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乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠模型的生物学特性及病理学研究 被引量:7
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作者 佘锦雯 亓翠玲 +6 位作者 杨永霞 张敏 唐富天 吴晓云 张希敏 王尽淘 王丽京 《广东药学院学报》 CAS 2011年第2期178-182,共5页
目的研究乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠的生物学特性及病理学改变。方法 MMTV-PyMT小鼠饲养于SPF级环境中,观察小鼠的繁育情况。观察小鼠乳腺癌的数目、体积及生存率,研究MMTV-PyMT小鼠乳腺癌的生物学特性。通过组织病理学切片,观察MMTV-P... 目的研究乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠的生物学特性及病理学改变。方法 MMTV-PyMT小鼠饲养于SPF级环境中,观察小鼠的繁育情况。观察小鼠乳腺癌的数目、体积及生存率,研究MMTV-PyMT小鼠乳腺癌的生物学特性。通过组织病理学切片,观察MMTV-PyMT小鼠乳腺癌的病理学变化、肺转移情况、细胞增殖和血管形成情况。结果乳腺癌MMTV-PyMT小鼠已经成功繁育9代,共产仔约400只。小鼠乳腺9周即可触摸到肿瘤,并随着周龄的增加,肿瘤的数目逐渐增加,体积逐渐增大,最多可达10个;大部分11周出现肺转移;通常最长生存时间为15周。乳腺癌MMTV-PyMT小鼠为浸润性导管癌,PCNA免疫组化结果显示乳腺癌有较多的增殖细胞;vWF结果表明乳腺癌有明显的新生血管。结论乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠已被成功保种和扩群,可稳定自发性乳腺癌,其生物学特性和病理学改变与人乳腺癌相近,可作为研究乳腺癌发生发展的经典动物模型。 展开更多
关键词 乳腺癌 MMTV-pymt转基因小鼠 动物模型 生物学特征 病理学改变
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不同性别PyMT自发性乳腺癌小鼠成瘤特点和不同时间肺转移观察 被引量:1
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作者 郎佳丽 金璐 +4 位作者 邵霞 曹贝贝 严楷蕾 傅惠英 寿旗扬 《浙江中医药大学学报》 CAS 2019年第11期1207-1212,1226,共7页
[目的]研究不同性别自发性乳腺癌小鼠乳腺肿瘤病毒启动子(mouse mammary tumor virus,MMTV)控制下表达多瘤中间T抗原(polyoma middle T-antigen,Py MT)的转基因小鼠的致瘤特性,再以雌性小鼠为观察对象进一步研究血常规指标变化及肺转移... [目的]研究不同性别自发性乳腺癌小鼠乳腺肿瘤病毒启动子(mouse mammary tumor virus,MMTV)控制下表达多瘤中间T抗原(polyoma middle T-antigen,Py MT)的转基因小鼠的致瘤特性,再以雌性小鼠为观察对象进一步研究血常规指标变化及肺转移情况等。[方法]准备同为8周龄的Py MT雌性小鼠和Py MT雄性小鼠,观察比较雌性与雄性小鼠肿瘤发病时间、生存时间与生存率;另取同为8周龄的雌性Py MT和雌性FVB小鼠,观察8周后取血进行血常规检测,并通过病理切片观察小鼠12周龄及16周龄时肺组织的病理变化。[结果]每周观测小鼠的形态学特征可发现雌鼠第8周可扪及肿瘤,而雄鼠则在第18周可扪及肿瘤;雌鼠最长生存时间是19周,雄鼠则为46周,即雌性小鼠肿瘤发病时间早于雄性小鼠,生存时间明显短于雄性小鼠。血常规指标检测显示,雌性Py MT小鼠白细胞及亚群(除单核外)数量明显高于FVB小鼠(P<0.05,P<0.001);雌性Py MT小鼠在12周龄开始出现肺转移,肺部大量炎症细胞浸润,16周时肺组织伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色发现明显的肺转移,出现弥漫性分布、大小不等、质实、染色深的癌巢,细胞间推挤或重叠,细胞大小形态不同。[结论]MMTV-PyMT自发性乳腺癌小鼠雌鼠发病比雄鼠早,生存时间短,具有实验周期短、便于观察肿瘤发生的优势,12周龄开始出现肺转移,16周龄肺转移明显,是适合用于筛选抑制肿瘤细胞浸润、转移等药物的乳腺癌动物模型。本实验还通过血常规结果、肺转移情况数据为实验动物性别的选择提供参考。 展开更多
关键词 pymt小鼠 乳腺癌 肿瘤生长 肺转移 肿瘤细胞
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云南红梨PyMT基因的克隆、原核表达和功能分析
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作者 樊磊 张晓东 +3 位作者 陈丽梅 苏俊 舒群 李昆志 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第6期485-492,共8页
