中草药添加剂对西门塔尔肉牛血清免疫、细胞因子、抗氧化指标及直肠菌群的影响

试验旨在研究饲粮中添加中草药添加剂对西门塔尔肉牛血清免疫、细胞因子、抗氧化指标及直肠菌群的影响。采用单因素随机区组试验设计,选取20头健康的12月龄平均体重为(268.80±4.95)kg的西门塔尔肉牛,随机分为对照组(CG组)和试验组(AG组),每组10个重复,每个重复1头肉牛。CG组饲喂基础饲粮,AG组在基础饲粮中额外添加100 g/(头·d)中草药添加剂。预试期5 d,正式试验期60 d。结果表明:与CG组相比,AG组西门塔尔肉牛血清免疫球蛋白A(IgA)和白细胞介素-6(IL-6)含量提高了12.70%和7.58%(P<0.05),血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性提高了3.13%(P<0.05),丙二醛(MDA)含量降低了28.87%(P<0.05),总抗氧化能力(T-AOC)提高了1.39%(P>0.05)。AG组西门塔尔肉牛肠道菌群Shannon、Chao1和Ace指数比CG组分别提高了0.17%、1.51%和0.96%(P>0.05)。AG组西门塔尔肉牛肠道中拟杆菌门(Bacteroidetes)和疣微杆菌门(Verrucomicrobia)的相对丰度比CG组提高了6.50%和2.94%(P>0.05),厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度比CG组降低了5.94%(P>0.05);未分类拟杆菌属(unclassified_Bacteroidetes)的相对丰度高于CG组(P<0.05),居海事城球杆菌属(Phocaeicola)和另枝菌属(Alistipes)的相对丰度比CG组提高了8.33%和16.45%(P>0.05)。研究表明,中草药添加剂可以提高西门塔尔肉牛的免疫水平、抗氧化能力、肠道菌群丰度,促进肠道有益菌群的生长,增强机体消化纤维的能力。

活动性肺结核合并糖尿病患者血糖水平与树突状细胞亚群及T细胞亚群的相关性研究

目的研究活动性肺结核合并糖尿病患者血糖水平与树突状细胞(DCs)亚群及T细胞亚群的相关性。方法选取2020年1月至2022年1月惠州市中心人民医院接受诊治的200例患者为研究对象,按照病情分为单纯活动性肺结核患者(对照组)和活动性肺结核合并糖尿病患者(研究组),每组各100例。按照患者糖化血红蛋白(HbA1c)水平将研究组患者分为轻度高血糖组(10 mmol/L≤HbA1c<13.9 mmol/L)45例、中度高血糖组(13.9 mmol/L≤HbA1c<22 mmol/L)33例、重度高血糖组(HbA1c≥22 mmol/L)22例。比较每组患者血糖指标、DCs亚群、T细胞亚群、细胞因子水平,并分析不同血糖程度与DCs、T细胞亚群的相关性。结果四组患者各血糖指标比较为对照组<轻度高血糖组<中度高血糖组<重度高血糖组(P<0.05);DCs亚群(cDC1、cDC2、pDC)及T细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD3^(+))分布值比较为对照组>轻度高血糖组>中度高血糖组>重度高血糖组(P<0.05);四组患者各炎性细胞因子水平比较为对照组<轻度高血糖组<中度高血糖组<重度高血糖组(P<0.05);外周血DCs亚群、T细胞亚群分布情况与血糖水平呈负相关(P<0.05)。结论针对活动性肺结核合并糖尿病患者,不同血糖程度患者炎性细胞因子水平、DCs亚群及T细胞亚群分布情况不同,且DCs亚群及T细胞亚群分布情况与患者血糖水平呈负相关。

