Identification of a 12.5-kD Protein From Caudate-Putamen Nucleus as a Dopaminergic Neuronotrophic Factor

The effect of the extract from caudate-putamen nucleus of newborn rats(CPe)on thedopaminergic(DA)neurons has been studied.An MTT colorimetric microassay measuring optical densitiesfor the growth of DA neuron cultures reveals a significant increase in growth for cultures with CPe as com-pared to those without CPe(p【0.05).Rhodamine retrograde-prelabelled DA neurons were cultured on aPhastgel containing all the electrophoretically separated protein bands from CPe,and able to fish out from ittheir own trophic factor,a 12.5-kD protein band.The survived neurons at the 12.5-kD protein band wereimmunostained positive with anti-dopamine antibody.Co-culturing the 12.5 kD-containing gel strip with ex-plants from substantia nigra at a close distance for a week revealed anti-dopamine immunopositive neuritesoutgrowing from the explants only towards the 12.5-kD gel strip.These results indicate that a 12.5-kD pro-tein from the CPe is capable of maintaining the survival of DA neurons of the substantia nigra and promotingtheir neurite outgrowth.

高血压性壳核出血微创治疗的临床研究

目的研究应用微创液化引流术治疗高血压性壳核出血的疗效。 方法对187例高血压性壳核出血患者,在CT引导下,依据壳核血肿的形态、大小及患者的病情,选择适宜的穿刺点、方向,行CT平面导向下的微创液化引流术,清除血肿。 结果 187例患者出院161例,死亡26例,病死率为13.9％;对125例患者随访6个月至7年,以日常生活活动量表(ADL)评估患者神经功能,ADL 1 52例(41.6％),ADL2 36例(28.8％),ADL320例(16.0％),ADL411例(8.8％),ADL56例(4.8％)。 结论 应用微创液化引流术治疗壳核出血,能最大限度地清除血肿,避免或减轻并发症,具有较大的优越性。

经侧裂-脑岛入路显微手术治疗壳核区高血压脑出血

目的 观察经侧裂-脑岛入路超早期显微手术治疗壳核区高血压脑出血的效果。方法 2002年1月～2005年8月，37例高血压壳核区脑出血患者，均在发病7h内（超早期）施行经侧裂-脑岛入路显微手术清除壳核区血肿，合并脑室内血肿者辅以脑室外引流术。其中小骨窗手术12例，骨瓣开颅25例。术后复查头颅CT了解血肿清除情况，统计生存率，并以日常生活活动（ADL）分级随访评价患者神经功能恢复状况。结果 术后24～28h头颅CT示：32例患者血肿清除〉90％，5例患者血肿清除〈70％。随访6～12月，37例中生存35例，死亡2例。生存的35例患者中，恢复良好（ADL1～2级）26例（70．3％），中残（ADL3级）4例（10．8％），重残（ADL4级）4例（10．8％），植物生存1例（2．7％）。结论 经侧裂-脑岛入路显微手术确切保护脑血管及脑组织减少神经功能缺失，是治疗壳核区高血压脑出血行之有效的方法。

神经导航辅助早期微侵袭治疗高血压性壳核出血

目的探讨神经导航辅助下早期微创治疗高血压性壳核出血的安全性和疗效。方法对20例诊断为高血压性壳核出血患者,神经导航辅助下行经单孔穿刺血肿,吸除大部分血肿后,留置引流;并与同期18例常规开颅手术进行比较。结果导航治疗组平均住院时间为(14±6)d,出院时基本痊愈7例,显著进步8例,进步3例,无变化1例,死亡1例;常规开颅组平均住院时间为(38±31)d,出院时基本痊愈1例,显著进步2例,进步7例,无变化1例,死亡7例。结论神经导航辅助下早期微创治疗高血压性壳核出血,可以明显改善患者的预后。

