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Insights into the dwarfing mechanism of pear(Pyrus betulaefolia) based on anatomical and structural analysis using X-ray scanning
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作者 Lili Dong Chuxuan Yang +6 位作者 Jing Wang Jingjing Li Mei Zhao Dingli Li Zhiyun Qiu Chunhui Ma Zhenhua Cui 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第2期355-366,共12页
The lack of a suitable rootstock to control scion growth has limited the development of high-density plantations in pear production, which is partly attributed to poor understanding of the dwarfing mechanism. In the p... The lack of a suitable rootstock to control scion growth has limited the development of high-density plantations in pear production, which is partly attributed to poor understanding of the dwarfing mechanism. In the present study, the rootstock of the dwarf-type pear (Pyrus betulaefolia)PY-9’ was identified and used as the material for anatomical analysis.PY-9’ grew to half the tree height of the normal cultivar Zhengdu’, along with fewer internodes and shorter length. Significant differences in growth rate betweenPY-9’ andZhengdu’ were detected at approximately 30 days after full bloom, which corresponded with the time of the greatest difference in water potential between the dwarf and normal cultivar.PY-9’ showed a higher photosynthetic rate thanZhengdu’. Anatomical analysis showed thatPY-9’ had higher area ratios of both phloem and xylem and more developed vascular tissues thanZhengdu’. The three-dimensional reconstructed skeleton of the xylem from X-ray computed tomography scanning revealed greater intervessel connectivity inZhengdu’ than inPY-9’, which could contribute to the more vigorous growth ofZhengdu’. This study thus provides the first comparison of the microstructural properties of xylem elements between a dwarfing-type and vigorous-type pear rootstock, providing new insights into the dwarfing mechanism in pear and facilitating breeding of dwarf pear rootstocks to increase crop productivity. 展开更多
关键词 pyrus betulaefolia Anatomical analysis Dwarfing mechanism Intervessel connectivity ROOTSTOCK
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杜梨(Pyrus betulifolia Bge.)多糖提取工艺及其清除自由基活性 被引量:4
2