金属硫蛋白(metallothioneins,MTs)是一种在生物中普遍存在的多功能蛋白.根据云红梨1号光特异性差减文库中获得的PyMT(Pyrus pyrifolia metallothionein)基因序列,PCR扩增4种红梨PyMT的基因组序列并进行序列分析;通过RT-PCR方法从云红梨... 金属硫蛋白(metallothioneins,MTs)是一种在生物中普遍存在的多功能蛋白.根据云红梨1号光特异性差减文库中获得的PyMT(Pyrus pyrifolia metallothionein)基因序列,PCR扩增4种红梨PyMT的基因组序列并进行序列分析;通过RT-PCR方法从云红梨1号果皮中扩增出PyMT基因,并将其命名为PyMT1(Pyrus pyrifo-lia metallothionein 1).构建原核表达载体pGEX-4T-1-PyMT1,在E.coli BL21中进行表达;通过在液体培养基中添加不同浓度的重金属离子,检测转化菌和对照菌的的生长曲线,分析PyMT1的功能.序列分析表明,PyMT1是典型的Metallothion 2.PyMT1氨基酸序列系统发育分析表明,PyMT1与MdMT亲缘关系最近.SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期的大小一致;生长曲线结果表明工程菌对重金属离子Zn、Cu、Cd具有一定的耐受性.这些结果为进一步纯化、鉴定目的蛋白和研究其结构和功能奠定了基础. 展开更多
关键词 云南红梨 pymt 序列分析 原核表达 重金属抗性
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MMTV-PyMT乳腺癌小鼠模型肿瘤发生的特点
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作者 姚祥龙 杨帅 +6 位作者 陈芳慧 盛乐 赵曼 阮健 鲁山 李君 蔡亚非 《安徽师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第4期348-351,355,共5页
以MMTV-PyMT乳腺癌小鼠模型为对象,研究其肿瘤发生特点。观察MMTV-PyMT转基因小鼠,记录乳腺癌小鼠肿瘤的发病时间、发生位置以及肿瘤小鼠的生存时间,并且通过病理学切片观察不同时间段乳腺癌的病理变化。大多数MMTV-PyMT雌性小鼠在出生... 以MMTV-PyMT乳腺癌小鼠模型为对象,研究其肿瘤发生特点。观察MMTV-PyMT转基因小鼠,记录乳腺癌小鼠肿瘤的发病时间、发生位置以及肿瘤小鼠的生存时间,并且通过病理学切片观察不同时间段乳腺癌的病理变化。大多数MMTV-PyMT雌性小鼠在出生后的第8周开始发生肿瘤,而雄性小鼠在第19周左右产生肿瘤;雌鼠自发产生肿瘤后最长生存时间为12周,而雄鼠则为28周。不同时间段的MMTV-PyMT雌性小鼠乳腺肿瘤染伊红染色结果有着明显的区别,早期肿瘤均为浸润性导管癌,随着癌症的发展,癌细胞开始突破基底膜,癌细胞扩散至整个乳腺组织中,整体呈现出弥漫性分布、癌巢着色较深,细胞间推挤或重叠。MMTV-PyMT自发性乳腺癌小鼠雌性小鼠和雄性小鼠均可发生乳腺癌,雌性小鼠具有发病时间早,生存时间短,肿瘤时期变化明显等特点。 展开更多
关键词 乳腺癌小鼠 肿瘤发生 MMTV-pymt
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CLCN3/MMTV-PyMT转基因小鼠杂交群体的建立及鉴定
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作者 邓璐璐 李琴 +2 位作者 吴慧 毛建文 徐彬 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第6期17-21,I0010,共6页
目的建立并鉴定CLCN3/MMTV-Py MT双转基因小鼠杂交群体,构建氯通道Cl C-3过表达的自发乳腺肿瘤转基因小鼠模型。方法将CLCN3转基因小鼠和MMTV-Py MT转基因小鼠分别进行繁殖,选取阳性子代鼠进行配对,培育杂交后代,然后通过PCR鉴定基因型... 目的建立并鉴定CLCN3/MMTV-Py MT双转基因小鼠杂交群体,构建氯通道Cl C-3过表达的自发乳腺肿瘤转基因小鼠模型。方法将CLCN3转基因小鼠和MMTV-Py MT转基因小鼠分别进行繁殖,选取阳性子代鼠进行配对,培育杂交后代,然后通过PCR鉴定基因型、通过组织免疫荧光方法、Western blot检测转基因小鼠蛋白表达情况。结果成功繁育CLCN3转基因小鼠和MMTV-Py MT转基因小鼠,经PCR鉴定成功构建CLCN3/MMTV-Py MT双转基因鼠杂交群体,并成功保种和扩群,经组织免疫荧光和Western-blot分析双转基因小鼠的Cl C-3蛋白的表达高于MMTV-Py MT转基因小鼠。结论成功构建Cl C-3过表达的自发乳腺肿瘤转基因小鼠模型,为进一步研究Cl C-3在肿瘤生长和转移中的功能提供了良好的动物模型。 展开更多
关键词 CLCN3 MMTV-Py MT 转基因小鼠 乳腺癌
