采用高效液相色谱仪检测补骨脂炮制前后化学成分含量变化。雌性ICR小鼠连续30 d ig生、盐补骨脂水煎液,末次给药24 h后,取血清,采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平;取肝脏、脾脏和肾脏,称定质量并计算脏器指数,采用苏木素-伊红(HE)染色法进行肝脏病理组织学检查;采用ELISA法检测血清中雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肝脏中法尼醇受体(farnesoid X receptor,FXR)、雌激素硫酸转移酶1E1(sulfotransferase 1E1,SULT1E1)和E2含量。结果补骨脂经盐炙后补骨脂苷、异补骨脂苷、新补骨脂异黄酮含量下降,其余8种成分含量均升高,其中补骨脂素、异补骨脂素、corylifol A升高较为明显。雌性小鼠ig生、盐补骨脂水煎液30 d后出现生殖器损伤,小鼠阴道口红肿,有水样浸润。与对照组比较,生、盐补骨脂组小鼠血清ALT、AST、ALP活性及DBIL、TBIL、TBA水平均显著升高(P<0.05、0.01、0.001),盐炙后补骨脂致肝损伤较生品更严重;肝脏FXR、SULT1E1含量显著降低(P<0.01、0.001),血清E2、FSH、IL-6和肝脏E2含量均显著升高(P<0.05、0.01、0.001)。盐补骨脂与生补骨脂比较,IL-6升高更明显,FXR、SULT1E1下降更明显。结论补骨脂素、异补骨脂素和Corylifol A可能是补骨脂药效成分同时也可能是其主要毒性成分,盐补骨脂较生补骨脂更易造成肝损伤。

基于雷公法结合盐炙法对补骨脂的炮制及肝毒性评价

目的基于雷公法结合盐炙法对补骨脂进行炮制减毒并评价补骨脂炮制前后的肝毒性变化。方法建立高效液相色谱法同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂乙素和补骨脂酚6个指标成分的含量;选取醇浓度、醇浸时间和蒸制时间为考察因素,以指标成分含量下降率的综合加权评分为指标,正交试验优化炮制工艺,并通过小鼠肝毒性实验评价补骨脂炮制前后的肝毒性。结果补骨脂最佳炮制工艺,按《中国药典》2020年版盐炙法制备盐补骨脂,取盐补骨脂适量,加入5倍量80%乙醇浸泡24 h,倒出乙醇并用蒸馏水洗净,加入5倍量蒸馏水,浸泡12 h,倒出蒸馏水并洗净,置蒸锅内隔水蒸4 h,取出晾干;由该法炮制所得的补骨脂炮制品中毒性成分含量明显下降,小鼠肝毒性显著降低。结论该炮制方法可明显降低补骨脂的肝毒性,为临床合理炮制补骨脂提供参考。