作者 赵小亮 吕友晶 +3 位作者 李苗苗 李广生 王玉峰 于广利 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期276-282,共7页
通过L9(33)正交试验获得杜梨(Pyrus betulaefolia Bge.)多糖最佳提取工艺。在运用紫外光谱、红外光谱及高效液相色谱等方法研究杜梨多糖(PBP)理化性质的基础上,进一步评价了PBP对羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)和1,1-二苯基-2-... 通过L9(33)正交试验获得杜梨(Pyrus betulaefolia Bge.)多糖最佳提取工艺。在运用紫外光谱、红外光谱及高效液相色谱等方法研究杜梨多糖(PBP)理化性质的基础上,进一步评价了PBP对羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)和1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基的清除活性。结果表明,在料液比为1∶15,90℃下提取5h的最优条件下,PBP提取率达到18.65%。多角激光光散射仪分析表明,PBP分子质量为392.9kD。单糖组成分析表明,PBP是由阿拉伯糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为49.54∶28.68∶8.81∶8.45∶4.54。PBP不仅具有清除羟自由基和超氧阴离子自由基活性,对DPPH自由基的清除活性更强。 展开更多
关键词 杜梨 多糖 提取 理化特性 自由基清除活性
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保水剂对杜梨(P. betulaefolia Bge.)生长及生理的影响 被引量:3
3
作者 杨青松 蔺经 +2 位作者 李晓刚 盛宝龙 常有宏 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期63-66,共4页
在盆栽条件下,对保水剂处理的杜梨苗木的生长及生理状况进行比较研究。研究结果表明,在自然生长环境中,3种保水剂用量处理对杜梨苗木生长量依次为T2(50g/盘)、T3(70g/盘),T1(25g/盘),且生长量显著高于对照;而在干旱胁迫... 在盆栽条件下,对保水剂处理的杜梨苗木的生长及生理状况进行比较研究。研究结果表明,在自然生长环境中,3种保水剂用量处理对杜梨苗木生长量依次为T2(50g/盘)、T3(70g/盘),T1(25g/盘),且生长量显著高于对照;而在干旱胁迫条件下,随着保水剂用量增加生长量也增加,且苗木生存期显著延长,比对照显著提高29.7%~58.2%。在干旱胁迫前期,净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)随剂量增加而上升,但达到一定剂量会受水分的胁迫而下降;而在干旱21d时,净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)随剂量增加而上升。 展开更多
关键词 保水剂 杜梨 生长 生理
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接种土著和外源AM真菌对杜梨抗旱性的影响及其适应机制
4
作者 栗晗 江尚焘 +7 位作者 彭海英 李培根 顾长宜 张金莲 陈廷速 徐阳春 沈其荣 董彩霞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期159-172,共14页
【目的】丛枝菌根(AM)真菌可改善植物生长,提高抗环境胁迫能力。筛选对梨苗具有抵御干旱胁迫的AM真菌,为梨菌根化育苗提供理论依据与技术途径。【方法】采用盆栽试验及高通量测序技术,对杜梨苗分别接种梨土著AM真菌层状近明球囊霉(Claro... 【目的】丛枝菌根(AM)真菌可改善植物生长,提高抗环境胁迫能力。筛选对梨苗具有抵御干旱胁迫的AM真菌,为梨菌根化育苗提供理论依据与技术途径。【方法】采用盆栽试验及高通量测序技术,对杜梨苗分别接种梨土著AM真菌层状近明球囊霉(Claroideoglomus lamellosum,Cl)和外源菌株摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae,Fm)、根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices,Ri)及蜜色无梗囊霉(Acaulospora mellea,Am),探究干旱胁迫下单接种土著、外源菌株及混合接种(Mix)处理对杜梨幼苗生长的影响,分析干旱0、3和6周Mix处理下根系及根际土AM真菌群落变化。【结果】正常水分和干旱处理下,单接种梨土著菌株Cl、外源菌株Ri及Mix处理均显著提高株高、茎粗、叶面积、叶片相对含水量,干重增加35.26%—52.20%;地上部磷、钾、钙、镁等元素吸收增强,尤其增加磷的吸收,菌根磷吸收效应最高达1.0以上,而单接种外源菌株Am效果次之,正常供水条件下Fm抑制杜梨幼苗生长。回归性分析表明,菌根生长效应和元素吸收随侵染强度的增加而增加。干旱胁迫下,接种AM真菌显著降低杜梨幼苗叶片丙二醛含量,抗氧化酶活性和脯氨酸含量均有不同程度提高。测序结果显示,与正常水分相比,干旱胁迫下杜梨幼苗根系及根际土AM真菌群落结构发生显著改变,其中外源菌株Ri均占主导,Cl、Am丰度次之,Fm丰度最低,且随干旱胁迫程度增加,根内Ri的丰度显著上升。【结论】接种不同AM真菌对杜梨幼苗具有不同的生长效应,其中梨土著菌株Cl和外源菌株Ri表现出较强的促生和抗旱能力。AM真菌群落中Ri丰度的提高是杜梨幼苗适应干旱胁迫的重要途径。 展开更多