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金花茶提取物对MMTV-PyMT转基因小鼠自发乳腺癌的预防作用研究 被引量:5
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作者 侯晓莹 杜鸿志 +5 位作者 伍瑶 黄悦 冯书云 全兴萍 袁胜涛 孙立 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第33期6417-6421,共5页
目的:考察金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对MMTV-Py MT转基因小鼠乳腺癌发生的实验预防作用。方法:MTT法检测金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对人乳腺癌细胞SKBR-3的体外增殖抑制作用;采用MMTV-Py MT转基因自发乳腺癌小鼠模型观察金花茶二... 目的:考察金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对MMTV-Py MT转基因小鼠乳腺癌发生的实验预防作用。方法:MTT法检测金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对人乳腺癌细胞SKBR-3的体外增殖抑制作用;采用MMTV-Py MT转基因自发乳腺癌小鼠模型观察金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对小鼠体内肿瘤发生的预防作用。结果:金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对人乳腺癌细胞SKBR-3有显著地体外增殖抑制作用,其IC50为419.0±12.87μg/m L;转基因小鼠动物模型中,金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对小鼠肿瘤的发生和发展均有显著地抑制作用;模型组小鼠肿瘤平均发生数量为5.25个/只,给药组为3.75个/只;模型组组小鼠平均瘤重为0.47 g/只,给药组0.24 g/只。结论:金花茶二氯甲烷乙酸乙酯提取物对MMTV-Py MT转基因小鼠乳腺癌的发生有一定的预防作用。 展开更多
关键词 金花茶 乳腺癌 MMTV-pymt转基因小鼠 肿瘤预防
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金蓉颗粒通过雌二醇/活性氧簇/核转录因子E2相关因子2通路抑制乳腺癌进程的机制研究
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作者 李东梅 陈青青 +4 位作者 陈丹丹 韦任雄 周若鹏 林毅 陈前军 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第2期428-437,共10页
【目的】观察金蓉颗粒(原名消癖颗粒,由淫羊藿、肉苁蓉、郁金等组成)对MMTV-PyMT小鼠乳腺癌发生与转移的影响及对雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的调控作用。【方法】选取MMTV-PyMT自发乳腺癌转基因小鼠模... 【目的】观察金蓉颗粒(原名消癖颗粒,由淫羊藿、肉苁蓉、郁金等组成)对MMTV-PyMT小鼠乳腺癌发生与转移的影响及对雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的调控作用。【方法】选取MMTV-PyMT自发乳腺癌转基因小鼠模型,分为模型组(生理盐水灌胃)、金蓉颗粒组(0.5 mg/kg金蓉颗粒混悬液灌胃),共给药12周。给药结束后,观察2组小鼠原发肿瘤大小及肺转移情况,检测血清中E2、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)、ROS的水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察乳腺肿瘤组织病理学改变,免疫组织化学法检测乳腺肿瘤组织中层黏连蛋白(Laminin)、Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平,聚合酶链反应(PCR)法检测乳腺肿瘤组织中Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达水平。【结果】与模型组比较,金蓉颗粒组小鼠乳腺肿瘤生长及肺转移被明显抑制,血清E2、ROS和8-OHdG水平明显降低,SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC水平明显升高(均P<0.05),乳腺肿瘤组织中Laminin表达水平显著降低,Nrf2及下游NQO1、HO-1的蛋白和mRNA表达水平升高(均P<0.05)。【结论】金蓉颗粒可抑制小鼠乳腺癌生长及肺转移,其机制可能与激活E2/ROS/Nrf2通路有关。 展开更多