慢性吗啡依赖及戒断对大鼠不同脑区NSF附着蛋白表达的影响

目的探讨慢性吗啡依赖及戒断对大鼠伏隔核(NAc)、尾壳核(CPu)及海马(Hip)中NSF附着蛋白(SNAPs)表达的影响。方法成年♂Wistar大鼠,随机分为对照组、吗啡组和戒断不同时间组,吗啡组大鼠背部皮下注射吗啡8d,每日3次,剂量递增,对照组大鼠注射等体积生理盐水。吗啡组末次注射吗啡4h后处死,断头取脑。自然戒断组分别在戒断不同时间处死动物。各组均设平行对照。利用RT-PCR和Western blot技术分别检测各脑区SNAPs的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,慢性吗啡依赖大鼠CPu内γ-SNAP的mRNA和蛋白表达水平均上调25%左右(P<0.01),NAc及Hip脑区则无明显变化,自然戒断d2、d3、d7组亦未观察到γ-SNAP明显的表达改变。α-SNAP和β-SNAP在吗啡依赖和自然戒断状态下3个被检脑区(NAc、CPu、Hip)均未检测到明显的表达变化。结论慢性吗啡依赖可增加CPu内γ-SNAP的表达,对α-SNAP和β-SNAP的表达没有影响,提示SNAPs 3种亚型在慢性吗啡依赖过程中行使不同的功能,可能与特定神经递质的分泌有关。慢性吗啡依赖及戒断引起的突触前神经递质释放改变可能不是由α-SNAP和β-SNAP表达量变化介导的,其具体机制可能与其内在活性变化或蛋白在细胞内的转位有关。

帕金森病模型大鼠脑内多巴胺与铁含量的关系

实验采用原子吸收分光光度法、快速周期伏安法、高效液相电化学检测等方法 ,研究以 6 羟基多巴( 6 OHDA)制备的帕金森病 (PD)模型大鼠黑质内铁含量的变化 ,铁对多巴胺 (DA)能神经元的直接毒性作用以及铁离子螯合剂甲磺酸去铁胺的神经保护作用。结果发现 :( 1)PD大鼠损毁侧黑质内铁含量为非标准PD大鼠的 3倍左右 ;( 2 )PD大鼠损毁侧纹状体内铁含量无明显改变 ;( 3 )单纯注射 6 OHDA的大鼠其损毁侧纹状体 (CPu)DA的释放量和含量均明显降低 ;( 4 )侧脑室预先注射甲磺酸去铁胺 ,再重复上述实验 ,损毁侧CPuDA释放量和含量均无明显改变 ;( 5 )单侧黑质内注射 4 0 μgFeCl3后 ,大鼠损毁侧CPu内DA释放量和含量显著降低。上述结果提示 ,6 OHDA可导致CPuDA释放量及含量减少 ,此过程有铁的参与。由于铁可导致DA神经元死亡 ,因此铁含量的增加可能是DA含量减少的原因之一 。

百可利对6-羟多巴胺不同注射位点帕金森病模型大鼠的治疗作用

目的观察百可利对6-羟多巴胺(6-OHDA)内侧前脑束(MFB)和纹状体尾壳核(CPu)两个不同注射位点帕金森病(PD)模型大鼠的治疗作用,两个注射位点模型分别记为:MFB-M,CPu-M。方法运用6-OHDA两点注射法,损毁大鼠左侧中脑多巴胺能神经元,制备PD模型。记录大鼠后肢肌电(EMG)信号频率观察肌肉震颤;测定大鼠自主活动;电化学法检测纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物含量;免疫组化法检测大鼠脑内酪氨酸羟化酶(TH)、OX-42表达;观察神经元超微结构变化。结果给药3周后,两个注射位点的模型组行为改变趋势一致,百可利在两个注射位点的模型动物上药效表现不同,在CPu-M组可明显提高PD大鼠自主活动数(P<0.05)。EMG信号分析显示,在MFB-M组,给予百可利,肌电频率降低55%;在CPu-M组,给予百可利,肌电频率降低60%。EMG时效研究表明,在CPu-M组,百可利药效持续420 min以上。纹状体递质水平显示,两个注射位点的模型组DA递质水平差异很大,在CPu-M组,百可利能够明显升高DA水平(P<0.05)。两个注射位点的模型组免疫组织化学结果趋势一致,在CPu-M组,百可利有更明显神经元保护作用(P<0.05),在MFB-M组,百可利抑制小胶质细胞过度激活作用更强(P<0.01)。结论不同注射位点制备的PD模型能够反映不同时期PD的病理变化,百可利可通过抑制炎性介质生成和释放、保护残存神经元、恢复神经元功能等机制改善PD不同发病时期模型动物的行为学症状。

双侧壳核内侧区出血致记忆力、计算力减退1例报告

报告1例因双侧大脑壳核内侧区出血导致记忆力、计算力减退的特殊病例。患者3年前突发右侧大脑壳核内侧出血致左侧轻瘫,而无学习、记忆障碍;近来又发生脑出血,影像学检查证实出血部位在左侧大脑壳核内侧,本次除右侧上肢轻瘫外,还伴随近事记忆和记数障碍。这两次脑出血都损伤到脑内与学习记忆有关的新区———边缘区,从临床上证实边缘区参与脑的近事记忆和记数功能。

