王不留行黄酮苷和葛根异黄酮对哺乳母猪泌乳性能及血清激素和抗氧化指标的影响

本试验旨在探讨王不留行黄酮苷和葛根异黄酮对哺乳母猪泌乳性能及血清激素和抗氧化指标的影响。试验采用2×2双因子随机设计,主效应分别为王不留行黄酮苷(0、2 g/kg)、葛根异黄酮(0、2.5 g/kg)及二者互作。选择胎次和预产期相近的经产长白母猪24头,随机分为4个组(对照组、王不留行黄酮苷组、葛根异黄酮组和混合组),每组6头猪。预试期7 d,正试期21 d。结果表明:1)混合组母猪平均日采食量显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,各添加组哺乳第2周仔猪平均日增重均有升高的趋势,混合组显著高于对照组(P<0.05)。各添加组常乳中胰岛素样生长因子I含量显著高于对照组(P<0.05),且各组间均差异显著(P<0.05)。2)混合组第1、10、21天血清中生长激素,第21天雌激素和第1、10、21天催乳素含量均显著高于对照组(P<0.05)。3)各添加组第10、21天血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组(P<0.05),第10、21天血清中丙二醛含量显著低于对照组(P<0.05)。混合组第1、10、21天的血清中总超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,添加王不留行黄酮苷和葛根异黄酮提高了母猪的泌乳量,血清中催乳素、生长激素含量及总超氧化物歧化酶活性,使母猪泌乳性能、血清激素和抗氧化指标得到提高。

葛根素对低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室Apelin/APJ系统的影响

目的探讨葛根素防治慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的效应是否与新的小分子活性肽Apelin及其受体(APJ)有关。方法清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为对照组、低氧高二氧化碳模型组和葛根素组。放免法测定血浆与右心室组织匀浆的Apelin-36水平,RT-PCR检测右心室组织Apelin与APJ mRNA表达。结果右心室与左心室加室间隔的质量比[RV/(LV+S)]:模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.01);平均肺动脉压(mPAP):模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.05),平均颈动脉压(mCAP)各组间比较无显著统计学意义(P>0.05)。血浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.01).葛根素组又高于模型组(P<0.05)。右心室肌匀浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.05),葛根素组又明显比模型组高(P<0.01)。右心室肌Apelin mRNA水平:模型组明显低于对照组(P<0.05),而葛根素组显著高于模型组(P<0.01)。右心室肌APJ mRNA:模型组低于对照组(P<0.05),而葛根素组高于模型组(P<0.05)。结论葛根素防治低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的机制可能部分与调节Apelin/APJ系统有关。

葛根素通过调控炎性因子水平降低营养性肥胖大鼠的体质量

构建膳食诱导的SD大鼠肥胖模型,将肥胖模型大鼠随机分为3组:肥胖模型组、西布曲明阳性药组、葛根素处理组,另设基础对照组,每组6只,每天灌胃给药,每7d测定体质量。连续给药42d后,各组大鼠禁食24h,乙醚麻醉眼眶取血测血常规、血清胰岛素、血清瘦素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脂联素以及血管内皮生长因子(VEGF)水平,以研究葛根素对饮食诱导肥胖大鼠的减肥作用及对与肥胖相关细胞因子的影响。结果显示:给药处理42d,葛根素处理组与营养性肥胖模型大鼠比较,分别降低体质量21%、血糖(Glu)水平16%、低密度胆固醇(LDL-C)20%、血脂(TG)58%;依次降低SD大鼠血清中的TNF-α、VEGF、胰岛素和瘦素细胞因子水平为36%、36%、12%和70%,提高高密度胆固醇(HDL-C)26%以及脂联素水平16%。因此,葛根素具有提高抗炎因子水平、降低炎性因子的水平、改善胰岛素和瘦素抵抗的能力,并可能通过纠正肥胖导致的炎性因子失衡而降低营养性肥胖大鼠的体质量。

高效液相色谱法测定全血中葛根素含量

建立一种测定全血中葛根素浓度的HPLC方法。方法 :以Nova pakC18、4μm色谱柱为分离柱 ,以甲醇 水 (30∶70 )为流动相 ,采用HPLC法测定。结果 :全血中葛根素在浓度为 2～ 2 0 μg·ml-1范围内线性良好 (r =0 .9997) ,平均回收率为(97.1± 0 .8) % ,供试液日内RSD为 1.15 % ,日间RSD为 5 .2 7% ,最低检测浓度为 0 .1μg·ml-1。结论 :本文建立了一个可靠、简便的测定全血中葛根素的HPLC法。