黄芪对甲状腺功能正常的桥本甲状腺炎患者外周血T淋巴细胞亚群表达的影响

目的·探讨黄芪对甲状腺功能正常的桥本甲状腺炎患者T淋巴细胞亚群及细胞因子表达的影响。方法·选择2020年1月—12月在上海市第六人民医院金山分院接受治疗且资料完整的甲状腺功能正常的桥本甲状腺炎患者120例,采用随机数字表将患者为干预组及对照组,每组各60例。对照组治疗方案为碘适宜状态饮食,干预组在对照组治疗方案基础上联合黄芪药液口服(150 mL/次,2次/d)治疗。连续治疗6个月,比较2组治疗前后外周血清T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)),细胞因子[包括白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6、IL-10],超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP),红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR),以及甲状腺功能及自身抗体、肝肾功能等指标的变化。观察黄芪治疗期间不良反应。应用多因素线性回归分析甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)变化幅度的影响因素。结果·最终纳入118例患者,每组各59例。治疗6个月后,干预组CD4^(+)T细胞比例,CD4^(+)/CD8^(+)比值,IL-2、TNF-α、IL-6、IL-10、hs-CRP、ESR、TPOAb和甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)水平均较治疗前及其同期对照组显著改善,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组治疗后上述指标与治疗前比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后干预组未见严重不良反应。多因素线性回归分析结果显示,应用黄芪、CD4^(+)T细胞、CD4^(+)/CD8^(+)比值升高幅度及hs-CRP下降幅度均是TPOAb下降幅度的独立影响因素(β=−0.393,P=0.029;β=−0.513,P=0.010;β=−0.351,P=0.035;β=0.434,P=0.023)。结论·黄芪可改善甲状腺功能正常的桥本甲状腺炎患者CD4^(+)T细胞、IL-2、TNF-α、IL-6、IL-10水平及CD4^(+)/CD8^(+)比值,且安全性佳。

流式细胞术检测细胞周期影响因素及不同免疫细胞亚群周期分析

细胞周期检测对于了解细胞增殖状态、细胞功能研究、药物筛选与评估等领域具有重要意义。流式细胞仪分析细胞周期是目前较为经典且广泛应用的检测手段之一。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染是最常用的基于流式的检测细胞周期方法,然而,该方法在使用过程有诸多处理因素会对检测结果造成影响。此外,不同免疫细胞亚群在不同细胞周期阶段的分布差异也有助于研究免疫反应,了解疾病状态。本文以B16-F10细胞系为例,采用PI单染法,从固定条件、上机条件和软件分析3个角度,评价多种处理因素对细胞周期检测结果的影响。根据结果分析,在进行细胞周期检测时,建议取3×10^(6)个细胞,用300μL预冷PBS重悬细胞后逐滴滴入700μL预冷的无水乙醇,放置于4℃或-20℃过夜固定,低速收样,收样速率为每秒400~600颗粒数,去黏连后需收集至少3000个细胞。另外,通过EdU、PI双指标染色可以精确划分细胞周期,而细胞表面标志物染色联合Ki-67和PI染色法,可在不进行细胞分选的情况下进行不同免疫细胞亚群周期分析。本文较为系统的探讨了PI单染法检测细胞周期的影响因素,提供了标准的实验操作流程。建立了EdU联合PI检测细胞周期和针对不同免疫细胞亚群周期分析方案,拓宽了细胞周期检测方式。