关键词 干旱胁迫 杜梨 丛枝菌根真菌 促生 群落结构
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全基因组DNA甲基化和转录组联合分析鉴定杜梨耐盐相关转录因子
5
作者 李慧 张雨峰 +3 位作者 李晓刚 王中华 蔺经 常有宏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1377-1390,I0004-I0007,共18页
【目的】鉴定不同杜梨株系根中响应盐胁迫信号的相关转录因子,分析盐胁迫下基因序列DNA甲基化变化与基因表达改变之间的关系,探讨参与调控不同杜梨株系耐盐能力的转录因子成员。【方法】以杜梨耐盐株系和普通株系为试材,在苗期使用200 m... 【目的】鉴定不同杜梨株系根中响应盐胁迫信号的相关转录因子,分析盐胁迫下基因序列DNA甲基化变化与基因表达改变之间的关系,探讨参与调控不同杜梨株系耐盐能力的转录因子成员。【方法】以杜梨耐盐株系和普通株系为试材,在苗期使用200 mmol·L^(-1) NaCl对90日龄组培生根苗进行水培处理,以Hoagland营养液为对照。利用火焰石墨炉原子吸收光谱仪测定钠离子含量;利用全基因组DNA甲基化和转录组测序技术从表观遗传修饰和转录调控水平对盐胁迫下转录因子进行生物信息学分析;最后用McrBC-PCR和qPCR对差异转录因子进行验证。【结果】外源NaCl处理24 h后,杜梨植株中钠离子含量显著增加,其中耐盐株系的增加幅度比普通株系小,为普通株系钠含量的73.1%,但根中积累的钠是普通株系含量的1.1倍;杜梨根中检测到69类共2682个转录因子的表达,盐胁迫后243个转录因子在两个株系中都发生了差异表达,包括AP2/ERF(37个)、bHLH(19个)、bZIP(7个)、HD-Zip(10个)、MYB(30个)、NAC(18个)、WRKY(8个)和ZFP(23个)等家族成员;盐胁迫后,耐盐株系基因组中转录因子甲基化水平下降,而普通株系转录因子甲基化水平上升,其发生DNA差异甲基化区域主要在基因启动子位置,差异甲基化类型主要为mCHH,占mCG、mCHG、mCHH三种类型总和的93%以上。AP2/ERF、bHLH、DREB、GRAS、GT因子、HB Zip、MYB、NAC、Trihelix和Zinc finger ZFP家族的23个转录因子响应盐胁迫表达量上调而甲基化水平降低,可能参与调节钠在根中的吸收和积累。对部分候选基因的表达模式和启动子区域分别进行实时荧光定量(qPCR)和甲基化依赖型限制性内切酶PCR(McrBC-PCR),验证了生物信息学分析结果。【结论】盐胁迫后在两个杜梨株系根中均差异表达的转录因子数目为243个,其中8个转录因子(PbERF2、PbGT3、PbZAT10.1、PbSCL33、PbDREB1、PbZAT10.2、PbERF53、PbNAC72)DNA序列的甲基化改变与基因转录水平变化呈负相关,研究结果为揭示转录因子参与不同杜梨株系耐盐能力调控的分子机制提供了依据。 展开更多
关键词 杜梨 盐胁迫 转录因子 DNA甲基化 转录组
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秋水仙素对杜梨四倍体的诱导及鉴定
6
作者 路斌 徐宁伟 +4 位作者 李娟娟 王琦 栗浩 于晓跃 路丙社 《河北科技师范学院学报》 CAS 2023年第4期37-42,共6页
为探明秋水仙素诱导杜梨四倍体的最佳处理组合,本次试验以杜梨萌动种子为材料,研究了不同质量分数秋水仙素处理对杜梨种子的诱变效应,对诱变植株进行了倍性鉴定。结果表明:经质量分数0.5%秋水仙素处理48 h的杜梨种子诱导效果最佳,诱导率... 为探明秋水仙素诱导杜梨四倍体的最佳处理组合,本次试验以杜梨萌动种子为材料,研究了不同质量分数秋水仙素处理对杜梨种子的诱变效应,对诱变植株进行了倍性鉴定。结果表明:经质量分数0.5%秋水仙素处理48 h的杜梨种子诱导效果最佳,诱导率为26.67%。四倍体诱变株染色体数4n=68条,是二倍体植株(2n=34)的2倍;流式细胞仪进一步检测表明,四倍体诱变株叶片细胞DNA数量是二倍体植株的2倍。杜梨四倍体呈现有植株矮化、节间缩短、叶片变大等表型特征,还表现出叶绿素质量分数提高、净光合速率增大等生理特性。 展开更多
关键词 秋水仙素 杜梨 四倍体 倍性鉴定
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杜梨嫩枝扦插影响因素探究 被引量:2
7
作者 王艺衡 李金斗 +6 位作者 李涛 庄梦弟 王鹏飞 张海霞 马辉 张玉星 许建锋 《中国果树》 北大核心 2023年第3期29-34,共6页