不同频率电针对大鼠尾壳核头部一氧化氮合酶表达的影响

低频 (2Hz)和高频 (1 2 8Hz)电针大鼠“合谷”穴 ,采用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)法 ,显示不同频率电针对尾壳核头部各区一氧化氮合酶 (NOS)表达的影响。结果表明 ,低频和高频电针均可使尾壳核头部NOS表达增强 。

海马结构、前额皮层或尾-壳核损毁对大鼠空间认知能力的影响

本研究的目的是探讨海马结构(HF)、前额皮层(PFC)和尾-壳核(CP)在大鼠空间认知加工中的作用。实验观察到HP或PFC损毁大鼠Morris迷宫学习或记忆作业成绩显著低于CP损毁组和控制组(CG);HF损毁大鼠主要采用与其它各组不同的“非图类”搜索策略。搜索策略的差异提示:HF和PFC在大鼠图认知加工系统中处于不同的功能层次,HF起相对重要的作用。CP几乎不影响大鼠空间认知能力,表现出哺乳类与鸟类同源结构的功能分化倾向。

原发性失眠患者脑磁共振波谱成像研究

目的研究原发性失眠(primary insomnia,PI)患者不同脑区(丘脑、海马、壳核)代谢特点。材料与方法采用氢质子磁共振波谱成像技术检测38例PI患者(PI组)和39例健康对照者(healthy control,HC)组丘脑、海马区、壳核区的氮-乙酰基天门冬氨酸(N-acetyl-aspartate,NAA)、胆碱复合物(choline-containing compounds,Cho)和肌酸(creatine,Cr)浓度,并计算NAA/Cr和Cho/Cr。采用多导睡眠监测(polysomnography,PSG)技术监测客观睡眠参数;采用神经心理量表匹茨堡睡眠质量指数和睡眠严重程度指数评定所有受试者的主观睡眠质量和失眠严重程度;采用状态-特质焦虑量表(State-Trait Anxiety Inventory,STAI)和贝克抑郁量表(Beck Depression Inventory,BDI)评定受试者的焦虑及抑郁程度。结果(1)代谢物浓度比较:与HC组对比,PI组左侧丘脑Cr、Cho浓度升高(P=0.040,P=0.007),右侧丘脑Cho浓度升高(P=0.039),双侧海马和壳核区的代谢物与对照组相比差异无统计学意义(Pall>0.05)。(2)相关性:PI患者左侧丘脑NAA值与总睡眠时间、睡眠效率呈负相关(r=-0.384,P=0.017),左侧丘脑NAA/Cr值与REM%呈负相关(r=-0.387,P=0.016);右侧丘脑Cho/Cr值与SL%呈正相关(r=0.380,P=0.019),丘脑NAA、Cr、Cho、NAA/Cr、Cho/Cr值与各量表评分未见明显相关。PI患者左侧海马Cho值与ArI呈正相关(r=0.348,P=0.044);右侧海马Cho值(r=-0.334,P=0.047)、Cr值(r=-0.445,P=0.007)与BDI评分呈负相关。PI患者左侧壳核NAA值与N3%呈正相关(r=0.340,P=0.037);左侧壳核Cr值与特质焦虑量表(Trait Anxiety Inventory,TAI)呈正相关(r=0.447,P=0.005);左侧壳核NAA/Cr值与N1%(r=-0.344,P=0.047)、TAI评分(r=-0.521,P=0.001)、状态焦虑量表(State Anxiety Inventory,SAI)评分(r=-0.400,P=0.013)呈负相关;左侧壳核Cho/Cr与TAI评分(r=-0.527,P=0.001)、SAI评分(r=-0.434,P=0.007)呈负相关。组间差异的参数与各量表评分及PSG参数未见明显的相关性。结论PI患者丘脑Cho及Cr代谢紊乱;客观睡眠影响丘脑区域代谢,而患者情绪障碍与海马和壳核区域的代谢有关。

大鼠尾壳核头部一氧化氮合酶阳性神经元区域性分布和脑缺血后变化

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶法 ,观察了大鼠尾壳核头部背内侧区、背外侧区、腹内侧区和腹外侧区一氧化氮合酶阳性神经元的分布和形态特征。并在夹闭双侧颈总动脉 2小时后 ,观察这些区域一氧化氮合酶阳性神经元的变化。结果表明 ,尾壳核头部一氧化氮合酶阳性神经元的分布存在着区域性差异。采用目镜测微尺对尾壳核头部 2 0 0个一氧化氮合酶阳性神经元胞体直径作了测量 ,表明头部主要是胞体直径为 1 0～ 2 0 μm的中等大小细胞。夹闭双侧颈总动脉 2小时后 ,尾壳核头部四个区一氧化氮合酶阳性神经元的密度较稀疏 ,但程度不同。

