目的探讨降低表皮生长因子受体(EGFR)在肺内的表达对博莱霉素致小鼠肺纤维化的影响。方法将40只4-6周龄C57BLB/c雄性小鼠按简单随机法分为正常对照组(气管滴入PBS)、纤维化组(气管滴入博莱霉素3mg/kg)、RNAi组(气管滴入博莱霉...目的探讨降低表皮生长因子受体(EGFR)在肺内的表达对博莱霉素致小鼠肺纤维化的影响。方法将40只4-6周龄C57BLB/c雄性小鼠按简单随机法分为正常对照组(气管滴入PBS)、纤维化组(气管滴入博莱霉素3mg/kg)、RNAi组(气管滴入博莱霉素3mg/kg+气管滴入siR-NA20μl)和RNAi阴性对照组(气管滴入博莱霉素3mg/kg+气管滴人siRNA阴性对照20μl)。实验第10天处死小鼠,收获肺组织,检测羟脯氨酸含量。肺组织切片行HE染色观察肺组织病理改变,采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测EGFR的表达。Westernblot检测EGFR、磷酸化EGFR表达。结果RNAi组与纤维化组比较,肺组织EGFRmRNA表达(0.31±0.05 vs 0.75±0.08,P〈0.01)和EGFR蛋白表达(1.53±O.47vs2.56±0.37,P〈0.01)均显著下降;肺病理损伤较纤维化组减轻,肺羟脯氨酸含量显著减少(543.00±25.89vs900.73±31.77,P〈0.01);磷酸化EGFR蛋白表达亦较纤维化组明显减少(1.78±0.35 vs 2.84±0.51,P〈0.01)。结论EGFRRNAi抑制了EGFR活化,减轻了博莱霉素诱导的肺纤维化改变。展开更多
文摘目的探讨降低表皮生长因子受体(EGFR)在肺内的表达对博莱霉素致小鼠肺纤维化的影响。方法将40只4-6周龄C57BLB/c雄性小鼠按简单随机法分为正常对照组(气管滴入PBS)、纤维化组(气管滴入博莱霉素3mg/kg)、RNAi组(气管滴入博莱霉素3mg/kg+气管滴入siR-NA20μl)和RNAi阴性对照组(气管滴入博莱霉素3mg/kg+气管滴人siRNA阴性对照20μl)。实验第10天处死小鼠,收获肺组织,检测羟脯氨酸含量。肺组织切片行HE染色观察肺组织病理改变,采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测EGFR的表达。Westernblot检测EGFR、磷酸化EGFR表达。结果RNAi组与纤维化组比较,肺组织EGFRmRNA表达(0.31±0.05 vs 0.75±0.08,P〈0.01)和EGFR蛋白表达(1.53±O.47vs2.56±0.37,P〈0.01)均显著下降;肺病理损伤较纤维化组减轻,肺羟脯氨酸含量显著减少(543.00±25.89vs900.73±31.77,P〈0.01);磷酸化EGFR蛋白表达亦较纤维化组明显减少(1.78±0.35 vs 2.84±0.51,P〈0.01)。结论EGFRRNAi抑制了EGFR活化,减轻了博莱霉素诱导的肺纤维化改变。