超声结合检验指标评价不同放疗方式对肺癌患者淋巴细胞亚群的影响

目的探索不同调强放疗方式H-alfentanil区差异对原发性肺癌患者围放疗期外周血淋巴细胞亚群的影响。方法选取2021年8月至2023年1月于河北北方学院附属第一医院放疗科行放疗的原发性肺癌患者58例,根据放疗方式不同分为IMRT组(n=28)、VMAT组(n=30);记录2组患者放疗计划参数;选定放疗前1周内(T0)、放疗剂量至40Gy时(T1)、放疗结束后4周(T2)3个时间点进行外周血淋巴细胞和亚群化验及超声检查锁骨上淋巴结及颈部淋巴结。结果治疗前VMAT组双肺V5、V10、V15、V20、V25、V30高于IMRT组,MLD低于IMRT组,差异均有统计学意义(P<0.05),治疗前PTV、2组淋巴细胞亚群各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后2组的淋巴细胞总数、CD3^(+)T总数、CD3^(+)CD4^(+)T亚群、CD4^(+)/CD8^(+)均降低(P<0.01);CD3^(+)CD8^(+)T亚群、CD16^(+)CD56^(+)NK亚群均升高(P<0.01);其中VMAT组CD3^(+)CD4^(+)T亚群指标、CD4^(+)/CD8^(+)指标低于IMRT组(P<0.05);Logistic分析,2组患者淋巴细胞总数的下降与双肺V5、V10、V15、V35、V40、V45、V50、V60呈正相关(P<0.05);超声检查锁骨上淋巴结及颈部淋巴结大小、形态及淋巴门的位置比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论原发性肺癌行IMRT、VMAT放疗均引起外周血淋巴细胞减少及淋巴细胞亚群再分布,VMAT放疗双肺H-alfentanil区较IMRT范围更大,外周血淋巴细胞减低越明显,超声的形态学检查在评价不同放疗方式对肺癌患者淋巴细胞亚群的影响的作用有限。

B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性研究

目的探究B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性。方法选取2017年10月至2019年10月于保定市第二中心医院妇产科分娩的孕妇100例,分为早产组27例和足月顺产组73例,取孕妇阴道拭子和蜕膜间质组织,检测B群链球菌阳性率、蜕膜间质细胞凋亡情况、血清炎性因子水平、NLRP3、Caspase-1、OX40、OX40L、PD-1和PD-L1 mRNA表达,分析B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性。结果2组孕妇B群链球菌阳性率、蜕膜间质细胞凋亡情况、血清炎性因子水平、NLRP3、Caspase-1、OX40、OX40L、PD-1和PD-L1 mRNA表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。早产组孕妇的GBS阳性率和蜕膜组织细胞凋亡值分别为37.04%和(46.73±4.92),足月顺产组的GBS阳性率和蜕膜组织细胞凋亡值仅为9.59%和(6.03±2.04);早产组孕妇的血清炎性因子水平高于足月顺产组,蜕膜间质细胞凋亡的孕妇血清炎性因子水平高于未凋亡的孕妇,差异有统计学意义(P<0.05)。结论B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号存在相关性,蜕膜间质细胞死亡会引发炎性因子水平升高。

不同剂量异烟肼治疗肺结核的临床效果及对患者肺功能和T淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨不同剂量异烟肼治疗肺结核的临床效果及对患者肺功能、T淋巴细胞亚群的影响。方法 选取2020年6月至2022年6月河北省胸科医院收治的肺结核患者90例为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各45例。对照组在常规抗结核药物基础上予0.3 g/d异烟肼治疗,观察组在常规抗结核药物基础上予0.5 g/d异烟肼治疗,2组疗程均为6个月。比较2组临床疗效,评估患者肺功能及T淋巴细胞亚群变化情况。结果 观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组最大呼气流量、第1秒用力呼气容积均高于治疗前,且观察组均高于对照组[(7.8±1.4)L/s比(6.3±1.2)L/s、(1.48±0.28)L比(1.15±0.23)L](均P<0.05)。治疗后,2组血清CD+3、CD+4、CD+4/CD+8比值均高于治疗前,且观察组均高于对照组,CD+8均低于治疗前,且观察组低于对照组(均P<0.05)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 不同剂量异烟肼治疗肺结核的临床效果不同,增加异烟肼剂量至0.5 g/d能够提升疗效,促进肺结核患者肺功能改善,提高免疫功能,且安全性较好。

肝细胞癌与肠道菌群:不容忽视的瘤内菌群

肠道菌群的失衡与多种肿瘤的发生和发展相关,包括肝细胞癌(HCC)。肠道菌群与HCC的研究经历了相关性研究,肠道菌群本身、肠道菌群相关代谢产物与宿主免疫等方向;而随着对宿主-微生物相互作用的深入研究,肿瘤内菌群的概念浮出水面。肠道菌群可通过代谢产物或与免疫细胞相互作用从而远程影响肿瘤,而肿瘤内菌群与癌细胞密切接触,因此可能具有不同的相互作用模式。本文将从HCC的瘤内菌群发现、检测以及瘤内菌群来源等方面展开综述。