脑缺血早期大脑皮质和尾壳核一氧化氮合酶神经元的进程变化

目的：探讨一氧化氮合酶神经元在脑缺血早期（２４ ｈ内）的变化规律。方法：ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法。结果：各组间正常侧 ＮＯＳ神经元无明显变化，散在分布于皮质的Ⅱ～ Ⅵ层，以Ⅳ～Ⅵ为主，尾壳核内 ＮＯＳ神经元数量较多，密集分布于外侧区。缺血 １５ ｍｉｎ和 ３０ ｍｉｎ组，缺血中心区皮质和尾壳核 ＮＯＳ神经元数量减少，形态无明显变化；缺血 ｌｈ和 ２ ｈ组，皮质和尾壳核内 ＮＯＳ神经元数量进一步减少，突起变短；缺血 ３ ｈ和 ６ ｈ组，缺血中心区皮质ＮＯＳ神经元数量很少，外观不光滑，突起不清；１２ ｈ和２４ ｈ组缺血中心区ＮＯＳ神经元消失。结论：皮质和尾壳核ＮＯＳ神经元对脑缺血耐受性较差。

不同频率电针对大鼠尾壳核头部一氧化氮合酶表达的影响

目的 研究不同频率电针对大鼠尾壳核头部一氧化氮合酶 (NOS)表达的影响 ,为针灸治疗的广泛应用提供形态学基础。方法 低频 (2Hz)和高频 (12 8Hz)电针大鼠“合谷”穴 ,采用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH -d)法显示NOS表达。结果 2Hz及 12 8Hz电针“合谷”穴组的尾壳核头部NOS阳性神经元均较正常对照组明显增多 (P <0 .0 1) ,12 8Hz电针组的NOS阳性神经元较 2Hz组明显增多 (P <0 .0 1)。结论 2Hz及12 8Hz电针均可使尾壳核头部NOS表达增强 ,NOS表达与电针频率呈正相关。

CD14 mRNA、TLR4 mRNA在急性和亚急性MPTP帕金森病小鼠模型中的表达

目的研究急性和亚急性1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）帕金森病小鼠模型腹侧中脑与纹状体中脂多糖受体CD14 mRNA、TLR4 mRNA的表达。方法腹腔注射MPTP制作急性（20 mg/kg,4次,每次间隔2 h）和亚急性（20 mg/kg,每天1次,共7 d）帕金森病小鼠模型。实验分为4组：正常对照组（8~10周龄小鼠）、中年小鼠组（8月龄）、急性模型组（8~10周龄）、亚急性模型组（8~10周龄）,每组6只C57BL/6小鼠。模型组小鼠在末次注射MPTP 1d后取脑组织。用酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学染色,观察亚急性小鼠模型黑质多巴胺能神经元数目改变情况。用RT-PCR方法检测CD14 mRNA、TLR4 mRNA的表达水平。结果亚急性小鼠模型黑质TH阳性细胞减少。急性和亚急性模型组小鼠黑质与纹状体CD14 mRNA表达水平明显增高,高于正常对照组和中年小鼠组（均P〈0.05）,TLR4mRNA表达各组间没有明显差异（P〉0.05）。结论 CD14 mRNA作为内毒素受体在MPTP帕金森病小鼠表达增高,可能涉及脂多糖介导的免疫反应,从而参与神经损伤和帕金森病病理生理过程,针对CD14的阻断中和处理可能作为一种新的帕金森病治疗措施。

丙酸睾丸酮早期处理对大鼠行为及脑内多巴胺转运体的影响

目的:观察丙酸睾丸酮早期处理对大鼠行为及脑内多巴胺转运体的影响。方法:分别以开放广场实验及免疫组织化学技术观察丙酸睾丸酮处理大鼠行为及脑内多巴胺转运体(DAT)的变化。结果:开放广场实验显示早期注射丙酸睾丸酮可使大鼠活动增多,表现为水平运动、垂直运动、运动的总径长以及清洁动作次数显著增加;免疫组织化学显色结果表明丙酸睾丸酮处理组大鼠黑质和尾壳核DAT免疫反应强度增强,其灰度值显著低于对照组。结论:丙酸睾丸酮早期处理大鼠活动的增加可能与雄激素影响黑质-尾壳核多巴胺能神经体系有关。