葛根素对小鼠脑微循环血流量的影响

为了观察静脉注射葛根素对小鼠脑微循环的影响，应用ＪＩ２００型激光微循环动态分析仪直接记录脑微循环血流量的变化。结果表明，正常小鼠静脉注射葛根素（０．２ｍｇ／ｋｇ）３ｍｉｎ后，脑微循环血流量显著增加（Ｐ＜０．０５），且持续３０ｍｉｎ；提高葛根素剂量（２ｍｇ／ｋｇ），其效应加强且持续６０ｍｉｎ。高分子右旋糖酐所致脑微循环障碍小鼠静脉注射葛根素后，脑微循环血流量有改善，但作用较弱。结果提示，葛根素可增加正常小鼠脑微循环血流量。

葛根素滴眼液眼内药代动力学的研究

本文利用高效液相色谱法测定了房水浓度中葛根素浓度，建立了灵敏、精确、简便、重现性好的分析方法。适用于眼内的药代动力学的研究。实验数据按ＣＡＰＰ房室模型程度计算，结果表明葛根素滴眼液在家兔眼内的药物动力学过程符合二房室模型，其拟合动力学方程为：Ｃ（ｔ）＝２１３ｅ－１００ｔ＋０２３ｅ－００８３ｔ－２３６ｅ－５０６ｔ，其主要药动学参数分别为：Ａ＝２１３μｇ·ｍｌ－１；Ｂ＝０３３μｇ·ｍｌ－１；α＝１００ｈ－１；β＝０８３ｈ－１；ｔ１／２α＝０６９ｈ；ｔ１／２β＝８３２ｈ；Ｋα＝５０６ｈ－１；Ｋ２１＝０１９ｈ－１；Ｋ１０＝０４３ｈ－１；Ｋ１２＝０４６ｈ－１；Ｃｍａｘ＝０９６３μｇ·ｍｌ－１；Ｔｍａｘ＝２００ｈ；ＡＵＣ＝５１６μｇ·ｈ·ｍｌ－１。

葛根素在大鼠全脑缺血-再灌注时对核因子-κB表达的影响

目的 :探讨葛根素在全脑缺血再灌注损伤中的作用机制。方法 :采用 Pulsinelli法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。分别在大鼠全脑缺血 10 min后再灌注 2、6、12、2 4和 4 8h时 ,用免疫组织化学法检测海马CA1区核因子 κB(NFκB)的活性和抑制蛋白 κB(IκB)的表达 ,用原位杂交法检测肿瘤坏死因子 α m RNA(TNFα m RNA)的表达 ,用苏木精伊红 (HE)染色检测存活神经元数目。结果 :全脑缺血再灌注后 ,NFκB的活性和 TNFα m RNA的表达在 2 h即明显升高 ,分别在 6 h和 12 h达到高峰 ,4 8h仍高于假手术组(P均 <0 .0 1) ;IκB的表达在 2 h有明显下降 ,6 h降至最低点 ,以后逐渐升至 2 h水平 ,存活神经元数目随再灌注时间的延长而逐渐较少 (P均 <0 .0 1)。在各对应时间点 ,葛根素可明显降低 NFκB的活性 (P均 <0 .0 5 ) ,增加 IκB的表达和存活神经元数目 (P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;在 6～ 4 8h时降低 TNFα m RNA的表达(P<0 .0 5 )。结论 :全脑缺血再灌注时 ,葛根素可通过抑制 IκB的降解及 NFκB的活性 ,下调 TNFα m RNA的表达 ,而起到脑保护作用。

葛根素对心脑血管保护作用的实验研究

目的观察葛根素对微循环、脑缺血缺氧的改善作用及对垂体后叶素(Pit)所致大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法用PeriFlux 5000激光多普勒探测小鼠静脉给药前和静脉给药后2min^5min耳廓微循环灌注量的变化。皮下注射给药6d,末次给药后30min,断头观察断头后喘息持续的时间。尾静脉注射垂体后叶素造成急性心肌缺血模型,观察各给药组在不同时间点Ⅱ导联心电图心率、ST段变化及伴心律失常等心电图变化。给药1h后眼眶静脉丛采血分离血清,测血清天门冬酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)。结果葛根素给药组与模型组比较,小鼠耳廓微循环灌注量明显增加,断头后喘息时间延长。葛根素也能明显对抗垂体后叶素引起的急性心肌缺血的ST段抬高,降低心律失常的发生率,及降低血清AST、CK、LDH。结论葛根素具有改善微循环及脑缺血缺氧的作用,对垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血具有保护作用。

