调节小鼠胰腺发育中Ptf1a基因表达的microRNAs的鉴定研究

Ptf1a,又名p48,是Ptf1转录因子的一个亚基,为胰腺命运决定与细胞分化必需的转录因子.最近研究发现,Ptf1a表达的丰度变化与发育中胰腺细胞生长、分化和胰岛β细胞数量密切相关.然而,胰腺细胞中Ptf1a的表达调节机制还不清楚.MicroRNAs(miRNAs)是一类约22nt的非编码小RNA,它们通过切割靶mRNA或抑制靶mRNA的翻译调节基因的表达.一些研究提示,miRNAs参与调控胰腺发育的多个过程.因而推测,miRNAs可能在胰腺发育中参与调控Ptf1a的表达变化.为了验证这一假设,结合两个靶基因预测算法的结果,获得4个可能调控Ptf1a表达的miRNAs.随后,利用双荧光素酶报告系统研究发现,预测得到miRNAs中的miR-18a,miR-145和miR-495能通过结合到小鼠Ptf1a mRNA的3′UTR而有效抑制其表达.还利用qRT-PCR和免疫荧光染色实验研究了miR-18a、miR-145和miR-495与Ptf1a在小鼠胰腺发育过程中的表达模式.结果表明,miR-18a,miR-145和miR-495与Ptf1a mRNA及蛋白质的表达成负相关,进一步说明miR-18a,miR-145和miR-495可能在小鼠胰腺发育中调节Ptf1a的表达.

胰腺中PCAG-Ptf1a全长表达载体的构建及检测

为了探讨胰腺中Ptf1a的作用机制,试验采用PCR、克隆、酶切、连接等分子生物学手段,构建Ptf1a全长表达载体PCAG-Ptf1a。结果表明:Ptf1a全长表达载体PCAG-Ptf1a构建成功,该载体转入NIH3T3细胞中,能够表达PCAG-Ptf1a蛋白。

急性心肌梗塞的PTFv_1变化

将120例冠心病患者根据病史分为AMI早期组35例、AMI后期组32例和慢性心肌缺血组53例,对各组PTFv_1变化进行对比研究。结果PTFv_1异常发生率及其负值3组有显著差异(P<0.005)。发现AMI早期阶段PTFv_1负值大,随着病情恢复负值变小,是反映左心功能变化直观、简单、敏感的指标。PTFv_1<-0.03mm·s强烈提示左心功能不全,<-0.04mm·s预后不良。

心电图PTF—V_1诊断左房增大的再评价

523名连续的,无选择的病人既作心电图检查测量PTF-V_1,又进行超声心动图检查测量左房大小,以评价PTF-V_1诊断左房增大的价值。PTF-V_1≤-0.04mm·s诊断左房增大的敏感性为37%,特异性为94%,阳性预测值为59%,阴性预测值为87%,总符合率为84%。结果提示:PTF-V_1阴性对排除左房增大有定意义,PTF-V_1阳性诊断左房增大有一定的限度。为明确左房大小,以超声心动图检查为宜。

200例急性心肌梗死的Ptf-V1分析

目的分析急性心肌梗死的Ptf-V1。方法观察200例急性心肌梗死病例,对其Ptf-V1进行分析。结果急性心肌梗死组的平均值为-0.024 6±0.023 1,冠心病组的Ptf-V1平均值为-0.013 5±0.022 2,t=4.087,P<0.01,差异有非常显著性。结论急性心肌梗死Ptf-V1异常,负值增大。