为探究杜梨嫩枝扦插的影响因素,筛选出最佳扦插方法,提高其扦插成活率,以杜梨嫩枝为试材,采用单因素试验设计筛选最优插条来源、新梢部段、插条长度和扦插基质,正交试验设计筛选最佳扦插生长调节剂配比。结果表明:连栋温室中采集的杜梨... 为探究杜梨嫩枝扦插的影响因素,筛选出最佳扦插方法,提高其扦插成活率,以杜梨嫩枝为试材,采用单因素试验设计筛选最优插条来源、新梢部段、插条长度和扦插基质,正交试验设计筛选最佳扦插生长调节剂配比。结果表明:连栋温室中采集的杜梨新梢中部段、长10~15 cm的插条更适合杜梨嫩枝扦插;IBA对扦插生根的影响大于NAA和IAA,IBA主要影响生根率和平均根数,NAA和IAA主要影响平均根长;基质湿度和基质配比是影响扦插成活的2个重要因素,其中基质湿度对嫩枝扦插的影响大于基质配比。综上,以长10~15 cm的温室杜梨新梢中部段为插条,在100 mg/L IBA+40 mg/L NAA+10 mg/L IAA中浸泡1 h,再插入河沙∶珍珠岩∶草炭土=1∶2∶2的半干湿基质中,扦插生根率可达70%。 展开更多
关键词 杜梨 嫩枝扦插 生根率
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杜梨养生保健价值浅谈 被引量:4
8
作者 李娜 杨文慧 +4 位作者 王明 张伟巍 易姝利 巩江 倪士峰 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第32期19803-19803,19805,共2页
在广泛进行文献检索基础上,综述了杜梨的种属、成分及养生价值,为全民养生保健提供资料。
关键词 杜梨(pyrus betulaefolia bge) 成分 药理 养生保健
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中国北方野生杜梨分布现状及其形态多样性评价 被引量:21
9
作者 宗宇 孙萍 +1 位作者 牛庆丰 滕元文 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期918-923,I0002,共7页
【目的】为了解中国北方野生杜梨的分布现状并对其进行形态多样性评价,【方法】通过实地调查取样,测定了叶片和果实系列形态指标,评价了野生杜梨居群的龄级结构。【结果】野生杜梨在中国北方主要分布在(32.94~39.74)。N,(107... 【目的】为了解中国北方野生杜梨的分布现状并对其进行形态多样性评价,【方法】通过实地调查取样,测定了叶片和果实系列形态指标,评价了野生杜梨居群的龄级结构。【结果】野生杜梨在中国北方主要分布在(32.94~39.74)。N,(107.54~119.16)。E,海拔47~1545m内,有4个集中分布地域,分别为子午岭、伏牛山、太行山和蒙山。不同地域间野生杜梨的叶片、果实和居群龄级结构差异较大,叶片形态多样性以河南省境内野生杜梨最高,同时其单果质量显著大于其他地域.而甘肃华池和宁县野生杜梨果实的单果质量和横纵径最小。野生杜梨居群主要由胸径为2.5~22.5cm的幼树和立木组成。【结论】综合分析,伏牛山区的野生杜梨居群较之其他居群形态多样性丰富,龄级结构更加多样化;我们建议将资源富集和多样性丰富的华池、舞钢和泗水等地的野生杜梨进行重点保护。 展开更多
关键词 野生杜梨 分布现状 形态多样性
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杜梨铵转运蛋白基因的克隆表达及在梨属植物中的SNP分析 被引量:6
10
作者 丛郁 杨顺瑛 +2 位作者 宋志忠 郝东利 苏彦华 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1942-1950,共9页
利用EST并结合RACE方法从杜梨幼苗克隆获得1个AMT基因(PbAMT1;2).分析显示,PbAMT1;2cDNA全长1 811 bp,开放阅读框为1 515 bp,其对应基因组DNA序列不含内含子.PbAMT1;2编码的蛋白由504个氨基酸组成,具有11个跨膜域,1个N-糖基化位点、3个... 利用EST并结合RACE方法从杜梨幼苗克隆获得1个AMT基因(PbAMT1;2).分析显示,PbAMT1;2cDNA全长1 811 bp,开放阅读框为1 515 bp,其对应基因组DNA序列不含内含子.PbAMT1;2编码的蛋白由504个氨基酸组成,具有11个跨膜域,1个N-糖基化位点、3个酪蛋白激酶磷酸化位点和8个蛋白激酶C磷酸化位点.同源性分析发现,PbAMT1;2与其他植物的AMT具有较高的一致性,其中与百脉根LjAMT1;2的一致性为80.23%,与拟南芥AtAMT1;2的一致性为78.68%,与番茄LeAMT1;2的一致性为77.80%.系统进化树分析表明,PbAMT1;2属于AMT1亚家族.半定量RT-PCR结果显示,PbAMT1;2主要在根部表达,而在茎和叶中几乎没有表达.以杜梨、豆梨、砂梨、白梨、秋子梨和西洋梨等6种梨属植物的DNA为模板,高保真Taq酶PCR扩增AMT1;2基因ORF区DNA序列,发现6种梨属植物的AMT1;2 ORF区DNA序列长度均为1 515 bp,相似性高达99.48%,但在44个核苷酸位点中存在SNPs,导致18个氨基酸位点发生变异,多态性频率为1SNP/34.43 bp,核苷酸变异度为2.9%,氨基酸变异度为3.57%. 展开更多
关键词 杜梨 AMT1 2基因 克隆 梨属植物 单核苷酸多态性