葛根异黄酮对哺乳母猪血清生化指标和泌乳相关激素的影响

本试验旨在研究葛根异黄酮对哺乳母猪血清生化指标和泌乳相关激素的影响。选择24头体况、胎次、预产期相近的长白母猪,随机分为2组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮基础上添加葛根异黄酮,每组12个重复,预饲期为7 d,正式期21 d。结果表明:葛根异黄酮对哺乳母猪血清生化指标无显著影响(P>0.05)。第1、10天试验组血清中雌激素含量较对照组分别增加1.07%、0.97%,催乳素含量较对照组分别增加6.25%、3.08%(P<0.05);试验组第1、10、21天生长激素水平较对照组分别增加0.51%、1.04%、2.14%(P<0.05)。综上可知,葛根异黄酮能促进与泌乳相关激素的分泌,而对哺乳母猪血清生化指标无显著影响。

葛根素微丸制备及含量测定方法

目的:制备葛根素微丸,建立葛根素微丸中葛根素含量测定的方法。方法:离心造粒法制备葛根素微丸。HPLC法测定葛根素的含量,色谱条件为C18柱,以甲醇-水(30∶70)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为250 nm。结果:所制备的微丸产率达80%以上,葛根素含量在0.025～0.500μg之间线性关系良好,平均回收率为98.44%,RSD为1.14%。结论:本法简便、准确、重复性好,可用于葛根素微丸的制备和质量控制。

HPLC法测定白石清热冲剂中葛根素的含量

用反相高效液相离子对色谱法测定白石清热冲剂中葛根素的含量．色谱柱：ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１８（１０μｍ，４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）；流动相：甲醇－ｐＨ６．８，００１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（２７：７３），每升流动相含四丁基溴化铵０００５ｍｏｌ；检测波长２５０ｍｍ，测得线性范围０１１６～０５８０μｇ（ｒ＝０９９９８），平均回收率９７２％，相对标准差ＲＳＤ＝１８％．

葛根素对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤时听功能和NF-к Bp65的影响

目的探讨葛根素在豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤中的保护作用及分子机制。方法纯白雄性豚鼠32只随机分为4组:正常对照组(n=8)、缺血再灌注7d组(n=8)、生理盐水组(n=8)和用药组(n=8)。除正常对照组外的所有豚鼠均进行手术造模。用药组在缺血再灌注开始时,腹腔注射葛根素150mg/(kg·d),每日1次,连用6d。生理盐水组操作同用药组,但以等容量生理盐水代替葛根素。应用听觉脑干反应评价听功能。采用石蜡包埋的免疫组织化学技术,对各组近中轴位切片行NF-кBp65免疫组织化学染色。结果用药组ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期明显缩短,阈值降低。正常对照组、缺血再灌注7d组、用药组与生理盐水对照组ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期和阈值比较差异有显著性(P<0.01)。正常对照组与用药组ABRⅢ、Ⅳ波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期和阈值比较差异无显著性(P>0.05)。用药组NF-кBp65表达与缺血再灌注7d组比较明显下调差异有显著性(P<0.01)。结论葛根素具有保护耳蜗缺血再灌注损伤的作用。其保护作用的机制可能与下调NF-кBp65表达表达有关。

葛根素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的抗氧化作用及对部分生化指标的影响

目的探讨葛根素对大鼠缺血再灌注损伤肝脏的抗氧化作用及对部分生化指标的影响。方法建立大鼠全肝缺血再灌注模型,60只大鼠随机分为三组,每组20只,分别为假手术对照组(A组)、肝缺血/再灌注组(B组)和肝缺血/再灌注加葛根素治疗组(C组),分别在肝缺血前、缺血45min、再灌注45min共3个时相点,检测血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、黄嘌呤氧化酶(XO)活性、丙二醛(MDA)浓度以及血清谷丙转氨酶(ALT)活性。结果肝缺血/再灌注组,血浆XO,MDA及ALT显著高于假手术对照组、SOD明显低于假手术对照组(P<0.05或P<0.01);而葛根素治疗组与缺血/再灌注组比较,上述指标均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论葛根素可通过降低氧自由基水平(增强SOD活性、减弱XO活性)拮抗脂质过氧化反应(降低MDA浓度),从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。

卡通片质量标准研究

目的 :对卡通片进行定性定量分析 ,制定其质量标准。方法 :对卡通片中黄芪、人参、葛根进行了薄层色谱鉴别 ,并采用高效液相色谱法对该制剂中黄芪的主要有效成分黄芪甲甙进行定量测定。结果 :加样回收率为 97.6 4% ,RSD为 2 .18% (n=5 )。结论 :方法灵敏 ,结果准确 。

