石韦对小鼠免疫功能及异基因皮片移植排斥的抑制作用

目的研究石韦对小鼠免疫功能和同种异基因皮片移植的影响。方法分别给小鼠灌胃高、中、低3个剂量石韦水煎液,研究其对正常小鼠和由左旋咪唑引起的免疫亢奋模型小鼠脾脏重量指数、巨噬细胞的吞噬活性、淋巴细胞转化、IgM分泌量的影响;观察石韦对小鼠同种异基因皮片移植的影响。结果石韦可抑制正常小鼠巨噬细胞吞噬活性、T淋巴细胞转化率和IgM的分泌量(P<0.05)。3个剂量的石韦均可调节免疫亢奋小鼠脾脏重量指数、巨噬细胞吞噬活性、T淋巴细胞转化率恢复至正常水平,中剂量组可以显著降低IgM的分泌量至正常水平。小鼠移植皮片的存活时间:石韦低剂量组为(16.13±1.13)d,中剂量组为(15.62±1.01)d,高剂量组为(14.89±2.01)d,显著长于对照组的(9.75±0.89)d。结论石韦可抑制正常小鼠的免疫功能,调节免疫亢奋小鼠免疫功能恢复至正常水平,减轻机体对同种异基因皮片移植的排斥反应。

石韦孢子叶和营养叶中活性成分含量分析

对石韦孢子叶和营养叶中的多糖、总黄酮和总皂甙含量进行测定和分析。结果表明:(1)孢子叶中活性成分含量的高低顺序为总黄酮>多糖>总皂甙,其中,总黄酮与多糖和总皂甙含量的差异均达到极显著水平(P<0.01),而多糖与总皂甙含量的差异则不显著(P>0.05);营养叶则是多糖>总黄酮>总皂甙,且各活性成分含量间的差异均达到极显著水平(P<0.01)。(2)孢子叶与营养叶相比,多糖和总黄酮含量的差异均达到极显著水平(P<0.01),而总皂甙含量的差异不显著(P>0.05)。其中,多糖含量是营养叶高于孢子叶,而总黄酮含量则是孢子叶高于营养叶。(3)石韦叶片中多糖含量与总黄酮含量间存在极显著的负相关关系(P<0.01),而总皂甙含量与多糖和总黄酮含量的相关性均未达到显著水平(P>0.05)。

HPLC法同时测定石韦药材中绿原酸、芒果苷和木犀草素的质量浓度

建立了一种反相高效液相色谱法,同时分离石韦药材中绿原酸、芒果苷和木犀草素,并测定其质量浓度.采用超声优化提取石韦的有效成分：Phenomenex Gemini 5μm C18（150×4.6 mm,5μm）色谱柱,甲醇-冰乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min;并用波长程序进行检测,柱温35℃,外标法定量.结果表明,绿原酸、芒果苷、木犀草素的线性范围分别为0.084-40.00,0.084-40.00,0.084-13.33μg/mL（R〉0.999）,平均回收率为96.3%~97.8%,相对标准偏差小于2.16%.

HPLC同时测定石韦中绿原酸、槲皮素和山柰酚含量

目的：建立高效液相色谱法同时分离测定石韦中绿原酸、槲皮素、山柰酚3种有效成分的方法。方法采用Phenomenex C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）；以甲醇-乙酸（pH＝3.0）作为流动相,梯度洗脱；流速：1.0 mL/min；紫外检测波长：254 nm；柱温：35℃。结果绿原酸、槲皮素、山柰酚分别在0.00024～3.00μg（r＝0.9999）、0.00016～2.00μg（r＝0.9999）、0.00016～2.00μg（r＝0.9999）范围内呈良好的线性关系,最低检测限（S/N＝3）依次为3.29、0.43、0.33 ng/mL,平均回收率分别为97.73%、98.07%、96.92%。结论本方法操作简单、准确、灵敏度高,为石韦中绿原酸、槲皮素、山柰酚的测定及分离提供了依据。

不同因素对石韦孢子萌发及生长的影响

以石韦孢子为外植体,研究不同蔗糖浓度、生长调节剂和培养基等对石韦孢子萌发生长的影响。结果表明,1%～2%蔗糖有利于孢子的萌发生长,萌发率达80%以上;无机盐浓度较低的1/8MS和Knop,s培养基较利于孢子的萌发,萌发时间仅为6d,萌发率分别为83.2%、84.1%;在培养基中加入1.0mg/L NAA、0.5mg/L 6-BA,可以缩短孢子萌发时间,并获得最高的萌发率。此外,1/2MS培养基比较适合原叶体的增殖;以河沙为基质的不完全培养基比较适合孢子体诱导,诱导率达90%以上。