肠道菌群情况与发声和多种运动联合抽动障碍患儿神经递质、神经功能及T细胞亚群的相关性分析

目的探讨发声和多种运动联合抽动障碍(又称抽动症)患儿肠道菌群分布情况与其神经递质、神经功能及T细胞亚群的相关性。方法以2020年5月—2023年5月南京中医药大学附属南京市中西医结合医院收治的97例抽动症患儿作为研究对象,通过耶鲁抽动症整体严重度量表(YGTSS)将所有患儿分为轻度组23例、中度组42例和重度组32例。采集所有患儿粪便样本,采用16S rRNA测序技术和Qiime软件进行肠道菌群α多样性分析[Chao1指数、observed species(Sobs)指数、Shannon指数、Simpson指数];测定T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))和神经递质[5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、γ-氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)]水平;评估两组儿童神经功能;采用Pearson相关性分析探讨患儿肠道菌群与神经递质、神经功能及T细胞亚群的关系。结果与轻度组相比,中度组和重度组的YGTSS评分的运动性抽动、发声性抽动、总分更高(P<0.05);轻度组、中度组和重度组患儿的Chao1、Sobs、Shannon和Simpson指数比较,经方差分析,差异均有统计学意义(P<0.05);与轻度组相比,中度组和重度组的α多样性更低(P<0.05);轻度组、中度组和重度组患儿的CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)比较,经方差分析,差异均有统计学意义(P<0.05);与轻度组相比,中度组和重度组的CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)更低,CD8^(+)更高(P<0.05);与轻度组相比,中度组和重度组的5-HT和DA更高,GABA、NE、神经功能评分更低(P<0.05)。根据Pearson相关性分析结果,患儿Chao1、Sobs、Shannon和Simpson指数与5-HT、DA呈负相关(P<0.05),与CD4^(+)、GABA、NE和神经功能评分呈正相关(P<0.05)。结论肠道菌群与抽动症患儿的神经递质、神经功能和T细胞亚群密切相关。

非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊对斑秃小鼠IL-7/IL-7Rα信号通路和Tregs细胞亚群的影响

目的:研究1565 nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊(Platycladus orientalis tincture,POT)对斑秃(Alopecia areata,AA)小鼠治疗作用以及对白细胞介素7(Interleukin 7,IL-7)/白细胞介素7受体α(Interleukin-7 receptorα,IL-7Rα)信号通路和调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)亚群的影响。方法:将50只成年雄性C3H/HeJ小鼠随机分为对照组(C组),模型组[M组,环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)诱导AA模型],M+1565 nm组(1565 nm非剥脱点阵激光治疗AA),M+POT组(POT治疗AA)、M+1565 nm+POT组(1565 nm非剥脱点阵激光联合POT治疗AA),每组10只。流式细胞术检测C组和M组皮损组织中Tregs细胞亚群的比例和所有组血液中单个核细胞中Tregs细胞亚群的比例。Western blot法检测各组小鼠皮损组织中IL-7和IL-7Rα的表达。结果:与C组比,M组皮肤组织IL-7和IL-7Rα的表达均明显增加,而且Tregs细胞比例明显减少(P<0.05)。与M组比,M+1565 nm组和M+POT组IL-7的表达均降低(P<0.05)。与M组比,M+1565 nm+POT组IL-7和IL-7Rα的表达均降低,且Tregs细胞比例都显著增加(P<0.05)。结论:1565 nm非剥脱点阵激光联合POT治疗可以抑制斑秃小鼠IL-7/IL-7Rα信号并减少Tregs细胞的比例。

T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和血清SAA变化对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤的预测