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杜梨果实多糖提取方法及含量测定的研究 被引量:20
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作者 赵小亮 白红进 +2 位作者 汪河滨 周忠波 罗锋 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期279-281,共3页
分别采用超声波-微波协同萃取、微波、水浴及超声波4种方法提取杜梨果实多糖,用蒽酮-硫酸比色法测定多糖的含量。结果表明,4种提取方法存在明显的差异,以超声波-微波协同萃取效果最佳,其后依次是微波、水浴及超声波。4种方法提取下多糖... 分别采用超声波-微波协同萃取、微波、水浴及超声波4种方法提取杜梨果实多糖,用蒽酮-硫酸比色法测定多糖的含量。结果表明,4种提取方法存在明显的差异,以超声波-微波协同萃取效果最佳,其后依次是微波、水浴及超声波。4种方法提取下多糖的含量分别为13.91%、13.56%、12.74%和11.06%,葡萄糖浓度在25.15~100.6μg.mL-1范围内呈现良好的线性关系,平均回收率为100.5%,RSD为1.59%(n=5)。超声-微波协同萃取提取杜梨果实多糖的方法优于微波、水浴及超声波法提取,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量的方法准确,重复性好。 展开更多
关键词 杜梨果实 多糖 超声波-微波协同萃取 微波 超声波 含量测定
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杜梨果实热水提取物对H_(22)小鼠的抗肿瘤作用 被引量:8
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作者 赵小亮 周忠波 +1 位作者 白红进 张国锋 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2897-2898,共2页
目的探讨杜梨果实热水提取物对H22小鼠的抗肿瘤作用。方法以H22(肝癌实体型)移植小鼠为模型研究杜梨果实热水提取物体内抗肿瘤作用,以及对脾脏、胸腺指数的影响。结果杜梨果实热水提取物对H22有显著的抑制作用,使荷瘤小鼠的脾脏、胸腺... 目的探讨杜梨果实热水提取物对H22小鼠的抗肿瘤作用。方法以H22(肝癌实体型)移植小鼠为模型研究杜梨果实热水提取物体内抗肿瘤作用,以及对脾脏、胸腺指数的影响。结果杜梨果实热水提取物对H22有显著的抑制作用,使荷瘤小鼠的脾脏、胸腺指数明显升高。结论杜梨果实热水提取物具有一定的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 杜梨果实 热水提取物 肝癌H22小鼠 抗肿瘤
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核黄素对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统的影响 被引量:8
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作者 韩金龙 李慧 +2 位作者 蔺经 杨青松 常有宏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期893-898,共6页
为探讨外源核黄素对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统的影响,以梨砧木杜梨幼苗为供试材料,在水培条件下,研究了外源施加不同浓度核黄素对200 mmol/L Na Cl胁迫下其叶片抗氧化酶活性、活性氧产生、膜质过氧化和抗氧化物质含量的影响。结果显示... 为探讨外源核黄素对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统的影响,以梨砧木杜梨幼苗为供试材料,在水培条件下,研究了外源施加不同浓度核黄素对200 mmol/L Na Cl胁迫下其叶片抗氧化酶活性、活性氧产生、膜质过氧化和抗氧化物质含量的影响。结果显示:Na Cl胁迫3 d后,杜梨叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性减弱,过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性增强,抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(As A)合成下降,活性氧(O2·-、H2O2)和丙二醛(MDA)大量积累。施加外源核黄素能增强Na Cl胁迫下杜梨叶片中SOD、POD、CAT、GR、GSH-Px和APX的活性,提高GSH和As A的含量,减少O2·-和H2O2的产生,降低脂质过氧化程度,有效缓解盐胁迫对杜梨叶片的过氧化伤害,其中以10μmol/L浓度的核黄素处理效果最为显著。 展开更多
关键词 杜梨 核黄素 盐胁迫 过氧化作用 抗氧化酶
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杜梨叶片多糖提取方法的研究 被引量:3
