蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织OL、OPC细胞凋亡和Nogo-A、OMgp表达的影响

目的探讨蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠神经保护作用的机制。方法将80只胎龄<22 d的早产仔鼠随机分为8组(每组10只):早期药物干预组(蒲金口服液高剂量组、蒲金口服液低剂量组、银杏叶提取物组、模型组)和晚期药物干预组。生后21 d龄进行神经行为学检测,并采用qRT-PCR和Western blot方法检测勿动蛋白-A(Nogo-A)和少突胶质细胞髓磷脂糖蛋白(OMgp)的表达,TUNEL法和A2B5、CNPase双标免疫荧光染色法检测少突胶质细胞(OL)、前体细胞(OPC)凋亡情况。结果LPS组早产仔鼠脑组织Nogo-A和OMgpmRNA和蛋白的表达均明显高于正常对照组(P<0.05),蒲金口服液高剂量、低剂量和银杏叶提取物干预组大鼠的神经行为学评分均优于模型组(P<0.05),且早期干预组高于晚期干预组(P<0.05)。蒲金口服液高剂量、低剂量和银杏叶提取物均能降低早产脑损伤大鼠脑组织Nogo-A、OMgp mRNA和蛋白的表达,减少OL和OPC的凋亡(P<0.05),其中蒲金口服液高剂量早期干预效果更显著(P<0.05)。结论蒲金口服液可以改善早产脑损伤大鼠的神经行为学表现,减少脑组织Nogo-A、OMgp的表达和OL、OPC的凋亡,具有神经保护的作用。

蒲金口服液对HIBD幼鼠脑组织PSD-95、NMDAR-2B表达的影响

目的探讨蒲金口服液对缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)幼鼠的神经保护机制。方法单侧颈总动脉结扎联合缺氧环境制备HIBD幼鼠模型。动物分为中药组、西药组、模型组、假手术组、空白组。中药组蒲金口服液0.1 mL/(kg·d)灌胃;西药组单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液3 mL/(kg·d)腹腔注射;余组生理盐水0.1 mL/(kg·d)灌胃,均每日1次,连续14 d。Morris水迷宫测试学习与记忆行为能力,尼氏染色观察脑组织神经元,透射电镜观察突触超微结构,Western Blot检测脑组织PSD-95、NMDAR-2B表达。结果蒲金口服液可改善HIBD幼鼠神经损伤,上调脑组织突触后密度蛋白95(PSD-95)、谷氨酸受体2B抗体(NMDAR-2B)表达(P<0.05)。结论蒲金口服液改善HIBD幼鼠神经行为学表现,可能与其调控PSD-95、NMDAR-2B表达,维护突触稳态有关。

蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织PSD-95、NMDAR-2B表达的影响

目的:观察蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织突触后致密物95(postsynaptic density-95,PSD-95)、N-甲基-D-天冬氨酸受体-2B(N-methyl-D-aspartate receptor-2B,NMDAR-2B)表达的影响。方法:将18只SPF级雄性大鼠与36只雌性大鼠以12比例合笼饲养,雌鼠受孕后另外饲养。将36只怀孕母鼠分为LPS组(n=30)和对照组(n=6),LPS组孕鼠腹腔注射350μg·kg^(-1)的LPS制作宫内感染动物模型,然后记录孕鼠的分娩时间及新生仔鼠体重,胎龄<22 d为早产仔鼠。将80只LPS组早产仔鼠按随机数字表法分为4组,每组20只,分别为高剂量蒲金口服液组(25 g·kg^(-1))、低剂量蒲金口服液组(12.5 g·kg^(-1))、银杏叶提取物组(3 mg·kg^(-1))、模型组。随机选对照组正常分娩仔鼠20只,设为空白组。每组大鼠中的10只于仔鼠出生第0—7天进行早期药物干预,其余10只于仔鼠出生第7—14天进行晚期药物干预。HE染色观察新生仔鼠脑损伤状况;RT-PCR检测PSD-95 mRNA、NMDAR-2B mRNA表达水平;Western Blot检测脑组织中PSD-95及NMDAR-2B蛋白表达水平。结果:与对照组比较,LPS组活产仔鼠数和仔鼠出生体质量均显著降低(P<0.05);LPS组孕鼠子宫壁充血,胎盘呈老化状态,绒毛间质纤维组织增生,毛细血管管腔变小,子宫和胎盘内可见炎性细胞浸润;LPS组仔鼠脑室旁白质结构稀疏,神经元排列紊乱,出现明显的结构缺陷,少量细胞出现核固缩、溶解的现象。与空白组比较,模型组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);与模型组比较,低、高剂量蒲金口服液组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与同时期低剂量蒲金口服液组比较,高剂量蒲金口服液组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与晚期干预比较,早期干预的低、高剂量蒲金口服液组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。结论:蒲金口服液在促进神经细胞恢复方面作用显著,其机制可能与促进PSD-95、NMDAR-2B的表达,改善突触后膜致密物积聚与修复,调节突触可塑性,保持突触的结构完整性有关,且早期、高剂量干预效果更显著。