目的分析T淋巴细胞亚群、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)和血清淀粉样蛋白A(SAA)对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤的预测价值。方法选取儿童急性重症肺炎心肌损伤60例为观察组,轻症肺炎50例为对照组,同期体检健康儿童58例为健康组。检测心肌损伤指标、免疫球蛋白(Ig)、淋巴细胞亚群(CD^(+))、动脉血气及乳酸清除率。分析急性重症肺炎心肌损伤的影响因素,以及各指标对急性重症肺炎患儿心肌损伤的预测价值。结果观察组和对照组CD3^(+)、CD4^(+)、Th1/Th2、IgA、IgM、IgG、氧分压(PaO 2)低于健康组,肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、SAA、CD8^(+)、CD19^(+)、CD23^(+)、CD40^(+)、乳酸清除率高于健康组,且观察组变化更为显著(P<0.05)。SAA、CD8^(+)、CD3^(+)、CD4^(+)、Th1/Th2是急性重症肺炎心肌损伤的影响因素(P<0.05)。T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和SAA联合预测急性重症肺炎心肌损伤的曲线下面积高于各指标单独应用(P<0.05)。结论T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和血清SAA对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤具有较高的预测价值。

温针灸四关穴对中晚期宫颈癌癌性疼痛患者T淋巴细胞亚群调节作用研究

目的 探讨温针灸四关穴治疗气滞血瘀证中晚期宫颈癌癌性疼痛的疗效及对T淋巴细胞亚群的调节作用。方法 选定沧州市中心医院2021年10月至2023年10月就诊的84例气滞血瘀证中晚期宫颈癌癌性疼痛患者,按随机数字表法分为温针灸组、西药组,各42例。西药组给予三级止痛治疗,温针灸组在西药组基础上给予温针灸四关穴治疗,比较两组患者临床疗效、卡氏评分量表(Karnofsky,KPS)评分、视觉模拟评分量表(visual analogue scale,VAS)评分、一般自我效能感量表(general self-efficacy scale-schwarzer,GSES)评分、疼痛应激指标[5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、β内啡肽(β-endorphin,β-EP)、P物质(substance P,SP)]、T淋巴细胞亚群指标、生活质量综合评定问卷量表(generic quality of life inventory-74,GQOLI-74)评分。结果 温针灸组总有效率(95.24%)高于西药组(76.19%)(P<0.05)。两组治疗后KPS评分、GSES评分、GQOLI-74评分、血清β-EP水平、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均较治疗前更高(P<0.05),两组治疗后VAS评分、血清5-HT水平、SP水平、CD8+均较治疗前更低(P<0.05)。温针灸组治疗后KPS评分、GSES评分、GQOLI-74评分、血清β-EP水平、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均较西药组更高(P<0.05,P<0.01),VAS评分、血清5-HT水平、SP水平、CD8+均较西药组更低(P<0.01)。结论 在三级止痛的基础上联合温针灸四关穴可有效缓解气滞血瘀证中晚期宫颈癌癌性疼痛患者疼痛症状,改善身体状况、免疫功能,调节疼痛应激物质释放,提高生存质量,效果显著。

人脐带间充质干细胞的异质性探讨及基于单细胞RNA测序结果的亚群分析

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的异质性,并基于单细胞RNA测序结果进行亚群分析。方法选择两株由郑州奥博细胞医学实验室有限公司提供的hUCMSCs(分别命名为hUCMSCs-1和hUCMSCs-2),通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)进行干性基因[性别决定区Y-box 2(Sox2)、Nanog]检测。对hUCMSCs进行成骨诱导,3 d后检测成骨基因碱性磷酸酶(Alp)的表达,7 d后进行碱性磷酸酶染色,14 d后进行茜素红染色。对两株hUCMSCs进行成软骨诱导,21 d后检测成软骨基因二型胶原(COL2A1)的表达。用10 ng/mL白细胞介素-1β(IL-1β)刺激大鼠软骨细胞24 h,与hUCMSCs-1和hUCMSCs-2共培养后,检测软骨细胞合成代谢基因蛋白聚糖(ACAN)和分解代谢基因基质金属蛋白酶3(MMP3)的表达。对hUCMSCs-1进行单细胞RNA测序,并根据功能进行亚群分组,通过生物信息学分析方法描绘各个亚群标志基因热图、富集的信号通路。结果两株hUCMSCs的Sox2、Nanog、Alp、COL2A1表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。在成骨诱导7 d后,hUCMSCs-1的碱性磷酸酶染色程度深于hUCMSCs-2。在成骨诱导14 d后,茜素红染色结果显示,hUCMSCs-1钙结节数量多于hUCMSCs-2。经IL-1β干预后,软骨细胞与两株hUCMSCs共培养后的MMP3表达水平差异有统计学意义(P<0.05),但ACAN表达水平差异不显著(P>0.05)。基于单细胞RNA测序结果,hUCMSCs-1可分为C1、C2、C3三个功能亚群。C1亚群的信号通路在细胞外基质受体相互作用上富集,与软骨细胞合成代谢相关;C2亚群信号通路在细胞衰老和凋亡上富集,与细胞的自我更新相关;C3亚群信号通路在DNA复制和减数分裂上富集,与细胞周期相关。结论不同个体来源的hUCMSCs存在异质性,其在成骨、成软骨和抗分解代谢能力方面可能存在差异。通过单细胞RNA测序可较好地根据hUCMSCs的功能特性对其进行分群,有助于提高间充质干细胞治疗的临床疗效。