HPLC法测定石韦中木犀草素的含量

目的：用高效液相色谱法测定石韦中木犀草素的含量。方法：采用Shimadzu C_(18)柱(150mm×4．6mm,5μm),流动相为甲醇-0．2%H_3PO_4溶液(50：50),流速1．0mL/min,检测波长254nm,柱温室温,用外标法定量,测定石韦中木犀草素的含量。结果：木犀草素的线性范围0．0325～0．391μg,r=0．9999,回收率95．85%,RSD为0．27%。结论：该方法简便,快速,线性关系良好,适合作为石韦中木犀草素含量测定的方法。

石韦孢子叶片组织化学定位

利用冰冻切片法和徒手切片对石韦(Pyrrosia lingua)新鲜叶片中的蒽琨类化合物、皂苷类化合物及多糖进行组织化学定位研究。结果表明:蒽琨类化合物主要积累在叶片的栅栏组织中;表皮毛、海绵组织和韧皮部也有蒽琨类化合物,木质部和表皮无明显显色反应。皂苷类化合物也主要积累在叶片的栅栏组织中;表皮毛、海绵组织、薄壁组织和韧皮部中也有少量皂苷类化合物,木质部无明显显色反应。厚角组织中蒽琨类物质含量比皂苷类物质含量高;多糖普遍存在于石韦叶肉中,维管束、薄壁组织和表皮有少量分布。

前列通方治疗慢性非细菌性前列腺炎23例

目的观察前列通方治疗慢性非细菌性前列腺炎的临床疗效。方法 46例慢性非细菌性前列腺炎患者随机分为治疗组和对照组,各23例,治疗组予中药前列通方(刘寄奴、石韦、柴胡、黄芩、半夏、马鞭草、冬葵子等)口服,对照组予普适泰片(1片/次,2次/d),疗程1个月,观察临床疗效及慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)积分、前列腺液(EPS)常规检查等指标变化情况。结果治疗组临床总有效率为78.26%,与对照组82.61%比较,无统计学意义;治疗后NIH-CPSI和EPS积分均较对照组明显降低(P<0.05)。结论前列通方能有效改善慢性非细菌性前列腺炎患者疼痛或不适感及排尿异常,提高生活质量。

黔产石韦的化学成分

为进一步了解黔产石韦的化学成分,采用硅胶柱色谱和结晶等方法对黔产石韦的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果显示:从90%乙醇回流提取物中分离得到7个化合物,分别鉴定为Hop-22(29)-ene(1)、胡萝卜苷(2)、β-谷甾醇(3)、芒果苷(4)、三月桂酸甘油酯(5)、邻苯二甲酸二(2-甲基己基)酯(6)、十六烷酸(7)。其中化合物(1)、(5)、(6)首次从该属植物中分离得到。

石韦、庐山石韦和毡毛石韦不同浸提物的红外光谱特征比较分析

采用傅立叶变换红外光谱(FTIR)技术对石韦,庐山石韦和毡毛石韦不同浸提物中的化学成分进行研究,明确了三种石韦的主要化学成分在不同浸出物的分布情况,本实验稳定可靠,简单可行,为石韦有效成分的研究及其提取提供依据。

石韦叶斑病病原鉴定

对采自广西大化县的石韦叶斑病病原进行分离鉴定和生物学测定。结果表明,引起该病的病原为胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides （Penz.） Sacc.]。病害叶部症状初为凹陷的小斑点,后扩展成近圆形、椭圆形或不规则形;病斑中部褐色,病斑外缘可见黄色晕圈。该菌菌丝生长、分生孢子产生和分生孢子萌发的温度范围均为15~35℃,最适温度为30℃,在pH 3~10的范围内该菌均能生长,最适pH 6,分生孢子致死温度为50℃10 min。光照处理对该菌生长发育无显著影响。分生孢子在饱和湿度或水滴中萌发率最高,在相对湿度低于90%时不能萌发。菌丝生长的最适碳、氮源分别为D-果糖、葡萄糖、甘露醇和硝酸钾,分生孢子形成最适碳、氮源分别是甘露醇、可溶性淀粉和大豆粉。

石韦配子体发育的观察

通过人工培养,记录了石韦(Pyrrosialingua)配子体发育的详细过程。孢子单裂缝,两侧对称,表面有瘤状突起;丝状体一般为2～4个细胞;幼原叶体为偏心形,成熟原叶体心形;片状体时期出现毛状体,原叶体发育类型为三叉蕨型;毛状体着生基细胞形态多样;约60d性器成熟。

