分光光度法测定藏药翼首草中总皂苷的含量

目的 测定不同产地及不同药用部位藏药翼首草中总皂苷的含量。方法 样品显色后通过分光光度法测定总皂苷的含量 ;样品预处理以无水乙醇 30ml、浓盐酸 3ml回流提取 2h。结果 显色后的样品比较稳定 ,测定方法简便、灵敏、准确。结论 总皂苷以西藏拉萨的翼首草为高 ;不同药用部位中根比叶高出约 10 %～ 2 0 %。

藏药翼首草化学成分的研究

目的 为了开展常用藏药翼首草的质量标准研究 ,对该药进行了化学成分分离和结构鉴定。方法 乙醇提取 ,大孔吸附树脂、硅胶柱分离 ,采用化学和光谱学方法鉴定化合物。结果和结论 分离并鉴定了该药所含的 3个化合物 :①β -谷甾醇、②齐墩果酸、③rivularicin ,其中化合物rivularicin为本实验首次从该植物中分离和鉴定成功。

藏药匙叶翼首草高频组织培养再生体系优化研究

以匙叶翼首草种子为材料,探索种子最佳消毒方法,对影响无菌苗外植体愈伤组织诱导、增殖及植株再生的因素进行了研究。结果表明:(1)剥去外种皮的种子,经75%乙醇1min+0.1%HgCl_27min+50%多菌灵500倍液30min消毒后,在1/2 MS培养基中的发芽率达60.67%,无污染。(2)无菌苗的叶片和茎段都适宜诱导愈伤组织,在培养基MS+5.0mg·L^(-1) 6-BA+2.0mg·L^(-1) 2,4-D中可在10d内诱导出生长旺盛的愈伤组织,愈伤诱导率分别为84.00%、97.33%。(3)适宜的愈伤组织增殖培养基为MS+3.0mg·L^(-1) 6-BA+2.0mg·L^(-1) IAA,培养20d的叶片和茎段愈伤组织的生长率分别为74.37%、70.52%。(4)适宜的丛生芽诱导培养基为MS+3.0mg·L^(-1) 6-BA+2.0mg·L^(-1) IAA+250mg·L^(-1) L-脯氨酸+150mg·L^(-1)水解酪蛋白,30d后茎段和叶片的丛生芽发生率分别达到100%、94.44%。(5)再生苗在1/2 MS+0.5mg·L^(-1) NAA培养基中生根培养30d,生根率为100%。匙叶翼首草高效稳定的再生体系为保护其野生资源和工厂化育苗提供了有效途径。

甘南高原野生与人工栽培翼首草根部多糖含量测定

翼首草[Pterocephalus hookeri(Clarke)Hoeck]系川续断科翼首花属植物匙叶翼首花全草,富含植物多糖,块根可入药。通过超声波提取法从翼首草根部提取多糖,采用苯酚-硫酸比色法对其含量进行测定。结果表明,超声波提取的甘南高原野生翼首草的多糖含量为18.78 mg/100 mL,超声波提取的甘南高原人工栽培翼首草多糖含量为20.63 mg/100 mL,可见人工栽培翼首草根部多糖含量明显高于野生的。

基于UPLC-QTOF-MS/MS的藏药翼首草不同提取物化学成分比较研究

应用UPLC-QTOF-MS/MS鉴定翼首草化学成分,对其水提取物和醇提取物中差异性化合物进行辨识并进行半定量评价。从4批翼首草药材中共鉴定出48个化合物,其中5个化合物首次在翼首草发现。75%乙醇提取物及水提取物整体化学轮廓差异较大,从中辨识16个差异性化合物,其中4个(rivularicin等)化合物为醇提液中所特有。水提取物中neochlorogenic acid等4个化合物含量较高;75%乙醇提取物中sylvestroside III等8个化合物含量较高。该含量差异是否会对其药效产生影响仍有待进一步研究。

翼首草化学成分及其神经保护活性

目的研究翼首草Pterocephalus hookeri(C.B.Clarke)Hoeck的化学成分及神经保护活性。方法翼首草95%乙醇提取物的分析采用Sephadex LH-20、DM-130大孔树脂、硅胶、HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。通过构建DAT:EGFP转基因斑马鱼帕金森疾病模型研究其神经保护活性。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为大花双参苷A(1)、茶茱萸苷(2)、林生续断苷Ⅰ(3)、二甲氧基-林生续断苷Ⅲ(4)、林生续断苷Ⅲ(5)、laciniatosideⅠ-7-dibutyl acetal(6)、laciniatosideⅠ(7)、laciniatosideⅡ(8)、林生续断苷Ⅳ(9)。首次发现其中的含双环烯醚萜正丁醇活性部位具有对神经元有抗氧化方面的神经保护活性。结论化合物4为首次从该植物中分离得到,翼首草对神经元有保护活性。

藏药翼首草的研究与应用

翼首草为藏医广泛应用,具有清热解毒、祛风湿、止痛等作用,本文根据国内外有关文献研究,对藏药翼首草的研究进展与应用情况进行了综述,结果发现现代药理学研究结论与文献记载该药的功能主治相一致,这为该药的研究与应用奠定了良好的基础,可以预见随着研究的深入,该药应用前景广阔。

翼首草鲨烯合酶(PhSQS2)全长克隆、表达特性分析及蛋白功能验证

目的从匙叶翼首草Pterocephalus hookeri转录组中挖掘参与三萜合成的鲨烯合酶(squalene synthase,SQS)并研究其作用机制。方法以翼首草基原植物匙叶翼首草为研究对象,基于前期转录组数据筛选克隆PhSQS2基因,并进行生物信息学分析;通过烟草瞬时转化实验观察PhSQS2亚细胞定位情况,利用实时荧光定量PCR分析PhSQS2在不同器官中的表达特征;构建原核表达载体经体外酶促反应鉴定PhSQS2功能。结果PhSQS2基因开放阅读框(open reading frame,ORF)区域全长1242 bp编码414个氨基酸,蛋白相对分子质量为47400,理论等电点为6.57,总平均疏水性为-0.075,为不稳定蛋白。PhSQS2主要定位在细胞核和细胞质中;组织分布具有特异性,在根和叶中均有表达,叶中表达量显著高于根中。体外酶促实验证明PhSQS2催化法尼基焦磷酸生成鲨烯。结论PhSQS2的功能鉴定为解析翼首草中萜类物质生物合成途径,提高三萜皂苷类成分含量及优质种质资源筛选培育提供了前期理论基础。