磁共振波谱分析在帕金森病早期诊断中的应用研究

目的回顾性分析43例1H-MRS检查的帕金森病病例,探讨1H-MRS对帕金森病的诊断价值。方法以43位临床确诊的原发性帕金森病病人和30位年龄相仿的正常人为研究对象,对纳入的帕金森病患者进行UPDRS评分。对帕金森病患者及正常对照组豆状核进行单体素质子磁共振波谱扫描,获取磁共振波谱信号,计算NAA/Cr、Cho/Cr、NAA/Cho之比值。比较PD患者和正常人之间上述值的差异并进行统计学分析。结果早期帕金森病患者患肢对侧豆状核及中晚期帕金森病患者豆状核NAA/Cr、NAA/Cho较正常对照组明显降低(P<0.05),Cho/Cr比值变化不明显(P>0.05);但随着患者病情加重其豆状核的NAA/Cr、Cho/Cr、NAA/Cho比值变换不明显(P>0.05)。结论1H-MRS对帕金森病早期临床诊断和疾病病理生理研究具有良好前景。

强直电刺激右侧尾壳核对大鼠海马、中部颞叶新皮质电图的影响

目的 :探讨尾壳核 (caudate putamen ,CPu) 海马 (hippocampus,HPC) 中部颞叶新皮质 (Medialtemporallobeneocortex ,MTNC)通路在癫痫相关性病理神经网络重建中的作用。方法 :4 5只SD大鼠。用不锈钢双极同芯电极记录右侧HPC、右侧MTNC、左、右侧HPC、右侧HPC和右侧MTNC深部电图 ,重复强直电刺激 (6 0Hz ,2s,0 .4～0 .6mA)大鼠右侧CPu 10次 ,每次刺激间隔时间约 10min ,观察上述脑区深部电图的改变。结果 :强直电刺激右侧CPu可以诱发植入电极同侧或双侧HPC出现原发性后放和继发性电图癫痫样点燃效应 ,也可以表现为HPC深部电图脑电波出现压抑 反弹 癫痫样点燃发作 ;诱发同侧HPC与MTNC出现部分同步性阵发癫痫样电活动 ;腹腔注射东莨菪碱 (0 .0 5mg/kg)后 ,重复上述电刺激右侧CPu实验 ,可以诱发双侧HPC电图出现 3Hz慢波电振荡长时程增强现象 ,也可以诱发同侧HPC与MTNC出现完全同步的阵发性癫痫样电活动。结论 :过度激活CPu功能可以促进CPu HPC MTNC通路癫痫相关性病理生理性神经网络重新的建立 ,该效应累及对侧大脑半球 。

伽玛刀照射大鼠前脑时小胶质细胞的反应

目的 本研究以小胶质细胞作为中枢神经系统对损伤反应和免疫防护的一种标志 ,在伽玛刀治疗仪中用不同剂量的伽玛射线照射正常大鼠前脑一侧尾壳核 ,探讨小胶质细胞与射线损伤的剂量 -效应关系 ,为伽玛刀的治疗剂量选择提供依据 .方法 以 OX42抗体作为检测小胶质细胞的标志 ,用免疫组织化学方法观察小胶质细胞在照射靶区及其周围组织的形态和数量变化 .结果 1低剂量 (10～ 30 Gy)射线照射时 ,小胶质细胞数目在照射侧增加 ,而对侧各组织阳性细胞数较少 ;2中剂量 (4 0～ 6 0 Gy)照射时 ,照射靶区 (尾壳核 )阳性细胞数目减少 ,且靶区及其周围组织出现活化小胶质细胞即胞体变大 ,形态多样 ,突起变短、少 ;3大剂量 (70～ 10 0 Gy)照射时 ,照射靶区出现坏死空洞 ,该空洞随剂量加大而增大 ,靶区及其周围组织水肿 ,且小胶质细胞变为吞噬细胞状并且胞体内可见吞噬颗粒 ,对侧脑中阳性细胞数目增多但形态上仍多为分枝状小胶质细胞 .结论 以上结果表明小胶质细胞是中枢神经系统损伤的敏感指标 ;靶区的损伤程度与照射剂量成正相关 ;

大鼠尾壳核内注射μ或δ型阿片受体激动剂对操作式条件反射的影响

通过微计算机,训练大鼠建立巩固的操作式防御性条件反射。尾壳核(CPU)内埋置套管后,进行微量注射阿片受体激动剂和条件反射测验。吗啡、亮氨酸脑啡肽或DAGO分别注于CPU后30min或2h,均引起条件反应率(CR)显著下降或伴有潜伏期(L)延长。稍大剂量的DPDPE亦导致CR下降,L无明显变化。以上药物对动物自发活动无影响。结果提示,尾壳核内注射μ或δ型阿片受体激动剂都抑制已巩固的条件反射的再现。