响应面法优化石韦总多酚提取工艺及抗氧化活性研究

目的优选石韦总多酚的提取工艺并初步探讨其抗氧化活性。方法以总多酚提取量为指标,在单因素实验基础上,采用响应面法对影响其得率的乙醇体积分数、提取时间、料液比进行优化,同时考察其体外抗氧化活性。结果最佳提取工艺为乙醇体积分数60%,提取时间40 min,料液比1∶16,最大提取量31.01 mg·g-1,结果与模型预测值相符。体外抗氧化活性研究表明,石韦总多酚具有较强的总抗氧化能力和还原能力,以及清除DPPH自由基的能力。结论该优选工艺方便、快捷、高效;石韦总多酚抗氧化能力显著,为其进一步开发利用提供了理论基础。

石韦的抗病毒黄酮部位及有效化学成分

目的:探究石韦的黄酮部位的抗病毒效果,并分析其有效成分.方法:采用标准病毒株或临床分离病毒株进行活性检测,通过观察病毒致细胞病变效应的发生率,计算黄酮部分抑毒指数TI,评价其抗病毒活性,并用HPLC-MS分析有效成分.结果:体积分数为30%的乙醇洗脱的石韦黄酮部位对肠道EV-71病毒抑制效果最好,用HPLC-MS分析体积分数为30%的乙醇洗脱石韦总黄酮部位的15个成分,其中3个酚酸类成分,12个黄酮类成分.结论:石韦黄酮部位有显著的抗病毒效果,可能是一种潜在的具有开发性的抗病毒药物.

广西产石韦和柔软石韦抗炎镇痛作用研究

目的:比较广西产石韦和柔软石韦的抗炎镇痛疗效。方法:雄性昆明种小鼠80只,随机分为8组:模型组(蒸馏水),阳性对照组(地塞米松0.01mg/kg),石韦及柔软石韦给药高(40g生药/kg)、中(20g生药/kg)、低(10g生药/kg)剂量组,每组10只,各组小鼠灌胃给药,每天1次,连续7d,于末次给药后30min,采用巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀及对角叉菜胶致足趾肿胀方法,观察石韦和柔软石韦对小鼠耳廓肿胀及对角叉菜胶致足趾肿胀的影响;雌性及雌雄并用昆明种小鼠80只,随机分为8组:空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(阿司匹林0.2g/kg),石韦及柔软石韦给药高、中、低剂量组,给药方法同上,于末次给药后30min,采用小鼠热板试验和醋酸扭体试验方法,观察石韦和柔软石韦对小鼠热板痛阈和扭体次数的影响。结果:与模型组比较,石韦和柔软石韦高、中剂量组均可明显减轻小鼠耳廓肿胀度和足趾肿胀度(P<0.01或P<0.05)。石韦和柔软石韦比较,石韦高、中剂量组明显减轻足趾肿胀度(P<0.01),石韦中剂量组明显减轻小鼠耳廓肿胀度(P<0.05);与空白对照组比较,石韦和柔软石韦高、中剂量组的痛阈值和痛阈提高百分率均有明显的提高(P<0.01或P<0.05),石韦和柔软石韦高、中、低剂量组明显减少小鼠扭体次数(P<0.01或P<0.05)。石韦和柔软石韦比较,石韦高、中剂量组明显提高小鼠热板痛阈值(P<0.01),石韦和柔软石韦对小鼠扭体次数无明显差异(P>0.05)。结论:石韦和柔软石韦均有明显的抗炎镇痛作用,石韦的抗炎镇痛作用强于柔软石韦。