T淋巴细胞亚群和肝功能指标与慢性乙型肝炎患者中医辨证分型的相关性

目的 分析T淋巴细胞亚群和肝功能指标与慢性乙型肝炎(CHB)患者中医辨证分型的相关性,为临床中医辨证分型、治疗方案选择和疗效观察提供科学依据。方法 选取2020年1—12月乐山市中医医院983例CHB患者,其中中医辩证分型实证270例(湿热中阻证75例、瘀血阻络证195例)、虚证713例(肝郁脾虚证662例、肝肾阴虚证28例、脾肾阳虚证23例)。检测各证型患者肝功能相关指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DBil)]和T细胞(CD3~+、CD4~+、CD8~+)计数,分析各项指标与CHB中医证型的相关性。结果 肝郁脾虚证、瘀血阻络证、湿热中阻证、肝肾阴虚证、脾肾阳虚证临床CHB频率依次升高。CHB各证型中,脾肾阳虚证患者年龄最大,湿热中阻证患者年龄最小。各证型间肝功能相关指标和T淋巴细胞计数差异均有统计学意义(P<0.05);CD3~+、CD4~+T细胞计数与湿热中阻证呈正相关(P<0.05),与脾肾阳虚证呈负相关(P<0.05)。结论 T淋巴细胞亚群和肝功能相关指标与CHB患者中医辨证分型存在相关性,可为临床中医辨证分型、治疗方案选择和疗效观察提供客观依据。

PD-1检测联合T淋巴细胞亚群分析对脓毒症患者预后评估的临床研究

目的 检测PD-1表达量联合T淋巴细胞亚群和部分细胞因子分析,评估脓毒症患者的免疫状态及预后。方法 选取符合2016年美国重症医学会/欧洲重症医学会(SCCM/ESICM)脓毒症及脓毒症休克定义Sepsis-3诊断标准,并且符合入组条件的68例患者,根据病情分为脓毒症组和脓毒症休克组,其中脓毒症组30例,脓毒症休克组38例,记录患者一般临床资料,通过ELISA法检测PD-1,抽取外周血送检,检查项目包括血常规、淋巴细胞亚群测定(T辅助淋巴细胞CD4^(+)与T抑制淋巴细胞CD8^(+))、降钙素原、白介素-6、超敏C反应蛋白。结果 2组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),但2组患者急性生理与慢性健康评分和序贯器官衰竭的评分比较差异有统计学意义(P<0.05);脓毒症休克组的PD-1较脓毒症组表达水平高,差异有统计学意义(P<0.05),但淋巴细胞计数、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较脓毒症组低(P<0.05);2组患者的感染指标降钙素原及炎症指标白介素-6和超敏C反应蛋白比较差异有统计学意义(P<0.05),脓毒症休克组较脓毒症组检测值更高(P<0.05);总T淋巴细胞相比,2组患者差异无统计学意义(P>0.05);脓毒症休克组患者的住ICU时间、14天病死率、28天病死率均较脓毒症组明显升高(P<0.05);PD-1表达水平、CD4^(+)T细胞是影响脓毒症患者死亡的独立危险因素。结论 脓毒症和脓毒症休克患者早期即出现免疫抑制,脓毒症休克组患者免疫抑制更严重,预后更差。