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作者 蒋卉 赵小亮 +2 位作者 游瑞行 付清敏 郑志明 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第2期70-72,共3页
分别采用微波、水浴及超声波3种方法提取杜梨叶片多糖,用蒽酮-硫酸比色法测定多糖的含量。结果表明3种提取方法存在明显的差异,以超声波法提取效果最佳,其后依次是水浴及微波,3种方法提取多糖的含量分别是20.01%、10.41%和9.37%。
关键词 杜梨叶片 多糖 微波 超声波
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盐胁迫下的杜梨PbPYL4基因克隆及其与PbNCED2基因表达分析 被引量:7
15
作者 王宏 蔺经 +2 位作者 李晓刚 王中华 常有宏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1017-1023,共7页
【目的】分离和克隆杜梨ABA受体蛋白基因Pb PYL4,了解其在杜梨响应盐胁迫的表达情况。【方法】以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)无性系组培苗为试验材料,使用RT-PCR的方法从杜梨中克隆到ABA受体基因,命名为PbPYL4,并研究该基因盐胁迫... 【目的】分离和克隆杜梨ABA受体蛋白基因Pb PYL4,了解其在杜梨响应盐胁迫的表达情况。【方法】以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)无性系组培苗为试验材料,使用RT-PCR的方法从杜梨中克隆到ABA受体基因,命名为PbPYL4,并研究该基因盐胁迫处理下的表达模式,同时检测ABA合成基因Pb NCED2在盐胁迫下的表达模式。【结果】PbPYL4的c DNA长度为682 bp,其中开放阅读框(ORF)621 bp,编码207个氨基酸的蛋白。系统发生分析结果表明,PbPYL4与植物中已经发现的拟南芥ABA受体蛋白PYL4/RCAR10亲缘关系较近。荧光定量RT-PCR表达分析结果表明,根,盐胁迫12 h内,Pb PYL4基因被诱导表达,12 h达到第1个小高峰,随后24 h表达下降,48 h表达又上升,72 h达到第2个峰值;茎,盐胁迫48 h后,Pb PYL4基因被诱导表达;叶片,处理12 h后,Pb PYL4基因被诱导表达,72 h表达略微下降。在同样组织中,Pb NCED2表现出与Pb PYL4相似的表达时序。【结论】Pb PYL4基因可能在杜梨响应盐胁迫的过程中起了重要的作用。 展开更多
关键词 杜梨 ABA受体PbPYL4 基因克隆 表达分析
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杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白PbCBL10基因的克隆和表达特性研究 被引量:9
16
作者 李慧 丛郁 +2 位作者 常有宏 蔺经 盛宝龙 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期550-556,共7页
【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CalcineurinB—likeprotein,CBL)基因的序列特征和表达特点,【方法】以杜梨幼苗为试材,运用同源克隆和半定量RT—PCR对PbCBLIO基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明.PbCBLIO基因... 【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CalcineurinB—likeprotein,CBL)基因的序列特征和表达特点,【方法】以杜梨幼苗为试材,运用同源克隆和半定量RT—PCR对PbCBLIO基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明.PbCBLIO基因编码区cDNA长度为801bp,编码的多肽由266个氨基酸组成。该多肽预测的等电点为4.56,估计的相对分子质量为30.45ku。其对应基因组DNA序列长1983bp,包括9个外显子和8个内含子。通过PSORT进行亚细胞定位分析发现PbCBLl0蛋白位于质膜上的几率最大。PbCBLIO基因编码的多肽具有4个钙离子结合域EF手形结构和1个钙调磷酸酶A亚基结合位点。PbCBLl0与番茄S1CBLIO(NP_001239045)和拟南芥AtCBLl0(NP_195026)蛋白间的同源性较高,分别为82%和77%,并与AtCBL10亲缘关系最近。PbCBL10基因在杜梨幼苗根、茎和叶片中均为诱导型表达,50~200mmol·L^(-1)CaCl2、20μmol·L^(-1)ABA、100mmol·L^(-1)NaCl、10%(w/v)PEG6000或180mmol·L^(-1)甘露醇处理后其表达量明显上调。【结论】PbCBLIO基因具备植物CBL基因家族的固有特征,能够响应胞内钙浓度变化,对ABA、盐碱、干旱和渗透胁迫均存在转录响应。 展开更多