关键词 金蓉颗粒 乳腺癌 雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)通路 氧化损伤 MMTV-pymt小鼠
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多瘤病毒MT基因真核表达载体的构建 被引量:1
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作者 何三纲 赵怡芳 贾俊 《口腔医学纵横》 CSCD 2001年第1期15-16,共2页
目的 :构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核细胞表达载体。方法 :从野生型多瘤病毒上取其nt46 32至nt15 6 0片段克隆到pUC19上 ,再将该片段定点插入 pEGFP1的HindⅢ和EcoRI位点间 ,构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核表达载体 pPyMT GFP。经线... 目的 :构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核细胞表达载体。方法 :从野生型多瘤病毒上取其nt46 32至nt15 6 0片段克隆到pUC19上 ,再将该片段定点插入 pEGFP1的HindⅢ和EcoRI位点间 ,构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核表达载体 pPyMT GFP。经线性化 ,将重组体导入鼠皮肤成纤维细胞中 ,G418选择培养 ,得到抗性细胞克隆。结果 :构建的pPyMT GFP质粒在鼠成纤维细胞中有稳定表达。 结论 :来源于野生型多瘤病毒的PyMT基因在哺乳动物细胞中有稳定表达 ,其真核表达载体 pPyMT 展开更多
关键词 多瘤病毒MT基因 真核表达 血管瘤
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IL-25 blockade inhibits metastasis in breasl cancer 被引量:4
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作者 Zhujun Jiang Jingtao Chen +3 位作者 Xuemei Du Hang Cheng Xiaohu Wang Chen Dong 《Protein & Cell》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期191-201,共11页
Metastasis is the leading cause of death in breast cancer patients. However, the mechanisms underlying metasta- sis are not well understood and there is no effective treatment in the clinic. Here, we demonstrate that ... Metastasis is the leading cause of death in breast cancer patients. However, the mechanisms underlying metasta- sis are not well understood and there is no effective treatment in the clinic. Here, we demonstrate that in MMTV- PyMT, a highly malignant spontaneous breast tumor model, IL-25 (also called IL-17E) was expressed by tumor- infiltrating CD4+ T cells and macrophages. An IL-25 neu- tralization antibody, while not affecting primary tumor growth, substantially reduced lung metastasis. Inhibition of IL-25 resulted in decreased type 2 T cells and macro- phages in the primary tumor microenvironments, both reported to enhance breast tumor invasion and subse- quent metastasis to the lung. Taken together, our data suggest IL-25 blockade as a novel treatment for metastatic breast tumor. 展开更多
关键词 IL-25 breast cancer METASTASIS MMTV-pymt
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