肠内营养对结直肠癌患者脱落肿瘤细胞、菌群及免疫的影响

目的探讨肠内营养对结直肠癌患者腹腔及肠腔内脱落肿瘤细胞、肠道菌群、免疫功能的影响。方法选取2022年3月至2023年3月于大连大学附属新华医院行根治术治疗的300例结直肠癌患者作为研究对象,按照随机数字表法分为试验组(肠内营养)与对照组(予以传统肠道准备),各150例。对比腹腔和肠腔内脱落细胞阳性率、肠道耐受性、肠道清洁度;观察术前和术后7 d的肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌、肠球菌)、总蛋白(TP)、前清蛋白(PA)、白蛋白(ALB)、CD4~+T细胞百分比、CD8~+T细胞百分比,并计算CD4~+T细胞/CD8~+T细胞比值。结果试验组的腹腔、肠腔内脱落细胞阳性率分别为4.67%、10.67%,显著均低于对照组(P<0.05)。两组整体肠道耐受性(Ⅰ级/Ⅱ级/Ⅲ级)和肠道清洁度(Ⅰ级/Ⅱ级/Ⅲ级/Ⅳ级)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组术后7 d每克粪便湿重中双歧杆菌、乳酸杆菌的对数值高于术前,而大肠埃希菌、肠球菌的对数值低于术前(P<0.05)。试验组术后7 d的CD4~+T细胞百分比、CD8~+T细胞百分比、CD4~+T细胞/CD8~+T细胞比值,TP、PA、ALB水平高于术前(P<0.05);试验组术后7 d每克粪便湿重中双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌、肠球菌的对数值,CD4~+T细胞百分比、CD8~+T细胞百分比,CD4~+T细胞/CD8~+T细胞比值,TP、PA、ALB水平分别为(7.65±0.68)log GFU/g、(6.92±0.71)log GFU/g、(8.56±1.45)log GFU/g、(8.28±0.97)log GFU/g,(41.03±2.21)%、(26.25±2.07)%、(1.92±0.28),(69.52±6.82)g/L、(266.36±9.58)mg/L、(40.01±3.69)g/L,对照组分别为(6.19±0.42)log GFU/g、(6.08±0.43)log GFU/g、(9.31±1.72)log GFU/g、(9.01±1.21)log GFU/g,(30.14±1.48)%、(18.01±1.51)%、(1.50±0.19),(62.01±4.05)g/L、(217.08±8.41)mg/L、(31.82±3.12)g/L,两组比较,试验组每克粪便湿重中双歧杆菌、乳酸杆菌的对数值,CD4~+T细胞百分比、CD8~+T细胞百分比、CD4~+T细胞/CD8~+T细胞,TP、PA、ALB水平更高,大肠埃希菌、肠球菌的对数值更低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论结直肠癌患者术前予以肠内营养有利于减少腹腔及肠腔内脱落肿瘤细胞的阳性率和纠正胃肠道菌群,改善营养状态和免疫功能,对指导临床治疗和改善预后具有重要意义。