关键词 杜梨 类钙调磷酸酶B亚基蛋白 基因克隆 表达特性
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超声-微波协同萃取法提取杜梨果实多糖 被引量:11
17
作者 赵小亮 白红进 +3 位作者 吴翠云 王彦芹 王星军 李雨潇 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期2151-2152,共2页
目的提取杜梨果实多糖,并测定其含量。方法采用超声-微波协同萃取法和常规水浴提取杜梨果实多糖,并用蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量。结果超声波-微波协同萃取法比较常规水浴法提取杜梨果实多糖效果更好,两种方法提取多糖的含量分别是13.... 目的提取杜梨果实多糖,并测定其含量。方法采用超声-微波协同萃取法和常规水浴提取杜梨果实多糖,并用蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量。结果超声波-微波协同萃取法比较常规水浴法提取杜梨果实多糖效果更好,两种方法提取多糖的含量分别是13.91%和12.74%;葡萄糖浓度在25.15~100.6μg·ml^(-1)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.5%,RSD1.59%(n=5)。结论超声-微波协同萃取法可作为杜梨果实多糖提取的首选方法,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量的方法准确,重复性好。 展开更多
关键词 杜梨果实 多糖 超声.微波协同萃取 含量测定
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杜梨PbCBL10基因表达与启动子功能分析 被引量:5
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作者 许园园 蔺经 +2 位作者 李晓刚 李慧 常有宏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1024-1031,1197,共9页
【目的】类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like proteins,CBLs)参与调控植物生长发育及在响应逆境胁迫过程发挥重要作用。深入探明杜梨CBLs家族成员PbCBL10在逆境下的表达模式并在转录水平上揭示表达差异,为揭示梨抗逆机制提供理... 【目的】类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like proteins,CBLs)参与调控植物生长发育及在响应逆境胁迫过程发挥重要作用。深入探明杜梨CBLs家族成员PbCBL10在逆境下的表达模式并在转录水平上揭示表达差异,为揭示梨抗逆机制提供理论依据。【方法】以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)幼苗为试材,运用实时荧光定量RT-PCR技术分析了PbCBL10在Na Cl、Ca Cl2、甘露醇(Mannitol)、聚乙二醇(PEG6000)、脱落酸(ABA)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)和温度诱导下的表达特性;通过基因组步移技术分离PbCBL10启动子序列,并利用生物信息学方法对其功能进行预测;构建启动子植物表达载体并通过农杆菌介导法转化烟草,研究多种胁迫及激素诱导下GUS蛋白瞬时表达情况。【结果】RT-qPCR分析表明:PbCBL10表达受Na Cl、Ca Cl2、甘露醇、PEG6000、ABA、6-BA、NAA和温度诱导;获得了长度为919bp的PbCBL10启动子序列,该序列含有典型调控元件与多个胁迫顺式元件;瞬时表达结果表明,多种胁迫与激素作用因子均可诱导PbCBL10启动子调控GUS基因的表达。【结论】PbCBL10参与多种激素和逆境胁迫过程的信号转导,在调控梨树生长发育及响应环境胁迫方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 杜梨 胁迫响应 PbCBL10 RT-QPCR 启动子 GUS
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杜梨CBL1和CBL7基因对非生物逆境的响应 被引量:11
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作者 韩金龙 李慧 +2 位作者 丛郁 常有宏 蔺经 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期529-535,共7页
