清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎模型新生大鼠Toll样受体4、核因子-κB表达及细菌易位的影响

【目的】探讨清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎(NEC)模型新生大鼠回肠组织Toll样受体4(TLR4)mRNA、核因子-κB(NF-κB)mRNA表达及细菌易位的影响。【方法】选用3日龄SD新生大鼠随机分为3组:正常对照组、NEC模型组及治疗组。采用鼠代乳品人工喂养及缺氧冷刺激的方法,复制新生大鼠NEC模型。治疗组采用鼠乳代用品+清热活血调气方(15 g.kg-1.次-1,3次/d)人工喂养,同时予以缺氧冷刺激;正常对照组鼠乳喂养,不进行任何干预。第4天心脏穿刺采血后处死大鼠取近回盲部末端回肠2 cm,采用实时荧光定量PCR法检测回肠组织TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达水平及血标本中细菌16S rRNA进而得出细菌易位发生率。【结果】与模型组比较,治疗组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达水平显著下降(P<0.01),细菌易位发生率显著降低(P<0.05)。【结论】清热活血调气方可下调NEC模型新生大鼠回肠组织TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达,减少细菌易位的发生。

清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎模型新生大鼠肠损伤的影响

【目的】探讨清热活血调气方对坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)模型新生大鼠肠损伤的保护作用。【方法】选用SPF级3日龄Sprague-Daw ley新生大鼠36只,随机分为正常对照组、NEC模型组及治疗组,每组12只。NEC模型组采用鼠代乳品人工喂养、体积分数100%氮气缺氧90 s、4℃冷刺激10 min方法,每天2次,连续3 d,复制新生大鼠NEC模型;治疗组采用代乳品+清热活血调气方(30 mL.kg-1.次-1,3次/d)人工喂养,同时予缺氧冷刺激;正常对照组置于母鼠身旁喂养,不进行任何干预。各组于造模后第4天处死大鼠取出肠组织,取近回盲部肠组织做病理切片,观察组织学变化并做组织损伤评分,组织学评分≥2为NEC。【结果】与正常对照组比较,模型组肠损伤组织病理评分显著升高,体质量显著下降(P<0.01);与模型组比较,治疗组肠损伤组织病理评分与发病率显著降低,体质量显著升高(P<0.05或P<0.01)。【结论】清热活血调气方对NEC模型新生大鼠肠损伤具有一定保护作用。

基于网络药理学及分子对接探讨清热活血方对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制

目的通过网络药理学及分子对接方法,探讨清热活血方改善心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的潜在作用机制。方法检索BAT-MAN数据库获得清热活血方药物活性成分及药物靶点;检索GeneCards数据库获得MIRI疾病靶点;将药物靶点与疾病靶点取交集,应用STRING数据库进行蛋白-蛋白相互作用(PPI)分析,筛选出核心靶点,进行生物及通路富集分析;最后使用Auto Dock Vina进行分子对接验证。结果获得清热活血方药物活性成分149个,药物靶点1241个,MIRI疾病靶点1753个,共同作用靶点223个,核心靶点77个;生物及通路富集分析涉及炎症、氧化应激、凋亡、自噬等生物途径;靶点与药物活性成分的对接活性可验证网络药理学的预测结果。结论清热活血方可通过多成分、多靶点、多通路的协同机制,发挥保护MIRI的作用。

清热活血方治疗动脉粥样硬化分子机制的网络药理学分析

目的 通过网络药理学的方法探究清热活血方治疗动脉粥样硬化的分子机制。方法 2020年12月至2021年2月,通过BAT-MAN数据库获取中药的活性成分及对应的靶点,从Genecards数据库搜集动脉粥样硬化的相关靶点。取交集获取清热活血方治疗动脉粥样硬化的靶点,通过string数据库检索靶点之间的相互作用关系,在Cytoscape 6.1构建的蛋白-蛋白网络中筛选出核心节点,依据核心靶点反向找出对应的成分。通过DAVID网站获取核心节点的通路富集分析结果,使用Auto Dock Vina进行分子对接验证结果可信性。结果 得到蛋白激酶B1(AKT1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、载脂蛋白E1(APOE1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)等核心靶点116个,对应丹参酮Ⅱ、丹参醌B、γ-谷甾醇、黄芩苷等活性成分107个,基因本体论(GO)分析的结果集中在平滑肌细胞增殖的积极调节、内皮细胞增殖的积极调节、炎症反应、一氧化氮合酶活性的积极调节、脂肪细胞分化的负调节、内皮细胞迁移的积极调节等方面,京都基因和基因组数据库(KEGG)的结果集中在TNF、PI3KAkt、MAPK、FoxO、VEGF等信号通路上。分子对接的结果提示50个对接结果中35个超过-5 kcal/mol提示结果可信度较高。结论 清热活血方通过抑制炎症反应及平滑肌增殖、调节脂质代谢减少泡沫细胞生成、促进一氧化氮生成保护内皮来治疗动脉粥样硬化。