外周血细胞计数比值及淋巴细胞亚群在类风湿关节炎病情评估中的价值

目的探讨外周血细胞计数比值及淋巴细胞亚群在类风湿关节炎(RA)及合并间质性肺病(ILD)病情评估中的价值。方法回顾性分析2020年6—12月50例住院RA患者的一般资料、外周血细胞计数比值及淋巴细胞亚群检测结果。按28个关节疾病活动度评分(DAS 28)分为高疾病活动度组(DAS 28>5.1分)及中低疾病活动度组(DAS 28≤5.1分)。另根据是否合并ILD,分为未合并ILD(RA-non-ILD)与合并ILD(RA-ILD)组。对比不同分组外周血细胞计数比值及淋巴细胞亚群的差异,并使用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血细胞计数比值及淋巴细胞亚群对RA的诊断评估价值。结果与中低疾病活动度组相比,RA高疾病活动度组的血小板-淋巴细胞比值(PLR)较高,淋巴细胞-单核细胞比值、总T淋巴细胞比率、总T淋巴细胞绝对计数、CD8^(+)T细胞及CD4^(+)T细胞绝对计数低于中低疾病活动度组(P<0.05)。PLR评估RA病情活动度的ROC曲线下面积(AUC)为0.722,95%CI为0.579~0.865。RA-non-ILD组与RA-ILD组外周血细胞计数比值及淋巴细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05),各指标ROC曲线的AUC也均低于0.7。结论PLR对于RA疾病活动度的区分可能具有一定价值,其他各指标无论对于区分RA疾病活动度还是区分是否合并ILD都没有表现出明显潜力。

T细胞亚群与应用免疫检查点抑制剂的肿瘤患者产生不良反应的相关性分析

目的观察临床不同癌种患者在接受肿瘤细胞免疫检查点抑制剂治疗前后外周血中T淋巴细胞亚群的变化,探索其与不良反应发生相关性。方法回顾性收集2021年8月~2022年12月于辽宁中医药大学附属医院住院接受ICIs治疗的60例肿瘤患者的临床资料,对比接受ICI治疗前后的CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)计数及CD4^(+)/CD8^(+)的变化,分析T细胞亚群变化的影响因素。结果接受ICI治疗后CD3^(+)、CD4^(+)计数较前升高、CD4^(+)/CD8^(+)较前升高,差异具有统计学意义(P<0.05);虽CD8^(+)较前降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结果显示使用中药时间越长,CD4^(+)/CD8^(+)更趋近于正常范围0.7~2.78,同时不良反应出现的几率越低,irAEs分级越低。结论细胞病理免疫分析的T淋巴细胞结果或可作为临床指导预防免疫相关不良反应的指标之一,治疗过程中联合应用中药可显著降低临床不良反应。

芍药汤治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎疗效及对患者炎症因子和T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察芍药汤治疗溃疡性结肠炎(UC)患者(湿热内蕴证)的临床疗效及对患者炎症因子和T淋巴细胞亚群的影响。方法:选择接受治疗的110例UC患者作为研究对象,掷硬币法分为两组,各55例。对照组采取美沙拉秦治疗,观察组在对照组基础上采取芍药汤治疗,两组均连续治疗3个月。治疗3个月时比较两组患者临床疗效;比较两组治疗前、治疗3个月时临床症状、Mayo、Geboes指数评分、炎症因子、T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))及肠道菌群水平;统计并比较两组治疗期间不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后,两组主症、次症及总分低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组Mayo活动指数、Geboes指数评分低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于治疗前,CD8^(+)低于治疗前,观察组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,CD8^(+)低于对照组(P<0.05);治疗后,两组双歧杆菌、乳酸杆菌高于治疗前,大肠杆菌低于治疗前,观察组大肠杆菌低于对照组(P<0.05);观察组发生1例恶心,1例皮肤瘙痒,对照组未发生不良反应(P>0.05)。结论:芍药汤能够有效改善湿热内蕴证UC患者临床症状,促进肠黏膜愈合,降低机体炎症反应,提高免疫功能,恢复胃肠道菌群平衡,提升临床疗效。

基于“肺与大肠相表里”探析血管内皮细胞与肠道菌群的关联

肠道菌群及其代谢物失调对内皮细胞损伤和功能障碍具有重要影响。中医“肺”与血管内皮细胞在结构、生理及病理方面具有相关性。中医学“肺与大肠相表里”理论是肺与肠在结构、生理及病理方面相关性的高度概括,可作为血管内皮细胞与肠道菌群相关联的理论基础。本文可为以肠道菌群为切入点、修复血管内皮细胞损伤干预心血管疾病的实验研究提供理论依据,并为中医药临床治疗相关疾病提供参考。