【目的】克隆2个杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因,并对其序列特征、表达特点及抗逆功能进行比较研究。【方法】采用电子克隆、RT-PCR和长片段PCR克隆了PbCBL1和PbCBL7的cDNA和DNA序列,利用生物信息学方... 【目的】克隆2个杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因,并对其序列特征、表达特点及抗逆功能进行比较研究。【方法】采用电子克隆、RT-PCR和长片段PCR克隆了PbCBL1和PbCBL7的cDNA和DNA序列,利用生物信息学方法进行序列分析,半定量RT-PCR检测它们的表达特点,原核表达初步比较研究上述2个基因的抗逆功能。【结果】杜梨PbCBL1 cDNA编码区为642 bp,编码213个氨基酸,对应基因组DNA序列长2 969 bp;PbCBL7 cDNA编码区为639 bp,编码212个氨基酸,对应基因组DNA序列长1 788 bp;PbCBL1和PbCBL7均由8个外显子和7个内含子组成。PbCBL1和PbCBL7编码的多肽均具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构和1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。未经处理的杜梨幼苗(对照)根和叶中PbCBL1和PbCBL7的表达非常微弱,NaCl、PEG6000、甘露醇和ABA处理后,它们在根和叶中的表达均上调,且PbCBL1在叶片中的表达量显著增加。2个CBL基因分别转入大肠杆菌BL21(DE3)后,均能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对菌株的生长抑制,而转PbCBL1菌株的抗逆效果较为明显。【结论】PbCBL1和PbCBL7基因具备植物CBLs基因家族的固有特征,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,上述基因的转入能够提高大肠杆菌BL21(DE3)对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力,转PbCBL1菌株的抗逆功能强于转PbCBL7菌株。 展开更多
关键词 杜梨 CBL基因 序列特征 表达特点 功能比较
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杜梨CPI基因的克隆、序列分析及表达 被引量:8
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作者 李慧 丛郁 +2 位作者 常有宏 蔺经 盛宝龙 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期1070-1077,共8页
植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cysteine proteinase inhibitor,CPI)在植物的抗逆基因工程中发挥着越来越重要的作用,分离和克隆植物CPI基因进而研究该基因的功能是植物抗逆基因工程研究的热点。为从分子水平上揭示CPI基因在杜梨防御机制中... 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cysteine proteinase inhibitor,CPI)在植物的抗逆基因工程中发挥着越来越重要的作用,分离和克隆植物CPI基因进而研究该基因的功能是植物抗逆基因工程研究的热点。为从分子水平上揭示CPI基因在杜梨防御机制中所起的作用,利用RACE和PCR方法,从杜梨种子中克隆CPI基因的cDNA和DNA序列,并采用跨内含子表达引物进行半定量RT-PCR来分析该基因在不同胁迫条件下的表达情况。结果表明:PbCPI基因cDNA长度为987 bp,开放阅读框包含738个核苷酸,编码1个由信号肽(26个氨基酸)和成熟肽(219个氨基酸)组成的多肽。该多肽预测的等电点为6.68,估计的相对分子质量为27 190。其对应基因组DNA序列由3个外显子(1~302 bp,401~772 bp,1 615~1 897 bp)和2个内含子(303~400 bp,773~1 614 bp)组成。通过PSORT进行亚细胞定位分析发现PbCPI蛋白位于内质网上。PbCPI基因编码的多肽具有植物CPI产生抑制活性所必需的一级结构:2个甘氨酸残基(Gly46-Gly47)、假定的反应域QXVXG(Q90-V91-V92-A93-G94)和A/PW基序(P120-W121);并包含植物CPI家族高度保守的特征序列模式LARFAVQEHN、QVVAG和YQAKVWVKPW。进化树分析表明PbCPI和蔷薇科植物CPI蛋白位于分子进化树的同一发育分支上,并且与苹果MdCPI(AAO19652)蛋白具有较高的一致性(95.92%)。杜梨叶片中PbCPI为诱导型表达,高温(30℃)、低温(4℃)、NaCl、机械损伤、MeJA或ABA处理4 h后其表达量明显上调,即其对温度胁迫、盐碱、机械损伤和外源激素处理均存在转录响应,这表明该基因参与了杜梨对生物或非生物胁迫的防御机制。 展开更多
关键词 杜梨 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 基因克隆 序列分析 表达特性
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