石韦提取物抗氧化及抑制亚硝化作用研究

研究石韦不同溶剂提取物的总酚、总黄酮含量和抗氧化及抑制亚硝化活性,并分析其相关性。采用福林酚比色法和硝酸铝络合分光光度法分别测定各提取物中总酚、总黄酮的含量,以DPPH法、ABTS法和普鲁士蓝法分别测定各提取物的自由基清除能力和铁离子还原力,采用盐酸萘乙二胺法和α-萘胺法分别测定石韦各提取物对亚硝酸盐的清除率和对亚硝胺合成的阻断率,采用Pearson法分析总酚、总黄酮含量与抗氧化及抑制亚硝化活性的相关性。结果表明:石韦不同溶剂提取物的总酚和总黄酮含量存在显著性差异,其中正丁醇提取物的总酚、总黄酮含量均最高,分别为29.85±2.15和37.23±2.41 mg/g。各提取物均具有较强的抗氧化和抑制亚硝化活性,以正丁醇提取物的效果最显著,其DPPH自由基清除能力(IC50=44.14±1.21μg/mL)、ABTS自由基清除能力(IC50=97.47±12.10μg/mL)和还原能力(822.08±24.82μmoL Vc/g),以及对亚硝酸盐的清除能力(IC50=7.071±0.231 mg/mL)、对亚硝胺合成的阻断能力(IC50=15.010±1.224 mg/mL)均最强,并显著强于其他提取物(P<0.05)。相关性研究显示,石韦各提取物的抗氧化活性和抑制亚硝化活性与其总酚和总黄酮含量呈显著正相关(P<0.05),表明总酚类和总黄酮类物质是石韦发挥作用的物质基础。通过对石韦不同提取物的总酚和总黄酮含量的测定、抗氧化和抑制亚硝化作用评价及相关性分析,为石韦的进一步开发利用提供实验数据和参考依据。

石韦化学成分及其生物活性

目的研究石韦Pyrrosia Lingua(Thunb.)Farwell的化学成分及其生物活性。方法石韦85%乙醇提取物采用硅胶柱、D101和Sephadex LH-20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法、琼脂平板打孔法分别测定其抗肿瘤、抗菌活性。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为22,28-epoxyhopane(1)、hop-22(29)-en-28-ol(2)、hopan-28,22-olide(3)、cyclolaudenone(4)、4-(3′,4′-dihydroxyphenyl)-butan-2-one-4′-O-β-D-glucoside(5)、2-hydroxy-4-[(3S)-3-hydroxybutyl]phenyl-β-D-glucopyranoside(6)、β-sitosterol(7)。化合物2~3对Hela细胞有微弱抑制作用;化合物1~2对MCF-7细胞有微弱抑制作用;化合物3对HepG 2细胞有微弱抑制作用。结论化合物3~6为首次从该植物中分离得到,化合物1~3有一定的生物活性。

石韦不同极性萃取物体外降血糖活性研究

为进一步明确石韦对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制作用机制,该研究以石韦95%乙醇提取物的不同极性萃取物为试材,阿卡波糖为阳性对照,采用pNPG法(p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside,pNPG)、DNS法(3,5-dinitro salicylic acid,DNS)考察石韦不同极性萃取物的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性,并采用酶促动力学方法与Lineweaver-Burk曲线分析最强活性萃取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型,以期为石韦的进一步开发利用提供科学依据。结果表明:石韦水萃取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用最强,其IC_(50)值分别为(4.71±0.72)μg·mL^(-1)、IC_(50)=(48.40±0.32)μg·mL^(-1),并显著强于其他萃取物(P<0.05),且对α-葡萄糖苷酶抑制作用比阿卡波糖强,对α-淀粉酶抑制作用弱于阿卡波糖。阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制作用的IC_(50)值分别为(2857.36±1.35)μg·mL^(-1)和(16.41±0.63)μg·mL^(-1)。酶促动力学显示水萃取物对α-葡萄糖苷酶为可逆性抑制,Lineweaver-Burk曲线显示为竞争性抑制。综上结果表明,石韦水萃取物具有较好的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性,是一种胃肠道副作用小、天然α-葡萄糖苷酶抑制剂来源。

石韦的化学成分研究

目的:研究石韦的化学成分。方法:应用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱技术对石韦化学成分进行分离纯化,利用NMR、MS和IR等波谱分析方法进行结构鉴定。结果:从石韦石油醚萃取部位分离得到4个化合物,鉴定为:何帕-22(29)-烯(hop-22(29)-ene)(1),β-谷甾醇(β-sitosterol)(2),胡萝卜苷(daucosterol)(3),山奈酚(kaempferol)(4)。化合物1首次从该植物中分离得到。

石韦对泌尿、代谢、免疫系统疾病的影响

文章简要介绍了石韦的功效、主要成分及药理作用等。从石韦的化学成分,石韦与泌尿系统、代谢系统及免疫系统的关系进行综述,为后期石韦的深入研究提供理论依据。参照已发表文献及本课题组的前期研究结果发现石韦除对水代谢(泌尿)有促进作用之外,对其他代谢性疾病也有治疗潜力,原因可能是石韦对免疫系统的影响,分析表明,石韦对泌尿-代谢-免疫系统的治疗具有整体性、一致性和连贯性的作用。