葛根素联合激素冲击治疗急性非动脉炎性前部缺血性视神经病变

[目的]观察葛根素联合激素冲击疗法对非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)水肿期的疗效。[方法]对临床确诊的NAION经眼底检查及OCT检查确诊为水肿期患者58例60只眼,其中29例30只眼给予葛根素联合激素冲击治疗(治疗组);另外29例30只眼给予激素冲击疗法配合复方樟柳碱(CA)治疗(对照组)。[结果]治疗组视力提高程度明显好于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照组在视野改善方面差异比较有统计学意义(P<0.01);OCT检查,治疗组减轻视盘厚度好于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]葛根素联合激素冲击疗法在NA10N水肿期治疗有较好的治疗效果。

葛根素对在体兔房室结缺血再灌注损伤的影响

目的探讨葛根素对兔房室结缺血再灌注损伤的影响。方法采用健康雄性兔50只，随机分为5组：A组（假手术组）10只；B组（缺血30min，再灌注30min）10只；C组（缺血30min，再灌注240min）10只；D组（葛根素预处理后，缺血30min，再灌注30min）10只；E组（葛根素预处理后，缺血30min，再灌注240min）10只。检测血清天冬酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸肌酶（CK）变化，免疫组化检测房室结BCL-2基因蛋白表达，电镜观察其超微结构变化。结果A组AST、LDH、CK未升高，免疫组化检测房室结BCL-2基因蛋白未见表达，超微结构无变化。B、C组变化明显。D、E组较B、C组轻。结论用葛根素干预后，缺血再灌注损伤减轻。

基于僵住行为评价葛根素抗创伤后应激障碍的实验研究

目的通过不可逃避电足刺激建立创伤后应激性障碍(PTSD)动物模型,观察葛根素对PTSD模型小鼠行为学的影响。方法 60只雄性ICR小鼠随机分为正常对照组,模型组,舍曲林组,葛根素低、中、高剂量组。除正常对照组外其余各组均给予PTSD造模,造模后正常对照组、模型组每天灌胃生理盐水,舍曲林组和葛根素低、中、高剂量组分别给予15 mg/kg舍曲林及7. 5 mg/kg、15 mg/kg和30 mg/kg葛根素灌胃。试验的第5、10、17天检测僵住行为。结果第5天检测结果显示舍曲林组不能产生抗PTSD样效应,但葛根素中、高剂量组均可逆转小鼠PTSD样僵住时间百分比显著上升。第10、17天结果显示舍曲林组和葛根素中、高剂量组均可逆转小鼠僵住时间百分比显著上升。结论葛根素对不可逃避电足建立PTSD模型僵住行为有良好的改善作用。

气血康口服液(无糖型)质量标准研究

目的 :制订气血康口服液 (无糖型 ) (三七、人参、葛根等 )的质量标准。方法 :用TLC法鉴别人参、三七、葛根 ,用HPLC ELSD法测定三七皂苷R1含量。结果 :在TLC色谱中能检出人参皂苷Rg1、葛根 ,在HPLC ELSD测定三七皂苷R1在 1.6 6 4～ 16 .6 4 μg范围内呈良好的线形关系 (r =0 .9997) ,平均回收率 10 0 .9% ,RSD为 2 .5 %。 结论 :定性定量方法简便准确 ,能有效地控制气血康口服液 (无糖型 )的质量。

葛根素的分离纯化方法研究

[目的]探索适于工业化生产的分离纯化葛根素的更好方法。[方法]选取5种大孔吸附树脂及聚酰胺,并结合酸性氧化铝柱进一步吸附色素,采用重结晶法纯化产品,并采用紫外分光光度法检测产品纯度。[结果]建立了柱吸附结合重结晶的方法分离纯化葛根素的方法,葛根素纯度>99%。[结论]该方法操作简便,成本低,收率高,适于工业化生产。

葛根素对培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究葛根素(Pue)处理后对培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法原代培养新生大鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤模型,分为缺氧/复氧对照组和缺氧/复氧+葛根素保护组(葛根素浓度分别为1、0.1、0.01 g/L)。观察各组心肌细胞形态结构及超微结构的变化,测定心肌细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)含量和一氧化氮(NO)分泌量,以及Pue对上述指标的影响。流式细胞仪计数各组细胞凋亡率。结果Pue可明显提高SOD和LDH活性,降低MDA含量,减少NO分泌量,差异均有高度统计学意义(均P<0.01);电镜下治疗组心肌细胞结构接近正常;流式细胞仪计数治疗组细胞凋亡率明显低于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论葛根素处理对体外培养心肌细胞模拟缺氧/复氧损伤模型有明显的保护作用,其保护机制可能与葛根素稳定心肌细胞膜和减轻氧自由基损伤,并且抑制缺氧/复氧损伤中的心肌细胞凋亡有关。