基于贝氏柯克斯体急性期抗原A的间接ELISA方法建立及应用

为开发快速有效的Q热血清学诊断技术,以贝氏柯克斯体急性期抗原A(acute disease antigen A,AdaA)为诊断靶标分子,构建了基于该重组抗原的间接ELISA方法,完成了来自福建某牛场的200份临床牛血清样本检测,并对检测结果进行了评估。结果表明:以商品化ELISA试剂盒ID Screen■Q热为金标准,建立的间接ELISA检测特异性为94.4%(152/161),检测敏感性为84.6%(33/39),与感染牛的常见病原体如衣原体、布氏杆菌、副结核杆菌无交叉。应用该诊断方法检测发现,福建某牛场约有21%(42/200)的牛为Q热阳性。该结果证实,基于AdaA的间接ELISA方法具有较高的特异性及敏感性,有良好的应用价值,可以用于牛Q热的血清学监测。

天津地区核酸检测重复无反应性献血者HBV感染指标分析

目的使用不同类型的NAT法对HBsAg阴性的核酸检测重复无反应性(NRR)献血者样本进行检测,同时使用ELISA法对HBV DNA阳性样本进行相关标志物检测,确认HBV DNA阳性样本的血清学感染指标的模式,保障用血安全。方法使用TMA原理的单人份核酸检测(ID-NAT)对82278例献血者样本进行检测后,总共收集60例NRR样本血浆,采用3种NAT方法对HBV DNA进行检测:方法①采用TMA原理的NAT法进行3次HBV DNA鉴别试验;方法②使用A、B不同的PCR试剂对HBV DNA进行检测;方法③使用Q-PCR对HBV DNA进行定量检测,得到3种方法的总阳性数及比率。使用ELISA法对确认HBV DNA阳性组进行血清学标志物检测,并与未确认HBV DNA阳性组进行比较,分析两组抗体和血清学组合模式阳性率有无差异。结果60例NRR样本,方法①检出HBV DNA阳性样本19例(31.67%,19/60),方法②检出HBV DNA阳性样本23例(38.33%,23/60),方法③检出HBV DNA阳性样本9例(15%,9/60)且病毒载量均较低。3种方法检测出感染HBV的NRR样本共32例(53.33%,32/60),其中仅方法①6例(18.758%,6/32)、仅方法②10例(31.25%,10/32)、仅方法③3例(9.37%,3/32)。确认组的HBcAb和阳性率高于未确认组,高达84.38%和9.38%,两组比较具有统计学差异。确认组HBcAb(+)且HBeAb(+)比率为6.25%而未确认组无此模式,所有抗体全阴性的组合模式确认组比率6.25%低于未确认组28.57%。结论多种类型的NAT法联合检测可以提高NRR样本中HBV DNA的检出率,NRR人群中确认HBV DNA阳性献血者感染标志物HBcAb阳性率、HBcAb(+)且HBeAb(+)比率均升高,所有抗体全阴性的组合模式比率降低。

立刻──酶联免疫吸附试验诊断血吸虫病的研究

本研究对立刻－酶联免疫吸附试验（Ｑ－ＥＬＩＳＡ）诊断血吸虫病的特异性、敏感性、交叉反应、疗效考核及现场应用等方面进行了试验，同时与ＩＨＡ进行了比较。结果表明，Ｑ－ＥＬＩＳＡ诊断血吸虫病的特异性９７．９７％，与ＩＨＡ基本相同。检测慢性血吸虫病的敏感性为９７．０５％，其阳性检出率与感染度有关。Ｑ－ＥＬＩＳＡ的敏感性和现场应用价值优于ＩＨＡ，且具有简便、快速和微量等优点。

Q－ELISA单盲法诊断血吸虫病的效果观察

Ｑ－ＥＬＩＳＡ单盲法诊断血吸虫病的效果观察林金莲，俞鑫玲，何永康，李毅，何扬，李岳生（湖南省寄生虫病防治研究所４１４０００）Ｑ－ＥＬＩＳＡ（快速－酶联免疫吸附试验）是近年来由深圳高科技创业中心研究的一种诊断血吸虫病的新方法。据报道，该法诊断血吸虫病的...

EB VCA—IgA和EB—DNA检测对儿童传染性单核细胞增多症和鼻咽癌诊断价值的比较

目的探讨检测血清中EBVCA—IgA抗体与EB—DNA在儿童传染性单核细胞增多症和鼻咽癌中的诊断意义。方法采用ELISA方法和荧光定量PCR方法分别检测60例儿童传染性单核细胞增多症患者组和对照组，60例未经治疗的鼻咽癌患者组和对照组EBVCA—IgA抗体和EB—DNA，分别比较其阳性检出率来探讨他们对两种疾病的诊断价值。结果EBVCA—IgA抗体在儿童传染性单核细胞增多症患者组和对照组中的阳性检出率差异无显著性意义，在鼻咽癌患者组和对照组中的阳性检出率差异有显著性意义。EB—DNA检测在两种疾病患者组和对照组中的检出率差异均有显著性意义。结论VCA—IgA抗体检测对儿童传染性单核细胞增多症诊断意义不高，在鼻咽癌中有重要诊断意义。EB—DNA检测对两种疾病均有重要诊断意义，可作为诊断EBV感染最有效的方法之一。

Q热贝氏柯克斯体间接ELISA检测方法的建立

本研究以Q热贝氏柯克斯体弱毒株Ⅱ相全菌为包被抗原建立Q热贝氏柯克斯体间接ELISA检测方法,通过方阵滴定法对抗原包被浓度和二抗反应浓度的确定及各项反应条件的优化,确定其阴阳性临界值为0.44。用本方法与IDEXX Q热抗体检测试剂盒对393份牛临床血清进行检测,检出的血清阳性率分别为11.45%和6.10%,符合率为94.66%。结果表明,本试验建立的检测Q热贝氏柯克斯体的间接ELISA法具有较好的特异性及较强的敏感性,可初步应用于Q热贝氏柯克斯体抗体的临床检测。

上海市某规模牛场Q热血清学监测

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对上海市两个规模牛场共720份牛血清进行了Q热抗体检测,结果显示:共检出抗体阳性血清256份,总抗体阳性率为35.6%;其中成年牛阳性血清182份,抗体阳性率为35.0%;育成牛阳性血清74份,抗体阳性率为37.0%。试验表明松江区这两个规模牛场均存在不同程度的Q热贝氏柯克斯体感染。

单盲法快速-ELISA诊断血吸虫病的效果观察

以单盲法及目测判读与检测OD值对比观察快速ELISA诊断血吸虫病的效果。单盲法检测56例日本血吸虫病人及33名健康者血清，敏感性94，6％，特异性97．0％；与其它寄生虫病（肺吸虫病）的交叉反应率为6．2％。以目测法判断与测定OD值作对比，检测58例血吸虫病人及35名健康者血清，阳性检出率分别为94．8％和96，5％，特异性分别是100％和97．1％；经χ2检验，P＞0．05两法判断结果无显著性差异；与肺吸虫病和肝吸虫病均未见交叉反应。本实验进一个证明：快速－ELISA试验具有较好的诊断价值，适于现场推广应用。如以测定OD值判断结果，则使该法更具客观标准。

四君子汤对脾气虚大鼠血清5-HIAA、MTL表达影响随机平行对照研究

[目的]观测四君子汤对脾气虚模大鼠血清5-HIAA、MTL表达影响。[方法]使用随机平行对照方法,30只(6~8周)健康SD大鼠适应性饲养1周,随机数字表法分为3组,空白组、脾气虚组、四君子汤组,10只/组。模型复制:实验第5d,用力竭游泳和饮食不节的复合因素建立脾气虚模型。造模成功后,给予四君子汤灌胃治疗6d;四君子汤灌胃期间,空白组和模型组灌等量蒸馏水形成对照。实验第24d(造模14d),各组大鼠均于末次给药干预处理后禁食不禁水24h,10%水合氯醛腹腔麻醉(3mL/kg),剖腹,腹主动脉取血,4℃放置1h,3000转离心分离10min,分离使用不含热原和内毒素的试管,操作过程避免任何细胞刺激,收集,置于-20℃冰箱中待用。ELISA法观测5-HIAA、MTL水平、一般状态。[结果]血清5-HIAA平均含量脾气虚组、四君子组均高于白组(P<0.01);四君子组低于脾气虚组(P<0.01);血清MTL平均含量脾气虚组、四君子组均低于空白组(P<0.01);四君子组高于脾气虚组(P<0.01)。[结论]四君子汤灌胃干预脾气虚大鼠,可抑制5-HIAA表达,升高IL-6表达,有利于促进胃排空、缩短胃排空时间、增强食欲、增加进食量,进而改善脾气虚大鼠食欲下降、摄食减少、体重减轻等症状,起到一定调控作用。

Herd-prevalence of Coxiella burnetii(Q fever) antibodies in dairy cattle farms based on bulk tank milk analysis

Objective:To determine the prevalence of Coxiella burnetii(C.burnetii) antibody positive randomly selected dairy herds in southeast Iran(Kerman).Methods:Bulk tank milk samples were collected randomly from 44 sufficiently large commercial dairy herds,included near 12 000 dairy cattle,in Kerman(The largest province of Iran),southeast Iran.The samples were tested for antibodies against C.burnetii using the commercial CHEKIT(?) Q fever antibody ELISA Test Kit(Idexx,Liebefeld-Bern,Switzerland).Results:The prevalence of positive,negative and intermediate herds were 45.4%,43.2%and 11.4%,respectively.Conclusions:The result supports the hypothesis of high prevalence and endemic pattern of Q fever in Iran.This investigation highlights the importance of further studies on Q fever in Iran.